高效液相-审计追踪检查
SOP高效液相色谱法检验操作规程
4.2.3除另有规定外，普通分析柱的填充剂粒径一般在3~10um之间。粒径更小（约2um）的填充剂常用于填装微径柱（内径约2mm）。
若供试品所含的部分杂质未与溶剂峰完全分离，则按规定先记录供试品溶液的色谱图Ⅰ，再记录等体积纯溶剂的色谱图Ⅱ。色谱图Ⅰ上杂质峰的总面积（包括溶剂峰），减去色谱图Ⅱ上的溶剂峰面积，即为总杂质峰的校正面积。然后依法计算。
5.2.5面积归一化法按各品种项下的规定，配制供试品溶液，取一定量注入仪器，记录色谱图。测量各峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰
式中tR2为相邻两、W2及W1，h/2、W2,h/2分别为此相邻两峰的峰宽及半高峰宽。
当对测定结果有异议时，色谱柱的理论板数（n）和分离度（R）均以峰宽（W）的计算结果为准。
5.1.6重复性用于评价连续进样中，色谱系统响应值的重复性能。采用外标法时，通常取各品种项下的对照品溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0％；采用内标法时，通常配制相当于80％、100％和120％的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成3种不同浓度的溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子。其相对标准偏差也应不大于2.0％。
4.2.6流动相的PH值应控制在2~8的。当PH大于8时，可使载体硅胶溶解；当PH小于2时，与硅胶相连的化学键合相易水解脱落。当色谱系统中需使用PH值大于8的流动相时，应选用耐碱的填充剂，如采用高纯硅胶为载体并具有高表面覆盖度的键合硅胶填充剂、包裹聚合物填充剂、有机-无机杂化填充剂或非硅胶基键合填充剂等；当需使用PH值小于2的流动相时，应选用耐酸的填充剂，如具有大体积侧链能产生空间位阻保护作用的二异丙基或二异丁基取代十八烷基硅烷键合硅胶填充剂、有机-无机杂化填充剂等。
高效液相色谱仪的四种检测方法及计算
高效液相色谱仪的四种检测方法及计算高效液相色谱仪（HPLC）在化学、生物学、制药、食品等领域都有广泛应用，其检测方法多种多样，以下将详细介绍四种常用的检测方法及其计算方式。
一、紫外-可见光检测法 (UV-Vis)紫外-可见光检测法是最常用的HPLC检测方法。
在此方法中，样品组分在紫外或可见光区域有吸收，因此可以被检测。
计算方法一般采用峰面积或峰高法定量。
峰面积法比峰高法更为准确，因为它同时考虑了峰的高度和宽度。
在计算时，首先需要获得标准品的校正曲线，然后根据未知样品的峰面积或峰高在校正曲线上找到对应的浓度。
二、荧光检测法 (Fluorescence)荧光检测法的灵敏度通常比紫外-可见光检测法更高，但并非所有化合物都能产生荧光。
在这种方法中，样品组分被激发光照射后发出荧光，荧光强度与组分浓度成正比。
计算方式与紫外-可见光检测法类似，也是通过校正曲线进行定量。
三、电化学检测法 (Electrochemical Detection)电化学检测法通常用于检测具有电化学活性的化合物，如许多药物和神经递质。
它可以在没有光学性质的情况下对物质进行检测，提高了HPLC的应用范围。
常见的电化学检测方法包括安培检测法和电导检测法。
定量计算通常基于法拉第定律，即电流与通过电解池的电荷量成正比。
四、质谱检测法 (Mass Spectrometry)质谱检测法是与HPLC连用的一种高级检测方法，可以提供待测物质的分子量信息，从而确定其化学结构。
在此方法中，HPLC分离后的组分直接进入质谱仪进行检测。
定量计算通常使用内标法或外标法，需要对待测物质进行同位素标记或使用已知量的内标物质。
此外，还可以使用多反应监测模式（MRM）进行更准确的定量。
以上四种方法各有优缺点，应根据具体的应用需求和样品性质选择合适的方法进行检测和计算。
同时，为了获得准确可靠的结果，还需要对HPLC系统进行适当的维护和校准。
高效液相色谱仪校验规程
This Document can only be used in JingDeZhen FuXiang Pharm.Co., Ltd. Any unauthorized useand copy is forbidden .标准文件Standard document文件编号Document No.SOP-LOP-790-8/00高效液相色谱仪校验规程Calibration SOP for HPLC页码Page1 / 9状态Status正式Formal备份号Control No.起草人Written by起草日期Written date年月日颁发部门Issued department质量管理部Quality department审核人Reviewed by审核日期Reviewed date年月日批准人Approved by批准日期Approved date年月日生效日期Effective date年月日分发部门Distributed department ：质量负责人质量管理部QA QC1、目的Objective ：建立高效液相色谱仪内部校验规程，确保校验工作规范、顺利进行。
2、范围Scope ：本规程适用于本公司使用的高效液相色谱仪（紫外-可见光检测器/二极管阵列检测器）的校验。
3、职责Responsibilities：3.1 培训职责：本文件起草人或审核人或批准人负责对质量管理部全体人员培训。
3.2 QC ：负责制定本规程，并对本规程的实施负责。
3.3 QA ：负责监督和检查本规程的实施。
4、定义Definition ：无。
5、程序Procedures ：5.1 依据国家计量校验规程JJG 705-2002液相色谱仪，安捷伦液相说明书，岛津液相说明书。
5.2 备件及材料5.2.1水：HPLC 级水。
5.2.2化学试剂：乙腈（HPLC ）、丙酮（分析纯）。
5.2.3咖啡因标准品。
5.2.4咖啡因标样。
高效液相实验室用计算机系统验证方案
食堂、宿舍A土方开挖实验室用计算机系统验证方案设备名称：LabSolutins工作站设备位置：精密仪器室设备用途：LC-2030岛津高效液相色谱仪操作系统验证编号：YZ-ZL-验证时间：目录页脚内容28食堂、宿舍A土方开挖立项申请表 (3)一、概述 (4)二、验证目的 (4)三、验证范围 (4)四、验证所需具备的条件 (4)五、验证内容 (4)1、系统安装条件验证 (4)2、计算机系统安全性验证 (5)3.工作站登录方式验证 (9)4.工作站用户权限验证 (12)5.工作站中方法权限验证 (17)6.工作站审计功能验证 (19)7.工作站数据安全性验证 (21)8.偏差 (25)六、验证实施 (26)七、验证数据汇总 (26)八、验证小组组成及职责 (26)九、验证计划进度 (26)十、参考文献 (26)十一、验证报告与验证证书 (27)立项申请表页脚内容28食堂、宿舍A土方开挖一、概述为保证检验数据完整性和产品质量，应对检验过程中使用的计算机及工作站进行安全性验证，本方案是针对我公司安装的计算机以及LabSolutins工作站进行验证。
页脚内容28食堂、宿舍A土方开挖二、验证目的通过对计算机及工作站进行验证，规范检验用计算机系统，保证工作站的正常运行，确保计算机系统的准确性、真实性、可靠性及检验数据的完整性。
三、验证范围本方案适用于岛津高效液相色谱仪LabSolutins工作站计算机系统。
四、验证所需具备的条件1、LC2030岛津高效液相色谱仪2、LabSolutins工作站3、联想品牌电脑（高液专用）4、五、验证内容1、系统安装条件验证检查计算机安装的环境，位置，是否能满足计算机及工作站的正常运行需要。
验证结果：验证结论：□合格□不合格、验证人：日期：.页脚内容28食堂、宿舍A土方开挖2、计算机系统安全性验证1.计算机登录方式验证接通计算机电源，启动计算机后，计算机是否是直接进入操作系统界面还是出现选择用界面；选定用户后，是否直接登录还是需输入密码后才能登录。
九高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定
线性范围
检查自动进样器在不同进 样量下的线性响应范围， 以确保其适用于不同浓度 的样品分析。
检测器性能检查
噪声与漂移
评估检测器的基线噪声和漂移，以确保其稳定性和灵 敏度。
线性范围与响应因子
检查检测器在不同浓度下的线性响应范围和响应因子， 以确保其准确性和可靠性。
检测限与定量限
确定检测器的检测限和定量限，以评估其对于低浓度 样品的检测能力。
九高效液相色谱仪的性能检查和色 谱参数的测定
目录
• 性能检查 • 色谱参数测定 • 方法开发与验证 • 仪器维护与故障排除 • 数据处理与结果分析 • 法规要求与实验室管理实践
01 性能检查
泵系统性能检查
01
02
03
流量准确性
通过测量实际流量与设定 流量的偏差来评估泵系统 的准确性。
流量精密度
03 方法开发与验证
方法开发流程梳理
明确分析目标
确定需要分析的样品类型、目标化合物以 及分析要求。
确定洗脱程序
通过优化洗脱程序，包括梯度洗脱和等度 洗脱，使目标化合物在合适的时间内出峰，
并获得良好的峰形和分离度。
选择色谱柱和流动相
根据目标化合物的性质选择合适的色谱柱 和流动相，确保目标化合物能够得到有效 的分离和检测。
峰识别、定量计算及结果解读方法分享
峰识别
根据色谱峰的保留时间、峰形等特征，识别出样品中的各 组分，并与标准品进行比对验证。
定量计算
通过比较样品峰与标准品峰的峰面积或峰高，使用内标法、 外标法等定量方法，计算出样品中各组分的含量。
结果解读
根据定量计算结果，结合样品信息和相关标准，对检测结果进行解读和评估， 判断样品是否符合要求。同时，对异常结果进行原因分析，并提出相应的改进 建议。
高效液相色谱法操作步骤
高效液相色谱法操作步骤
高效液相色谱法的操作步骤如下:
1. 过滤流动相并根据需要选择不同的滤膜。
溶剂必须为色谱纯，且溶剂及样品必须过膜（0.45μm）。
超声脱气30分钟以上。
2. 用流动相冲洗金属过滤器，然后将过滤器浸入储液罐的流动相中。
有一段时间没用或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。
3. 将储液罐放置在一定的高度，以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌落。
4. 然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪：泵→检测器→高效液相色谱软件→设置软件参数，如分析时间、检测波长、流速等。
5. 启动泵，运行5分钟，主要是为了排除系统中的气泡，结束后关闭所有排气阀。
6. 然后按照预先计划的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，运行流动相，走基线，直到基线平稳。
7. 基线平稳后，在软件中设置样品的运行参数，如流速和分析时间等。
分析时间会因样品、流速、柱长等因素变化。
8. 设计走样方法。
9. 在进样和进样后操作的过程中，需要及时调整和监控各项参数。
高效液相色谱法简介及其在药品检验中的应用
高效液相色谱法简介及其在药品检验中的应用高效液相色谱法是一种广泛应用于药品检验领域的分析技术。
它具有高分离效率、高灵敏度、高重现性等优点，能够对各种化合物进行快速、准确地分离和检测。
在药品检验中，高效液相色谱法主要应用于药品成分分析、含量测定、质量控制等方面。
例如，利用高效液相色谱法可以对药品中的活性成分进行定量分析，检测残留药物和其代谢产物，以及分析药品中其他化合物的含量等。
此外，高效液相色谱法还可以用于药品质量评价和研发过程中的药物分析。
总之，高效液相色谱法在药品检验中的应用是非常重要的，为药品质量的保证和提高作出了重要贡献。
- 1 -。
高效液相色谱
高效液相色谱高效液相色谱，又称高压液相色谱（HPLC，High Performance Liquid Chromatography），是一种重要的色谱技术，广泛应用于药物分析、食品安全检测、环境监测等领域。
相较于传统液相色谱，高效液相色谱具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优势，因此成为现代分析实验的核心技术之一。
高效液相色谱的原理基于物质在不同相互作用力下的差异，通过样品在固定相上的分配行为，实现对不同成分的分离和分析。
其核心部分是色谱柱，包括固定相、流动相和样品分子。
其中，固定相是一种特定的固体或液体材料，具有一定的孔隙结构和表面特性，用于捕获和分离样品成分。
流动相则由溶剂组成，可以通过与固定相的相互作用调节分离效果。
而样品分子则根据其在固定相上的亲疏性，相继被吸附、扩散和解吸，最终实现分离。
高效液相色谱的分离过程包括样品进样、柱温控制、流速调节等步骤，每个步骤都需要严格控制，以保证分离效果和结果准确性。
在样品进样之前，通常需要采用样品前处理方法，如固相萃取、溶剂萃取等，以去除杂质和提高分析物的浓度。
然后，样品通过进样器进入色谱柱，通过控制流速和柱温，使样品成分在固定相上发生分配行为，从而实现分离。
最后，通过采集柱洗脱出来的物质，并通过检测器检测其浓度变化，得到分析结果。
高效液相色谱的关键是选择适当的固定相和流动相。
不同的样品性质和分析要求需要选择不同的固定相。
常见的固定相包括疏水相、离子交换相、亲水相等。
此外，流动相的选择也非常重要，常见的流动相溶剂有水、有机溶剂（如甲醇、乙腈）等。
合理选择固定相和流动相能提高分离效果，提高检测灵敏度。
高效液相色谱有多种检测器可供选择，常用的有紫外-可见光谱检测器（UV-Vis）、荧光检测器、质谱检测器等。
通过检测器的信号，可以得到样品的浓度信息，从而进行定量分析。
高效液相色谱在药物分析中的应用广泛。
例如，针对不同药物的检测需求，可以选择不同的色谱柱和流动相，在合适的检测器下进行分析。
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28
三、红外分光光度计审计追踪功能
（五）、图谱查看
1 1、在“仪器”选择仪器， 打开，再点击“再解 析”，出现如下界面。
2
3
29
三、红外分光光度计审计追踪功能
（五）、图谱查看 2、选择图谱，打开查看具体信息。
30
结束语
软件所具有的审计追踪功能可以帮助用户更好、更方便地满足 法规的要求，也能够帮助管理者发现实验室的问题。重要的是， 作为检验员，需要真实、完整的记录实验过程。
9
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（三）、用户权限分配
1、在“开始”菜单中选择 “控制面板/所有控制面板项 /管理工具/本地安全策略”， 出现如右对话框：
10
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（三）、用户权限分配
2、选择“本地策略/用 户权限分配”，即可对 用户的权限进行分配。
5、选择“应用程序和服务日 志/ Microsoft/Windows”。
8
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（二）、事件查看器的检查 7 6、选择“Date Time Control Panel/ operational”。 7、查看信息，如：图例中显 示将时间修改为：2017-9-23 8：49：51。 6
仪器审计追踪
CONTENTS
目录
01 02 03
Windows7系统的审计追踪
安捷伦液相色谱系统审计追踪
红外分光光度计审计追踪
2
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（一）、查看时间修改功能是否锁定
1、 单击电脑桌面右下角时间日期，
弹出如左对话框
2、单击“更改日期和时间设置”， 弹出如下图对话框 2、
分光光度计均以该版
本截图（遮挡部分信 息）。
25
三、红外分光光度计审计追踪功能
（三）、日志浏览器查看
1、在“管理工具”
中选择“日志浏
览器”，如下图。
26
三、红外分光光度计审计追踪功能
（三）、日志浏览器查看 2、可进行筛选查看具体日志信息。
27
三、红外分光光度计审计追踪功能
（四）、安全策略查看
在“管理工具”中选择“安 全策略”、“帐户”，可对 账户进行安全策略设置或查 看。
*本资料中的
液相图片均以 该版本为例
13
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（二）、查看系统日志
系统活动日志记录
了账户创建、登入 等账户管理信息， 也记录了仪器创建、 配置和修改等信息。
14
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（三）、查看当前工作日志
1、联机状态下，选择
“视图/工作日志/当
前工作日志”，打开， 如下图所示：
看时间顺序，方法创建、复制等信息。
18
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（四）、查看方法审计跟踪（方法二）
在（脱机）数 据分析下，选 中某一项目， 单击右键，选 择“当前数据 文件工作日 志”，查看 。
19
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（五）、查看序列审计跟踪
在“数据”文件 夹下，选择某一 文件夹，打开 “***.LOG”，
11
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（一）、登录
每次开启 Chemstation 都需要登入 保护所有 Chemstation 数据、方法等内容， 禁止非授权人员使用 启动安全登入功能后，非授权人员无法使用
Chemstation
12
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（一）、登录
点击“帮 助”、“关 于”，查看 系统版本号
15
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（三）、查看当前工作日志 2、查看工作日志中时间顺序。
16
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（四）、查看方法审计跟踪（方法一） 1、选择“方法/方法审计跟踪”。
17
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（四）、查看方法审计跟踪（方法一） 2、出现如下“方法审计跟踪”对话框后，查
查看文件夹名称
和文件名称应该 一致。打开记事 本，查看时间顺 序。
20
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（六）、查看数据审计跟踪
1、根据用户的储存 位置，找到“数据” 文件夹。
21
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（六） 、查看数据审计跟踪
2、在“数据”文件 夹下找到 “RUNLOG” 。
22
二、安捷伦液相色谱系统审计追踪功能
（六） 、查看数据审计跟踪
3、打开。查看时间 顺序，查看序列号。
23
三、红外分光光度计审计追踪功能
（一）、登录
双击桌面图标，填写用户ID， 密码，登录。
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三、红外分光光度计审计追踪功能
（二）、查看版本信息 1 1、选择“仪器”。 2 3
2、单击图标。
3、查看版本信息。 注：本资料中的红外
Байду номын сангаас31
1、
3
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（一）、查看时间修改功能是否锁定
3、 单击“更改日期和时间”，查
看是否能进行修改
3、 4、 4、单击“更改时区”，查看是否 能进行修改
4
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（二）、事件查看器的检查
1、右键单击桌面“计算机”
图标 2、单击“管理”，出现如 下对话框
5
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（二）、事件查看器的检查
3、单击“事件查看器”
6
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（二）、事件查看器的检查
4、选择“Windows日志”。 查看其项下“应用程序”、“安全”、
“系统”等 。
7
一、计算机Windows7系统的审计追踪功能
（二）、事件查看器的检查