理化微生物检验记录
食品理化检验样品的采集、收样与检验
食品理化检验样品的采集、收样与检验食品卫生微生物检验样品的采集和处理 (1)生活饮用水水样的采集、收样与检验 (3)食品理化检验样品的采集、收样与检验 (6)食品卫生微生物检验样品的采集和处理一、范围适用于各类食品样品的采样。
二、采样用品灭菌探子、铲子、匙、采样器、试管、吸管、广口瓶、剪子、开罐器等。
三、样品的采集在食品检验中，所采集的样品必须有代表性。
食品中因其加工批号、原料情况（来源、种类、地区、季节等）、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节（例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备）及销售人员的责任心和卫生认识水平等均可影响食品卫生质量，因此必须考虑周密。
1、采样数量每批样品要在容器的不同部位采取，一般定型包装食品采取一袋/瓶（不少于250g）及散装食品采取250g.2、采样方法(1) 采样必须在无菌操作下进行。
(2) 根据样品种类，袋装、瓶装和罐装食品，应采完整的未开封的样品。
如果样品很大，则需要无菌采样器取样；固体粉末样品，应边取边混合；液体样品通过振摇混匀；冷冻食品应保持冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存），非冷冻食品需在1℃～5℃中保存。
3、采样标签采样前或后应贴上标签，每件样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等)。
四、送检样品送到微生物检验室应越快越好。
如果路途遥远，可将不需冷冻样品保持在1℃～5℃环境中(如冰壶)。
如需保持冷冻状态，则需保存在泡沫塑料隔热箱内（箱内有干冰可维持在0℃以下）。
送检时，必须认真填写申请单，以供检验人员参考。
五、检验微生物检验室接到送检申请单，应立即登记，填写实验序号，并按检验要求，立即将样品放在冰箱或冰盒中，积极准备条件进行检验。
各食品微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。
一般阳性样品，发出报告后3d(特殊情况适当延长)，方能处理样品。
进口食品的阳性样品，需保存6个月，方能处理。
阴性样品可及时处理。
检验完后，检验人员应及时填写原始记录，签名后，送质控办出具检验报告。
取样记录
2米(个)日时分；7米(个)日时分；
3米(个)日时分；8米(个)日时分；
4米(个)日时分；9米(个)日时分；
5米(个)日时分；10米(个)日时分；
取样结束
混合样品，封装，并做好标记(品名，规格、批号、取样日期等)口；
每件复原方式：
原件复原口加密封措施口；
是否粘贴取证：
取样数量
全检量米口个口实取量米口个口
请检单号
样品类别
内包材口
检验项目
理化检验口微生物检验口无菌检验口
检验依据
取样依据
取样准备要求
盛样容器
洁净自封袋口
处理
方式
清洗口不清洗口
取样工具：
剪刀口直尺口
灭菌方法
紫外灯灭菌口
取样环境
一般区口层流罩口洁净取样区口
指令人
指令时间
年月日
记录
盛样容器
洁净自封袋口
处理时间：年月日
文件名称
外包材取样记录
编码
版本号
第二版
页数
1/1
实施日期
年月日
制订人
审核人
批准人
文件状态
制定日期
年月日
批准日期
年月日
制定部门
质管部
分发部门
外包材取样记录
指令
品名
批号
数量
口个口张口枚
取样数量
实取量口个口张口枚
请检单号
样品类别
内包材口外包材口
检验项目
理化检验口微生物检验口无菌检验口
检验依据
取样依据
取样准备要求
处理时间：年月日
处理人
取样工具
取样吸液管口不锈钢勺口
原辅料取样规程
文件内容：1．目的 (2)2．范围 (2)3．职责 (2)4．程序 (2)5．记录 (4)6．附件 (4)7．变更历史 (4)颁发部门：质保部分发部门及数量：质保部（办公室-01、化验室-02）共2份。
1．目的本程序的制订是为了原辅料取样的规范化。
2．范围本程序适用于中药材、原辅料在进厂检验、贮存期内复检、化验室重新取样复检的的取样。
3．职责3.1 质保部负责统筹安排取样工作。
3.2经授权的取样人员执行取样操作。
3.3仓库物料管理员协助取样工作。
4．程序4.1 取样前准备进厂检验、贮存期内复检由仓库物料管理员开具《收货及请检单》；常规取样外的取样，需样部门填写《增补取样申请单》（见附录E）报质保部经理批准，必须说明增补取样原因。
质保部取样员收到《收货及请检单》或经批准的《增补取样申请单》后做好以下准备工作。
4.1.1 制定取样方案，确定所需样本数和样品量。
4.1.1.1药材的取样样本、取样量计算原则：（n为包件数）n≤5：逐件取样。
n为6～100：取5件。
n为101～1000：按5%取样。
n＞1000：超过部分按1%取样。
4.1.1.2 原料：取样样本数（N）的计算原则如下（n为来料包件数）：n≤3：逐件取样（N=n）。
n为4～300：抽取n＋1件（N=n＋1）。
n >300：抽取n/2＋1件（N=n/2＋1）。
4.1.1.3 辅料。
a) 一般辅料：取样样本数（N）的计算原则如下（n来料为包件数）：n≤3：逐件取样（N=n）。
n为4～300：抽取n＋1件（N=n＋1）。
n >300：抽取n/2＋1件（N=n/2＋1）。
b) 大批量小包装的辅料（如瓶装乙醇、盐酸、氢氧化钠）：取样样本数（N）的计算原则如下（n来料为包件数）：n≤5：逐件取样（N=n）n＞5：抽取5件（N=5）如一次全检量的3倍不足5个最小包装量的取5个最小包装。
4.1.1.4质保部根据质量标准、检验方法制定原辅料取样量（见附件1），取样量通常为全检所需总量的2～3倍；取样员根据检验及留样的需求计算取样总量。
微生物限度检查法标准操作规程完整
3、计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性检查 供试品微生物计数中 所使用的培养基应进行适用性检查。供试品的微生物计数方法应进行方法适用性 试验，以确定采用的方法适合于该产品的微生物计数。
4、菌种及菌液的制备
试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0袋），并采用适宜的菌种保藏技术进行保藏。计数培养基适用性检查和计数方法 适用性试验。
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)[CMCC(B) 10104]
大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC(B) 44102])
乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)[CMCC(B) 50094]
白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F) 98001]
薄膜过滤法采用的滤膜孔径不大于。滤膜直径一般为50mm。滤器及滤膜使用 前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。水溶性供 试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。为发挥滤膜的最大过滤效率，应 注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要 用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量不超过100ml，总冲洗量不得超过1000m1；以免滤膜上的微生物受损伤。取照上述“供试液的制备”和“接种和 稀释”制备的供试液适量（一般取相当于1g、1ml、10cm2的供试品，若供试品 中所含菌数校对，供试液可酌情减量），加至适量的稀释液总，混匀，过滤，用 适量的冲洗液冲洗滤膜。测定需氧菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于胰酪大豆胨 琼脂培养基平板上；测定霉菌和酵母菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于沙氏葡萄糖 琼脂培养基平板上，按规定条件培养、技术。每株试验菌每种培养基至少制备1张滤膜。同法测定供试品对照组和菌液对照组菌数。
食品中微生物的检测-金黄色葡萄球菌检验
免疫学方法
抗原制备
从金黄色葡萄球菌中提取特异性抗原，制备 成免疫原。
抗体制备
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过凝集 反应、沉淀反应等方法检测样品中的金黄色
葡萄球菌。
抗原抗体反应
将免疫原注射到动物体内，刺激机体产生特 异性抗体。
结果判定
根据反应结果判断样品中是否含有金黄色葡 萄球菌。
分子生物学方法
食品中微生物的检测-金黄 色葡萄球菌检验
目录
• 引言 • 金黄色葡萄球菌概述 • 样品采集与处理 • 微生物学检测方法 • 理化检测方法 • 结果分析与报告 • 质量控制与实验室安全
01
引言
目的和背景
保障食品安全
金黄色葡萄球菌是一种常见的食品污染源，可引起食物中毒，对公众健康构成威胁。因此，检测食品中的金黄 色葡萄球菌对于保障食品安全具有重要意义。
适量性
根据检测方法和目的，采 集适量样品，以满足检测 需求。
样品保存与运
低温保存
样品应尽快放入低温环境 （如4℃冰箱）中保存，以 减缓微生物的生长速度。
避免反复冻融
尽量避免样品在保存过程 中反复冻融，以免影响微 生物的存活和检测结果的 准确性。
快速运输
样品在运输过程中应保持 低温，并尽快送达实验室 进行检测。
04
微生物学检测方法
传统培养法
增菌培养
将液体样品接种到选择性增菌液 中，于适宜温度下培养一定时间 ，使金黄色葡萄球菌得以增殖。
鉴定
通过观察菌落形态、革兰氏染色 、血浆凝固酶试验等生化特征进 行鉴定。
01
02
样品处理
取适量食品样品，进行均质化处 理，得到均匀一致的液体样品。
03
04
微生物检验室理化检验室设计方案
1、微生物检验一、微生物实验室概况食品微生物实验室主要负责各类微生物项目的检测,主要检测项目有菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、双歧杆菌、罐头商业无菌、致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等)。
微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室与普通实验室六部分组成。
这些房间的共同特点就是地板与墙壁的质地光滑坚硬,仪器与设备的陈设简洁,便于打扫卫生。
二、微生物实验室功能分区(一)准备室准备室用于配制培养基与样品处理等。
室内设有试剂柜、存放器具或材料的专柜、实验台、电炉、冰箱与上下水道、电源等。
(二)洗涤室洗涤室用于洗刷器皿等。
由于使用过的器皿已被微生物污染,有时还会存在病原微生物。
因此,在条件允许的情况下,最好设置洗涤室。
室内应备有加热器、蒸锅,洗刷器皿用的盆、桶等,还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
(三)灭菌室灭菌室主要用于培养基的灭菌与各种器具的灭菌,室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备及设施。
(四)无菌室无菌室一般为4 - 5 平方米、高 2、5 米的独立小房间(与外间隔离),专辟于微生物实验室内。
无菌室也称接种室,就是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。
在微生物工作中,菌种的接种移植就是一项主要操作,这项操作的特点就就是要保证菌种纯种,防止杂菌的污染。
在一般环境的空气中,由于存在许多尘埃与杂菌,很易造成污染,对接种工作干扰很大。
1、无菌室的设置无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。
其基本要求有以下几点:(1)无菌室应有内、外两间,内间就是无菌室,外间就是缓冲室。
房间容积不宜过大,以便于空气灭菌。
最小内间面积2×2、5＝5m2,外间面积1×2＝2m2,高以2、5m以下为宜,都应有天花板。
(2)内间应当设拉门,以减少空气的波动,门应设在离工作台最远的位置上;外间的门最好也用拉门,要设在距内间最远的位置上。
(3)在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上,应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。
微生物限度检验操作规程
2021版微生物限度检验操作规程目的建立微生物限度检查操作规程，标准操作，保证结果的准确性。
范围成品、辅料、内包装袋及纯化水的检验。
内容概述：本检验操作规程依据中国药典2021年版四部?通那么1105 非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法?和?通那么1106 非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法?进行检查。
微生物计数法一、计数方法1．微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。
2、计数方法本法包括平皿法、薄膜过滤法。
3、计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性检查供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。
供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确定采用的方法适合于该产品的微生物计数。
4、菌种及菌液的制备4.1试验用菌株的传代次数不得超过5代〔从菌种保藏中心获得的枯燥菌种为第0袋〕，并采用适宜的菌种保藏技术进行保藏。
计数培养基适用性检查和计数方法适用性试验见表1。
4.2菌液制备按表1规定培养各试验菌株。
取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物参加3-5ml含0.05%〔ml/ml〕聚山梨酯80的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。
采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管中，用含0.05%〔ml/ml〕聚山梨酯80的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。
菌液制备后假设在室温下放置，应在2小时内使用；假设保存在2-8℃，可在24小时内使用。
黑曲霉孢子悬液可保存在2-8℃，在验证过的贮存期内使用。
表1 试验菌液的制备和使用4.3阴性对照为确认试验条件是否符合要求，应进行对照试验，阴性对照试验应无菌生长。
4.4培养基适用性检查按照表1规定，接种不大于100cfu的菌液至胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基平板或沙氏葡萄糖琼脂培养基平板，置规定的条件下培养。
《食品理化检验技术》课程标准
食品理化检验技术》课程标准课程名称：食品理化检验技术课程类型：专业核心类适用专业：食品营养与检测课程学分：8 总学时：1441 课程定位食品理化检验技术是食品营养与检测专业的一门工学结合专业核心课程。
根据食品和农产品加工业发展的趋势及我国食品安全的现状，在充分进行专业调研的基础上，我院食品营养与检测专业以培养食品检验与质量安全控制技术人才为办学目标，主要为广东省食品及农产品加工企业培养食品检验与质量控制技术骨干，学生毕业后主要在食品检验与质量控制岗位上工作。
食品检验技术（包括感官检验、理化检验、微生物检验）属于产品质量控制范畴内的专门技术，在企业实际生产中具有十分重要的作用，它贯穿于食品产品研发、原料供应、生产和销售的全过程，是食品质量控制与安全保证不可缺少的手段。
食品理化检验技术是依据食品相关标准，运用分析的手段，对各类食品（包括原料、辅料、半成品、成品及包装材料）的成分和含量进行检测，进而评定食品品质及其变化的一门实验学科。
理化检验是企业检验岗位工作的主要内容，也是食品检验职业技能鉴定的核心部分。
所以食品理化检验技术课程是专业课程体系中的核心课程，是一门技术性、应用性、实践性很强的课程。
本课程的建设与改革对学生职业能力的培养、职业素养的养成和专业的发展起主要支撑作用。
本课程是学生在完成分析化学、生物化学、食品营养与卫生等课程的学习后再进行学习，并通过食品检验校内生产实训、顶岗实习等后续课程的强化，使学生可以逐步获得独立进行食品理化检验的工作能力，具有严谨求实的科学态度，增强食品食品质量安全的意识，提高自主学习、获取信息、团结协作、拓展创新等综合能力。
2 课程目标本课程以“培养学生熟练掌握现代食品理化检验技术，熟悉食品相关标准，具有高水平的食品检验技能和良好的职业素养”为教学目标。
2.1 能力目标2.1.1 培养学生具有制定检验方案的能力：能根据不同的分析对象和检验目的，选择合适的分析方法，确定合理的检验方案。
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检测日期订单号/混装号检测日期订单号/混装号抽样日期检测依据
抽样日期检测依据
项目
标准
结果
备注
项目
标准
结果
备注
恶性杂质恶性杂质外包装外包装色泽色泽
组织状态组织状态气味滋味
气味滋味JL(HV-QA-04)01JL(HV-QA-04)01
无结块等正常
注：1、产品批检；2、报告编号规则为“订单号/LH 日期－流水号”。
检验： 审核：
注：1、产品批检；2、报告编号规则为“订单号/LH 日期－流水号”。
检验： 审核：
无玻片/石/金属/害虫清洁无污染符合标样
编号：
记录
无结块等正常
无玻片/石/金属/害虫记录
二、感官二、感官
清洁无污染符合标样理化检验记录
编号：
理化检验记录。