微生物12革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌
第二十三章需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验
微生物第二十三章需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验考点棒状杆菌属（白喉棒状杆菌）、炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、产单核李斯特菌生物学性状、临床意义、微生物学检查。
棒状杆菌属芽胞杆菌属李斯特菌属丹毒丝菌属加特纳菌属形态棒状杆菌有芽胞短杆、链或丝状细杆或线状杆菌、多形性触酶＋＋＋－－动力－＋＋－－对氧需、兼需、兼兼性兼性兼性G＋C mol% 51～65 32～60 36～38 35～40 42～44（一）白喉棒状杆菌G+，杆菌，菌体粗细、长短不一，一端或两端膨大呈棒状。
着色不匀，有异染颗粒（异染颗粒的主要成分是RNA核糖核酸和多偏磷酸盐，具有鉴定意义）。
无鞭毛、无荚膜、无芽胞。
需氧，营养要求较高。
引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌，其他大多数为条件致病菌。
1.培养特性：在普通培养基上生长不良，形态不典型。
血液琼脂平板：灰白色S型菌落，有狭窄的β溶血环。
☆吕氏（Loeffler）血清斜面培养基：生长迅速，形成灰白色、湿润、S型菌落。
涂片染色形态典型，异染颗粒明显。
(让其迅速生长并形成典型涂片染色形态的培养方法)亚碲酸钾血琼脂：本菌能吸收亚碲酸盐，并使其还原为元素碲，使菌落呈黑色。
（选择鉴别培养基）<霍乱弧菌使菌落呈褐色>2.致病性本菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，致病物质：白喉毒素（主要的致病因素、索状因子、K抗原），引起毒血症。
白喉棒状杆菌和毒素可使局部黏膜上皮发生炎性渗出并将炎性细胞和坏死组织和菌体凝结在一起，形成灰白色假膜，假膜脱落与气管内，可阻塞呼吸道成为白喉早期致死的主要原因。
而严重的毒血症引起的细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹等严重损害，是白喉晚期死亡的主要原因。
3.免疫性：☆锡克试验或致敏红细胞凝集试验。
调查人群对白喉是否产生免疫力。
4.标本采集：无菌长棉拭子，从可疑的伪膜边缘采集分泌物，未见伪膜的疑似。
5.生化反应：主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。
尿素分解试验：白喉棒状杆菌（-），类白喉棒状杆菌（+）。
需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验考点总结
需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验考点总结一、棒状杆菌属G+，杆菌，菌体粗细、长短不一，一端或两端膨大呈棒状。
着色不匀，有异染颗粒。
无鞭毛、无荚膜、无芽胞。
需氧，营养要求较高。
引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌，其他大多数为条件致病菌。
（一）白喉棒状杆菌1.生物学性状（1）形态与染色：菌体细长微弯，一端或两端膨大的革兰阳性杆菌。
细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。
无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。
异染颗粒：Neisser（奈瑟）染色；Albert（阿培特）染色。
这是白喉棒状杆菌的形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。
异染颗粒（浓染颗粒）Neisser（奈瑟）染色：菌体染成黄褐色，颗粒被染成紫黑色；Albert（阿培特）染色：菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。
（2）培养特性：在普通培养基上生长不良，形态不典型。
1）血液琼脂平板：灰白色S型菌落，有狭窄的β溶血环。
2）吕氏（Loeffler）血清斜面培养基：生长迅速，形成灰白色、湿润、S型菌落。
涂片染色形态典型，异染颗粒明显。
3）亚碲酸钾血琼脂：本菌能吸收亚碲酸盐，并使其还原为元素碲，使菌落呈黑色。
4）液体培养基。
（3）生化反应：触酶试验阳性，氧化酶试验阴性。
分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖，产酸不产气。
不分解乳糖，极少分解蔗糖。
能还原硝酸盐，不液化明胶，不产生吲哚，不分解尿素。
据亚碲酸钾血琼脂培养基、肉汤培养基的生长特点及生化反应，可将本菌分为轻、中、重三型。
在我国以轻型多见。
分型与所致疾病的严重程度无关，可用于流行病学调查。
2.致病性致病物质：白喉棒状杆菌引起白喉，多在秋冬季节流行。
以咽白喉最常见，喉白喉及鼻白喉次之，偶亦引起眼结膜、外耳道、阴道及皮肤的局部病变。
本菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，引起毒血症。
毒素能与敏感的心肌、肝、肾、肾上腺等组织细胞及外周神经，尤其与支配咽肌和腭肌的神经结合，引起细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹等严重损害，是白喉晚期死亡的主要原因。
【微生物】名词解释重点版1
重要的名词解释1.Bacterial L form细胞细胞壁缺陷型：某些药物作用于细菌，可抑制的肽聚糖的合成或破坏细胞壁的结构，在高渗环境下，细菌仍可存活，成为细胞壁缺陷型。
某些L型仍有一定的致病力，通常引起慢性感染。
2.plasmid质粒：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，为闭合环状的双链DNA，带有遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状，具有自主复制能力。
3.荚膜（capsule）：某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质，为疏水性多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。
4.鞭毛（flagellum）：许多细菌菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物。
鞭毛长5~20μm，直径12~30nm。
5.侵袭力(invasiveness）：致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障，进入机体并在体内定植、繁殖和扩散的能力。
[荚膜、粘附素、侵袭性物质] （粘附因子：G-：菌毛、外膜蛋白，G+：磷壁酸、菌膜多糖）6.菌毛（pilus或fimbriae）：许多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物，与细菌的运动无关。
7.芽胞(spore）：某些革兰阳性细菌在一定的环境条件下，在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。
8.Obligate aerobe 专性需氧菌：该类细菌具有完善的呼吸酶系统，需要分子氧作为受氢体以完成需氧呼吸，只能在有氧条件下生长。
如结核分枝杆菌，霍乱弧菌。
9.Facultative anaerobe 兼性厌氧菌：兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能，不论在有氧或无氧条件下均能生长，但以有氧时生长较好，占细菌的大多数。
10.Obligate anaerobe专性厌氧菌：该类细菌缺乏完善的呼吸酶系统，利用氧以为的其他物质作为受氢体，只能在无氧条件下进行发酵。
有游离氧存在时反而受其毒害甚至死亡。
如破伤风梭菌，脆弱类杆菌。
11.bacteriocin 细菌素：某些细菌能产生一种仅作用于近缘关系细菌的抗生素样物质，其抗菌范围很窄，本质为蛋白质。
重症监护病房临床标本1 129株病原菌的分析
(4) 10.7 33.3 84.4 43.3 61.9 35.7 33 57.7 3.4 74
(5) 71.4 62.5 82.4 93.8 85.7 6.2 100 75
1 129株细菌的分群分布，以革兰阴性为主(占82.3%)，其中非发酵菌为最多，其次为肠杆菌科，革兰阳性细菌占15.2%，真菌占2.3%。但上述分布百分率因标本不同而异。从表1中可看出，血液中分离的细菌仍以革兰阳性菌占优势。而从尿液和其他标本的分离菌则以肠杆菌科为多，尤其是尿液中肠杆菌科占绝对优势，和文献［4］报告一致。而非发酵菌只是在痰液中占多数［5］。
醋酸钙不动杆菌 117 10.4 阴沟杆菌 78 6.9 粪肠球菌 6 0.6
产气肠杆菌 11 0.9 A族链球菌 1 0.1
坂琦肠杆菌 1 0.1 B族链球菌 2 0.2
聚团肠杆菌 16 1.4 枯草杆菌 3 0.3
杰高维肠杆菌 1 0.1 假白喉棒状杆菌 4 0.4
肠杆菌科
细胞 413(36.6) 296(26.2) 49(4.0) 22(1.9) 46(4.1)
革兰阳性菌 172(15.2) 85(7.5) 16(1.4) 34(3.0) 37(3.3)
真菌类 26(2.3) 7(0.6) 9(0.8) 7(0.6) 3(0.3)
二、菌株种类
518株非发酵菌中，380株是铜绿色假单胞菌。该菌是ICU感染的最常见的病原菌。近年有报道该发病率正上升至首位［6］。本文结果亦可证明。其次是醋酸钙不动杆菌117株。该菌在上海地区是非发酵菌的第二位常见菌［7］。国内其他地区出现频率亦在上升。
实验十二 厌氧性细菌(1稿)
实验十二厌氧性细菌（厌氧培养方法）厌氧性细菌（Anaerobicbacteria）是一大群必须在无氧或低氧环境中才能生长繁殖的细菌；一般情况下，这类细菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好，不能在空气（氧气浓度大于18%）和（或）二氧化碳浓度小于10%以下的固体培养基表面生长。
这类细菌缺乏完整的代谢酶体系，其能量代谢多以无氧发酵的方式进行。
它能引起人体不同部位的感染，包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。
（一）无芽胞厌氧菌主要种类及生物学性状无芽胞厌氧菌共有23个属，与人类疾病相关的主要有10个属。
1.革兰阴性厌氧杆菌有8个属，类杆菌属中的脆弱类杆菌最为重要。
形态呈多形性，有荚膜。
除类杆菌在培养基上生长迅速外，其余均生长缓慢。
2.革兰阴性厌氧菌有3个属，其中以韦荣菌属最重要。
为咽喉部主要厌氧菌，但在临床厌氧菌分离标本中，分离率小于1%，且为混合感染菌之一。
其他革兰阴性球菌极少分离到。
3.革兰阳性厌氧菌有5个属，其中有临床意义的是消化链球菌属，主要寄居在阴道。
本菌属细菌生长缓慢，培养需5～7天。
4.革兰阳性厌氧杆菌有7个属，其中以下列3个属为主：（1）丙酸杆菌属：小杆菌，无鞭毛，能在普通培养基上生长，需要2～5天，与人类有关的有3个种，以痤疮丙酸杆菌最为常见。
（2）双歧杆菌：呈多形性，有分枝，无动力，严格厌氧，耐酸。
29个种中有10个种与人类有关，其中只有齿双歧杆菌与龋齿和牙周炎有关。
其他种极少从临床标本中分离到。
（3）优杆菌属：单一形态或多形态，动力不定，严格厌氧，生化反应活泼，生长缓慢，常需培养7天，最常见的是迟钝优杆菌。
（二）微生物学检查要从感染灶深部采取标本。
最好是切取感染灶组织或活检标本，立即送检医.学教育网搜集整理。
1.直接涂片镜检：将采集的标本直接涂片染色镜检，观察细菌形态、染色及菌量，为进一步培养以及初步诊断提供依据。
需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验
第二十三章需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验本章考点：1.概述：概念2.棒状杆菌属（白喉棒状杆菌）、炭疽芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、产单核李斯特菌●生物学性状●临床意义●微生物学检查常见的与临床有关的需氧革兰阳性杆菌有棒状杆菌属、芽胞杆菌属、李斯特菌属、丹毒丝菌属、加特纳菌属。
上述菌属的主要区别见表5-23-1。
表5-23-1 革兰阳性杆菌属的鉴别棒状杆菌属芽胞杆菌属李斯特菌属丹毒丝菌属加特纳菌属形态棒状杆菌有芽胞短杆、链或丝状细杆或线状杆菌、多形性触酶+ + + - -动力- V + - -对氧需氧、兼性厌氧需氧、兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧G+Cmol% 51～65 32～69 36～38 36～40 42～44一、棒状杆菌属（一）简述：棒状杆菌属是①一群革兰阳性杆菌，菌体粗细、长短不一，一端或两端膨大呈棒状.故名棒状杆菌。
②本菌着色不匀，有异染颗粒。
③无鞭毛、无荚膜、无芽胞。
（无特殊结构）④需氧，⑤营养要求较高，能分解一些糖类，产酸不产气。
本属细菌种类较多，有白喉棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、干燥棒状杆菌、溃疡棒状杆菌等。
引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌，棒状杆菌除白喉棒状杆菌外，其余统称为类白喉棒状杆菌，大多数为条件致病菌。
（二）白喉棒状杆菌1.生物学特征（1）形态与染色：菌体细长微弯，一端或两端膨大的革兰阳性杆菌，大小为（2～5）μm×（0.5～1.0）μm。
无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。
细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。
染色特点：在细菌的一端或两端有浓染的颗粒，和菌体着色不均匀，称为异染颗粒，这是白喉棒状杆菌的形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。
美蓝染色菌体着色不均匀，呈现着色深浅相间的节段或着色较深的颗粒；Neisser（奈瑟）染色，菌体染成黄褐色，颗粒被染成紫黑色；Albert（阿培特）染色，菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。
（2）培养特性：需氧或兼性厌氧，生长最适温度为35℃～37℃，pH为7.2～7.8。
医学微生物学 第13章 厌氧性细菌
四、 防治原则 1. 外科处理 2. 抗生素（药敏试验）
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左图：混合厌氧感染（至少三种厌氧菌存在）
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第十二章 厌氧性细菌 （Anaerobic bacteria）
厌氧性细菌：是一群必须在无氧环境下才能生 长繁殖的细菌。 分类： 厌氧芽胞梭菌（G+杆菌） 无芽胞厌氧菌（多种，G+,G-球菌，G+,G-杆菌）
1
第一节 厌氧芽胞梭菌 （Clostridum）
厌氧芽胞梭菌：是一群革兰氏染色阳性，能形 成芽胞的大杆菌。 少数为致病菌，如：破伤风梭菌，产气荚膜梭菌， 肉毒梭菌等。 对热、干燥和消毒剂有强大的抵抗力。
2
一、 破伤风梭菌 （C.tetani）
• 破伤风（tetanus）的病原菌 • 发病后机体呈强直性痉挛、抽搐、可因 窒息或呼吸衰竭死亡
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（一）生物学性状 形态：G+杆菌，有周鞭毛，无荚膜， 芽孢正圆，位于菌体顶端，呈鼓槌状
培养：严格厌氧菌;β-溶血，薄膜状菌落
抵抗力：芽孢---对热、干燥和消毒剂均有强大的抵 抗力，100℃，1小时破坏，干燥土壤中可 存活数十年
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（二）致病性 1.致病物质：肉毒毒素（神经毒）
与破伤风外毒素的相似点： ⅰ毒性强 ⅱ结构，功能，致病机制与破伤风外毒素相似 与破伤风外毒素的区别： ⅰ对酸、蛋白酶抵抗力强，导致肌肉麻痹 ⅱ不沿神经纤维传导，留在神经肌肉接头处 ⅲ C，D型毒素由噬菌体编码
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2.所致疾病 食物中毒（最常见的食物中毒）：
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（四）防治原则 1.低温保存食品 2.80℃，20min加热食品 3.尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三 型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗
微生物检验 需氧或兼性厌氧菌
意义（辅助诊断风湿热、肾小球肾炎链球菌近期感染）
G+、四联排列【（呈圆、卵圆或成双链状排列），肺炎链球菌：矛尖头状、成双排列、有荚膜】，
液体平板：呈絮状或颗粒沉淀、均匀混浊生长，血琼脂平板：灰白、乳白色菌落，
A群链球菌－－灰白色菌落、较大β-溶血环，
（需氧或兼性厌氧菌）金葡菌、链球菌的鉴定依据：
鉴定菌种
菌落特征
生化鉴定
金葡菌
最适：T-35~37℃pH:7.4
G+、呈葡萄串状-无规则排列，无芽孢、鞭毛，溶葡萄球菌素，致病性：强，血平板上：金黄色色素、β-溶血环，奶油样黄色色素，液体培养基：呈单、双或短链状排列，均匀混浊生长；高盐甘露醇平板：淡橙色菌落，卵黄高盐平板：白色沉淀环。
B群链球菌－－菌落>A群、狭窄β-溶血环
C、F、G群链球菌－－较宽β-溶血环
肺炎链球菌－－脐窝状、灰色扁平菌落、α-溶血环（草绿色）
甲型溶血性（草绿色）链球菌－－α-溶血、较宽草绿色溶血环
乙型溶血性链球菌－－β-溶血、宽大透明溶血环
丙型（非溶血性）链球菌－－γ-溶血
触酶：-，氧化酶 ：-，发酵葡萄糖产酸：-，杆菌肽试验：-（敏感），
呋喃唑酮：+，
A群链球菌：杆菌肽敏感试验（敏感-）、PYR试验（+）；
B群链球菌：CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+）；
C-）、杆菌肽试验：耐药（+）；
D群链球菌：胆汁七叶苷试验（+）、6.5％氯化钠生长（+）、PYR试验（-）；
肺炎链球菌：Optochin敏感试验（敏感-）、胆汁<七叶苷>溶菌试验（+）、菊糖（+）、胶乳凝集试验（+）、荚膜肿胀（+）；
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1、形态与染色
• 致病菌中最大的G+杆菌，两端平切、竹节状、无 鞭毛，有毒株有明显荚膜， • 有芽胞——椭圆形，小于菌体，位于菌体中央
炭疽杆菌荚膜
2、培养特性
• 需氧或兼性厌氧，生长条件不严格； • 普通培养基：扁平、粗糙、不透明、灰白色、无 光泽，边缘不整齐的菌落，低倍镜下菌落边缘呈 卷发状； • 血平板：12～15h不溶血，18～24h轻微溶血；
在麦康凯平板上不生长。
亚碲酸钾血平板菌落：
3. 生化反应
–发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。
–触酶和硝酸盐还原试验阳性，氧化酶阴性。
–不分解尿素，不产生吲哚。
4. 抵抗力
对热抵抗力不强，煮沸1分钟死亡。对干燥、 寒冷和日光的抵抗力较其他无芽胞细菌强，对 一般消毒剂敏感。
（二）微生物学检验
• 标本的采集 • 鉴定
（二）微生物学检验
• 标本采集及处理 • 鉴定
– 标本直接检查 – 分离培养 – 鉴定依据 – 鉴别试验
1、标本采集及处理
• • • • • • 皮肤炭疽：病灶深部标本 肺炭疽：痰和血液 肠炭疽：粪、呕吐物 脑膜炭疽：CSF、血液 尽可能在抗生素治疗前采取标本 严禁用解剖方式获取标本。
2、 鉴定
1、形态与染色
• G+大杆菌，菌体两端稍钝圆，多数呈链状 排列。 • 无荚膜、有鞭毛（炭疽杆菌无鞭毛） • 芽胞位于菌体中心或次末端、不突出菌体
蜡样杆菌
2、培养特性
• 营养琼脂平板：菌落呈乳白色、不透明、边缘不 整齐，菌落常沿划线蔓延扩展成片如同白蜡 • 血平板：菌落呈浅灰色、毛玻璃样，伴草绿色溶 血或透明溶血环 • 卵黄培养基：培养3小时能看到白色混浊环，称之 为乳光反应 • 液体培养基：生长均匀，有菌膜
毒力试验
• 人类临床标本中检出白喉棒状杆菌，并非 都能产生毒素，产生外毒素的菌株是由于 携带β -棒状杆菌噬菌体。可用 Elek 琼脂 扩散法体外试验或用动物体内毒力测定。
(1)琼脂平板毒力试验：
将含有20％牛血清肉汤琼脂注于平皿 中，将浸有lOOu／ml抗毒素血清的滤纸条 沉于琼脂内，在与滤纸条垂直方向将待检 菌划线接种，同时接种标准产毒株作为阳 性对照。37℃培养 24—48h，若菌苔两侧 出现斜向外侧延伸的乳白色沉淀线，并与 其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则 为产毒株。
炎，败血症、心内膜炎
• 首选青霉素
第二节 革兰阳性需氧芽胞杆菌属
• 炭疽芽胞杆菌 • 蜡样芽胞杆菌
炭疽病疫情
• 据新华社电2011年8月 12日，从辽宁省卫 生厅获悉，辽宁鞍山海城市和岫岩县近日 发生的皮肤炭疽传染病疫情，截至11日20 时病例报告数已增至30例，其中临床确诊 病例3例，疑似病例27例，无死亡病例。 • 据调查，辽宁这次疫情是由于当地居民私 自屠宰或接触病牛而感染发生的
第十二 章
革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌
本章内容
• 革兰阳性无芽胞杆菌
– 白喉棒状杆菌 – 产单核细胞李斯特菌 – 红斑丹毒丝菌
• 革兰阳性需氧芽胞杆菌属
– 炭疽芽胞杆菌 – 蜡样芽胞杆菌
教学要求
• 掌握白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌生物学性状与 微生物学检验。
• 熟悉产单核细胞李斯特菌的生物学性状与微生物 学检查法。
三、红斑丹毒丝菌
• 生物学性状 • 微生物学检查 • 临床意义
（一）生物学性状
• 形态与染色：G+短小杆菌 • 培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温度30 ~35℃，pH 7.2~7.4,耐8.5%NaCl， 35℃培养24h形成S和R两种菌落，
S型细菌呈杆状或球杆装，R型细菌呈长丝状，明胶穿刺
呈“试管刷”样生长。 • 生化反应：触酶、氧化酶（-），乳糖、甲基红、V-P、靛 基质、尿酶（-），三糖铁产H2S。
皮肤炭疽
一、炭疽芽胞杆菌
• 炭疽芽胞杆菌是人类历史上最源自被发现的 病原菌，俗称炭疽杆菌。是一种致病能力 最强的革兰阳性大杆菌。 • 芽孢：有些细菌(多为杆菌)在一定条件下, 细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性 很强的球形或椭圆形的休眠体。
（一）微生物特性
• • • • 形态与染色 培养特性 生化反应 抵抗力
（3）鉴定依据
• • • • 涂片染色和菌落特征 生化试验 青霉素抑菌试验 噬菌体裂解试验
将可疑菌落挑出，划线接种于普通营 养琼脂平板之上，在划线区内分别贴上浸 有诊断用炭疽芽孢杆菌噬菌体和青霉素的 纸片。37℃孵育过夜或24h后，在两种纸片 的周围均出现明显的抑菌环，便可判定为 炭疽芽孢杆菌。
电镜下的白喉杆菌
形态与染色
革兰染色白喉棒状杆菌
2. 培养特性：
本菌为需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格， 在一般培养基上不生长。
在吕氏血清斜面上生长快，菌落为细小有光泽、 圆形、灰白色、凸起、光滑的菌落；涂片染色菌体 形态典型、异染颗粒明显。
在亚碲酸钾血平板上，可形成黑色或灰黑色菌 落。此培养基可作为选择和鉴定之用。
（三）临床意义
• 致病物质 – 荚膜：抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散 – 毒素：是致病和死亡的主要原因 • 对青霉素、红霉素、庆大霉素、氯霉素、链霉素、 环丙沙星均敏感，但对头孢菌素耐药。
二、蜡样芽孢杆菌
• 微生物学特性 • 微生物学检验 • 临床意义
（一）微生物学特性
• 形态与染色 • 培养特性 • 生化反应
Elek平板试验结果
白喉杆菌菌苔
沉淀线(阳性)
含白喉抗毒素滤纸片
(2)动物试验
采用家兔皮内试验法。取待检菌的48h肉汤 培养液O．2ml，注射在去毛的一侧体壁皮内， 5h后注射500U白喉抗毒素血清，30min后再次注 射同样的培养液于动物去毛的另一侧体壁皮内 作为对照。经24—72h后，若注射抗毒素前接种 培养液的部位发生红肿与坏死，而对照部位不 发生任何变化，则说明待检菌株具有毒力。
（一）生物学特性 （二）微生物检验 （三）临床意义
（一）微生物特性
• 形态与染色：G+短小杆菌或球杆菌，常成双排列， 无芽胞
• 培养特性：最适30～37℃， 4℃能生长，在血琼 脂平板上，形成较小、圆形、光滑而有狭窄β -溶 血环的菌落，耐8.5%NaCl，半固体培养中动力阳 性（倒伞形，是本菌特征之一）。
噬 菌 体 斑
（4）鉴别试验
• 串珠试验 炭疽芽孢杆菌接种于含有0.05～ 0.5U/ml青霉素的培养基中，可发生形态变 异，形成大而均匀的圆球状并相连如串球 状，而类炭疽杆菌无此现象。
串珠试验
（三）临床意义
• 所致疾病：炭疽病 • 炭疽芽胞杆菌主要是牛、羊等食草类动物炭疽病 的病原体 • 炭疽病是人畜共患的急性传染病 • 传染源：患病食草动物及其制品或被污染物 • 传播途径：接触——皮肤炭疽 食用——肠炭疽 吸入——肺炭疽
（1）直接镜检
• G+染色：G+大杆菌、两端平截、竹节状排列。 • 荚膜染色：有明显荚膜，有时呈S、T、O形排列。 • 芽胞染色：芽胞卵圆形，位于菌体中央，菌体不 膨大。
（2）分离培养
• 血平板上的菌落：较大、灰白色、边缘不整齐和 有轻微溶血。
• 普通营养琼脂平板的菌落：灰白色、扁平、干燥、 无光泽。 • 浸染严重标本，最好用选择性培养基（喷他脒多 粘菌素B培养基）。
C、局部病灶的病变组织 D、宰杀后解剖
• 3、以下哪个不是炭疽芽胞杆菌的生物学特征( ) A、革兰阳性 B、菌体呈竹节状 C、专性需氧 D、感染后病死率不高 • 4、既有荚膜又有芽胞的细菌是( ) A、肺炎克雷伯菌 B、炭疽芽胞杆菌 C、枯草芽胞杆菌 D、蜡样芽胞杆菌 • 5、产单核李斯特菌在半固体培养基中培养可出现（ ） A、沉淀生长 B、浑浊生长 C、产生色素 D、倒伞形生长
• 分离培养：同时接种血平板及吕氏斜面或亚碲酸 钾血平板
–吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显
–亚碲酸钾血平板：黑色菌落
鉴定要点
• 革兰阳性，着色不均匀，菌体细长弯曲，排列不 规则，有X、V形态，具有异染颗粒
• 触酶阳性，无动力，无芽胞
• 吕氏血清斜面的菌落：灰白色、隆起、湿润
• 亚碲酸钾血平板的菌落：黑色或灰黑色
（二）微生物学检查
• 标本：血液、分泌物、渗出液 • 鉴定： （1）直接涂片镜检：G+短小杆菌 （2）分离培养： 35℃培养24h形成S和R两种菌落，明胶穿 刺接种可见“试管刷”样生长。
（3）生化反应：触酶（-），乳糖（+），三糖铁产H2S
（三）临床意义
• 红斑丹毒丝菌病病原体
• 鱼类、家畜、家禽、兔类 • 经皮肤感染 • 局部感染多见，很少引起全身感染 • 症状：红肿、疼痛、痒，高热，淋巴管炎，关节
• 了解红斑丹毒丝菌、蜡样芽胞杆菌的生物学性状 与微生物学检查
第一节 革兰阳性无芽胞杆菌
一、白喉棒状杆菌
（一 ）生物学特性
1. 形态结构：革兰氏染色阳性，菌体细长弯曲， 一端或两端膨大呈棒状，常排列呈V、L等文字 形。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。用亚甲蓝或奈 瑟染色，菌体一端、两端或中央可见明显的浓 染颗粒，称为异染颗粒，主要成分是核糖核酸 和多磷酸盐。
(三)临床意义
• 食物中毒
– 含菌量达105/g（ml)以上 –呕吐型——耐热肠毒素 – 腹泻型——不耐热肠毒素
• 心内膜炎、败血症和脑膜炎 • 夏、秋季多见
练习题
• 1、对炭疽病动物采集标本要特别禁止( A、取舌尖 B、取耳尖 • 2、下列哪种细菌的菌落为卷发状( ) A．蜡样芽胞杆菌 B．炭疽芽胞杆菌 C．白喉棒状杆菌 D．阴道加特纳菌 E．产单核李斯特菌 )
（三）临床意义
• 传染源：患者或带菌者 • 致病物质：白喉外毒素（由携带β -棒状杆菌噬菌 体的白喉杆菌产生） • 经呼吸道飞沫感染，引起白喉。 • 假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因 • 中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因 • 抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用