高效液相色谱法检测盐酸法舒地尔注射液的含量
盐酸法舒地尔注射液有关物质检查方法的研究
规定范围［５］，且分离度也大大提高。经对 ３批样品的 含量测定，结果符合规定，此方法操作准确可靠，可同 时检测复方泼尼松乳膏中醋酸泼尼松和氯霉素的含 量，保证制剂的质量。
参考文献 １ 陈新谦，金有豫．新编药物学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２０１１：６１２，
７７ ２ 梅艳，宋新文，汪洋，等．高效液相色谱法测定复方醋酸泼尼松乳膏含
按照《天津市医疗机构制剂规范》（２０１６年版）的 原方法进行检测，醋酸泼尼松的拖尾因子为 １．２５２，分 离度 １．８３４；氯 霉 素 的 拖 尾 因 子 为 １．１５４，分 离 度 为 １．７６５。两种药物的拖尾因子过大，且分离度不甚 理 想，故降低有机项比例，提高分离度。原温度为常温， 现升高温度，缩短出峰时间，使拖尾因子数值减小。又 通过查阅文献［４］，选择 ２４０ｎｍ作为检测波长，以上色 谱条件的改变，拖尾因子符合《中国药典》（２０１５年版）
天津药学 Ｔｉａｎｊｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｙ ２０１８年 第 ３０卷 第 １期
２５
挛及引起的脑缺血症状。临床试验证实，该药可用于 治疗急性缺血性中风、脑血管病和心绞痛后遗症 。 ［２－５］ 盐酸法舒地尔注射液在国外药典中均未收载，仅在国 家 药 品 标 准 ［ＷＳ１ － （Ｘ － １１０） － ２００６Ｚ、 ＹＢＨ０１７９２０１０、 ＹＢＨ０１９５２０１１、 ＹＢＨ０１５５２０１３、 ＹＢＨ０３４６２０１２、 ＹＢＨ０１７５２０１３、 ＹＢＨ０１５８２０１３、 ＹＢＨ０１９１２０１２］和 进 口 注 册 标 准 （ＹＸ２００４０２４７）中 收 载。根据处方、生产工艺及相关文献资料显示［６，７］，盐 酸法舒地尔的有关物质来源主要为工艺杂质、副产物 和降解杂质。经研究确认了 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ和 Ｅ共 ５个已 知杂质，分别为异喹啉 －５－磺酸、异喹啉、法舒地尔二 聚体、Ｎ－氧 化 物 和 高 哌 嗪。 本 文 收 集 相 关 已 知 杂 质 对照品，在 已 有 文 献 标 准 的 基 础 上［８－１４］，经 方 法 学 验 证，研究建立了更为合理有效的有关物质测定方法。 １ 仪器与试药
高效液相色谱法测定盐酸法舒地尔原料药及注射液的含量
高效液相色谱法测定盐酸法舒地尔原料药及注射液的含量周建玉;王卫【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2014(000)012【摘要】目的：采用高效液相色谱（HPLC）法测定盐酸法舒地尔原料药及注射液的含量。
方法采用 Phenomenex Prodigy ODS C18（2）100A (150 mm ×4.6 mm，5μm)色谱柱，以1.0％三乙胺水溶液（用磷酸调 pH 至7.0）-甲醇（50：50）为流动相，流速为0.8 mL / min，柱温为40℃，检测波长为275 nm，进样量为20μL。
结果盐酸法舒地尔质量浓度在3～60μg / mL 范围内与其峰面积呈良好线性关系，线性方程为 A ＝1.93×104 C -1.73×103，r ＝0.9999（ n ＝7）；平均回收率为99.50％，RSD 为0.87％（ n ＝9）。
结论该方法简便、精密、回收率高，重现性好，可用于盐酸法舒地尔原料药及注射液的含量测定。
%Objective To establish a HPLC method to determine the content of fasudil hydrochloride raw material drug and Fasudil Hy-drochloride Injection. Methods The Phenomenex Prodigy ODS C18(2) 100A column (150 × 4. 6mm,5μm) was adopted,the mobile phase was 1. 0% - triethylamine aqueous solution(adjusting to pH 7. 0 with phosphoric acid)- methanol(50 : 50),the flow rate was 0. 8 mL / min,the column temperature was 40℃ and detecting wave length was 275 nm. Results The mass concentration of fasudil hy-drochloride in the range of 3 - 60 μg / mL( r = 0. 999 9,n = 7)had good linear correlation with the area of the test peak,the linear e-quation was A = 1. 93 × 104 C - 1. 73 × 103,r = 0. 9999( n = 7);the average recovery rate was 99. 49%( n = 9,RSD = 0. 8% ). Conclusion The method is simple and precise with high recovery rate and good reproducibility,which can be used for the determination of the con-tent of fasudil hydrochloride raw material drug and Fasudil Hydrochloride Injection.【总页数】3页(P64-66)【作者】周建玉;王卫【作者单位】天津市药品检验所，天津 300070;天津市药品检验所，天津 300070【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R971【相关文献】1.紫外-可见分光光度法测定盐酸法舒地尔注射液中盐酸法舒地尔的含量 [J], 吕洁;孟祥军;邹春阳2.高效液相色谱法检测盐酸法舒地尔注射液的含量 [J], 高亚春;张东明3.高效液相色谱法测定盐酸法舒地尔中间体的含量 [J], 张亚梅;王国伟;刘璐4.高效液相色谱法测定盐酸法舒地尔中间体的含量 [J], 张亚梅;王国伟;刘璐5.用HPLC法测定盐酸法舒地尔注射液中盐酸法舒地尔的含量 [J], 乐健;石宽;闻俊;洪战英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相法检测盐酸法舒地尔注射液的含量
・ ３ ・
高效液相法检 测盐 酸法舒地 尔注射液 的含量
李 菲 马立萍 （ 哈 尔滨欧替药业有限公 司， 黑龙 江 哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ６ ０ ）
摘 要： 目的 ： 建立检查 盐酸 法舒地 尔注射 液的含量 测定方法 。 方法 ： 以辛烷基硅 烷键 合硅胶 为填充剂的 色谱 柱 ； 以０ ． ０ ５ ｍｏ ｌ ／ Ｌ磷酸二 氢铵溶 液 一乙腈（ ６ ５ ： １ ０ ） 为流动相 ； 检测波长为 ２ ８ ０ ｒ ｍｌ 。 结果 ： 盐酸法舒地 尔浓度在 ０ ． ０ ７ ５ － ０ ． １ ５ ｍｇ ／ ｍｌ 范围内， 与峰 面积呈 良好的线性关 系； 盐酸法舒地 尔平均回收率为 ９ ９ ． ５ ％， ＲＳ Ｄ为 ０ ． ３ ％＜２ ． ０ ％。 精 密度 良好 ， 重复性 高， 专属性好。 结论 ： 此方 法可 以准确检 测盐酸法舒地 尔注射
９ １ ． ６ ５ ９ １ ． ９ ７ ８ ９ ． ６ １
９ ９ ． ４ １
９ ９ ． ９ ２ ９ ９ ． ７ ８
２１仪器： 高嬲 夜 相色 义 日本岛津制造所 ；赛多利斯 Ｂ Ｐ ２ １ １ Ｄ分析天 平。色谱柱： ｃ ８ 柱（ ２ ５ ０ ｘ ４ ． ０ ａｍ， ｒ ５ １ ￣ ｍ） 。
液 的含 量 。
关键词 ： 盐酸法舒 地 尔注射 液； 高效液相 色谱 法； 含量
１ 概 述
表 １含量测定线性关系
盐酸法舒地尔是一种蛋白激酶抑制剂即细胞 内钙离子拈抗剂。 改善及预防蛛网膜下腔出血术后 的脑血管痉挛及随之引起的脑缺血症状。 国际医学专家在病理研究中发现 ，抑制患者 组织内的 Ｒ ｈ Ｏ激酶异常活跃是渝 帛 脑血管疾病 的关键， 成为国际上的研究热点， 盐酸法舒地尔注 射液是国际上唯——个已经上市的 Ｒ ｈ ｏ 激酶抑制 剂， 由日本旭化成制药株式会社研制成功 ， 经大量 临床验证， 盐酸法舒地尔注射液已成为预防和治疗 心脑血管疾病的主要途径。市场潜力非常大， 开发 此品种有良好的市场前景。 为了 保证药品的有效性， 对其含量测定方法 进行了力栏 究 。
HPLC法测定盐酸法舒地尔注射液中盐酸法舒地尔含量论文
HPLC法测定盐酸法舒地尔注射液中盐酸法舒地尔的含量【中图分类号】r97 【文献标识码】a 【文章编号】1672-3783（2013）03-0271-02盐酸法舒地尔注射液国家食品药品监督管理局国家药品标准中含量测定所用的方法为紫外-可见分光光度法，高效液相色谱方法与紫外-可见分光光度法相比，能使主药与辅料能有效分离，避免辅料对含量测定的干扰，使检测结果更准确，所以将含量方法改为高效液相色谱法。
1 仪器与试药：岛津 spd-10a vp紫外检测器；岛津spd-m10a vp 二极管阵列检测器；岛津 lc-15c 溶剂泵；岛津lc-10at vp 溶剂泵；岛津 lcsolution 15c色谱工作站；岛津 lcsolution色谱工作站。
盐酸法舒地尔对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100614-200401），盐酸法舒地尔注射液（天津红日药业，规格为2ml：30mg）；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法2.1 色谱条件：色谱柱：phenomenex c18 （250×4.60mm，gemini 5μ c18 110 ）；柱温：25℃；流速：1.0ml/min；检测波长：275nm；运行时间：12min；进样体积：20μl；流动相：1.0%三乙胺水溶液（用磷酸调ph值至7.0）：甲醇（55：45）；系统适用性要求：理论板数按盐酸法舒地尔峰计算应不低于6600。
2.2 对照品溶液的配置：取盐酸法舒地尔对照品约30mg，精密称定，至100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
2.3 供试品的配置：精密量取各批市售品2ml至100ml量瓶，加流动相稀释至刻度，摇匀。
2.4 测定法：精密量取对照品溶液及供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
按外标法以峰面积计算，即得。
3 方法学研究3.1 波长的选择为了准确的测定盐酸法舒地尔的含量，参考国家药品标准“盐酸法舒地尔”有关物质项下的检测波长，并取本品及各步反应中间体进行uv光谱分析，结果可知除了高哌嗪对紫外无吸收外，在275nm 波长处，5-异喹啉磺酸、中间体及盐酸法舒地尔均有最大吸收。
HPLC法测定盐酸法舒地尔注射液的含量
．
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法测定 盐 酸 法舒 地尔 注射 液 的含量
Hale Waihona Puke 宋玉才 ， 吕永超 （ 鲁 南制 药集 团股份有限公司 ， 山东 临沂 ２ ７ ６ ０ ０ ０ ）
Ａ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ＨＰ Ｌ Ｃ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ｗ ａ ｓ ａ ｃ ｃ ｏ ｍｐ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｏ ｎ ａ ｎ Ｗｅ ｌ ｃ ｈ Ｕ ｌ ｔ ｉ ｍａ ｔ ｅ ＸＢ —Ｃ８ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ
ｗａ ｓ ９ ９ ． ８ ７ ％ ｗｉ ｔ ｈ ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ＲＳ Ｄ ｏ ｆ ０ ． ２ ４ ％． Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｈ ａ ｄ ｓ ｔ ｒ ｏ ｎ ｇ ｐ ｒ ｏ ｐ ｅ ｒ ｔ ｙ ａ ｎ ｄ ｈ ｉ ｇ ｈ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｃ ｙ ， ｉ ｔ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ
摘要 ： 目的
建立 高效液相 色谱 法测定 盐酸 法舒地 尔注射液含 量的方法。方法
采 用 Ｗｅ ｌ ｃ ｈ Ｕ ｌ ｔ ｉ ｍ ａ ｔ ｅ Ｘ Ｂ—ｃ
色谱柱（ ４ ． ６ ｍ ｍ× ２ ５ ０ ｍ ｍ， ５ ｍ） ， 流动相 为 ０ ． ０ ３ ｍ ｏ ｌ ・ Ｌ 磷 酸氢二铵 溶液 一乙腈 ＝ ７ ６ ： ２ ４ （ 用磷 酸调 节 ｐ Ｈ值 至 ４ ． ５ ） ， 检测波长为 ２ ７ ５ ｎ ｍ， 流速为 １ ． ０ ｍ Ｌ・ ｍｉ ｎ ～。结果 盐酸 法舒 地 尔在 ９ ０ ． ０ ４～ ２ １ ０ ． ０ ８ ｐ ． ｇ・ ｍ Ｌ 的浓度 范围
盐酸法舒地尔标准
盐酸法舒地尔Yansuan Fashudi’er Fasudil HydrochlorideNS NO ONH.HClC 14H17N3O2S·HCl327.83本品为六氢-1-（5-磺酰基异喹啉）-1（H）-1，4-二氮杂卓盐酸盐，按干燥品计算，含C14H17N3O2S·HCl应为99.0%～102.0%。
【性状】本品为白色或类白色结晶或结晶性粉末。
无臭，味微苦；有引湿性。
本品在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在三氯甲烷或乙醚中几乎不溶。
【鉴别】（1）取本品约5mg，置小试管中，试管口用氢氧化镍试纸盖住，加热，绿色的氢氧化镍试纸即显黑色或灰色的斑点。
（2）取本品适量，加水制成每1ml中约含30μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)测定，在275nm、312nm与324nm的波长处有最大吸收，在250m和297nm的波长处有最小吸收。
（3）取干燥失重项下的供试品测定红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致（中国药典2010年版二部附录Ⅳ C）。
（4）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（中国药典2010年版二部附录Ⅲ）。
【检查】酸度取本品0.30g，加水10ml溶解后，依法测定（中国药典2010年版二部附录Ⅵ H），pH值应为4.5～6.0。
溶液的澄清度与颜色取本品0.15g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2010年版二部附录Ⅸ B）在1小时内比较，不得更浑；如显色，与黄色1号标准比色液（中国药典2010年版二部附录Ⅸ A第一法）比较，不得更深。
有关物质取本品适量，加流动相制成每1ml中约含0.2mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。
盐酸法舒地尔注射液细菌内毒素检查方法学研究
盐酸法舒地尔注射液细菌内毒素检查方法学研究摘要】目的：建立盐酸法舒地尔注射液细菌内毒素检查的方法学研究。
方法：参照2010 年版《中国药典(二部)》细菌内毒素检查法进行试验。
结果：样品经稀释后对内毒素检查无干扰，将细菌内毒素限值定为0.5EU/ml，可以选择灵敏度0.25Eu/ml 的鲎试剂进行内毒素检查。
结论：样品在最大稀释倍数内对内毒素检查无干扰。
【关键词】盐酸法舒地尔注射液；细菌内毒素检查法干扰试验盐酸法舒地尔是一种蛋白激酶抑制剂即细胞内钙离子拮抗剂。
改善及预防蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及随之引起的脑缺血症状。
国际医学专家在病理研究中发现，抑制患者组织内的Rho 激酶异常活跃是治疗心脑血管疾病的关键，成为国际上的研究热点，盐酸法舒地尔注射液是国际上唯一一个已经上市的Rho 激酶抑制剂，由日本旭化成制药株式会社研制成功，1995 年6 月在日本上市，商品名为“依立卢”，规格2ml:30mg。
盐酸法舒地尔注射液在我国研究起步于1997 年，天津市药物研究院和天津红日药业公司合作研究，并获得国家科技部科技型企业创新基金支持，于2004 年获得了国家二类新药证书，商品名“川威”。
目前国内标准[1]采用家兔法进行热原检查，由于细菌内毒素检查法具有灵敏、快速、操作简便、结果准确等优点。
因此我们参考《中国药典(二部)》细菌内毒素检查法[2]，对盐酸法舒地尔注射液进行细菌内毒素检查的可行性进行研究，报道如下。
1.实验材料及仪器鲎试剂：湛江安度斯生物有限公司生产，批号：1010112(灵敏度0.25EU/ml，规格0.1ml)、批号：1008202(灵敏度0.125EU/ml，规格0.1ml)。
细菌内毒素检查用水：湛江安度斯生物有限公司生产，批号1005240，规格5ml。
细菌内毒素工作标准品：批号201070，效价120EU/支，中国药品生物制品检定所生产。
旋涡混合器：XW-80A 型，厂家：上海医大仪器厂。
HPLC测定盐酸法舒地尔的有关物质
第28卷,第4期光 谱 实 验 室V o l.28,N o.4 2011年7月Ch inese J ou rnal of S p ectroscop y L aboratory July,2011HPLC测定盐酸法舒地尔的有关物质葛欣 孟祥军① 李娜然(沈阳医学院化学教研室 沈阳市皇姑区黄河北大街146号 110034)摘 要 建立H PL C测定盐酸法舒地尔的有关物质。
采用C18色谱柱,以甲醇2磷酸二氢铵溶液(30∶70,用磷酸调pH值至3.5±0.05)为流动相;检测波长为275nm。
盐酸法舒地尔检测限为0.3m g mL,主成分峰与其有关物质能完全分离。
本方法简便、准确、专属性好,可用于盐酸法舒地尔有关物质的测定。
关键词 盐酸法舒地尔;有关物质;高效液相色谱法中图分类号:O657.7+2 文献标识码:B 文章编号:100428138(2011)04219082031 引言盐酸法舒地尔(Fasudil hydroch l o ride)是一种具有广泛药理作用的新型药物,它的分子结构为52异喹啉磺酰胺衍生物,为RHO激酶抑制物。
临床上主要应用于多种原因引起的缺血性脑血管疾病[1]。
盐酸法舒地尔原料在合成过程中存在有关杂质,为此,本研究参考新药转正标准W S12(X2111)22006Z盐酸法舒地尔及相关文献[2—4],通过方法学验证,建立了盐酸法舒地尔中对有关物质的H PL C,以对盐酸法舒地尔进行更有效的内在质量控制。
2 实验部分2.1 仪器与试剂L C210A tvp高效液相色谱仪(日本岛津公司);N2000色谱工作站(杭州赛尔泰科技有限公司)。
盐酸法舒地尔对照品(批号1006142200401,含量99.5%,中国药品生物制品检定所);盐酸法舒地尔(原料药,湖北黄石世星制药有限公司,批号20080601,20080602,20080603);甲醇(色谱纯);磷酸二氢铵(分析纯);其他试剂均为分析纯。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
科 技 论 坛
高效 液相 色谱法检 测盐酸 法舒地 尔注射液 的含量
高亚春 张东明
（ 哈 尔滨誉欣 医药科技有限公 司， 黑龙 江 哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ０ ０ ） 摘 要： 目的 ： 建立检 查盐酸法舒 地 尔注射液 的含量 测定方法。方法 ： Ｃ ８ ｋ ￣（ ２ ５ ０ ￣ ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ ｍ） ； 以Ｏ ． ０ ５ ｍ ｏ ］ ／ Ｌ磷 酸二氢铵溶液一乙腈 （ ６ ５ ： １ ０ ） 为流动相 ； 检 测波长为 ２ ７ ５ ｎ ｍ。 结果 ： 盐酸法舒地 尔浓度在 ７ ． ８ ４ — １ ５ ６ ． ８ ｕ ｇ ／ ｍ ｌ 范围内， 与峰 面积呈 良好的线性关 系； 盐酸法舒地 尔平 均回收率为 ９ ９ ． ４ ７ ％， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ３ ２ ％＜ ２ ． Ｏ ％。 精 密 度 良好 ， 重复性 高， 专属 性 好 。结 论 ： 此 方 法 可 以 准确 检 测 盐 酸 法 舒地 尔注射 液 的含 量 。 关键词 ： 盐酸 法舒 地 尔 ； 高 效 液相 色谱 法 ； 含 量 测 定 表 １线性 关 系试 验 数 据