康为世纪 CW2088棉花基因组提取试剂盒
胶回收、DNA产品纯化
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2012-核酸纯化-01
罗金辉： 多交流，共同进步！
康为世纪产品培训之 DNA产物纯化、凝胶回收产品
主要内容
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DNA产物纯化产品
凝胶回收产品
哪些客户，哪些实验会用？
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PCR
DNA产物纯化/胶回收
酶切
50次
--
198
升级产品
200次
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598
升级产品
CW0520
微量DNA产物纯化试剂盒
50次
198
258
CW0517
大量DNA产物纯化试剂盒
50次
258
298
CW0522B
寡核苷酸纯化试剂盒
20次
188
198
DNA产物纯化产品卖点：
DNA产物纯化产品
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回收量大: 可获得多至20 ug的DNA
回收效率高：升级后的吸附柱回收DNA 效率更高。
100次
198
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取消
200次
328
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取消
CW2302
快速琼脂糖凝胶 DNA回收试剂盒
50次
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198
升级产品
200次
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598
升级产品
CW0524
微量琼脂糖凝胶 DNA回收试剂盒
50次
198
258
CW0518
大量琼脂糖凝胶 DNA回收试剂盒
50次
258
298
胶回收产品卖点：
胶回收产品
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01
回收片段范围宽：50 bp-50 kb
02
适用于PCR的棉花基因组DNA快速、批量制备方法[发明专利]
![适用于PCR的棉花基因组DNA快速、批量制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/c34ac3216137ee06eef91829.png)
专利名称：适用于PCR的棉花基因组DNA快速、批量制备方法
专利类型：发明专利
发明人：张道远,李小双,李海燕
申请号：CN201210514827.5
申请日：20121205
公开号：CN102925430A
公开日：
20130213
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种适用于PCR的棉花基因组DNA快速、批量制备方法，涉及作物育种领域转基因作物的分子检测。
该方法是由取棉花植株顶部的幼嫩叶片装入离心管中，加入提取液和钢珠，对样品进行破碎处理，然后水浴，加抽提液抽提，用异丙醇沉淀DNA，再用乙醇洗涤，沉淀溶于水即为提取的DNA。
本发明解决了棉花基因组DNA提取步骤复杂、耗时耗力的问题，提供了一种能够快速、批量的提取满足PCR检测需求的DNA的方法，能够应用于转基因棉花育种和安全性申报等环节中的分子生物学检测。
申请人：中国科学院新疆生态与地理研究所
地址：830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市北京南路40号附3号
国籍：CN
代理机构：乌鲁木齐中科新兴专利事务所
代理人：张莉
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基因组DNA提取试剂盒 说明书
基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒，，使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容，，若有任何疑问若有任何疑问，，欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司（（4006618810*************）进行咨询进行咨询，，您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站（（ ）了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。
一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠，用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。
我们根据磁珠的独特分离作用，提供了一个极其简便的操作程序：样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。
在最适的试剂及操作条件下，可获得高质量DNA。
该方法具有简便、快捷、高效等特点，整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。
品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇（DTT ） 10管，0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件：：本试剂盒所有试剂（除DTT 外）均可以室温保存,应避免阳光直射。
当室温低于15℃时，裂解液中可能有结晶析出，38℃水浴加热几分钟，恢复澄清后即可使用，提取效率不受影响。
DTT 需要于冰箱4℃保存。
本试剂盒有效期为12个月， 请于有效期内使用。
安全信息：试剂中含刺激性化合物，操作时应小心，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件：1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。
2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处，避免冻结。
二、实验前准备：1.准备所需的实验耗材和设备，如离心管、恒温振荡器、离心机等。
2.取出全血样品，可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。
三、DNA提取步骤：1.取出全血样品，用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集，去除红细胞。
2.加入蛋白酶K将细胞裂解，释放DNA。
3.加入缓冲液和脱水溶液，沉淀DNA并洗涤。
4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。
四、实验注意事项：1.操作过程中需注意无菌操作，避免污染。
2.加入蛋白酶K的量应准确控制，不要过多或过少。
3.混合溶液时需轻轻摇匀，避免气泡的产生。
4.稀释保存DNA时，需使用无核酸酶的载体溶液，如TE缓冲液。
五、质控及结果分析：1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。
2.检测DNA浓度和纯度，确保提取的DNA适用于后续实验。
3.可以保存提取好的DNA样品，以备后续实验使用。
六、应用领域：1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA，可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。
2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。
总结：全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具，操作简便、提取效率高。
在实验中需注意操作规范，保证提取的DNA质量和纯度。
该试剂盒广泛应用于科研领域，为基因研究和临床诊断提供了有力支持。
希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。
一种快速提取棉花干种子基因组DNA的新方法
摘要 ： 利用 Ｓ Ｓ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ （ Ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｒ ｅ ｐ ｅ ａ ｔ ｓ ） 分子标记技术 ， 能 够 快 速 有 效 地 进 行 杂 交棉 纯 度 鉴定 。 为 了攻 克 Ｓ Ｓ Ｒ 分 子 标 记 技 术 中存 在 的 技 术 难 关 ，本 文专 门对 棉 花 干 种 子 胚 的基 因组 ＤＮ Ａ 提 取 方 法进 行 了研 究 。利 用该 方
康为世纪 CW0556基因组扩增试剂盒
DNAamp PCR Kit基因组扩增试剂盒Version 09062010‐2.4 I 组分说明Catalog no. Number of preps CW055650CW0556A6CW0556B200Buffer SA 15 ml 1.5 ml 50 ml2×PCR MasterMix Proteinase KProtocol 550 μl550 μl180 μl80 μl12×1 ml2×1 ml1注意：2×PCR Master Mix含有Taq DNA Polymerase, 2x Taq PCR Buffer, 3 mM MgCl2, 和 400 µM dNTP mix.II 保存条件Buffer SA室温（15-25℃）干燥条件下可保存12个月；2×PCR MasterMix建议分装后放置于-20℃，可长期保存。
如需频繁使用，可存放于4℃。
III 产品简介本产品专用于从各种常见的样品中快速提取用于PCR扩增的DNA。
裂解液直接用于PCR，使用非常简便。
应用广泛，尤其适用于高通量育种筛选和临床筛选。
可以快速制备PCR模板。
Ⅳ 注意事项1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2.Buffer SA应放置于室温保存，如放在低温（-20℃或4℃）保存时有沉淀析出，可在56℃水浴中重新溶解沉淀，并摇匀溶液后使用。
3.本产品提供的2×PCR MasterMix为2×母液，使用时需加入模板和引物，并加入灭菌水补足体积，使其浓度为1×即可进行反应。
V 操作步骤以下所有步骤均可以在室温下操作，除非有特殊说明。
1. 第一次使用本试剂盒时，请仔细查看Buffer SA中是否有结晶析出，如有结晶请将裂解缓冲液于室温充分平衡至结晶完全溶解，或在56℃水浴中重新溶解沉淀后使用。
裂解缓冲液溶解后在室温保存。
康为世纪 DNA转染试剂
DNAFect Transfection ReagentDNA转染试剂Version 10272010‐1.0I 组分说明Catalog no. CW0860CW0860ADNAFect Transfection Reagent 0.5 ml 1 ml1Protocol 1II 保存条件2-8℃保存，可以稳定保存一年。
III 产品简介DNAFect是一种高效的阳离子脂质体转染试剂，适用于多种细胞的DNA转染。
可将DNA转入真核细胞中，对于大多数细胞都可以高效转染，且对细胞毒性较低。
IV 注意事项1. 转染试剂使用前务必先震荡摇匀。
2. 转染效率与细胞密度有很大关系，不同实验间应保持一个基本的传代步骤，且应确保转染时细胞没有长满或处于静止期。
一般贴壁细胞转染的最佳细胞密度是80-90%，悬浮细胞的最佳细胞密度为3-5x105细胞/ml，用于转染的最佳细胞密度根据不同的细胞类型或用途而异。
3. 转染时不要在培养基中加入抗生素，否则会导致细胞死亡。
V 操作步骤所有质粒用量均为标准用量。
以下操作步骤以6孔板为例，其他孔板按照表1中所列用量进行实验。
1.贴壁细胞：在转化前18-24小时，在6孔板的每孔中加入大约2ml正常生长培养基（在需要的情况下加入血清和抗生素），接种1-3 x105细胞。
待细胞生长至80-90%满。
悬浮细胞：在准备转染试剂之前，在0.8ml的无血清，无抗生素的培养基里接种1-3 x105细胞注意：由于转染效率对于培养条件极其敏感，所以应在不同的实验建立一个对应的传代流程。
2.在灭菌的离心管中准备以下试剂：溶液A：使用100 ul不含血清和抗生素的的培养基稀释2 ug DNA。
溶液B：充分混匀DNAfectin，使用100 ul不含血清和抗生素的的培养基稀释10-20 ul DNAFect。
3.将溶液 A 和溶液 B 在室温下孵育5分钟。
4.混合溶液 A 和溶液 B，并轻柔使其充分混匀，在室温条件下孵育20分钟。
康为世纪 高纯度质粒中提试剂盒
PurePlasmid Midi Kit高纯度质粒中提试剂盒Version 04282010‐2.1I 组分说明Catalog no. CW0502CW0502ANumber of preps. 50 6Buffer P1 30 ml 5 mlBuffer P2 30 ml 5 mlBuffer N3 40 ml 5 mlBuffer PB 30 ml 5 mlBuffer PW(concentrate) 15 ml 2 mlBuffer EB 15 ml 1 mlRNase A(10mg/ml ) 600 μl 100μlSpin Column CL 50 6Collection Tube(2ml) 50 6Protocol 1 1II 保存条件该试剂盒室温干燥条件下（15-25℃）可保存一年，更长的保存时间可置于2-8℃。
若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNaseA可室温(15-25℃)保存，更长时间保存置于2-8℃，加入RNaseA后的Buffer P1置于2-8℃保存，可以稳定保存半年。
III 产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，通过新型离心吸附柱在高盐浓度下高效、专一结合溶液中的DNA，提取率达85%–90%。
本试剂盒提取的质粒纯度高，质量稳定，最大限度的去除杂质蛋白和细菌中其它有机化合物的污染，一次可处理5-15ml菌液。
所得质粒可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。
IV 注意事项1.Buffer P1 在使用前先加入RNase A（将试剂盒中提供的RNase A 全部加入），混匀，置于2–8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
3.使用前请先检查Buffer P2 和Buffer N3 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
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Version 10112010 CottonGen DNA Kit
棉花基因组提取试剂盒
Cat. No. CW2088
保存：室温
组分说明
Cat.No. CW2088 CW2088A CW2088B
Kit Size 50 6 200
Buffer EPL 25 ml 5 ml 100 ml
Buffer GW1（concentrate）19 ml 3.8ml 76 ml
Buffer GW2（concentrate）13 ml 2.6ml 52 ml
Buffer GE 15 ml 2ml 60 ml
Spin Column DM 50 6 200
Collection Tube（2ml） 50 6 200
产品简介
本试剂盒专为棉花基因组提取而研制，同时也适用于其他多酚、多糖含量高的植物组织。
优化的缓冲体系使裂解液中的DNA 高效特异地结合在吸附柱上，可最大限度去除植物组织中的多糖、多酚等杂质。
提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠，可用于各种分子生物学常规实验，包括酶切、PCR、文库构建以及Southern杂交等。
注意事项
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2．所有离心步骤均应使用台式离心机，在室温下进行离心。
3．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4．使用前请先检查Buffer EPL是否出现浑浊，如有混浊现象，可在65℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
5．如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer EPL后加入4 μl DNase -free的RNase A（100 mg/ml），RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：CW0601。
操作步骤
1.取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约30 mg，加入液氮充分研磨。
2.加入400 μl Buffer EPL，涡旋振荡1分钟，使其充分裂解。
注意：本试剂盒可同时纯化DNA和RNA，RNA可能会抑制下游的一些酶促反应，但对PCR反应没有影响。
如果需要去除RNA，可在加入 Buffer EPL后加入4 μl 100 mg/ml的RNase A溶液（客户自备，货号：CW0601），震荡15秒，室温放置2分钟，再进行步骤3。
3.10,000 rpm（~11,500×g），离心2分钟，小心取上清，加入200 μl无水乙醇，充分混匀。
4.将液体转移到Spin Column DM中（Spin Column DM已放入Collection Tube内），12,000 rpm（~13,400×g）离
心30-60秒，弃废液。
将Spin Column DM放回到Collection Tube中。
5.向Spin Column DM中加入500 μl Buffer GW1（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（~13,400×g）离
心30-60秒，弃废液。
将Spin Column DM放回到Collection Tube中。
6.向Spin Column DM中加入700 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（~13,400×g）离
心30-60秒，弃废液。
7.将Spin Column DM放到Collection Tube中，12,000 rpm（~13,400×g）离心2分钟，弃废液。
Spin Column DM
室温放置数分钟，以充分晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR 等）。
8.将Spin Column DM放到一个新离心管中，加入50-100 μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12,000
rpm(13,400×g)离心1分钟，收集DNA溶液。
-20℃保存DNA。
注意：1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。
洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在
7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2）离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3）用另外的50-100 μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4）如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤8所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤8；若洗脱体积小于100 μl，可以增加DNA 的终浓度，但可能会减少总产量。
如果DNA的量小于1 μg，推荐用50 μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。