免疫印迹法_WB_对隐性梅毒抗体确证检测的价值探讨
不同方法检测抗梅毒抗体阳性标本的分析
９６临床检验杂志２００７年第２５卷第２期ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，２００７，Ｖ０１．２５，Ｎｏ．２文章编号：１００１．７６４Ｘ（２００７）０２－００９６—０３中图分类号：Ｒ４４６．６文献标识码：Ａ不同方法检测抗梅毒抗体阳性标本的分析白雪梅，闪全忠，刘欧，阮芳，祁小真（清华大学第一附属医院检验科，北京１０００１６）・论著・摘要：目的对ＴＰＨＡ检测血清抗梅毒螺旋体抗体阳性的标本，同时用另外３种方法进行检测，以探讨阳性结果是否存在方法学导致的假阳性。
方法３９５７例无梅毒症状的普通病人为实验组，３４４例性病门诊病人为对照组。
用ＴＰＨＡ进行抗梅毒抗体筛查，检测阳性的标本再用酶免疫法、甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）、免疫印迹法进行检测。
以免疫印迹法为标准对检测结果进行对比分析。
结果实验组中检出ＴＰＨＡ阳性６０例，经免疫印迹法检测确认阳性５７例，临界２例，１例为假阳性，酶免疫法阳性５３例，ＴＲＵＳＴ阳性２３例。
对照组中ＴＰＨＡ阳性４０例，免疫印迹法确认阳性４０例，酶免疫法阳性４０例，ＴＲＵＳＴ阳性３２例。
结论ＴＰＨＡ、ＥＩＡ测定抗梅毒抗体有较高的阳性符合率，２种方法检测抗体为阳性的患者，几乎全部存在既往感染或隐性感染。
对ＴＲＵＳＴ的结果则应综合分析。
关键词：梅毒螺旋体；免疫印迹法；ＴＰＨＡ梅毒螺旋体属于密螺旋体属苍白密螺旋体（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ，ＴＰ）的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。
检测抗梅毒螺旋体特异性抗体（ＴＰＡｂ）是梅毒筛查的常规方法，目前常用凝集试验（ＴＰＨＡ．苍白密螺旋体血凝试验、ＴＰＰＡ一苍白密螺旋体颗粒凝集试验）和酶免疫方法（ＥＩＡ）两类。
在进行ＴＰＡｂ检测的日常实践中，经常可以发现一些结果呈阳性的患者（特别是老年人），既无相应的临床症状或体征，又否认梅毒感染史或感染史不清。
对此，实验室往往难以给出令人信服的解释，以至于病人和临床医生对检验结果的可靠性提出质疑¨。
蛋白印迹法检测梅毒IgG抗体
蛋白印迹法检测梅毒IgG抗体
邹宇斌;林燕霞;郭健英;梁平
【期刊名称】《中国卫生产业》
【年(卷),期】2013(10)20
【摘要】目的探讨蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测梅毒IgG抗体的意义.方法采用蛋白印迹法检测梅毒孕妇新生儿血清标本24例,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体被动明胶颗粒凝集试验(TPPA)结果相比较.结果 24例梅毒孕妇新生儿血清标本TRUST18例阳性,TPPA和WB24例均为阳性,WB24例均检测出针对15Kda(千道尔顿)、17Kda、45Kda和47Kda多肽抗原抗体.结论蛋白印迹法是一种理想的梅毒确认实验,适用于临床广泛开展.
【总页数】2页(P161,163)
【作者】邹宇斌;林燕霞;郭健英;梁平
【作者单位】广东东莞市沙田医院皮肤科,广东东莞523980;广东东莞市沙田医院检验科,广东东莞523980;广东东莞市沙田医院检验科,广东东莞523980;广东东莞市康华医院皮肤科,广东东莞 523000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.6
【相关文献】
1.梅毒螺旋体IgG抗体和乙肝表面抗原二合一酶联免疫检测试剂盒的对比研究
2.免疫印迹法检测梅毒患者血清中IgG抗体临床意义及方法学评价
3.蛋白印迹法
Western-Blot诊断梅毒的临床评价4.梅毒螺旋体、心磷脂IgG抗体检测在梅毒诊断中的应用分析5.蛋白印迹法诊断梅毒的临床分析
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免疫印迹技术方法研究
免疫印迹技术方法研究一、前言免疫印迹技术借助的是抗体与抗原的特异性结合的作用，来检测样品中蛋白质表达情况的一项免疫学检测技术，不需要复杂的大型机器，主要依靠凝胶电泳和电转移来对蛋白质提取，最终对蛋白质进行定性定量分析。
二、内容1、技术原理（1）样品的凝胶电泳：制备凝胶，加入样品进行凝胶电泳，使样品中蛋白质分离。
（2）电印迹：所谓电印迹就是将凝胶电泳上的经过分离的蛋白转移到一个固相膜上。
因为如果让蛋白质在凝胶电泳后直接检测，部分蛋白质会嵌在凝胶里面，探针无法到达，同时可能对蛋白质条带有破坏作用，因此为了方便探针与蛋白质互相结合，将其转移到另一个与探针结合度更好的物质上，也就是固相膜。
（3）选择性封闭：为避免探针和无关物质结合，将膜上没有结合蛋白质的部分封闭，防止其他干扰。
（4）免疫结合：将抗体与膜上的蛋白质结合，使其反应，再用二抗与一抗反应。
（5）产物检测：通过二抗间接检测目的蛋白，将膜上的抗体和能发出荧光的物质结合，对产生的发光物质进行检测。
2、方法(1)聚丙烯酰胺凝胶的制备:把玻璃板洗净并晾干,四边对齐，置于制胶架上。
其次配制分离胶，蛋白质的相对分子量不同制胶也不同。
分离胶制好后沿玻璃板上的一角缓慢、平稳地注入两层玻璃板中间,待其充分凝固后,把浓缩后的胶溶液沿玻璃板一角注入，立刻插入梳子。
(2)蛋白样品的前处理:将缓冲液和蛋白质样品按一定比例混合,待其沸腾若干分钟后,放入冰块中待用。
(3)样品上样和电泳:将制好的凝胶缓慢从架上取下,放进电泳槽,将缓冲液注入电泳槽,再拔出梳子。
吸取经过预处理的蛋白样品20μL加样。
打开电泳槽电源,选择稳压模式,100v左右的工作电压，待电泳时加入的指示染料到达胶底部时关闭电泳槽。
经凝胶电泳处理后，样品蛋白质带负电荷，在凝胶中游动，游动速度与分子量大小成反比，自阴极游到阳极。
（4）蛋白质转移（电转印）：将凝胶板取下,切去不用的部分,剪裁和凝胶一样大小的NC膜或PVDF膜,再在电转移液中浸泡固相膜，裁剪数张比凝胶尺寸稍微小一点的滤纸,放入缓冲液中浸泡。
三种梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用
２ 结 果 ２．１ 三种方法梅毒血清学检测 的阳性 率 ２９７９份血 清标 本 中，ＣＬＩＡ法检测 阳性 １６８例 ，阳性率为 ５．６％ ；ＴＰＰＡ法检测 阳 性为 １５４例 ，阳性率为 ５．２％ ，略低于 ＣＬＩＡ法 ；ＴＲＵＳＴ法检 测
结果不一致 的标本 用免疫印迹法 （ＷＢ）进行确证试验 。
ＣＬＩＡ法是近年来 应用 的一 项新 技术 ，采用 双抗 夹心 法 的原理 ，使用化学 发光底 物取 代传 统的显 色底 物 ，增 加 了检 测 的灵 敏度 。有报道 ，ＣＬＩＡ法 检 测各期 梅 毒患者 敏感 性 为 ９６．３０％ ～１００％ ，特异性 为 ９８．７３％［４１。本文结果显 示 ，阳性 符合率 为 １００％ ，阴性 符合 率为 ９９．８９％ ，敏 感性 高于 ＴＰＰＡ 法 ，并且有 结果判 断客 观、操 作简便 、重 复性好 、批量操 作等 优点 ，可作为梅毒规模筛选 的试验 。在 临床使用 中，ＣＬＩＡ法 试验可与梅毒非 特异性 血清学 试验 （如 ＴＲ ＵＳＴ法 ）联检 ，并 对 阳性结果用 ＴＰＰＡ法试 验复 检 ，对 不一 致 的结果再 用 ＷＢ 法确证 ，并及 时与 临床沟通 ，了解患者 的病史 、生 活史 、临床
免疫印迹实验原理
免疫印迹实验原理
嘿，朋友们！今天咱来唠唠免疫印迹实验原理。
你说这免疫印迹实验啊，就像是一场奇妙的侦探之旅！咱要找的就是那些隐藏在蛋白质世界里的“小秘密”。
想象一下啊，细胞就好比一个大仓库，里面装满了各种各样的蛋白质。
而我们呢，就是要从这个大仓库里把我们感兴趣的特定蛋白质给揪出来。
这可不容易哦，就像在一堆沙子里找一粒特别的小石子儿。
首先呢，我们得把细胞里的蛋白质都给弄出来，这就像是把仓库里的东西都倒出来摊开。
然后呢，我们利用电泳这个神奇的手段，根据蛋白质的大小啊、电荷啊等等特性，让它们排好队，各就各位。
这一步可太关键啦，就像把混乱的人群按照高矮胖瘦排好一样。
接下来，这些排好队的蛋白质就会被转移到一张膜上，就好像是把它们从一个地方搬到另一个地方。
这张膜就成了它们的新家啦。
然后呢，我们就派出我们的“秘密武器”——抗体！这抗体就像是一个个小侦探，专门去寻找我们指定的那个蛋白质。
抗体一旦找到了目标，就会紧紧地抱住它，绝不撒手。
最后，我们通过一些特殊的方法，让这个结合的地方显现出来，哇，这不就找到了我们想要的那个蛋白质嘛！是不是很神奇呀！
你说这免疫印迹实验像不像一场刺激的游戏？我们就是游戏的玩家，要运用各种策略和技巧来找到最终的答案。
而且这个实验的用处可大啦！可以帮助我们检测疾病啊、研究蛋白质的功能啊等等。
所以啊，大家可别小瞧了这免疫印迹实验，它可是我们探索蛋白质世界的一把金钥匙呢！它能让我们解开很多生命的奥秘，让我们对这个世界有更深刻的认识。
怎么样，是不是对免疫印迹实验原理有了更清楚的了解啦？是不是也觉得它超级有趣呢？快去试试吧！。
两种方法检测HIV抗体与免疫印迹法确诊结果分析
两种方法检测HIV抗体与免疫印迹法确诊结果分析发表时间：2016-02-16T15:23:32.783Z 来源：《中国耳鼻咽喉头颈外科》2015年12月第12期供稿作者：师毅杜娟花[导读] 延安大学附属医院检验科艾滋病（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒引起的一种严重的传染性疾病.（延安大学附属医院检验科，陕西，延安，716000）【摘要】目的通过调查医院就诊患者HIV抗体阳性情况，为医院院内感染与医护人员防护工作提供重要依据，分别用北京科美生物，北京万泰，采用化学发光法(CLIA)与胶体金法对2013年~2015年入院患者输血前HIV抗体筛查检测，筛查阳性标本送陕西省疾病控制中心用重组免疫印迹法（WB法）进行确诊，结果，化学发光法HIV筛查阳性标本85例，胶体金法筛查阳性标本47例，经重组免疫印迹法最终确证59例，CLIA法阳性符合率69.4%（59/85）胶体金法的阳性符合率79.6%（47/59），用CLIA法，样本测定值/临界值（S/CO）在1.1~5.0之间的标本13例，经WB法确证1例，不确定5例，S/CO在5.1~10.0之间的23例，确证9例，不确定4例，S/CO值在10.1~29.5的49例，则经过WB法确证49例，研究发现随着S/CO值的升高胶体金法的阳性率随之升高反之阳性率越低。
【关键词】 HIV 抗体 CLIA法胶体金法免疫印迹艾滋病（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒引起的一种严重的传染性疾病，该病毒是以性传播、血液传播和母婴传播为主要传播途径，病死率极高，是当前严重威胁人类生命和健康的重要疾病之一，早期发现诊断是有效预防的首要环节【1】，其病毒传播速度逐年递增【2】同时现在大部分AIDS患者都是由医院就诊初筛检出阳性，而这类患者日益增多，给医务工作者在接触患者时带来院内感染的风险日益增加，血清HIV抗体的实验室检测是诊断AIDS的主要依据，根据《全国艾滋病检测技术规范》要求，初筛检测呈阳性后，需要两种不同原理不同厂家生产的筛查试剂进行复检。
免疫印迹技术实验报告
免疫印迹技术实验报告一、引言免疫印迹技术（Western Blotting）是一种用于检测特定蛋白质的定性和定量分析方法。
它基于免疫学原理，通过将待测蛋白质进行电泳分离，并利用抗体与目标蛋白质特异性结合的原理，最终实现对目标蛋白质的检测和定量分析。
本实验旨在通过免疫印迹技术检测目标蛋白质在不同样本中的表达水平，并观察其变化情况，以深入了解该蛋白质的功能和作用机制。
二、实验步骤1. 样本制备首先，我们需要准备样本。
样本可以是细胞或组织。
在实验中，我们选择了A 细胞和B细胞作为样本，分别进行后续实验。
2. 蛋白质提取将A细胞和B细胞分别加入适量的细胞裂解缓冲液，通过离心等操作将细胞裂解并获取蛋白质提取物。
3. SDS-PAGE电泳分离将蛋白质提取物加入SDS-PAGE凝胶中，进行电泳分离。
电泳时间和电压根据实验需要来确定。
4. 转膜将电泳分离后的蛋白质从凝胶中转移到聚丙烯酰胺膜上。
转膜可以通过湿法或半湿法等方法实现。
5. 阻断将转膜后的聚丙烯酰胺膜放入阻断液中，在室温下进行阻断。
阻断的目的是防止非特异性结合。
6. 一抗处理将目标蛋白质的一抗加入到含有阻断液的培养皿中，将转膜的聚丙烯酰胺膜放置在一抗液中，进行一抗处理。
一抗的选择根据目标蛋白质的特异性来确定。
7. 洗涤将转膜的聚丙烯酰胺膜从一抗液中取出，进行洗涤。
洗涤的目的是去除非特异性结合的抗体。
8. 二抗处理将与目标蛋白质一抗结合的二抗加入到含有阻断液的培养皿中，将转膜的聚丙烯酰胺膜放置在二抗液中，进行二抗处理。
9. 洗涤将转膜的聚丙烯酰胺膜从二抗液中取出，再次进行洗涤，确保清洗干净。
10. 显色将合适的显色剂加入到含有阻断液的培养皿中，将转膜的聚丙烯酰胺膜放置在显色剂中，进行显色反应。
显色剂的选择根据实验需要和目标蛋白质的特性来确定。
11. 照相观察显色结果，并使用相机拍摄转膜的聚丙烯酰胺膜，记录实验结果。
三、结果与讨论根据实验步骤，我们成功地使用免疫印迹技术检测了A细胞和B细胞中目标蛋白质的表达情况。
梅毒的免疫印迹法检测
梅毒的免疫印迹法检测
邵雁
【期刊名称】《浙江临床医学》
【年(卷),期】1999(001)004
【摘要】免疫印迹法（Western Immuncblot,WIB)是80年代新发展起来的一种特异性蛋白抗原、抗体检测技术．最早于1985年被应用于检测梅毒。
它将SDS——聚丙烯酰胺凝腔电泳与醇标技术榴结合，敏感性强，特异性高。
多篇评价免疫印迹法检测梅毒的报道都支持其作为一种证实试验在梅毒诊断中的价值。
【总页数】1页(P266)
【作者】邵雁
【作者单位】浙江大学医学院附属第二医院，310016;浙江大学医学院邵逸夫医院整形外科310016
【正文语种】中文
【中图分类】R759.1
【相关文献】
1.免疫印迹法(WB)对隐性梅毒抗体确证检测的价值探讨 [J], 张华荣;陈正明;文海燕;郑义;谢颖
2.免疫印迹法对孕妇梅毒螺旋体抗体检测的分析 [J], 梁军;王萍;曾岳新
3.免疫印迹法检测梅毒螺旋体IgM抗体对胎传梅毒诊断的价值 [J], 张兴旺;何莉莉;高霞;王芳;张晓梅;魏莲花
4.免疫印迹法检测TPN15,TPN17,TPN45和TPN47抗体表达在梅毒诊断中的应用
评估 [J], 王欣俞; 郭奕阳; 崔凯; 赵晋文; 丁晓娜; 王鑫琪; 魏殿军; 张延海; 高德禄; 刘朋
5.重组抗原免疫印迹法及化学免疫发光法检测梅毒假阳性价值比较 [J], 王扬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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实验研究免疫印迹法（WB）对隐性梅毒抗体确证检测的价值探讨张华荣陈正明文海燕郑义谢颖重庆国际旅行卫生保健中心（重庆，401147）摘要目的拟通过使用WB对隐性梅毒TPPA/TP－ELISA检测结果不一致标本的检测比较，探讨WB对于隐性梅毒抗体检测结果的确证价值。
方法1．先用TPPA或TP－ELISA检测血清或血浆标本，对阳性标本分别交叉使用另一种方法复核。
对两种方法检测结果不一致的60份标本，再用WB进行检测。
2．对NCCL提供的梅毒标准血清盘，使用TP－ELISA和TPPA同时检测，WB结果采用NCCL提供。
结果1．用TP－WB对60例TPPA/TP－ELISA检测不一致的标本进行检测，51份TP－ELISA阳性，TPPA阴性的标本，WB检测结果是32份阳性，9份不确定，10份阴性;9份TP－ELISA阴性，TPPA阳性的标本，WB检测结果是8例阳性，1例可疑。
2．血清盘40份标本，WB阳性26例，阴性14例，26例阳性标本分别用TPPA和ELISA检测，TPPA阳性24例，阴性2例;TP－ELISA检测26例全部阳性。
而14例WB检测阴性标本分别用两种方法检测时，TPPA与之完全相符，TPELISA出现两例阳性。
结论WB可作为潜伏期梅毒检测TPPA、TP－ELISA二者结果不致时的确认方法。
关键词免疫印迹法隐性梅毒中图分类号R392文献标识码B doi10．3969/j．issn．1008－5777．2013．02．0071前言近年来，梅毒发病率一直高居不下。
根据卫生部公布的卫生统计年鉴，2006年、2007年、2008年、2009年梅毒发病率分别为12．80/10万、15．88/10万、19．49/10万、20．07/10万，连续4年保持上升态势，位列法定报告传染病发病率第三，性病之首。
因此，梅毒防控任务依然严重。
梅毒的诊断标准中，有国家标准，卫生行业标准及口岸行业标准等。
对于潜伏期（隐性）梅毒，国家标准为多种实验室检测，卫生标准仍然以病史与临床症状结合相应实验室检查进行确诊［1，2］。
在口岸检疫中，被检测人群中梅毒多属于隐性感染者或者潜伏期梅毒，病史与临床资料难以获得，临床病态大多不明显，口岸行业更依赖于实验室检测，目前是通过对血清的初筛实验（RPR/TRUST/ELISA）和确证实验（暗视野微生物检查/TPHA/TPPA）来进行［3］。
梅毒的特异性抗体试验有TP．HA、TPPA、TP－ELISA、FTA－ABS和WB等。
在几种特异性抗体检测方法中，FTA－ABS为公认的金标准，但FTA－ABS对硬件和人员的要求都较高，还无法普及，因此常用的方法为：TPHA、TPPA、ELISA和WB。
对于几种特异性抗体检测方法的意义、准确性、一致性等认识，以及检测结果不一致时，应该采用什么方法作为最终判断的“金标准”，由于目前的国标GB15974－1995、卫生部行业标准WS273－2007、口岸行业标准SN/ T1210－2003都没有做出明确的规定，导致了一定的混乱和无所适从。
WB检测梅毒抗体的研究已经很多，其灵敏度与特异度都很高，但目前WB仍未能作为梅毒检测的确证手段。
本研究拟通过TPPA、ELISA检测结果的比较，以及TPPA、ELISA检测结果不一致的血清标本进行WB检测的比较，探讨几种WB对于潜伏期梅毒的确证价值。
2材料与方法2．1材料2．1．1标本来源基金项目：国家质量监督检验检疫总局2008IK207重庆国际旅行卫生保健中心2009年11月到2010年6月出境劳务、留学、公务等11680人。
标本采集、处理采集体检人群静脉血3－4mL，存于促凝管中，3500rpm5min分离血清进行试验。
试剂酶联免疫吸附试验试剂（TP－ELISA双抗原夹心法）由北京万泰生物药业股份有限公司生产；颗粒凝集试验试剂（TPPA）由日本富士瑞必欧公司生产，珠海丽珠试剂有限公司代理；免疫印迹试验试剂（TP－WB IgG）由德国欧蒙医学实验诊断股份公司（EUROIMMUN）生产，北京欧蒙生物技术有限公司销售。
2．1．2设备酶标仪：HT2，奥地利ANTHOS公司生产；全自动酶免分析系统：FAME24/20，瑞士哈美顿博纳图斯股份公司生产。
2．2研究方法2．2．1先用TPPA或TP－ELISA检测血清标本，对阳性标本分别交叉使用另一种方法复核。
对两种方法检测结果不一致的60份标本，再用WB进行检测。
2．2．2对NCCL提供的梅毒标准血清盘，使用TP －ELISA和TPPA同时检测，WB结果采用NCCL 提供。
2．2．3所有试验方法严格按照说明书完成。
对TP －WB判断由一人检测，一人复核，判读标准为：在15kDa，17kDa，45kDa（tmpA），47kDa条带中，没有出现肉眼可见条带为阴性，1条为不确定，2条及以上为阳性。
2．3质量控制TP－ELISA方法室内质控品购自北京康彻斯坦，按照说明书要求进行。
参加国家疾病预防控制中心，重庆市临检中心的能力验证活动各三次，每次5份血清样本，结果均完全满意。
3结果3．1TPPA/TP－ELISA/TP－WB对60例临床标本检测结果（表1）用TP－WB对60例TPPA/TP－ELISA检测不一致的标本进行检测，51份TP－ELISA阳性，TPPA阴性的标本，WB检测结果是32份阳性，9份不确定，10份阴性；9份TP－ELISA阴性，TPPA阳性的标本，WB检测结果是8例阳性，1例可疑。
TP－ELISA阳性，TPPA阴性的标本中的2例经WB确认为阳性一个月后复查，TRUST检测结果也转阳。
表1TP－ELISA、TPPA与TP－WB检测结果比较（60例）血清检测结果份数WB+－可疑ELISA+－5193281091 TPPA+－9518321019 3．2血清盘检测结果比较血清盘40份标本，WB阳性26例，阴性14例，26例阳性标本分别用TPPA和ELISA检测，TPPA阳性24例，阴性2例；TP－ELISA检测26例全部阳性。
而14例WB检测阴性标本分别用两种方法检测时，TPPA 与之完全相符，TPELISA出现两例阳性。
见表2。
表2血清盘标本TPPA/TP－ELISA对TP－WB检测比较TPPA TP－ELISA标本数n+－标本数n+－TP－W B+－261424214261426212合计402416402812注：血清盘TP－WB结果由卫生部临检中心提供。
4讨论本次试验中，对40份血清盘标本检测结果显示，26份阳性样本，TPELISA与TPWB均全部检出，而TPPA只检出24份阳性，2份漏检，存在一定的假阴性；14份阴性样本，TP－ELISA检出2份假阳性，存在一定的假阳性率，而TPPA与WB均正确检出。
在临床标本的检验中，51例TPELISA阳性TPPA阴性的标本，用WB复核（以WB自带说明书为标准）则32份阳性，有9份不确定，10份阴性；同上，9例TPELISA阴性TPPA阳性的标本，WB复核9例阳性，1例可疑，这个结果与检测血清盘的结果较一致。
此结果也与国内众多文献报道一致，认为TPELISA的检测灵敏度高于TPPA，但是特异性比TPPA差。
而TPWB的灵敏度和特异性均优于两者。
不同的研究者对于采用免疫印迹法所呈现的梅毒螺旋体特异性抗原区带结果报道存在一定的差异。
谭爱国［4］刘意等［5］以47KDa，17KDa和14KDa三条带中出现两条及以上为阳性结果；白雪梅等［6］以47KD、45KD、17KD、15KD四条带中出现两条及以上为阳性，一条为可疑，无条带则阴性，但他们都是使用的商品化的WB试剂盒。
Josephine L．Back-house等建立WB方法检测梅毒抗体时，以TpN47，TpN44．5，TpN17，TpN15四条带中出现三条及以上为阳性，并且检测了TpN47，TpN44．5，TpN17，TpN15单条带出现与梅毒的关系［1］；Elaine Antunes de Lemos等将WB检测梅毒的方法标准化［8］，以47KD，17KD和15kD出现一条以上即为阳性，并且分析了梅毒潜伏期、临床一至三期梅毒各时期IgG 条带的特征，指出WB方法不仅能作为血清学确认实验，还能用于区别梅毒的临床各期；Martina Herre-mans等［9］比较WB与19S FTA－ABS方法时，也以47KD，17KD和15kD出现一条以上即为阳性。
本研究的WB实验中，一共检测了P15、P17、P45、P47四种条带，除去四条带全部阴性的结果，出现条带阳性的结果共有50例，其中2例四条带全部出现，即检出了P15、P17、P45、P47四种抗体。
从表3可见，P47条带检出的比例最高，即针对P47的抗体有较高的检出率。
由于TPELISA和TPPA检测原理的差异，在血清中抗体不全时，则可能出现两者检测结果不一致的情况。
表3WB阳性血清中四条带阳性分布情况（60例）条带P15P17P45P47阳性例数2183147比例21/608/6031/6047/60阳性率35%13．3%51．7%78．3%对于TP的血清学检测，ELISA灵敏度高，但特异性稍差，TPPA灵敏度稍低，但特异性高［10］；而WB 同时有高灵敏度与高特异度，用TP－WB检测血清，对梅毒的诊断有着特殊的意义。
文献中用WB用于强阳性标本检测，灵敏度特异性均可达100%。
本研究将WB用于两种筛查方法ELISA和TPPA结果不符的标本的检测，从结果发现，ELISA存在一定的假阳性率，而TPPA则存在一定的漏检，经TPPA判定为阴性而WB判为阳性的病例中，有2例一个月后复查TRUST变阳，有2例自述有梅毒感染史。
但WB 检测过程较ELISA和TPPA繁琐，检测时间长，技术要求较高，对于数量不多的血清可以直接检测，但用于检测大量的临床样本则不太适合。
用ELISA结合TPPA检测进行血清检测，对于二者结果不一致的时候，使用WB进行确认是可行的。
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