比较纳米载银抗菌剂与纳米二氧化钛抗菌剂抗白色念珠菌性能的实验研究_李蓓

观察破骨细胞分化情况。结果：出生 １、３、５、７ ｄ 大鼠下颌第一磨牙牙胚冠方牙囊成纤维细胞、成釉细胞 ＲＡＮＫＬ ｍＲＮＡ
综上所述，纳米载银抗菌剂及纳米二氧化钛抗菌 剂均具有抗白色念珠菌的功效，且纳米载银抗菌剂抗 白色念珠菌性能优于纳米二氧化钛抗菌剂，为硅橡胶 材料抗菌提供理论依据。
· ７２ ·
临床口腔医学杂志 ２００８ 年 ２ 月第 ２４ 卷第 ２ 期 Ｊ Ｃｌｉｎ Ｓｔｏｍａｔｏｌ，Ｆｅｂ，２００８，Ｖｏｌ．２４．Ｎｏ．２
临床口腔医学杂志 ２００８ 年 ２ 月第 ２４ 卷第 ２ 期 Ｊ Ｃｌｉｎ Ｓｔｏｍａｔｏｌ，Ｆｅｂ，２００８，Ｖｏｌ．２４．Ｎｏ．２
· ７１ ·
体沙氏培养基为溶剂，配置为 ４０ ｍｇ／ｍｌ 的混悬液，按二倍稀释 法稀释为递减浓度应用液，分别为 ４０、２０、１０、５、２．５、１．２５ ｍｇ／ ｍｌ、６２５、３１２、１５６、７８ μｇ／ｍｌ。
实验中设立对照组，对照组为不加入抗菌剂溶液，只加入实 验菌液和等量的液体沙氏培养基溶液。
结果
４ 种抗菌剂对白色念珠菌的最小杀菌浓度见表 １。
表 １ ４ 种无机抗菌剂对白色念珠菌的最小杀菌浓度
纳米载银磷酸锆 ＲＨＡ－ Ｔ
ＴｉＯ２－ Ａｇ
ＴｉＯ２
ＭＢＣ ４０ ｍｇ／ｍｌ ４０ ｍｇ／ｍｌ ↓（２０ ｍｇ／ｍｌ） ↓（４０ ｍｇ／ｍｌ）
银离子化合制得的新型抗菌剂。其抗菌机理主要为：当 表面含银微粒接触致病菌细胞时，由于银为正离子 （Ａｇ＋或 Ａｇ２＋），而细胞膜带负电荷，依靠库仑引力，二者 牢固吸引，银离子与细胞机体中酶蛋白的巯基（－ ＳＨ） 反应，使蛋白质凝固，导致菌体死亡。
佘文君［２］等将 ６ 种纳米银抗菌剂对口腔病原菌的 抗菌活性进行了比较，结果发现 ６ 种抗菌剂对变形链 球菌、乳酸杆菌、黏性放线菌、白色念珠菌、金黄色葡萄 球菌、大肠埃希菌均有良好的杀菌效果。同时有研究表 明载银抗菌剂无毒性［３］。因此纳米载银抗菌剂可应用 于口腔环境中，预防口腔疾病的发生。
ＴｉＯ２
ＴｉＯ２－ Ａｇ
对照组
图 １ ＴｉＯ２－ Ａｇ 与 ＴｉＯ２ 浓度为 ４０ ｍｇ／ｍｌ 时白色念珠菌生长
讨论
银作为抗菌剂使用由来已久。早在公元前 ５ 世纪， 人们就已经采用银质餐具保鲜食物。１９３９ 年 Ｈｉｌｌ 等用 实验手段证明了银离子具有杀菌能力。以后的一系列 研究表明：银离子对原核生物（细菌）有毒性，而对真核 生物细胞无毒性作用。纳米载银抗菌剂是在纳米材料 的基础上，由无机离子交换体与具有较强杀菌能力的
牙齿萌出过程中 ＲＡＮＫＬ ｍＲＮＡ 的表达 与破骨细胞的关系 ＊
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
贺佳倩， 刘英群 ＊＊， 马海峰， 吕 晶 （ 哈尔滨医科大学口腔医学院儿童口腔科 黑龙江 哈尔滨 １５０００１）
［摘要］ 目的：探讨核因子 κＢ 受体活化剂配体 ＲＡＮＫＬ 在大鼠下颌第一磨牙牙胚冠方组织中 ｍＲＮＡ 的表达及破
骨细胞的分化情况。方法：运用原位杂交法检测大鼠下颌第一磨牙牙胚冠方组织中 ＲＡＮＫＬ ｍＲＮＡ 的表达；ＴＲＡＰ 染色
实验中未测得 ＴｉＯ２－ Ａｇ 及 ＴｉＯ２ 的最小杀菌浓度（ＭＢＣ），但 是在 ＴｉＯ２－ Ａｇ 浓度为 ２０ ｍｇ／ｍｌ 时，与对照组相比，菌株数明显 减少。在 ＴｉＯ２ 浓度为 ４０ ｍｇ／ｍｌ 时，与对照组相比，菌株数明显 减少（见图 １）。Ｓｐｓｓ １３．０ 统计 ｔ 检验分析 ２ 种载银抗菌剂间无统 计学差异（ｐ﹥０．０５）。
照组相比细菌生长明显减少。结 论 ：纳米载银抗菌剂与纳米二氧化钛抗菌剂对白色念珠菌均有抗菌效果，且纳米载银
抗菌剂比纳米二氧化钛抗菌剂抗菌效果好。
［关键词］ 抗菌剂；白色念珠菌；抗菌活性
［中图分类号］ Ｒ７８０．２ Ｒ７８３．１
［文献标识码］ Ａ
［文章编号］ １００３－ １６３４（２００８）０２－ ００７０－ ０３
Ｃｏｍｐａｒ ｉｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒ ｉａｌ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｎａｎｏ－ ｓｉｌｖｅｒ ｂａｓｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒ ｉａｌ ａｎｄ ｎａｎｏ－ ＴｉＯ２ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒ ｉａｌ． ＬＩ Ｂｅｉ， ＺＨＡＯ Ｙｉ－ ｍｉｎ，ＹＡＮＧ Ｊｕ－ ｃａｉ，ＤＯＮＧ Ｚｈｉ－ ｗｅｉ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｒｏｓｔｈｏｄｏｎｔｉｃｓ，Ｓｔｏｍａｔｏｌｉｇｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｏｕｒｔｈ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ＇ａｎ ７１００３２，Ｃｈｉｎａ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｎａｎｏ － ｓｉｌｖｅｒ ｂａｓｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｎｄ ｎａｎｏ － ＴｉＯ２ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ． Ｍｅｔｈｏｄ：Ｆｏｕｒｋｉｎｄｓ ｏｆ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ．Ｔｈｅｉｒ Ｍｉｎｉｍａｌ Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ （ＭＢＣ）ａｇａｉｎｓｔ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ Ｌｉｑｕｉｄ Ｄｉｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ． Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ＭＢＣ ｏｆ ｔｗｏ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｎａｎｏ － ｓｉｌｖｅｒ ｂａｓｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｓ ４０ ｍｇ／ｍＬ ．Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｓ ２０ ｍｇ／ｍＬ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｏｆ ｏｎｅ ｋｉｎｄ ｏｆ ｎａｎｏ － ＴｉＯ２ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｙ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｉｓ ４０ ｍｇ／ｍＬ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｎａｎｏ－ ｓｉｌｖｅｒ ｂａｓｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｎｄ ｎａｎｏ－ ＴｉＯ２ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｏｔｈ ｈａｖｅ ｆｉｎｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｆｆｅｃｔ ａｇａｉｎｓｔ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｎａｎｏ－ ｓｉｌｖｅｒ ｂａｓｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｓ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｎａｎｏ－ ＴｉＯ２ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ．
＊ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０４７１９０８） ＊＊ 通讯作者：赵铱民 Ｔｅｌ：０２９－ ８４７６４６５
化钛）对白色念珠菌的最小杀菌浓度（ＭＢＣ），并对其抗 菌活性进行比较，为增强硅橡胶赝复材料的抗白色念 珠菌性能方面提供理论依据。
材料和方法
１ 实验材料和仪器 １．１ 无机抗菌剂及实验菌株：纳米磷酸锆载银抗菌粉体（西 安 康 旺 抗 菌 科 技 股 份 有 限 公 司）， 纳 米 层 状 银 系 无 机 抗 菌 剂 （ＲＨＡ－ Ｔ，上海环谷新材料科技发展有限公司），载银纳米二氧化 钛（ＴｉＯ２－ Ａｇ，上海环谷新材料科技发展有限公司）及纳米二氧化 钛（ＴｉＯ２ 上海环谷新材料科技发展有限公司）。实验菌株为白色 念珠菌国际标准菌株（ＡＴＣＣ９００２８）。 １．２ 实验器材：超净工作台（苏州净化设备厂）；恒温培养箱 （上海市跃进医疗器械一厂）；液体快速混合器 （江西医疗器械 厂）；微量加样器；液体沙氏培养基；固体沙氏培养基平板。 ２ 实验方法 采用液体稀释法，检测 ４ 种纳米级无机抗菌剂的最小杀菌 浓度（ＭＢＣ）。 ２．１ 抗菌剂溶液配置：将 ４ 种纳米级无机抗菌剂分别以液
· ７０ ·
临床口腔医学杂志 ２００８ 年 ２ 月第 ２４ 卷第 ２ 期 Ｊ Ｃｌｉｎ Ｓｔｏｍａｔｏｌ，Ｆｅｂ，２００８，Ｖｏｌ．２４．Ｎｏ．２
比较纳米载银抗菌剂与纳米二氧化钛抗菌剂抗白 色念珠菌性能的实验研究 ＊
李 蓓 １， 赵铱民 １＊＊， 杨聚才 ２， 董智伟 １ （ １ 第四军医大学口腔医学院修复科 陕西 西安 ７１００３２； ２ 第四军医大学口腔医院检验科）
纳米二氧化钛是一种新型的抗菌剂，自 １９８５ 年 Ｍａｔｓｕｎａｇａ 发现其具有抗菌性以来，另有研究也表明纳 米二氧化钛对革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌均有抑制 作用［４］，对真菌也有抑制作用［５］。纳米二氧化钛是一种 光催化抗菌剂，在光照条件下，产生羟基自由基（·ＯＨ） 和原子氧（·Ｏ）。羟基自由基具有强氧化性，将各种有机 物（包括有害微生物体内的）氧化分解为 ＣＯ２ 和 Ｈ２Ｏ， 从而起到抗菌作用。同时纳米二氧化钛作为光催化抗 菌材料，在抗菌过程中仅作为催化剂，理论上不消耗， 可永久使用［６］。
２．２ 实验菌液配置：将实验菌株置固体沙氏培养基平板上。 传代培养 １８ ｈ 后，挑取琼脂表面单个菌落混悬于液体沙氏培养 基中，采用麦氏比浊法配制成 １×１０７ ＣＦＵ／ｍｌ 浓度的菌液备 用。
２．３ 最小杀菌浓度（ＭＢＣ）测定：用微量加样器分别吸取 １０ μｌ 实验菌液加入 １ ｍｌ 各递减浓度的抗菌剂溶液中，振荡混匀。 常温（２３±２）℃、相对湿度为（５０±５）％ 的条件下，光照作用 ２４ ｈ。 ２４ ｈ 后从每种材料、每一浓度的试管中取 １０ μｌ 混合液均匀涂 于固体沙氏培养基平板上。培养基平板置 ３７ ℃恒温培养箱培养 ４８ ｈ。观察无细菌生长的最低药物浓度，即为该药物的 ＭＢＣ。本 实验步骤重复 ３ 次，结果取平均值。
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ；ｃ ａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ；ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｆｆｅｃｔ
硅橡胶材料广泛用于赝复体的制作，例如阻塞器、 颜面赝复体等。由于硅橡胶表面疏松多孔，易为白色念 珠菌黏附，从而加速硅橡胶的老化，同时也易导致患者 白色念珠菌性口炎的发生。因此，硅橡胶抗菌性能研究 是目前国内外研究的热点问题之一。作为一种理想的 抗菌剂，应该具有即效、广谱、常效、稳定、安全的抗菌 效果。近年来，无机抗菌剂以其抗菌谱广，抗菌时效长， 生物安全性良好等优点广泛用于口腔材料中。
载银纳米二氧化钛是纳米二氧化钛的一种改性产 物，在纳米二氧化钛表面沉积银离子，可以分离光生载 流子，从而提高纳米二氧化钛的光催化活性［７］。隆泉［８］ 研究发现，纳米二氧化钛对金黄色葡萄球菌及白色念 珠菌均有抑制作用。故纳米二氧化钛抗菌剂也可有效 预防白色念珠菌性口炎。