实验五培养基使用特点与微生物接种方法
微生物培养方法
微生物培养方法微生物培养是一种用于研究微生物生理生化特性、生长繁殖规律及其与环境条件的关系等的重要技术手段。
以下是一些常见的微生物培养方法：1、固体培养基培养法固体培养基是在培养液中加入凝固剂，使培养基成为凝固状态的培养基。
这种培养基具有良好的稳定性，可以防止培养液中的微生物在培养过程中流失，同时也可以使微生物在固体表面生长繁殖，方便观察和检测。
固体培养基一般用于细菌、放线菌、酵母菌等微生物的培养。
2、液体培养基培养法液体培养基是一种不添加凝固剂的培养基，使培养基呈液体状态。
液体培养基中，微生物在培养液中自由悬浮生长繁殖，可以充分接触培养液中的营养物质，有利于微生物的生长繁殖。
液体培养基一般用于工业生产中的微生物培养，如发酵工业中制备各种发酵产品。
3、半固体培养基培养法半固体培养基是在液体培养基中加入少量凝固剂，使培养基成为半凝固状态的培养基。
这种培养基可以固定培养液中的微生物，同时也可以使微生物在半固体表面生长繁殖。
半固体培养基一般用于观察微生物的运动和生长情况。
4、厌氧培养法有些微生物需要在无氧或低氧分压条件下生长繁殖，因此需要采用厌氧培养法。
厌氧培养法一般采用密闭容器或厌氧手套箱中进行，可以提供无氧或低氧环境。
在厌氧培养法中，需要使用专门的厌氧培养基和厌氧菌株，以保证微生物的生长繁殖。
5、富集培养法富集培养法是一种常用的分离高浓度微生物的方法。
该方法是通过在培养基中添加一些特殊成分，如高浓度营养物质、抑制剂等，以抑制其他微生物的生长繁殖，从而增加目标微生物的数量和浓度。
富集培养法一般用于从自然界或工业生产中分离特定种类的微生物。
微生物培养方法有很多种，每种方法都有其特定的适用范围和特点。
在实际操作中，需要根据具体情况选择合适的培养方法，以达到最佳的培养效果。
还需要注意无菌操作、环境控制等方面的技术细节，以保证微生物生长繁殖的良好环境和条件。
微生物的分离培养方法微生物的分离培养是微生物研究中常用的技术之一，它能够将目标微生物从复杂的微生物群体中分离出来，并进行纯培养。
实验五 微生物的分离、接种及培养法
实验五微生物的分离、接种及培养法一目的要求1.掌握倒平板的方法、划线分离法、稀释平板分离法和菌落（活菌）计数法。
2.熟练掌握微生物的接种技术，学会微生物的一般培养方法和无菌操作技术。
二实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的分离方法有： 1) 平板划线分离法；2）稀释平板分离法。
在食品发酵工业中，通过微生物的分离、纯化，选育优良的微生物菌种，以提高产品的质量和产量；在食品卫生管理方面，需要进行微生物检测，必须将微生物单一分离出来，加以鉴别和研究。
土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。
因此土壤是微生物多样性的重要场所，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。
微生物的分离和接种是微生物学中重要的技术之一，需要严格的无菌操作，否则使得微生物实验毫无意义。
三实验材料1.菌种：葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、酵母菌、毛霉、曲霉、青霉等含菌样品。
2.培养基：肉汤蛋白胨培养基（斜面、平板）、肉汤蛋白胨液体培养基、蔡氏琼脂培养基（斜面、平板）。
3.土壤（自带）或其他物品；无菌水，无菌培养基，无菌吸管，无菌三角瓶等。
四实验内容与步骤（一）微生物的分离技术1. 平板划线分离法借助划线使混杂的微生物在平板的表面分散开，以获得单个菌落，从而达到分离的目的。
具体方法如下：倒制平板→制备含菌样品稀释液→划线→倒置适温培养→观察记录（1)倒制平板：将固体培养基熔化→冷却至 50-55℃→注入培养皿内 15ml（无菌操作）→旋匀→静置凝固→即成平板→在皿盖边贴标。
（2)含菌样液制备：样品少许（1-10g），加入盛有无菌水的试管内，摇匀，制成菌悬液即可，能直接划线的样品（如体液、黏液、污水等），可省去这操作。
（3)划线：左手持平板，接种环经灼烧灭菌后，以无菌操作取样，迅速将接种环伸入培养皿，轻轻划线（切勿把平板表面划破）。
然后将培养皿倒置放入恒温培养箱37℃，培养24-48 小时，观察平板上出现的现象，注意菌落的形状，并做记录。
(优选)实验五培养基的使用特点和微生物接种方法
2. 富集培养
富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生 理条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特 定微生物的需要。
常用的选择培养基
S.S琼脂（沙门氏菌、志贺氏菌分离用培养基）
组成成分：乳糖、胆盐、柠檬酸铁、柠檬酸纳、煌绿、 中性红、硫代硫酸钠等，强选择性抑制大肠杆菌，分 离沙门菌 煌绿、胆盐、柠檬酸纳抑制非肠道菌 大肠杆菌分解乳糖而产酸，使胆盐析出，菌落中 心浑浊呈深红色，柠檬酸铁可使产生硫化氢的菌 落呈黑色 硫代硫酸钠缓和胆盐对沙门氏菌的有害作用，中 和煌绿、中性红的毒性，使大肠杆菌的红色菌落 更加鲜艳
三糖铁琼脂或克氏双糖铁
三糖铁琼脂含有乳糖、蔗糖、和葡萄糖，蔗糖：区别普
通变形杆菌（＋）、沙门氏菌（-）
克氏双糖铁成分 蛋白胨； 牛肉膏 ； 酵母膏 ；乳糖 ；
葡萄糖； 氯化钠 ； 柠檬酸铁铵 ；硫代硫酸钠 ； 琼脂 ； 酚红为指示剂，黄色为产酸，红色为产碱
观察克氏双糖接种后斜面、底层产酸、产气、产H2S的情 况，通常大肠杆菌斜面不产酸、底层产酸产气、不产H2S
今天的实验
菌种：大肠杆菌、沙门菌、青霉 采用无菌操作进行移植 学会分区划线 所有平皿和试管必须有标记 18－24小时（真菌下周观察）观察试验结
果，描述固体培养和液体培养的细菌培养 特征
步骤
两个人为一组，一个接种大肠杆菌，一个 接种沙门菌
LB液体移植 普通琼脂：分区划线 麦康凯：分区划线 半固体：穿刺 克氏双糖：先穿刺后接种斜面
三、选择培养分离
1. 利用选择平板进行直接分离
高温下培养：分离嗜热细菌； 培养基中不含N：分离固氮菌； 培养基加抗生素：分离抗性菌；
待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制
《微生物学实验》操作步骤
实验一培养基的制备与灭菌实验步骤：（一）伊红美蓝培养基（EMB，用成品，分离大肠杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。
按成品说明称量、放入搪瓷杯，加水，加热完全溶化，倒入三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，作标记（培养基名称、批次组别、日期，下同），灭菌。
（二）营养琼脂培养基（即牛肉膏蛋白胨培养基，用成品，分离芽孢杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基，方法同上，灭菌。
（三）PDA培养基（即马铃薯蔗糖培养基，分离酵母菌、根霉用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。
培养基配方：马铃薯20%、蔗糖（白砂糖）2%、琼脂 2%，加水至所需体积，pH自然。
配制方法：马铃薯去皮，称量，切成小方块，放入搪瓷杯，加水适量，煮沸20 min，取汁液，补水至所需体积，加入蔗糖（白砂糖），加热溶化，最后加入琼脂（琼脂要预先单独用水浸泡，然后挤干再加入），加热至琼脂完全溶化，分装三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，灭菌。
培养基统一高压蒸汽灭菌（121℃25 min）。
（四）无菌平皿准备（下次实验倒平板用）每组10套，报纸包扎，高压蒸汽灭菌（121℃25 min）后，置干燥箱80℃烘干1 h。
（五）枯草样预处理及预培养（下次实验分离芽孢杆菌用）枯草样预处理：每组1瓶。
100 ml三角瓶＋自来水约50 ml，加5%可溶性淀粉，溶解。
枯草若干，剪短，浸入三角瓶水中，牛皮纸封口，包扎，置水浴中煮沸10 min，然后置培养箱30℃预培养3～7 d。
（六）葡萄样（或其它水果）酵母菌预培养（下次实验分离酵母菌用）每组1瓶。
葡萄（或其它水果）适量，捏碎，皮渣与汁液一起放入250 ml 三角瓶（装量1/2～2/3），封口，置培养箱25℃预培养3～7 d，观察自然发酵过程。
实验二微生物的分离与纯化实验步骤：（一）污水中大肠杆菌的分离（稀释倒平板法）1）用三角瓶取污水样适量。
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法微生物的接种是微生物学实验中的一个重要步骤，它是将微生物从一个培养基转移到另一个培养基的过程。
接种方法的选择对于微生物的培养和研究具有重要意义。
下面将介绍一些微生物常用的接种方法。
一、平板接种法。
平板接种法是将微生物接种在培养基的表面上，通过接种棒或铅笔头的方式在培养基表面画线或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，通常用于分离和计数微生物。
在进行平板接种时，需要注意接种的均匀性和细菌数量的控制，以避免产生过多或过少的菌落。
二、液体接种法。
液体接种法是将微生物接种在含有营养物质的液体培养基中，通过摇床或振荡器进行培养。
这种接种方法适用于培养需要大量微生物的情况，如大规模生产微生物菌种或进行微生物代谢产物的生产。
在进行液体接种时，需要注意培养液的搅拌速度和通气情况，以保证微生物的充分生长和代谢。
三、斜面接种法。
斜面接种法是将微生物接种在倾斜的培养基表面上，通过接种棒或铅笔头的方式在斜面上画线或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行斜面接种时，需要注意斜面的倾斜角度和接种的均匀性，以保证微生物的充分生长和代谢。
四、深层接种法。
深层接种法是将微生物接种在含有固体琼脂的试管或培养瓶中，通过接种棒或铅笔头的方式在琼脂表面插入或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较低的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行深层接种时，需要注意琼脂的固化温度和接种的深度，以保证微生物的充分生长和代谢。
五、滴播接种法。
滴播接种法是将微生物接种在含有营养物质的琼脂平板上，通过滴管或移液器滴播微生物悬液，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行滴播接种时，需要注意滴播的均匀性和微生物悬液的浓度，以保证微生物的充分生长和代谢。
总结，微生物的接种方法多种多样，选择合适的接种方法对于微生物的培养和研究具有重要意义。
微生物培养实验方法_
微生物培养实验方法_一、选材和操作环境1.选材：根据实验目的，选择适当的微生物进行培养。
可以选择广谱微生物培养基来适应多种微生物的生长，或者选用特定的微生物培养基来培养其中一种特定的微生物。
2.操作环境：为了避免实验污染和交叉感染，实验室应该严格执行无菌操作，使用无菌操作台进行培养实验。
二、无菌技术1.灭菌：使用高压蒸汽灭菌器或者乙醇灭菌器将培养器具、培养基和植物培养基灭菌，以杀灭存在的菌种。
2.无菌操作：将培养器具放在无菌操作台上，进行接种、移植以及采样等操作，确保操作过程中不受外界菌种污染。
三、液体培养实验1.静态培养：在无菌培养基中接种微生物，放入试管或培养瓶中，静置培养。
根据需求，可以在静态培养过程中添加适量的养分补充剂。
2.摇床培养：将含有微生物的培养基放在摇床上进行培养，设置合适的温度和摇动速度，可以促进微生物的生长和代谢。
3.发酵罐培养：将含有微生物的培养基放入发酵罐中进行大规模培养。
控制发酵罐内的温度、pH值、氧气供应等条件，可以实现微生物的高密度培养。
四、固体培养实验1.平板培养：将含有微生物的培养基倒入培养皿中，使其均匀分布在培养皿表面，待其凝固后，将微生物接种于其上。
培养过程中可以观察到微生物的孤悬、菌落的形成和生长情况。
2.涂布法：将含有微生物的培养基均匀涂布在玻璃片、培养皿或者培养瓶内壁上，形成薄膜状，待其凝固后，进行微生物的接种。
3.动植物体内培养：将微生物接种在动植物的体内，如动物的腹腔、皮肤或者植物的叶片、根系等，利用动植体提供的养分来满足微生物的生长需求。
五、检测微生物生长和代谢特性1.可视方法：通过观察培养基上微生物的生长情况、菌落的形态和颜色等，判断微生物的生长情况。
2.双抗法：使用特定的抗体和染料来染色微生物，使其表现出不同的颜色或者形态，以便于鉴别和分析微生物。
3.生化检测方法：通过检测微生物在培养基上产生的特定代谢产物，如酶活性、气体产生等，来评估微生物的生长情况和代谢特性。
微生物培养及实验基本操作技术
微生物培养及实验基本操作技术一、培养基配制培养基是指人工配制的、适合于微生物生长繁殖或累积代谢产物所需的各种营养物的混合基质。
配制培养基是进行微生物检验工作的基础,甚至是任何与微生物有关工作的基础。
注意事項–灭菌锅的使用①加水盖过底部铁板—②放入东西—③关门—④調整溫度時間—⑤关紧泄压阀灭菌結束後，等压力降回零時才可打開門進入灭菌锅之物品，蓋子不可關太緊或太鬆拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套培养基中的主要成分及其作用：营养物质：N源、C源、无机盐、生长因子、水常用的N源：蛋白胨、牛肉膏、肉浸汁、酵母膏常用的C源：糖、醇类物质（单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖；多糖：淀粉、纤维素、菊糖；醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油）水：用蒸馏水，不能用自来水凝固剂：琼脂、明胶、血清等抑制剂：1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率2、种类：盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素指示剂1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。
2、常用的指示剂：酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。
培养基的类型：●根据培养基的物理状态来区分：1、液体培养基：主要用于增菌培养、鉴别性培养2、固体培养基：用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定3、半固体培养基：观察微生物的动力，有时用来保藏菌种4、脱水(商品)培荞基：脱水培养基也称为商品培养基、预制干燥培养基。
●将各种营养成分按比例配制完全,制成脱水的干粉状,装瓶出售;使用时只需按比例加人定量的水溶化、灭菌便可。
●根据培养基的用途来区分：➢增殖培养基选择培养基鉴别培养基1、增殖培养基：在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。
细菌接种实验报告总结(3篇)
第1篇一、实验背景细菌接种实验是微生物学实验中的重要内容，通过对细菌进行分离、纯化和接种，我们可以研究细菌的生长、代谢、形态和生理特性。
本实验旨在通过学习细菌接种技术，掌握无菌操作的基本原则，了解细菌在不同培养基上的生长情况，为后续的微生物学研究打下基础。
二、实验目的1. 掌握无菌操作的基本原则，建立无菌观念。
2. 熟悉细菌的接种、分离培养方法和接种环的制作方法。
3. 观察细菌在不同培养基上的生长情况，了解细菌的生理特性。
4. 分析实验结果，提高实验技能。
三、实验方法1. 准备培养基：本实验选用三种培养基，分别为琼脂培养基、含有抗生素的琼脂培养基和富含糖分的琼脂培养基。
2. 细菌接种：采用平板划线分离法、斜面接种法、液体培养基接种法和穿刺接种法进行细菌接种。
3. 观察与记录：观察细菌在不同培养基上的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
四、实验结果与分析1. 平板划线分离法：通过连续划线接种，将混合菌分离成单菌落。
观察发现，菌落形态、颜色、大小等特征各异，表明分离效果良好。
2. 斜面接种法：用接种环取单个菌落，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后从底部向上作连续曲线划线。
观察到菌落生长均匀，斜面顶端菌落较密集。
3. 液体培养基接种法：用接种环取菌少许，在试管内壁与液面交接处的管壁上轻轻研磨，使细菌混合于培养液中。
观察到菌液均匀，无沉淀物。
4. 穿刺接种法：用接种针取细菌少许，从半固体培养基中央，平行于管壁垂直刺入，接近管底但不可接触管底，然后接种针沿原路退出。
观察到菌落生长良好，无细菌扩散。
五、实验总结1. 本实验成功掌握了无菌操作的基本原则，确保了实验结果的准确性。
2. 通过学习细菌接种技术，了解了不同接种方法的特点和适用范围。
3. 观察了细菌在不同培养基上的生长情况，为后续的微生物学研究提供了基础数据。
4. 在实验过程中，发现了实验操作中的不足，如接种环消毒不彻底、培养基制备不规范等，为今后的实验提供了改进方向。
微生物培养操作及注意事项
引言：微生物培养是微生物学研究中的基础实验技术，通过培养和繁殖微生物可以方便地获取大量的微生物细胞，为微生物学研究、工业生产以及医学诊断提供了重要的手段和依据。
本文将介绍微生物培养的操作步骤和注意事项，帮助读者掌握正确的培养技巧并避免常见的操作错误。
概述：微生物培养操作的目的是为了利用适当的营养条件提供给微生物生长所需的营养物质、温度和pH条件，并且维持适当的氧含量和无菌状态。
在进行微生物培养实验前，需要准备培养基、无菌工具和培养设备，并熟悉培养操作的基本原理和注意事项。
正文：一、选择合适的培养基1.了解微生物的营养需求：不同的微生物对营养物质的需求不同，如碳源、氮源、微量元素等。
了解微生物的营养需求是选择合适的培养基的前提。
2.选择适当的培养基类型：常见的培养基类型包括富养基、平衡盐基和选择性培养基等。
根据实验目的和微生物特性选择合适的培养基类型。
3.调整培养基的pH值：对于不同的微生物，其最适生长的pH 值有所差异。
在制备培养基时，需调整pH值到适宜范围。
4.添加适量的固化剂：常用的固化剂有琼脂、洋菜粉等，添加适量的固化剂有助于培养基的凝胶化。
5.培养基的无菌处理：制备好的培养基需要高温高压灭菌，以确保培养基的无菌状态。
二、准备培养设备和无菌工具1.烧杀法灭菌无菌器具：包括试管、烧杀针、培养皿等容器，在进行培养前，需要将这些容器进行高温高压灭菌处理，以确保其无菌。
2.使用无菌技术：在进行微生物培养操作时，需要掌握无菌技术，如洗手消毒、穿戴无菌手套、操作台面无菌处理等，以避免污染。
三、培养操作步骤1.取出无菌培养基：在无菌条件下，将培养基倒入无菌容器中，如试管、培养皿等。
2.加入适量的微生物菌液：从已经纯化和鉴定的微生物菌液中取出适量的菌液，通过吸管、针头等无菌工具加入到培养基中。
3.均匀混合微生物菌液和培养基：使用无菌技术将微生物菌液和培养基充分均匀混合，以保证微生物的均匀分布。
4.完成培养器具的封闭：将加入微生物菌液的培养器具盖好，并用无菌膜或橡皮塞封口，防止外界细菌的侵入。
微生物细菌接种培养实验报告
微生物细菌接种培养实验报告一、实验介绍微生物是指细菌、真菌、病毒、原生动物和藻类等微小生物的总称，它们在生命的整个过程中都扮演着重要的角色。
本次实验主要介绍了微生物细菌接种培养的方法和技巧，旨在帮助学生熟悉微生物实验的基本操作。
二、实验原理细菌接种培养实验是通过将细菌接种到含有营养成分的培养基中进行培养，使细菌在适宜的环境中进行繁殖。
细菌在培养基中繁殖所需要的主要营养成分有碳源、氮源、磷源和微量元素等。
根据不同的细菌，培养基的成分也不同，需要根据实验的需要加入不同的营养成分。
三、实验步骤1.准备培养基根据实验需要选择合适的培养基，加入适量的蒸馏水和其他营养成分，将培养基均匀地倒入培养皿中。
2.接种细菌取一支已经生长好的细菌，用吸管沾取适量的细菌液，滴到培养基表面。
如果需要进行斜面培养，可以用细菌接种环将细菌接种到斜面上。
3.标记培养皿在培养皿的盖子上标记好实验的日期、细菌种类等重要信息，避免混淆。
4.封闭培养皿用透明胶带将培养皿的盖子封闭，避免细菌在外界环境的干扰下生长。
5.培养将培养皿置于恒温箱中，根据需要调节恒温箱的温度和湿度。
一般情况下，细菌的培养需要3-5天的时间。
四、实验注意事项1.实验过程中要做到操作规范、注意卫生，避免细菌的污染。
2.在接种细菌前，要先消毒接种器具，避免外界环境中的细菌污染。
3.在标记培养皿时，要将重要信息标注清楚，避免混淆。
4.在恒温箱中放置培养皿时，要将不同种类的培养皿分开放置，避免细菌之间的交叉感染。
5.实验结束后，要做好实验器具和培养皿的消毒和清洗工作，避免细菌的残留和传播。
五、实验结果与分析通过培养皿的观察和细菌的生长情况，可以初步判断细菌的种类和数量。
如果细菌长成了光滑、湿润的菌落，可以说明细菌在培养基中得到了良好的生长和繁殖。
如果发现有异常生长或变异的情况，需要进行进一步的实验和分析。
六、实验总结微生物细菌接种培养实验是学生进行微生物实验的基础操作，通过本次实验，学生可以熟悉微生物实验的基本步骤和操作技巧，同时也可以了解到微生物在适宜的环境中进行繁殖的基本原理。
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2. 富集培养
富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理 条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微 生物的需要。
常用的选择培养基
S.S琼脂（沙门氏菌、志贺氏菌分离用培养基）
组成成分：乳糖、胆盐、柠檬酸铁、柠檬酸纳、煌绿、 中性红、硫代硫酸钠等，强选择性抑制大肠杆菌，分 离沙门菌
一、用固体培养基分离纯培养
液体培养基； 培养基： 固体培养基； 1.5%-2.5%
半固体培养基； 0.2%-0.75%
琼脂
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
一、用固体培养基分离纯培养
菌落（colony）： 单个（或聚集在一起的一团）微生 物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定 程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞 生长群体
煌绿、胆盐、柠檬酸纳抑制非肠道菌
大肠杆菌分解乳糖而产酸，使胆盐析出，菌落中 心浑浊呈深红色，柠檬酸铁可使产生硫化氢的菌 落呈黑色
硫代硫酸钠缓和胆盐对沙门氏菌的有害作用，中
和煌绿、中性红的毒性，使大肠杆菌的红色菌落
更加鲜艳
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
常用的选择培养基
麦康凯培养基
乳糖、胆盐，弱选择性，中性红,分离肠道致病菌 中性红指示剂 pH感应范围6.8（红色）到8.0（黄色） 分解乳糖产酸，菌落颜色呈红色 沙门氏菌、志贺氏菌不分解乳糖，菌落颜色与培养基相
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
三糖铁琼脂或克氏双糖铁
三糖铁琼脂含有乳糖、蔗糖、和葡萄糖，蔗糖：区别普
通变形杆菌（＋）、沙门氏菌（-）
克氏双糖铁成分 蛋白胨； 牛肉膏 ； 酵母膏 ；乳糖 ；
葡萄糖； 氯化钠 ； 柠檬酸铁铵 ；硫代硫酸钠 ； 琼脂 ； 酚红为指示剂，黄色为产酸，红色为产碱 观察克氏双糖接种后斜面、底层产酸、产气、产H2S的情 况，通常大肠杆菌斜面不产酸、底层产酸产气、不产H2S
实验五
微生物接种方法及微生物 测量方法
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
实验目的与要求 （p9/32)
强调无菌操作概念，掌握无菌操作技术 掌握微生物移植、纯化的基本方法 了解不同微生物在同一培养基上的培养特征，
及同一微生物在不同培养基上的培养特征 掌握几种常用的鉴别、选择培养基的使用 了解显微测微尺的构造；掌握应用显微测微
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
2、涂布平板法
一、用固体培养基分离纯培养
使用较多的常规 方法，但有时涂 布不均匀！
1、稀释倒平板法
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
操作较麻烦，对 好氧菌、热敏感 菌效果不好！
利用L棒进行涂布
3、平板划线法
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
3、平板划线法
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
一、用固体培养基分离纯培养
4、厌氧微生物的分离
厌氧罐
厌氧手套箱 实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
二、选择培养分离
对微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化
抑制大多数其它微生物的生长； 使待分离的微生物生长更快；
没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物 生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。
尺测量微生物细胞大小的方法与技术
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
微生物培养
Culture：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体 混合培养物：含有多种微生物的培养物； 纯培养物： 只有一种微生物的培养物；
Pure culture 通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果
纯培养技术是进行微生物学研究的基础！ 实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
不 同 微 生 物 在 特 定 培 养 基 上 生 长 形
菌落的描述：形态、表面和边缘特征
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
同一细菌在不同的培实验养五培养平基使板用特上点与形微生物成接 不同的特征菌落
种方法
一、用固体培养基分离纯培养
使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法： 1、稀释倒平板法 2、涂布平板法 3、平板划线法 4、厌氧微生物的分离
众多菌落连成一片
菌苔（lawn）
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
无菌操作： 火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
物（成
进形的
行 分 类 、 鉴 定 的 重 要 依 据
状 、 颜 色 等 ） ， 可 以 成 为 对 该具 有 稳 定 的 特 征
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
微生物大小测量原理（P48）
微生物细胞的大小是其形态特征之一，也是鉴定的依据之一。 在研究工作中有时要测定显微镜下微生物细胞的大小，使用 工具为显微测微尺。
显微测微尺有镜台测微尺和目镜测微尺。目镜测微尺是一块 可放在目镜内的园形玻片。在玻片中央把5mm长度，刻成 100等分的小格，其目镜测微尺经过镜筒光学系统后，其每格 尺寸随镜筒长度变化而变化，也随放大倍数而变化，因此必 须选定显微镜及放大倍数。然后用已知长度的镜台测微尺来 校准，计算出物镜下接目测微尺每小格的长度。然后才可用 接目测微尺直接测量标本的长度和宽度。镜台测微尺是一中 央部分刻有精确等分线的载玻片，其每格长度为10um，是专 用于校正目镜测微尺每格长度的。
同 胆盐有助于沙门氏菌的生长，抑制其他细菌
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
常用的选择培养基
沙门菌常用的培养基： 亚硫酸铋琼脂平板(BS): 含有煌绿、柠檬酸铋铵、亚硫酸钠、硫酸亚铁， 具有强选择性，分离沙门氏菌 HE（Heetoen)： 柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、硫代硫酸钠、麝香 草酚蓝和复红，分离肠道致病菌
实验五培养基使用特点与微生物接 种方法
三、选择培养分离
1. 利用选择平板进行直接分离
高温下培养：分离嗜热细菌； 培养基中不含N：分离固氮菌； 培养基加抗生素：分离抗性菌；
待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制
1. 利用选择平板进行直接分离
牛奶平板：分离蛋白酶产生菌； 颜色反应：分离特定的菌株；