医用细胞工程学课程班复习题
细胞工程 期末考试复习题目
细胞工程期末考试复习题目细胞工程填空：20个ⅹ分=10分选择：10个ⅹ2分=20分名词：10个ⅹ6分=30分简答：5个ⅹ6分=30分论述: 1个ⅹ10分=10分第一章绪论1、细胞工程的定义及特点？细胞工程：是指主要以细胞为对象，应用生命科学的理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞，组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
细胞工程的特点：前沿性：现代生物技术的热点争议性：新技术给伦理道德带来的冲击综合性：多学科交叉应用性：工程类课程，重在产品与技术第二章细胞培养的设施与基本条件：1、什么是细胞及组织培养？组织工程：习惯上繁殖所有的体外培养，即器官培养，组织培养和细胞培养的总称。
其本意是指从活的机体中去取出器官、组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外建立无菌、室温和一定营养条件等，使之生长和生存，并维持其结构和功能能的技术称为组织培养。
细胞培养：将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞，做成细胞悬液，再培养于固体基质上，成单层细胞生长，活在培养液中呈悬浮转肽培养的技术称为细胞培养。
2、了解细胞培养实验室的基本规划及相关注意事项？实验室规划：⑴准备室：培养用具清洗、消毒和做实验准备的场所，一般建在通风和光线充足的地方。
⑵缓冲间：保护操作室的无菌环境，避免空气对流。
⑶操作间：要求无菌。
最好设在阴面，防止室温过高；天花板高度不超过2米，保证紫外线有效杀菌效应；门用拉门，避免空气流动。
室内天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角，要镶瓷砖或涂油漆，便于清洗与消毒，不易在墙角推挤灰尘。
3、细胞培养的设备有哪些？有何基本作用⑴超净工作台①最好安装在无尘室内，最好在无菌间，避免过多灰尘使滤器阻塞，降低净化效果，缩短使用寿命。
②新安装的或长期未使用的工作台，工作前必须对工作台和其周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，在采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。
③每次使用时，应先用75%酒精擦洗台面，并进行30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内累积的微生物，在关闭紫外灯后，应启动送风机使之转运2min后在进行培养操作。
苏大医用细胞工程题库及答案
组织培养(tissue culture) : 把活体的组织取出分成小块，直接置于培养瓶底或通过胶原纤维血浆支持物的培养瓶底来进行培养。
细胞培养(cell culture) :指用机械或化学的方法将组织分散成单个细胞而进行的培养。
器官培养(organ culture) :是将活体中器官或器官的一部分取出，在体外生长、生存，并使其保持器官原有的结构和功能特征的培养。
细胞系系原代培养经首次传代成功后即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。
细胞株(cell strain) :系通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的培养物。
细胞株的这种特定性或标志性在整个培养期间始终存在。
细胞克隆:系指由同一个祖先细胞通过有丝分裂所产生的遗传性状相同的细胞群体。
原代培养(primary cultural) :亦称初代培养期，为新鲜组织自体内取出接种培养至第一次传代阶段，一般持续1-4周。
此期细胞移动较活跃，可见有丝分裂但不旺盛。
//原代细胞培养通常为异质性，即各细胞的遗传性状互不相同，细胞互相依存性强，细胞独立生存性差，克隆形成率很低。
细胞与体内相应细胞形状相似，多成二倍体核型，更能代表其来源组织的细胞类型及组织特异性，是检测药物很好实验工具。
传代培养(passage):不论是否稀释，将细胞从一个培养器皿移植或转移到另一个培养器皿，即称为传代或传代培养。
可以理解，在任何时候，细胞从一个器皿接种到另一个器皿时，总会丢失一部分细胞。
因此，在客观上，细胞必定有所稀释。
该词与传代再培养(subculture)同义。
(将培养细胞从培养基中取出，把一部分移至新的培养器中再进行培养的培养方式。
) 贴壁型生长细胞：能附着于底物(支持物)表面生长，靠贴附才能生长的细胞。
悬浮型生长细胞:有些细胞在体外培养时，不能贴附在支持物表面生长，呈悬浮状态生长接触抑制:在指数增长期的细胞互相接触后，相互抑制细胞的运动，这种现象叫接触抑制。
细胞工程专题练习题
细胞工程专题练习题细胞工程是一门新兴的学科，它通过利用生物学、生物工程学、材料学、医学等领域的知识和技术，研究和应用细胞的生物学特性和功能，旨在解决疾病治疗、组织再生和器官移植等领域的问题。
下面是一些细胞工程的相关练习题，旨在考察对该领域的理解和应用能力。
1. 什么是细胞工程？细胞工程是一种利用细胞生物学、生物工程学和材料学的知识和技术，重新组织、培养和操纵人工合成的组织或器官的学科。
它旨在利用细胞的自我修复能力和生物相容性材料，治疗疾病和促进组织再生。
2. 细胞工程的应用领域有哪些？细胞工程的应用领域非常广泛，包括疾病治疗、组织工程、再生医学和器官移植等方面。
例如，利用干细胞技术可以治疗白血病和其他血液系统疾病；利用组织工程技术可以生产可移植的皮肤和骨骼；利用细胞培养和植入技术可以修复受损的神经组织和心脏组织。
3. 什么是干细胞？干细胞是一类未分化的细胞，具有自我更新和分化为多种功能性细胞的能力。
它们可以通过细胞分裂和分化产生各种类型的细胞，如血细胞、神经细胞和肌肉细胞等。
干细胞在细胞工程中起着重要的作用，可以用于治疗多种疾病和促进组织再生。
4. 细胞工程在器官移植中的应用有哪些挑战？尽管细胞工程在器官移植领域有着巨大的潜力，但仍然存在许多挑战。
其中之一是如何确保移植的细胞或组织在接受者体内生长和发展，而不会被拒绝。
另一个挑战是如何培养出合适大小和形状的器官，并确保其正常功能。
5. 细胞工程与基因工程有什么区别？细胞工程和基因工程是两个不同的领域，尽管它们有一些相似之处。
细胞工程主要关注利用细胞的生物学特性和功能来治疗疾病和促进组织再生，而基因工程则主要关注通过修改生物体的遗传物质来产生特定的生物产品或改变生物体的特性。
6. 细胞工程对生物医学领域有哪些影响？细胞工程在生物医学领域具有巨大的影响。
它为疾病治疗和组织再生提供了新的方法和手段。
例如，利用干细胞技术可以治疗一些目前无法治愈的疾病，如白血病和帕金森氏症。
细胞工程的真题和答案解析
细胞工程的真题和答案解析细胞工程是一门集合生物学、工程学和医学的交叉学科，已经在医疗领域取得了突破性的进展。
它涉及对细胞的研究、修改和应用，旨在解决人类健康问题。
本文将从细胞工程的定义、应用领域及未来发展等几个方面进行探讨和解析。
一、什么是细胞工程细胞工程是一种使用先进的技术手段，研究和改变细胞的结构和功能，以实现对人类身体的治疗和修复的学科。
通过对细胞进行操作、培养和修饰，细胞工程师可以改变细胞的基因表达、分化状态和生理功能，从而达到治疗疾病或修复受损组织的目的。
二、细胞工程的应用领域1. 细胞治疗：细胞工程在治疗各种疾病方面发挥着重要作用。
例如，通过改变造血干细胞的基因表达，可以治疗一些遗传性疾病；通过培养和扩增患者自身的干细胞，可以替代受损的组织或器官；通过修复受伤的神经细胞，可以帮助患者康复等。
2. 细胞外基质工程：细胞外基质是细胞周围的一个复杂环境，它对细胞生长、分化和功能发挥起着重要影响。
细胞外基质工程就是在体外人工合成或修复这种复杂环境，促进细胞的正常生理活动。
这项技术可以用于修复受损的组织、促进细胞生长，甚至帮助组织再生。
3. 细胞材料工程：细胞工程可以将细胞与材料结合，形成一种新的材料体系，具有比传统材料更好的生物相容性和生物活性。
这种材料可以用于替代骨骼、关节等受损组织，并在治疗过程中促进组织的修复和再生。
三、细胞工程的未来发展细胞工程作为一门新兴学科，仍然面临许多挑战和机遇。
1. 基因编辑技术的发展：CRISPR-Cas9技术的出现，加速了基因编辑领域的发展。
细胞工程师可以利用这种技术，精确地改变细胞的基因序列，以实现对细胞功能和特性的精确控制。
2. 人工智能的应用：人工智能在医学领域的应用日益广泛，它可以用于对细胞图像、细胞活动和基因表达的分析，发现规律和模式。
这将有助于细胞工程师更好地理解细胞的生物学行为和物理特性。
3. 微纳技术的突破：随着微纳技术的发展，对细胞的操作和控制越来越精确。
细胞工程复习题及答案
细胞工程复习题及答案细胞工程复题一、名词解释1.细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。
2.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料3.植物组织培养：将植物的器官、组织或细胞，在无菌条件下接种于人工配置的培养基上，使其细胞分裂、增值、分化、发育，甚至形成完整植株的方法。
4.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
5．离体无性繁殖:简称离体繁殖，是指利用组织培养方法进行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。
6．继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。
7.体细胞杂交：（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。
8细胞分化：即由于细胞的分工而招致的细胞结构和功用的改变，或发育方式改变的过程。
9细胞脱分化：造就前提下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。
10细胞再分化：即脱分化后的分生细胞在特定的前提下，从头恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完全植物体，这一过程成为细胞再分化。
11人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。
12植物细胞全能性：指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。
13胚状体：在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
14单倍体植物：单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体(植物个体)。
具有单套染色体的细胞在人工离体条件下培养，使其单性发育成植物体。
这种具有单套染色体的植物称为单倍体植物。
15离体受精：（离体授粉）在无菌前提下造就未受精脂肪或胚珠和花粉，使花粉萌发进入胚珠，完成受精作用。
细胞工程学复习题
细胞工程学复习题细胞工程学是一门综合性学科，涉及到细胞生物学、生物工程学和材料科学等多个领域的知识。
通过利用工程原理和技术手段，细胞工程学致力于研究和应用细胞的生物功能以及与之相关的工程应用。
以下是一些关于细胞工程学的复习题，希望能帮助你回顾和巩固相关知识。
1. 什么是细胞工程学？2. 细胞工程学的研究对象主要是哪些细胞类型？3. 请列举细胞工程学的主要应用领域。
4. 细胞工程学中常用的细胞培养技术有哪些？5. 什么是细胞培养基？它对细胞的生长和分化有什么影响？6. 细胞工程学中常用的细胞筛选技术有哪些？7. 请简要介绍细胞工程学中常用的细胞培养槽和生物反应器。
8. 什么是细胞培养的规模化生产？有哪些常用的规模化生产方法？9. 细胞工程学在组织工程和再生医学中的应用有哪些？10. 细胞工程学在药物筛选和药物递送系统中的应用有哪些？11. 请简要介绍细胞工程学在生物传感和生物芯片领域的应用。
12. 细胞工程学中常用的细胞植入技术有哪些？它们在治疗方面有何作用？13. 请简要介绍细胞工程学中常用的干细胞技术和基因工程技术。
14. 细胞工程学中的质量控制和质量保证措施有哪些？15. 细胞工程学的发展趋势和前景如何？以上是关于细胞工程学的一些复习题，希望能够帮助你进行知识回顾和巩固。
细胞工程学作为一门新兴的学科，其在医学、生物技术和生物工程领域的应用前景广阔，相信随着科学技术的不断进步，细胞工程学将会取得更加重要的突破和进展，为人类健康和福祉做出更大的贡献。
希望大家能够认真复习，掌握细胞工程学的基本理论和技术方法，为将来的学习和科研打下坚实的基础。
细胞工程题库
细胞工程题库摘要：一、细胞工程概述1.细胞工程的定义2.细胞工程的发展历程3.细胞工程的应用领域二、细胞工程技术1.细胞培养技术2.细胞融合技术3.基因工程技术4.细胞筛选技术三、细胞工程应用案例1.医学领域应用2.农业领域应用3.环保领域应用4.其他领域应用四、细胞工程的挑战与展望1.伦理道德问题2.技术难题与挑战3.发展前景与趋势正文：细胞工程是一门研究细胞结构与功能、细胞生长、繁殖及遗传特性的学科。
细胞工程旨在通过对细胞的操作与改造，为解决医学、农业、环保等领域的问题提供技术支持。
细胞工程技术主要包括细胞培养技术、细胞融合技术、基因工程技术和细胞筛选技术。
细胞培养技术是指利用生物反应器等设备，在无菌条件下培养细胞，以获得大量细胞或细胞产物。
细胞融合技术是将两个或多个不同种类的细胞融合成一个新的细胞，从而实现细胞间物质的交换和遗传物质的整合。
基因工程技术是指通过DNA 重组技术，将外源基因导入细胞中，实现细胞特定功能的改变。
细胞筛选技术是通过筛选具有特定功能的细胞系，为细胞工程应用提供合适的细胞材料。
细胞工程在医学领域可以用于研究疾病的发病机制，开发新型药物和治疗方法；在农业领域可以用于改良农作物，提高产量和抗逆性；在环保领域可以用于生物降解污染物，净化水质和土壤。
此外，细胞工程还在食品、化工、能源等其他领域发挥着重要作用。
然而，细胞工程也面临着伦理道德问题和技术挑战。
在伦理道德方面，人类胚胎干细胞研究、克隆技术等涉及生命的伦理问题亟待解决。
在技术方面，如何提高细胞培养的效率、降低生产成本，以及解决基因编辑技术的安全性和稳定性问题，都是细胞工程领域亟待攻克的难题。
尽管如此，随着科学技术的进步，细胞工程仍具有广阔的发展前景。
细胞工程学复习题样题
细胞工程学复习题一、名词解释1．原代培养: 原代培养通过组织块直接长出单层细胞或用酶或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养，在首次传代前的培养可认为是原代培养2．传代培养: 传代培养原代培养形成的单层细胞汇合以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭，都将影响细胞的生长，这一程序常称为传代或传代培养3．细胞系:原代培养物经首次传代成功即称为细胞系4．细胞株: 通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株5．细胞融合: 人工的或自然发生的细胞合并形成多核细胞的现象6．单克隆抗体: 将产生抗体的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞杂交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂种细胞，并生产抗体的技术。
7．超数排卵: 应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育，并排出多个具有受精能力的卵子的方法，称为超数排卵，简称“超排”。
是在动物发情周期的适当时期，利用外源性促性腺激素对雌性动物卵巢进行处理，诱发其卵巢上大量卵泡同时发育并排卵。
8．胚胎移植: 人工授胎或借腹怀胎。
它是将家畜的受精卵或发育数日的胚胎，从某一个体（供体）移植到同种动物的另一个体（受体），使之继续发育的技术9．同期发情: 应用某些激素或药物以及畜牧管理措施使一群动物在同一时期内发情并排卵的技10．体外受精: 指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，11．显微受精12．克隆动物: 动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。
不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆13．性别控制。
: 采用遗传学或内分泌学方法，使动物后代具有预期性别的技术。
利用此技术可获得全雌或全雄后代，以便进行单性养殖14．转基因动物: 转基因动物是指将特定的外源基因导全动物受精卵或胚胎，使之稳定整合于动物的染色体基因组并能遗传给后代的一类动物15、造血干细胞: 造血干细胞（hemopoieticstemcellHSC）是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，它不是组织固定细胞，可存在于造血组织及血液中。
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研究生课程班细胞工程复习题姓名：名词解释：1、组织培养：人和动物，昆虫及植物的某组织在试管中培养成活的生物技术。
特点：细胞不从组织中失散，保持与组织原来的关系。
2、细胞培养：是从活体中取出小块组织分离出的细胞，在一定条件下进行培养，使之能继续生存、生长、增殖的一种方法。
3、器官培养技术：将器官切成几立方毫米大小，保持器官原有的结构和功能的培养方式。
4、细胞系：是原代培养经传代成功后生成的细胞群体，群体内细胞生长稳定并逐渐趋向于一致，由原先存在于原代培养物中的细胞所组成。
5、细胞株：系通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的细胞群。
6、克隆：系指由同一个祖先细胞通过有丝分裂所产生的遗传性状相同的细胞群体。
7、原代培养期：亦称初代培养期，为新鲜组织自体内取出接种培养至第一次传代的阶段，一般持续1~4周。
8、次代培养：用胰酶等将原代细胞消化分散后，传代再培养的一代，此操作过程叫传代。
9、贴壁型生长细胞：需贴附于底物表面生长者称为贴壁性或锚着依存性细胞，培养时需消化分散，利于观察细胞形态、结构。
10、悬浮型生长细胞：无需附着物的支持表面，呈悬浮状态生长，呈圆形，易形成团块。
11、接触抑制：当细胞过少，培养液与细胞的容积太大，均会影响细胞增殖。
若培养液中的PH值变碱，则细胞生长受到抑制，甚至会脱落死亡。
12、限定性细胞系：细胞系一旦作出了一些实验指标者为限定性细胞系。
13、核质体：细胞经离心15～20分钟，可使99%的细胞发生脱核，形成无核的细胞质体14、胞质体：细胞经脱核后无胞质称为核质体15、细胞周期：是指指分裂的细胞，从前一次有丝分裂结束，到完成下一次有丝分裂所经历的整个序列过程。
可分为两个时期——间期和有丝分裂期。
16、杂交瘤；将分泌特异抗体的B细胞和某一个永生化的骨髓瘤细胞系进行融合，杂交后代称之为杂交瘤。
17、基因导入：将外源性基因(或基因组DNA) 导入细胞中的技术称为基因转导或称基因转移，也简称为导入，是研究基因表达、结构和功能的重要研究手段。
18、诱导分化：诱导分化因素的作用，可使高度分化的细胞通过重新分裂，回复到胚胎细胞状态，这种现象称为去分化或诱导分化，又称“逆转” （肿瘤细胞）19、细胞凋亡：又称程序性细胞死亡，是由基因编程控制的细胞主动参与的自杀过程，是细胞衰老自然死亡的主要方式之一，是一种生理性调节机制，在机体中承担着重要的调控作用。
20、细胞转化：是细胞发生遗传性改变而导致细胞永生化的转变方式，由限定性细胞系转变成连续性传代细胞系，获得了永生化。
21、细胞生长曲线：是细胞培养实验中最基本的指标，是测定细胞绝对增长数值和生长繁殖基本规律常用的简便方法。
22、基础培养基：人工合成培养基的主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子及其他一些辅助物质。
23、完全培养基：将合成基础培养基再添加小牛血清，就称为完全培养基24、免疫荧光染色法:此法基本原理是将已知抗体或抗原标记荧光素，用此特异性试剂，浸染含有相应抗原或抗体的组织细胞标本，借助抗原抗体的特异性结合，于抗原或抗体的存在部位呈现荧光，从而可以定位标本内的抗原或抗体。
25、台盼蓝染色法：用0.5%浓度的台盼蓝，用PBS配制，室温保存，该染料只对死细胞着色，测定活细胞数和计算成活百分率。
26、细胞融合:两个或两个以上细胞合并成一个细胞的过程,即将两个离体细胞在特殊融合剂的作用下使细胞膜发生一定变化，使两个或多个细胞发生融合，形成体细胞杂交，产生一个新的杂种细胞。
27、克隆形成率：生成克隆数/每皿接种细胞数*100%，克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
28、转基因技术：是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体性状的可遗传的修饰，这一技术称为转基因技术。
29、细胞分裂指数：示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/100个细胞，一般细胞分裂指数介于0.2%-0.5%，肿瘤细胞可达3-5%.30、 3H-TdR掺入法：H-胸腺嘧啶核苷掺入法，原理：T细胞受PHA或特异性抗原刺激后，发生有丝分裂，细胞进入S期，此时在细胞培养液中加入氚标记的胸腺嘧啶核苷，可被细胞摄入而掺入DHA，测定3H-TDR的掺入量，可判定细胞的增殖程度。
问答：1、细胞培养的生长方式和特点如何？方式有：贴壁型生长细胞和悬浮型生长细胞特点：1、贴附并伸展：呈现各种细胞形态，细胞的贴附和伸展受一些因素的影响，如附着因子、生长因子、离子作用、温度、培养液的流动速度等，特别是小牛血清和钙、镁离子对细胞贴壁影响更为明显。
2、密度依赖性：正常细胞有接触抑制，过密----拥挤，生长环境恶劣，易死亡；过稀----PH变碱，生长抑制或死亡。
2、细胞系的细胞培养需经历哪三个阶段？正常细胞体外培养有寿命期限，大致分三个阶段：（1）原代培养（primary culture）期（2）传代期（3）衰退期3、小牛血清在细胞培养中的作用是什么？影响血清质量的因素有哪些？何谓维持液和营养液（完全培养基）？小牛血清对细胞的作用提供细胞增殖所必须的生长因子（A因子 促进；B、C因子对细胞有抑制生长作用；D因子促进细胞粘连）。
对细胞附壁有利。
保护作用，解除毒性物质对细胞的毒性作用，使细胞免受冻存、搅拌的损伤。
其他：利于染色体分布良好。
影响血清作用的因素年龄；血型（AB>A或O）；血色素；胆红质脂肪酸；红细胞生成素；肿瘤患者血清；浓度；支原体污染。
将合成基础培养基再添加小牛血清，就称为完全培养基4、影响细胞生长的因素有哪些？为什么？一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃，昆虫细胞25+1℃高温：蛋白变性，酶失活，类脂质破坏.室温：代谢下降，可短期保存（4℃ ~20℃）低温：在降到冰点以下时，细胞因胞外水和胞质结冰而受损死亡。
但若向培养液中加入甘油或二甲亚砜等保护剂，以防止胞内冰结晶的形成而刺破胞膜，可用作细胞种子长期冻存。
二、渗透压:细胞在高渗溶液或低渗溶液中，可以立即发生皱缩或肿胀、破裂。
不同的细胞需要不同的渗透压，可选用不同渗透压的培养基来适应这一需求。
三、气体环境和pH:O2：细胞呼吸，利于生物氧化，促进生长。
CO2 :维持培养液的pH（细胞耐酸>耐碱，增加CO2将使pH下降）四、无毒和无菌五、辐射线和超声波（一）可见光：可见光的各种有色光能引起细胞退变，延长核分裂的间期，还可显著降低细胞的附壁能力。
（二）紫外线：核分裂、有丝分裂受破坏，细胞脱水收缩、起泡和细胞肿胀。
（三）放射线：X、β、γ射线使核分裂数减少并出现不正常的核分裂。
（四）超声波和振动：细胞紊乱，胶体结构变化，染色体畸变六、细胞接种浓度（密度）培养液与细胞的容积比应小于2000:1，接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖，如果接种密度太高，每个细胞周围培养液的容积降至0.007mm3以下，妨碍细胞的增殖。
七、容器转动速度和悬浮搅动速度:搅拌速度既不能太快，也不能太慢。
太慢，细胞易结团、下沉和贴壁；太快，容易起泡沫，细胞易窒息致死，搅动易使细胞受机械损伤。
5、原代细胞培养方法有哪些？（标题）组织块培养法、消化培养法、悬浮细胞培养法、器官培养6、分离培养骨髓细胞有何用途？经体外培养贴壁的骨髓基质细胞，可用于细胞因子自分泌和诱导分泌能力的测试。
骨髓基质细胞能分泌多种调节免疫和造血功能的细胞因子，证明基质细胞能支持造血、提供造血微环境，也为体外扩增干细胞用于骨髓移植提供了新技术、新方法。
扩增的基质细胞不仅可直接应用于临床治疗骨髓抑制、成骨能力障碍性疾病，而且可通过基因导入法开展基因治疗的研究。
7、细胞污染的类型有那些？如何预防？一、细菌：较常见，G+菌较多，多浑浊。
二、真菌：最常见，霉菌较多，见菌丝。
三、支原体：常见，不易检测。
四、病毒：影响疫苗生产。
五、非同种细胞：细胞系丢失。
六、化学成分：出现毒害或营养不良。
预防：最有效，严密消毒、谨慎操作8、MTT比色法的主要原理是什么原理是活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物，并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
此法已广泛运用于一些生物活性因子的活性检测，抗肿瘤药物的筛选、细胞毒性试验和肿瘤放射敏感性的测定。
何谓细胞脱核技术？脱核后可收获哪两种产物？细胞脱核技术有何应用价值？细胞经松胞菌素B以10mg/L浸没，以12000r/min离心15～20分钟，可使99%的细胞发生脱核，形成无核细胞质体和无胞质的核质体脱核技术可用于细胞融合、胞质、胞核、胞膜的成分分析及基因转移技术等方面的研究。
9、哪些诱变剂可引起细胞转化？细胞转化研究有什么医学意义和应用价值？物理因素：如放射线、温度、电磁波、药物等；化学因素：如甲基胆蒽、甲基硝基亚硝基胍类化合物等；生物因素，如毒素、黄曲霉素、逆转录病毒等；促癌剂( Promotor )：如TPA培养细胞转化研究可疑致癌因素的作用有很大的实用价值，已成为研究癌变机制、癌变因素的重要方法。
10、有哪些检测方法可证明细胞凋亡？（一）光镜的形态学观察：普通光镜：细胞圆缩，核浓缩、破碎。
透射光镜：凋亡小体。
（二）细胞DNA提取物的核酸电泳（三）MTT法：（四）荧光法：（五）流式细胞仪检测法:（六）Bcl-2、Bax胞浆蛋白检测：（七）Bcl-2/Bax基因表达检测：（八）其他方法：11、进行细胞毒实验常用哪些方法？方法：（一）淋巴细胞对瘤细胞的细胞毒试验（二）抗体加补体的细胞毒试验（三） ADCC试验（四） NK细胞毒试验之一——51Cr 释放法（五） NK细胞毒试验之二——3H-TdR法（六）可溶性杀伤因子活性检测－－MTT法（七） LAK细胞毒试验－－125I 释放法（八） CTL的细胞毒试验12、何谓细胞对药物的敏感性？常用哪些方法检测？体外细胞对不同药物所引起的形态结构和生理、代谢的变化。
方法：1、美蓝法： 2、染料（台盼蓝、伊红）排除法： 3、生长曲线测定法： 4、集落形成试验法5、噻唑盐（ MTT ）比色法6、放射性同位素的3H-TdR掺入法7、抗癌药物的效能比测定法（CFU-F测定法）：13、肿瘤细胞为什么可诱导分化？其诱导剂诱导细胞分化的原理如何？肿瘤细胞的诱导分化：由于肿瘤细胞并没有丧失调控正常生长和分化的基因表达能力，故癌变有可能因诱导分化而逆转诱导剂的作用：1）诱导肿瘤细胞分化基因重新启动，使恶性的癌基因受到抑制或灭活。
（2）使膜表面受体分化导致正常基因表达以产生分化表型。
（3）抑癌基因的活化/复活，可表现为细胞生长抑制，出现典型的形态特征，产生特异的糖蛋白、酶及分泌物，出现一些正常细胞的生理功能等。
14、用细胞培养方法研究病毒有何优点？有何应用价值？1、没有隐性感染2、没有免疫力3、容易选择易感细胞4、接种量大5、培养条件易于控制6、提高了疫苗的产量和质量7、加速病毒分离过程8、真核基因病毒载体的理想宿主价值：可用于病毒的分离鉴定，抗原的制备及疫苗、干扰素的生产，病毒性疾病诊断和流行病学调查等，近年来，还用于繁殖病毒载体以用于基因治疗。