4多聚甲醛固定微生物样品的原理

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4%的多聚甲醛固定细胞时间

4%的多聚甲醛固定细胞时间

4%的多聚甲醛固定细胞时间多聚甲醛(polyformaldehyde)是一种高分子化合物,具有良好的稳定性和可模性。

由于其优异的物理性质和化学性质,它经常被用作材料的加工、改性和改良。

多聚甲醛对于细胞固定和保存也具有一定的应用价值。

多聚甲醛对于细胞固定的主要机制是通过反应它与细胞壁上的有机物质。

多聚甲醛的预处理可以使其在常温下可以长时间保存。

不同的组织和细胞类型可能对多聚甲醛的反应有所不同。

在此研究中,我们将考察细胞固定在4%多聚甲醛中的时间对细胞形态和活性的影响。

在实验中,我们将使用细胞培养技术来培养人类肝癌细胞HepG2。

将细胞分配到预制的多聚甲醛溶液中,然后在不同时间间隔观察细胞的形态和生物学活性。

结果表明,在4%多聚甲醛中,细胞固定时间较短(1小时)可以有效固定细胞并保持其细胞形态。

长时间固定后(4小时以上),细胞形态发生了明显的改变,细胞外形变得圆滑,并且出现了一些空泡。

在长时间固定后,HepG2细胞的增殖速度降低,并出现部分细胞死亡。

结论是,在4%多聚甲醛中,短时间固定细胞可以有效保持其形态和活动性。

长时间固定后,会导致细胞形态的改变、增殖速度的减缓和部分细胞死亡。

在细胞固定的过程中,需要对固定时间进行控制并根据不同的细胞类型和实验需求进行调整。

1. 高效:多聚甲醛使固定后的细胞和组织具有较好的形态和细胞学特征,便于后续的观察和研究。

2. 稳定性好:多聚甲醛可以长期保存固定后的细胞和组织样本,而且不会破坏它们的形态和结构特征。

3. 易于操作:多聚甲醛的使用比较简单,只需要将其加入到固定样本中即可。

4. 适用性广:多聚甲醛具有广泛的适用性,可以用于固定细胞、组织、器官等不同类型的样本。

多聚甲醛也存在一些缺点。

使用多聚甲醛固定样本后,可能会与一些药物、抗体等相互干扰,影响后续的分析结果。

长时间的多聚甲醛固定可能会引起一些细胞死亡和组织失活等不良反应。

1. 固定时间:固定时间应根据细胞和组织类型进行调整,在不同实验条件下确定最佳固定时间。

多聚甲醛固定细胞原理

多聚甲醛固定细胞原理

多聚甲醛固定细胞原理
多聚甲醛是一种常用的固定细胞的化学试剂。

其原理是通过与细胞中的蛋白质进行共价交联,使细胞结构固化并防止细胞内的酶进行降解。

多聚甲醛在细胞固定过程中起到了保护细胞结构和维持细胞形态的作用。

在细胞固定过程中,多聚甲醛溶液与待固定的细胞接触后,多聚甲醛会与细胞内的蛋白质发生反应,形成一种稳定的化学键。

这些化学键会使蛋白质分子之间发生交联,进而固定住细胞的结构。

多聚甲醛固定细胞的过程中,需要注意固定时间的控制。

固定时间过长会导致细胞中的蛋白质严重交联,使得细胞结构丧失正常形态;而固定时间过短则可能无法充分固定细胞,并且会导致后续的细胞染色等实验结果不准确。

多聚甲醛固定的细胞可以用于多种实验,如免疫组化染色、原位杂交、细胞形态学观察等。

在这些实验中,固定后的细胞可以保持其形态结构、蛋白质分布和细胞器构成不变,使得后续实验结果更加准确和可靠。

总而言之,多聚甲醛固定细胞的原理是通过与细胞蛋白质发生共价交联,使得细胞结构固定并保持原始形态。

这种方法在细胞学研究和实验中具有广泛的应用价值。

4%多聚甲醛溶液使用说明

4%多聚甲醛溶液使用说明

4%多聚甲醛溶液使用说明
货号:P1110
规格:100ml/500ml
保存:2-8℃可保存3个月,长期储存可置于-20℃。

产品说明:
多聚甲醛(Paraformaldehyde)是免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)研究中最常用的固定剂之一。

该固定剂较为温和,能很好地保存组织的抗原性和细微结构,适于组织标本和细胞片的较长期保存,非常适合组织和细胞的光镜免疫化学研究。

本产品为4%多聚甲醛的PBS溶液,可直接用于组织和细胞固定。

若需使用其他低浓度多聚甲醛,可使用0.01M PBS按比例稀释。

使用说明:
组织固定:室温或4℃浸泡固定2-24h,用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。

切片固定:室温或4℃固定10min-2h,视切片厚度而定,用缓冲液漂洗后即可用于染色。

细胞固定:室温或4℃固定10-30min,用缓冲液漂洗后即可用于染色。

注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品不含防腐剂,不宜室温或4℃长期保存,请勿反复冻融。

相关试剂:
C1010柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L,pH6.0
C1050ELISA包被液
DA1010DAB显色试剂盒(20×)
G1120H-E染色试剂盒
P11128%多聚甲醛
P210010×多聚赖氨酸
P10100.01M PBS干粉,PH7.2-7.4
S2100抗荧光衰减封片剂
X10200.1%胰蛋白酶液消化液。

4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)使用说明书

4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)使用说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
1
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)可以用于免疫染色时细胞样品或组织切片的固定。

按照每个样品固定时需要1mL 固定液计算,一个包装的4%多聚甲醛固定液可以固定100个样品。

使用说明
对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入1mL 固定液的比例,加入4%多聚甲醛固定液。

对于其它样品,加入4%多聚甲醛固定液的量都以充分盖住样品为准。

通常室温固定10min 即可完成固定。

也可固定较长时间,例如4℃固定过夜。

温馨提示
多聚甲醛有刺激性气味,为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴口罩,戴手套等。

储存温度
建议分装后保存于-20℃。

包装清单
货号 品名 包装
HCY068 4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4) 100mL 说明书 1份。

4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)使用说明书

4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)使用说明书

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1
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)可以用于免疫染色时细胞样品或组织切片的固定。

按照每个样品固定时需要1mL 固定液计算,一个包装的4%多聚甲醛固定液可以固定100个样品。

使用说明
对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入1mL 固定液的比例,加入4%多聚甲醛固定液。

对于其它样品,加入4%多聚甲醛固定液的量都以充分盖住样品为准。

通常室温固定10min 即可完成固定。

也可固定较长时间,例如4℃固定过夜。

温馨提示
多聚甲醛有刺激性气味,为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴口罩,戴手套等。

储存温度
建议分装后保存于-20℃。

包装清单
货号 品名 包装
HCY068 4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4) 100mL 说明书 1份。

4%多聚甲醛固定组织的方法

4%多聚甲醛固定组织的方法

聚甲醛(也称为福尔马林)是一种用于固定组织样本的常见方法,以便后续的组织学研究。

以下是一种使用4%多聚甲醛进行组织固定的常规方法:准备4%多聚甲醛溶液:将100 mL的PBS(磷酸缓冲盐溶液)加入4 g多聚甲醛中,并搅拌混合,直到多聚甲醛完全溶解。

获取待固定的组织样本:准备好需要固定的组织样本,例如动物组织或细胞。

固定组织样本:将组织样本置于4%多聚甲醛溶液中,确保样本完全浸泡在溶液中。

通常,至少需要10倍于样本体积的溶液来确保充分固定。

固定时间:根据需要固定的样本的大小和特性,将其浸泡在4%多聚甲醛溶液中的时间可在30分钟至24小时之间。

冲洗样本:固定时间过后,将固定的组织样本取出并用PBS缓冲液进行冲洗,以去除多余的多聚甲醛。

后续处理:完成固定和冲洗后,可以将组织样本进行进一步的处理,如去水化、脱脂、包埋等,以便进行切片和染色等组织学研究。

请注意,这只是一种常用的方法,具体的固定条件可能因实验目的和样本特性而有所不同。

因此,在进行固定实验之前,建议参考相关文献或向专业人士寻求建议,以获得最佳的实验方案。

多聚甲醛固定液

多聚甲醛固定液

多聚甲醛固定液多聚甲醛固定液是一种含有多聚甲醛(PFA)的溶液,通常浓度为4%。

PFA是一种无色、无味、无毒的化合物,具有良好的固定性能。

在多聚甲醛固定液中,PFA可以与细胞膜和蛋白质发生共价交联反应,使细胞结构得以保持。

同时,多聚甲醛固定液还含有缓冲剂和防腐剂,可以在一定程度上延长其保存期限。

多聚甲醛固定液主要用于固定组织细胞,保护其形态结构和细胞器的完整性。

在生物医学领域,研究人员常常需要对组织样本进行染色或显微观察,而这些操作往往需要在细胞固定的基础上进行。

多聚甲醛固定液的使用可以有效地保护细胞结构,使得细胞在后续操作中不易受到破坏,从而得到更加准确和可靠的实验结果。

在组织学研究中,多聚甲醛固定液扮演着至关重要的角色。

首先,它可以固定组织样本中的细胞结构,使得细胞保持原有的形态和结构。

其次,多聚甲醛固定液还可以保护细胞膜和蛋白质,防止其在后续处理过程中发生变性或降解。

最后,多聚甲醛固定液还可以提高组织样本的透明度,有利于后续的显微观察和成像。

除了在组织学研究中的应用外,多聚甲醛固定液还可以用于其他领域。

例如,在医学诊断中,医生常常需要对组织样本进行病理学检查,以确定疾病的类型和程度。

多聚甲醛固定液的使用可以保护组织细胞的形态结构,使得医生可以更加准确地进行诊断。

此外,在生物工程领域,多聚甲醛固定液还可以用于细胞培养和细胞凋亡的研究中。

需要注意的是,多聚甲醛固定液虽然具有良好的固定性能,但在使用过程中仍需注意一些问题。

首先,多聚甲醛固定液具有一定的挥发性,使用时需在通风良好的环境下操作,以免对人体造成伤害。

其次,多聚甲醛固定液还具有一定的腐蚀性,使用时需佩戴防护手套和眼镜,以保护皮肤和眼睛不受损害。

综上所述,多聚甲醛固定液是一种常用的化学试剂,具有良好的固定性能和广泛的应用前景。

在生物医学领域的组织学研究中,多聚甲醛固定液可以有效地保护细胞结构,提高实验结果的准确性和可靠性。

随着科学技术的不断发展,相信多聚甲醛固定液在生物医学领域的应用将会更加广泛,为人类健康事业做出更大的贡献。

多聚甲醛溶液(4%)-多聚甲醛固定液

多聚甲醛溶液(4%)-多聚甲醛固定液

北京雷根生物技术有限公司
4%多聚甲醛溶液/多聚甲醛固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。

固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。

Leagene 多聚甲醛溶液(4% PFA)主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成,pH 为7.4,该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定。

4%多聚甲醛溶液是免疫组织化学和培养细胞固定中最常用的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。

2、 一般组织固定时间控制在4~12h ,大标本应适当延长固定时间。

3、 培养细胞核细胞爬片固定时间控制在10~15min ,特殊情况除外。

注意事项:
1、 Leagene 多聚甲醛溶液(4% PFA)有一定刺激性和腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作, 避免吸入。

2、 一经开启,尽快用完,储存过久的液体固定效果易下降。

3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。

4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。

5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

编号 名称 DF0135 DF0135 DF0135 Storage 多聚甲醛溶液(4% PFA) 100ml 500ml 5L RT 使用说明书 1份。

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4%多聚甲醛固定微生物样品的原理
标本中大多数神经激素、肽类物质,以及蛋白质为水溶性,在用于研究之前,常需固定, 即使其凝固以降低其水溶性。

甲醛能与蛋白质的氨基反应,使蛋白质凝固,因此在医药上可做为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。

在固定剂中,最常用的是多聚甲醛。

常用固定液:固定剂品种很多,但大多属于醛类和醇类。

其固定原理不同,各有优缺点。

醛类(常用甲醛、戊二醛和多聚甲醛)
醇类(常用乙醇)
其它(丙酮)
(1) 醛类
甲醛(福尔马林)应用最广
原理:形成分子间的交联,影响蛋白构型而使之固定。

优点:形态结构保存好,且穿透性强,组织收缩少。

缺点:
甲醛放置过久可氧化为甲酸,使溶液pH降低,影响染色;
醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍;
分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露。

可造成假阴性的染色结果。

注意事项:
缩短固定时间,降低固定温度(4°C),为此组织块不宜过厚。

改用中性缓冲福尔马林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸盐缓冲液配制成10%甲醛固定液,减少固定液pH的变化。

固定后充分水洗以减少分子间交联。

切片在作免疫组化染色前,先经预处理使抗原再现(抗原修复)。

戊二醛:
穿透性强,微细结构保存好,但对抗原有一定影响,常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。

多聚甲醛(常用4%):
可用于免疫电镜;也可用于免疫荧光染色。

主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原,例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等。

(2) 醇类
最常用的醇类固定剂是乙醇。

其固定作用:使细胞内蛋白、糖类发生沉淀。

优点:穿透性强、抗原性保存好。

缺点:
脱水性强,易引起组织收缩、变硬,影响切片质量,因而乙醇固定时间不宜过长(2h内)。

乙醇使蛋白变性的作用轻,固定后可再溶解;染色过程中,温育时间长,抗原可流失而减弱反应强度
3) 其它固定剂
丙酮:
对抗原性的保存好,但脱水性更强,较少用于组织标本,但细胞爬片常用丙酮固定。

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