无基质辅助激光解吸电离质谱MatrixfreelaserdesorptionionizationmassspectrometryLDIMS
MALDI-TOF-MS病原体鉴定质量保证专家共识

MALDI-TOF MS病原体鉴定质量保证专家共识基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)作为一种新兴的软电离质谱技术,由于其具有快速、准确、灵敏、自动化及高通量等检测特点,已成为一项革命性病原体快速鉴定技术被用于临床微生物实验室,并将逐步取代常规病原体生化鉴定方法。
任何新兴技术应用于临床都需要建立规范的质量保证体系,以确保检测质量。
本专家共识将对开展MALDI-TOF MS用于病原体鉴定的设施与安全要求、人员培训与能力评估、MALDI-TOF MS病原体鉴定过程的质量控制、检验程序性能验证等进行建议。
设施与安全要求1.风险评估:拟开展MALDI-TOF MS病原体检测的实验室需在风险评估基础上建立有效的安全防护策略,包括设备的使用、化学试剂的安全使用和处理丢弃、感染性病原体和被污染材料的处置等。
风险评估包含确定工作流程和鉴定步骤中可能发生的化学和生物危害,以及降低风险的方法。
2.安全防护:任何操作临床病原体样本或病原体的实验活动至少需要在二级生物安全实验室(BSL-2)中进行。
MALDI-TOF MS应安置在二级生物安全实验室内,同时使用MALDI-TOF MS检测临床病原体样本时除了需考虑生物危害的风险外还要注意化学试剂的潜在风险。
人员培训与能力评估各实验室应具备MALDI-TOF MS检测过程中涉及的所有操作人员的初次培训和定期能力评估的程序文件,对涉及的所有操作人员应进行初次和定期(至少6个月一次)的培训以及能力评估,培训考核需遵循制造商的使用手册或实验室的标准操作规程,培训的内容包括原理方法、信息技术、仪器维护、结果报告与解释等方面。
此外,还应采用一组形态和生化特征典型的菌株对培训者进行人员比对和/或考核,以确保所有操作者鉴定结果的一致性。
MALDI-TOF质谱介绍

Matrix Assisted Laser Desorption Ionization (MALDI) Time of Flight (TOF)-Mass Spectrometer (MS)基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪MALDI-TOF-MS2009.1.15飞行时间质谱系列全方位服务于尖端科学研究AXIMA -C onfidence (MALDI -TOF REFLECTRON )AXIMA -QIT (MALDI -IT -TOF )LCMS -IT -TOF (ESI -IT -TOF )AXIMA -Assurance(MALDI -TOF LNR )AXIMA -Performance (MALDI -TOF -TOF )生物质谱用于蛋白鉴定的基本原理AXIMA-CFR plus (MALDI-TOF)二级质谱用于多肽测序二级质谱用于蛋白鉴定的方法AXIMA-TOF 2(MALDI-TOF-TOF)肽序列标签+mmm田中耕一发现使用基质可分析生物大分子MALDI-TOFMS 工作原理qV = 1/2(m 1v 12) = 1/2(m 2v 22)若m 1 > m 2, 则 v 1 < v 2t (m/z)分辩率 ~ 400飞行管激光样品靶15-25 kV检测器无基质为 LD不能分析大分子(碎裂)3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic acid (Sinapinic acid, SA)芥子酸CH:CHCOOH OH 2,5-Dihydroxybenzoic acidOHCOOHCyano-4-hydroxycinnamic acid(CHCA)肉桂酸OHN N H H NN Nor-harmane 2-咔啉(通用性较好)MALDI-TOFMS结构图MCP百页窗SEM AXIMA-CFR plus SHIMADZU BIOTECHPolyester resinPolyurethane Epoxy resinM=566 Polyurethane acrylate resinUV Curable ResinButoxyl modified DDPAGPC-MALDI-TOF-MSThe EndThanks for Your Attentions。
maldi-tof

新闻网页贴吧知道MP3图片视频百科文库MALDI-TOF-MS进入词条搜索词求助编辑MALDI-TOF-MS1. 基本原理MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱, 英文名Matrix-Assisted Laser Desorption/n Time of Flight Mass Spectrometry)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱,其无论是在理论在设计上都是十分简单和高效的。
仪器主要由两部分组成:基质附助激光解吸电离离子源(MALDI)和质量分析器(TOF)。
MALDI的原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光中吸收能生物分子,而电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子,而使生物分子电离的过程。
因种软电离技术,适用于混合物及生物大分子的测定。
TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道达检测器的飞行时间不同而被检测即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比 ,检测离子。
OF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点,为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手扮演着越来越重要的作用。
2 分子量测定分子量是有机化合物最基本的理化性质参数。
分子量正确与否往往代表着所测定的有机化合物及生的结构正确与否。
MALDI-TOF是一种软电离技术,不产生或产生较少的碎片离子。
它可直接应用于混合析,也可用来检测样品中是否含有杂质及杂质的分子量。
分子量也是生物大分子如多肽、蛋白质等鉴定参数,也是基因工程产品报批的重要数据之一。
MALDI-TOF的准确度高达0.1%~0.01%,远远高于目前的SDS电泳与高效凝胶色谱技术,目前可测定生物大分子的分子量高达600KDa。
3. 蛋白质组学中的质谱技术——肽质量指纹谱技术(PMF)蛋白质组学是当前生命科学研究的前沿领域。
对蛋白质快速、准确的鉴定是蛋白质组学研究中必不键性的一步。
采用MALDI-TOF-MS测得肽质量指纹谱(PMF)在数据库中查询识别的方式鉴定蛋白质,蛋白质组学研究中最普遍应用的最主要的鉴定方法。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【摘要】目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)在常规临床微生物鉴定中的性能验证方法,指导临床实验室规范微生物鉴定程序.方法选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共115株,包含革兰阳/阴性球菌30株、革兰阳/阴性杆菌31株、真菌30株,厌氧菌、苛养菌各12株,所有菌株均经Vitek Compact鉴定和/或细菌16S rDNA、真菌ITS DNA测序分析验证.任意选择3种MALDI-TOF MS微生物鉴定系统厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱,采用检测系统推荐方法进行菌株鉴定,进行准确度验证试验.精密度验证:选取标准菌株和临床菌株10株,1位操作者使用3个检测系统对10株菌株分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d;3位操作者使用3个检测系统对10株菌株每d分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d,从而验证鉴定结果的重复性.结果厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱对标准/质控菌株(除外厌氧菌)的鉴定符合率为100%;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100%;对革兰阴/阳性杆菌的种水平鉴定符合率分别为100%、100%、96.77%;对革兰阳性球菌的种水平鉴定符合率分别为96.67%、96.67%、100%;对真菌的种水平鉴定符合率均为90%一致;对苛养菌的种水平鉴定符合率均为100%;对厌氧菌鉴定符合率为91.67%种水平一致.精密度验证试验结果重复性100%.结论 3种MALDI-TOF MS系统在革兰阳/阴性球菌、革兰阳/阴性杆菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度符合要求,验证通过.本文建立的微生物鉴定质谱仪性能验证方案可满足综合性医院临床微生物实验室常规鉴定基本要求.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2018(036)010【总页数】5页(P783-787)【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;性能验证;微生物鉴定【作者】徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【作者单位】上海市临床检验中心临床微生物室,上海200126;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123【正文语种】中文【中图分类】R446.520世纪90年代末,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)成功应用于微生物菌种鉴定并得到迅猛发展。
质谱英文简写

APCI: Atmosphere Pressure Chemical Ionization 大气压化学电离
Q: Quadropole 四极杆
IT: Ion Trap 离子阱
FT-ICR: Fourier Transform – Ion Cyclotron Resonance 傅里叶变换离子回旋共振
TOF: Time Of Flight 飞行时间
SM: Sector Magnetic 扇形磁场
MS-MS: Mass Spectrometer – Mass Spectrometer ( tandem MS) 质谱质谱(多级质谱)联用
MCP: Micro-Channel Plates 微通道板
AD: Array Detection 阵列检测器
TS电离
PD: Plasma Desorption 等离子体解吸
FD: Field Desorption 场解吸
FI: Field Ionization 场电离
LD: Laser Desorption 激光解吸
MALDI: Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization 基质辅助激光解吸电离
EI: Electron Impact 电子轰击
CI: Chemical Ionization 化学电离
FAB: Fast Atom Bombardment 快原子轰击
LSIMS: Liquid Second Ion Mass Spectrometry 液体二次离子电离
ESI: Electrospray Ionization ( Nano ESI ) 电喷雾 (纳升喷雾)
蛋白质质谱分析研究进展

工业分析课程论文作业蛋白质质谱分析研究进展汤叶朗应用化学061指导老师摘要:随着科学的不断发展,运用质谱法进行蛋白质的分析日益增多,本文简要综述了肽和蛋白质等生物大分子质谱分析的特点、方法及蛋白质质谱分析的原理、方式和应用,并对其发展前景作出展望。
关键词:蛋白质,质谱分析,应用前言:蛋白质是生物体中含量最高,功能最重要的生物大分子,存在于所有生物细胞,约占细胞干质量的50%以上,作为生命的物质基础之一,蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用,因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。
关于蛋白质的分析研究,一直是化学家及生物学家极为关注的问题,其研究的内容主要包括分子量测定,氨基酸鉴定,蛋白质序列分析及立体化学分析等。
随着生命科学的发展,仪器分析手段的更新,尤其是质谱分析技术的不断成熟,使这一领域的研究发展迅速。
自约翰.芬恩(JohnB.Fenn)和田中耕一(Koichi.Tanaka)发明了对生物大分子进行确认和结构分析的方法及发明了对生物大分子的质谱分析法以来,随着生命科学及生物技术的迅速发展,生物质谱目前已成为有机质谱中最活跃、最富生命力的前沿研究领域之一[1]。
它的发展强有力地推动了人类基因组计划及其后基因组计划的提前完成和有力实施。
质谱法已成为研究生物大分子特别是蛋白质研究的主要支撑技术之一,在对蛋白质结构分析的研究中占据了重要地位[2]。
1.质谱分析的特点质谱分析用于蛋白质等生物活性分子的研究具有如下优点:很高的灵敏度能为亚微克级试样提供信息,能最有效地与色谱联用,适用于复杂体系中痕量物质的鉴定或结构测定,同时具有准确性、易操作性、快速性及很好的普适性。
2.质谱分析的方法近年来涌现出较成功地用于生物大分子质谱分析的软电离技术主要有下列几种:1)电喷雾电离质谱;2)基质辅助激光解吸电离质谱;3)快原子轰击质谱;4)离子喷雾电离质谱;5)大气压电离质谱。
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS
基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱)是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。
质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。
因此,质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦,有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图,由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以,所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。
但是,不管是哪种类型的质谱仪,其基本组成是相同的。
都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。
以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解,然后按质荷⽐(m/z)⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离,检测它们的强度,并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱,这种分析研究的⽅法叫做质谱图,质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量(质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量),并可以确定化合物的分⼦式(可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。
这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了,如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚,然后将碎⽚拼构起来,就可以使花瓶复原。
花瓶好⽐有机物的分⼦,打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。
收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。
⽽将碎⽚重拼花瓶的过程,相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。
由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图,⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律,这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础)。
飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。
这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。
由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管,并以恒定速度飞向离⼦接收器。
离⼦质量越⼤,到达接收器所⽤时间越长,离⼦质量越⼩,到达接收器所⽤时间越短,根据这⼀原理,可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。
液相色谱-质谱联用(lcms)的原理及应用
width: 740px"><div align=center><font color=#ff0000 size=3><strong> 液相色谱-质谱联用(lc/ms)的原理及应用</strong></div><div align=center> </div><div align=left><br><strong>液相色谱—质谱联用的原理及应用</strong> <br>简介<br>1977年,LC/MS开始投放市场</font></div><p><font color=#ff0000 size=3>1978年,LC/MS首次用于生物样品分析</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>1989年,LC/MS/MS取得成功</font></p> <p><font color=#ff0000 size=3>1991年,API LC/MS用于药物开发</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>1997年,LC/MS/MS用于药物动力学高通量筛选</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>2002年美国质谱协会统计的药物色谱分析各种不同方法所占的比例。
1990年,HPLC高达85%,而2000年下降到15%,相反,LC/MS所占的份额从3%提高到大约80%。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱原理
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)原理1. MALDI-TOF简介MALDI-TOF是一种常用的生物质谱分析技术,它基于基质辅助激光解吸电离和飞行时间质谱原理。
该技术在生物医学和生物化学领域发挥着重要作用,可以用于蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的质谱分析。
2. 基质辅助激光解吸电离原理在MALDI-TOF中,生物样品与一种能吸收激光能量并具有辅助离子化作用的基质混合,形成固体混合物。
当激光照射到这种混合物上时,基质吸收能量并传递给生物分子,导致其脱去一个或多个电子,从而产生带电离子。
这些离子在激光作用下被释放,并进入飞行时间质谱仪进行分离和检测。
3. 飞行时间质谱原理飞行时间质谱是一种通过粒子在电场中飞行时间与其质荷比的关系来确定粒子质量的质谱技术。
在MALDI-TOF中,产生的离子被加速进入飞行管道,然后在电场作用下以不同速度飞行。
由于质荷比不同,离子到达检测器的时间也不同,通过测量飞行时间即可推断质子的质量。
4. 深入理解基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对于MALDI-TOF技术,我们可以从基质选择、激光参数、离子飞行管道设计等方面进行深入探讨。
合适的基质选择对于样品的离子化是至关重要的,不同基质对分子的吸收能力、离子化效果及质谱信号有重要影响。
激光参数的选择直接关系到激光对基质和样品的作用效果,需要根据样品的特性进行合理选择。
离子飞行管道的设计也对分辨率和质谱信噪比有直接影响,合理设计和优化飞行管道可以提高质谱的灵敏度和分辨率。
5. 个人观点和总结从我个人来看,MALDI-TOF技术作为一种重要的生物质谱分析技术,对于分子生物学、生物医学及临床诊断等领域都具有重要意义。
通过深入理解基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱原理,我们可以更好地应用该技术进行生物大分子的质谱分析,为科学研究和医学诊断提供更准确、快速的手段。
在本文中,我们对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的原理和应用进行了深入解析,从基本原理到实际应用进行了全面探讨,希望对读者有所启发和帮助。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物鉴定中的应用林豪芸;吴文苑【摘要】In recent years ,matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a new organic soft ionization mass spectrometry which can identify and classify microorganism by directly using the sam-ple itself or cultivate colonies on petri dish in a few minutes .This new and simple method reduces the cost of consumables and the time of diagnosis greatly .Its reliability and accuracy have been shown in many studies and different system devices have al-ready been on the market .In the near future ,MALDI-TOF MS will have a broader prospect .This mass spectrometry will be-come an effective and fast microbial identification technology to replace the conventional method .In this article ,we will review the principles of MALDI-TOF MS ,its development and application ,its advantages and shortcomings which compared with tra-ditional methods at the present stage ,and the emphasis will focus on the application characteristics of MALDI-TOF MS in mi-crobial systems .%基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption /ionization time-of-flight mass spectrom-etry ,MALDI-TOF MS)技术是近年发展起来的一种软电离新型有机质谱,它可以在几分钟内直接对平皿中或标本中的菌落进行鉴定。