2013高考生物考前回扣----生物技术实践
高考生物一轮复习 第九单元 生物技术实践精练(含解析)-人教版高三全册生物试题
第九单元生物技术实践1.[11分]科研人员以猕猴桃为原料,选用优良菌种,制备猕猴桃酒和猕猴桃醋,其简化工艺流程图如下,回答下列问题:(1)在榨汁过程中清洗和破碎的顺序是,原因是。
(2)酒精发酵时一般将温度控制在℃,发酵过程中绝大多数微生物不能生长的原因是。
(3)最初的猕猴桃酒中含有少量尿素,脲酶可以分解尿素。
根据电荷性质分离脲酶的方法是,脲酶不宜直接投入酒中,原因是。
2.[15分]尿素作为主要的化肥种类之一,也是一种重要的化工原料。
目前处理含尿素废水的方法有微生物水解法及脲酶水解法等。
某研究小组欲从土壤中筛选能高效分解尿素的细菌(目标菌)。
(1)给农作物施用尿素,主要是为了给植物提供元素,过量施用尿素,尿素可随水土流失,易造成水体污染。
为了筛选能分解尿素的细菌,在配制培养基时需要添加KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。
(2)要从土壤中分离目标菌,关键的实验思路是。
理由是。
(3)为进一步鉴定分离得到的菌种,常在固体培养基中加入酚红试剂并接种培养,若菌落周围出现,可以初步确定该种细菌为目标菌,其原理是。
(4)运用固定化脲酶技术处理含尿素废水时应采用法对脲酶进行固定化,理由是。
3.[15分]胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病,也是常用的食品色素。
为了降低胡萝卜素的生产成本,某科研人员试图从光合细菌中提取胡萝卜素,实验流程如图所示。
回答下列问题。
(1)微生物培养基一般都含有水、无机盐、碳源和氮源四大营养要素,该实验所用培养基中不需要添加的营养要素是。
(2)若固体平板培养基上菌落数目过多而连成一片,原因可能是(答出一种即可),请提出解决此问题的合理措施:。
(3)若需对光合细菌进行活菌计数,则②过程应采用的接种方法是。
(4)从干燥的菌体中提取胡萝卜素常采用萃取法,萃取剂应具有的主要特点是。
(5)对萃取液进行浓缩时可直接使用蒸馏装置,浓缩时广口瓶中收集到的是,在浓缩之前,还必须对萃取液进行的操作是。
2013年高考生物(苏教版)二轮复习课件：4-14 生物技术实践
基础回归14
(2)蛋白质的提取和分离 ①实验原理：依据蛋白质分子的形状和大小，所带电荷的性质 和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等。 ②常用方法：凝胶色谱法——相对分子质量的大小，电泳—— 带电性质的差异及分子本身的大小、形状的不同。 (3)PCR 技术 ①引物是单链 DNA 或 RNA，原料是游离的四种脱氧核苷酸。 ②需要热稳定的 DNA 聚合酶(TaqDNA 聚合酶)。 ③扩增方向：从子链的 5′端向 3′端。 ④3 个步骤：变性、复性、延伸。 ⑤DNA 在 260 nm 的紫外线波段有一强烈的吸收峰， 可以利用 这一特点进行 DNA 含量的测定。
基础回归14
c.DNA 对高温的耐受性比蛋白质高：将滤液放在 60～75 ℃的 恒温水浴箱中保温 10～15 min，使蛋白质变性沉淀而 DNA 分 子还未变性。 d.DNA 不溶于酒精， 但细胞中的某些蛋白质溶于酒精： 在提取 液中加入冷却的酒精，可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。 ④DNA 的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、 冷却的体积分数为 95%的酒精，静置 2～3 min，溶液中会出 现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用 滤纸吸去上面的水分。 ⑤DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成 蓝色。
基础回归14
基础回归14 生物技术实践
1.传统发酵技术 比较 项目 菌种 代谢 类型 原理 果酒制作 酵母菌 兼性厌氧型 酵母菌无氧 呼吸 果醋制作 醋酸菌 需氧型 醋酸菌有 氧呼吸 腐乳制作 毛霉等微生 物 需氧型 多种微生物 有氧呼吸 泡菜制作 乳酸菌 厌氧型 乳酸菌无 氧呼吸
基础回归14
2.酶的研究与应用 (1)酶在果汁生产中的作用 组成 纤维 C1 酶、CX 酶、 素酶 葡萄糖苷酶 多聚半乳糖醛 酸酶、果胶分解 酶、果胶酯酶 作用 纤维素在 C1 酶、CX 酶的作用下分解 成纤维二糖，纤维二糖在葡萄糖苷酶 的作用下分解为葡萄糖 果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细 胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容 易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛 酸，也使得浑浊的果汁变得澄清
2013年高考生物 考前冲刺大题精做 专题9 生物技术实践部分最新名校试题汇编(教师版)
2013年高考生物考前冲刺大题精做专题9 生物技术实践部分最新名校试题汇编（教师版）1.（2013届某某省某某市高三第一次定位检测）葡萄发酵可产生果酒、果醋，请利用相关的知识回答以下问题：（1）如下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，④过程需要__________适宜条件。
（2）将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如下图所示。
发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。
据图分析，操作错误的是__________，发酵结束后，检验甲发酵过程中产物的方法是__________。
（3）如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图。
判断图A所用接种方法的依据是______________，图B效果的接种方法是______________。
（4）自己在家中制作的果醋很容易腐败，而包装瓶上写着105℃高温瞬时的果醋瓶上写着“不含任何防腐剂，最长保质期为一年”，其中的奥秘是_____________。
（5）在下图中用曲线表示正常果酒发酵阶段酵母菌种群个体数量的变化情况。
【答案】【解析】⑴④过程为制作果醋的阶段，乃至的醋酸杆菌为好氧性幼苗，生长的最适温度为30--35℃。
⑵酵母菌无氧呼吸可以产生酒精和CO2，是葡萄酒制作过程中已接近作用的微生物。
酵母菌在发酵过程中产生的CO2导致乙装置中气压升高，要定期打开排气管进行放气丙装置瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口，不利于放气；同时导致瓶内氧气过少，不利于发酵前酵母菌的大量繁殖。
⑶根据菌落特点可以直接判断出接种方法，详解见答案。
⑷见答案。
⑸在有氧气的环境中，酵母菌可以增殖，在无氧环境中酵母菌不能增殖。
点评：本题综合考查了果酒和果醋制作、微生物的实验室培养等相关知识。
属于识记、理解层次的考查。
2.（2013届某某省望城一中、某某县实验中学高三联考）请分析回答下列问题：(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。
2013高考生物 考前回扣 现代生物科技专题(含解析)新人教版
2013高考生物考前回扣---现代生物科技专题一、网络构建二、基础回扣专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA 片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
2013年全国通用 届高考一轮复习 选修1.1 生物技术实践
科学和安全,在菌种的培养和工艺上都更好。盐在发酵中能抑制杂
菌生长,越靠近瓶口时越容易污染。
三、泡菜的制作及亚硝酸盐含量的测定 1.泡菜制作原理 乳酸菌 ___________无氧呼吸可产生乳酸。 反应式:C6H12O6 2C3H6O3 2.制作流程
3.亚硝酸盐含量测定原理 在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与
中有无醋酸生成,简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定。
【例1】 生物技术在食品加工中的应用十分广泛,如果酒、果醋制作
是常见的例子。
果酒、果醋制作中,都需要大量纯种发酵微生物,所以首先要对发酵
微生物进行培养,在微生物培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑
温度、 和培养皿进行 和 、渗透压等条件;为防止杂菌污染,还需对培养基 (消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗 ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是 。
COOH+H2O 氨基酸
制作
流程
挑选葡萄
↓ 冲洗 ↓ 榨汁
让豆腐上
长出毛霉 ↓ 加盐腌制 ↓
↓
酒精发酵→果酒 ↓
加卤汤装瓶
↓ 密封腌制
醋酸发酵→果醋
发酵 条件
前期通氧,后 一直通氧,温 一直通氧,温 密闭,保证无 期密闭。温 度:30~35 ℃ 度:15~18 ℃ 氧环境,温度
度:18~25 ℃
并用70%的酒精消毒;封闭充气口;若用简易的发酵装置,每隔一定时 间排气时只需拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖等。 ③控制好发酵时间与温度、果醋制作时适时充气。
(2)腐乳制作注意事项。 ①影响腐乳品质的条件:水、盐、酒、温度、发酵时间等。 a.水的控制:含水量约70%,用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。 b.盐的控制:盐浓度过高,会影响腐乳的口味,浓度过低,豆腐易腐败变 质。
高考生物专题九 生物技术实践(含解析)新人教版
专题九：生物技术实践【考情分析】本专题内容包括选修一《生物技术实践》的全部内容。
本部分内容在高考中以非选择题呈现的较多，多为二选一模式。
本专题内容在高考中的主要考点有：微生物的培养基的配制、消毒、灭菌、计数分离等技术，尤其是培养和分离；传统发酵食品制作的原理、过程、条件控制；花药离体培养技术的操作及与植物组织培养的区别；植物有效成分的提取的原理、方法等；DNA、蛋白质的提取、分离的原理、方法与装置。
【知识网络】【知识综合】一、传统发酵技术的应用8二、微生物的培养及应用 12、微生物的纯化（1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离 （2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离 3、微生物的分离和计数 （1）分离：选择培养基（2）计数：常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。
这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
三、植物组织培养1、原理：细胞的全能性2种—培养—移栽—栽培（1） 包埋法：适合于较大的细胞 化学结合法物理吸附法（2不利于催化一系列的酶促反应五：五种重要物质的提取适用于酶的固定常用方法（1）提取方法总结（2）DNA粗提取与鉴定①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。
②实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。
③鉴定DNA加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。
④注意事项：经以血液为材料时，需加入柠檬酸钠抗凝，搅拌动作在轻缓，二苯胺在现用现配（3）血红蛋白的提取和分离操作程序①样品处理：红细胞的洗涤（除去血浆蛋白等杂质）、血红蛋白的释放（使红细胞胞破裂，血红蛋白释放出来）、分离血红蛋白溶液（经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来）。
②粗分离——透析：除去样品中分子量较小的杂质。
③纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。
高三生物复习课件：专题八 生物技术实践
要求实验操作应在酒精灯____________附近进行，以避免周围
环境中微生物的污染。 [名师点拨](1)由于该细菌能够分解原油，所以应该以原油 为唯一碳源来筛选，这种培养基称为选择培养基。
(2)菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂 布平板法。
(3)菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明 该菌株的降解能力强。
[名师点拨]洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分 离纯化，加入的是生理盐水，红细胞内液与生理盐水是等渗的， 所以可以防止细胞破裂。哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与 众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少。血红蛋白是有色蛋白，因 此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收
集洗脱液，这使得血红蛋白的分离过程非常直观，简化了操作。
[答案]D
【典例 3】(2012 年深圳六校联考)有些细菌可分解原油， 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤
中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题： (1) 在 筛 选 过 程 中 ， 应 将土壤样品 稀 释 液 接 种 于以
________________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲， 该培养基属于____________培养基。
专题八
生物技术实践
微生物的利用 (1)微生物的分离和培养 (2)某种微生物数量的测定 (3)培养基对微生物的选择作用 (4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其 他方面的应用 酶的应用 (5)酶活力测定的一般原理和方法 (6)酶在食品制造和洗涤等方面的应用 生物技术在食品加工及其他方面的应用 (7)植物的组织培养 (8)蛋白质的提取和分离 (9)PCR 技术的基本操作和应用
实 验 与 探 究 能 力
酵母菌
2013高考生物考前3天 现代生物科技
第十五讲现代生物科技专题（选修三）1.（2012·江苏，32）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对）和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。
现有MspⅠ、Bam HⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。
请回答下列问题。
（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。
（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为.（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。
从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有种不同长度的DNA片段。
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。
在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加的培养基进行培养。
经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是________________________________________________________ ___________________________________________________________ __________。
2.（2012·湖南六校联考，40）建立人工湿地公园是解决城市水污染的新思路，根据下面的示意图回答相关问题。
（1）人工湿地是一个生态系统，其中芦苇、绿藻、黑藻属于，芦苇、绿藻、黑藻分布于不同水层，这一现象体现了群落在结构上有明显的现象.（2）与其他自然生态系统相比,输入该生态系统的能量有和。
（3）人工湿地可以净化城市污水，但对污水排放量还要加以控制，原因是________________________________________________________________________________________________________________ ____________________。
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莄袅For personal use only in study and research; not forcommercial use薃For pers onal use only in study and research; not for commercial use葿2013高考生物考前回扣---生物技术实践膆一、网络构建For pers onal use only in study and research; not for commercial useFor pers onal use only in study and research; not for commercial use酵母菌 毛霉等无氧呼吸原 理」果酒腐乳果醋亚硝酸盐含量测定碳源、氮源.水、无机盐、生长因子pH.O2等条件稀释涂布平板法物的平板划线法无姑L酒精等化学药物消毒灭菌紫外线灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌选择培养基应用微生物的分离实例分解尿素的细菌丄伶解纤维素的细菌显微镜直接计数微生物的计数稀释涂布平板法计娄蒁薈活化酵母细胞I西已制CaCl 2酉己制海藻 酸钠溶液 混合母细胞I 果胶分解廊率和澄淸度 堤高果汁出汁力口酚诜原理 衣粉 过程聚半孚L醛酸酶果胶酯酶酚的专一」性 和高效性化学结合法 物理吸附法植物有效成 分的提取压榨 I T I胡萝卜素橘皮精油玫瑰精油螄二、基础回扣肄考点i 微生物的培养与应用芈仁培养基及其种类蚇(1)成分：包含碳源、氮源、水分、无机盐(有些微生物还需在培养基中额外补充生长因 子)。
膃(2)制备：计算T 称量T 溶化T 灭菌T 倒平板。
螄(3)种类莀划分 聿培养基种类 袇特点芁用途二菴胺溶液鉴定 DNA 的粗提取 与鉴定NaCl 溶液酒精纯化>粗分离一 样品处理纯度鉴定血红蛋 白的提凝胶色谱法 电泳法萃取蒸懈腿2 .微生物的纯化培养的方法蚇(1)平板划线法螃①通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面芁②在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落。
莆(2)稀释涂布平板法膆①将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
蒃②在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
聿3 .微生物的分离和计数蚈(1) 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数薆①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。
芄②测定微生物数量的常用方法肀统计菌落数目［公式：每克样品中菌株数=(C + V) X M］或显微镜直接计数。
螆③过程：土壤取样T样品的稀释T微生物的培养与观察。
羅④设置重复组与对照组羄a .设置重复组賺统计某一稀释度下平板上的菌落数时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说服力与准确性。
腿b .设置对照组莄判断培养基中是否有杂菌污染时，需将未接种的培养基与接种的培养基同时进行培养；螄判断选择培养基是否具有筛选作用时，需将牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。
罿(2)分解纤维素的微生物的分离芇①实验原理—纤维素酶(复合B§)-|*a.纤维素G酶、5酶纤维二糖葡萄糖苛酶葡萄糖纤维素分解菌需薜卜红色复合物S需篇圈袄賺即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
选择培养涂布平板肀②实验流程：土壤取样T选择培养基T度稀释T鉴别培养基T挑选菌落莅4 •测定微生物数量的方法芃(1)直接计数法：常用的是显微镜直接计数。
羁(2)间接计数法：常用的是稀释涂布平板计数法。
肁考点2:酶的应用螈膈2 •酶在食品制造和洗涤等方面的应用肅(1)加酶洗衣粉中酶制剂的种类与功效螁①加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。
目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。
袀②碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。
脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子的物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。
蚅(2)果胶酶在果汁生产中的应用肆在果汁生产中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁混浊。
果胶酶能够分解果胶，将其变成可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变澄清。
肃考点3:生物技术在食品加工及其他方面的应用荿1 •果酒、果醋制作的注意事项莅(1)材料的选择与处理袃选择新鲜的葡萄，榨汁前应先冲洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。
节(2)防止发酵液被污染螈需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。
为避免杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干，发酵装置要洗净并用70%勺酒精消毒；若用简易的发酵装置,每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。
膅(3)控制发酵条件袅2.腐乳制作的注意事项膃⑴影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。
螀①水的控制：含水量约70%用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。
肇②盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味；浓度过低，腐乳易腐败变质。
蚂③酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。
酒精含量过高，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。
节④温度的控制：温度为15〜18C，适合毛霉生长。
发酵时间控制在6个月左右。
腿(2)防止杂菌污染袇①用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。
蚃②装瓶时，操作要迅速小心。
加放卤汤后，要用胶条将瓶口密封。
封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。
蒀3 .泡菜制作的注意事项蕿(1)泡菜坛的选择：选择气密性好的泡菜坛。
用水封闭坛口使坛内与坛外空气隔绝，这是最简易的造成无氧环境的方法。
这样，坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。
如不封闭，则会有许多需氧菌生长，蔬菜会腐烂。
薈(2)腌制条件的控制：腌制过程中要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。
发酵时间受到温度的影响：18〜20C,腌制15天左右。
温度高，时间短一些。
温度过高、食盐用量不足10%腌制时间过短，都容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
螅莃考点4: DNA和血红蛋白的提取和分离芈1. DNA粗提取与鉴定芇(1)哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，不适于作为 DNA 提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。
蒄(2)实验过程中两次用到蒸馏水： 第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破， 释放出DNA 第二次目的是稀释 NaCI 溶液，使DNA 析出。
蒁(3)鉴定DNA 加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。
羁2 •血红蛋白的提取和分离操作程序羇(1)样品处理：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液。
薅(2)粗分离一一透析：除去样品中分子量较小的杂质。
薀(3)纯化：用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。
莀(4)纯度鉴定：一般用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的相对分子质量。
螇三、考题预测芃1 • (2013 •山东师大附中高三模拟)下面是与植物芳香油的提取相关的问题，请回答。
• • • •--甲O O 乙-I 111—A B C D(1) 玫瑰精油的提取可使用左图所示装置，这种方法叫 液 _______ (填“是”或“不是”)纯的玫瑰精油。
(2) 橘皮精油提取的原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用⑶ 胡萝卜素是 _______ 色的结晶。
从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 _____________ 法，加 热时应该注意控制 _________ ，一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量 成 _______ 比。
(4) 将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，右上图为鉴定结果示意图，请据图回________ 法；蒸馏时收集的蒸馏________ 法提取橘皮精油。
答：A B 、C 、D 四点中，属于标准样品的样点是2. (2013 •海淀区高三质检)常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界 中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。
下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程，请分析回答下列问题：(1) 将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用 ___________ 将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌 的三角瓶中，瓶中的液体经适当稀释后， 接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。
(2) 将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一 周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌 ________________________ 。
从存活的酵母菌提取 DNA 从中获取目的基因并用 PCR 技术大量扩增。
这里目的基因是指控制 ___________________________ 合成的基因。
(3) 将目的基因连接到一种穿梭质粒上。
该质粒既含有大肠杆菌的复制起点pMBlori ,也含有酵母菌复制起点 ARS 还具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶 基因。
你认为这种质粒的特点是 ___________________________ 。
(4) 大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含 _____________ 的培养基上进行筛选。
将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖， 应选择缺乏 ____________ 能力的酿酒酵母作为受体菌。
(5) 对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如上图所示，据图分析，将转基因酿酒 酵母接种在以 _____________ 为碳源的培养基中进行发酵能力测试， 最初培养基中的葡萄糖被 快速消耗，随着发酵继续进行， 酿酒酵母能够 ___________________________________ ，说明所 需菌株培育成功。
3. (12分)(2013 •北京崇文一模)请回答下列与大肠杆菌有关的问题。
(1) 从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于 ___________ ;它的同化作用类型是 __________ 。
(2) 成分 含量蛋白胨 10.0 g 乳糖 5.0 g 蔗糖5.0 gK z HPQ2.0 g32葡木己翻时将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL ,根据用途划分该培养基属于____________ 培养基(选择、鉴别)。
该培养基中的碳源是 ____________ 。
3培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和______________ 。
为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行__________________ 。
⑷现有一升水样，用无菌吸管吸取 1 mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。
各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为 _______________________________ 。