白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究

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黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ对银屑病模型豚鼠的实验研究

黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ对银屑病模型豚鼠的实验研究

黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ对银屑病模型豚鼠的实验研究李廷保【摘要】目的:探讨黄药子软膏Ⅰ、黄药子软膏Ⅱ对银屑病模型豚鼠的治疗效果.方法:将36只豚鼠随机分为6组,用10%心得安软膏外涂复制银屑病豚鼠模型,以黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ,雷红软膏外涂治疗,两周后,观察豚鼠耳部银屑病样病理改变及炎症细胞浸润情况,根据Baker评分和炎症细胞浸润数目,然后进行统计分析.结果:黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ组与模型组组间的组织学积分、炎症细胞浸润数比较有差异显著性(P<0.05),说明黄药子软膏组、雷红软膏组均有治疗效果,同时也说明黄药子软膏对豚鼠耳部的银屑病样病理改变和炎症具有抑制作用.结论:黄药子软膏外用对银屑病模型豚鼠有较好的治疗作用.【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2010(038)004【总页数】2页(P38-39)【关键词】银屑病模型豚鼠;黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ;实验研究【作者】李廷保【作者单位】甘肃中医学院中医系中医外科教研室,甘肃,兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】R758.63银屑病是一种慢性易复发的红斑鳞屑性皮肤病。

主要症状是患者的皮损部位出现红色的丘疹和斑片,其表面覆盖多层的银白色鳞屑,反复发作,较难治愈。

现代医学认为皮损有病理改变及炎症细胞浸润现象。

因此通过查阅大量医学文献,检索到黄药子可能有治疗银屑病的功效,但黄药子制成软膏外用治疗银屑病的报道甚少。

因而立此实验以豚鼠为研究对象,依据黄畋[1]心得安所致实验性豚鼠银屑病的模型实验:将实验豚鼠以10%心得安软膏涂右耳壳,1cm2/次,连续14天,复制银屑病豚鼠模型。

参照刘利红[2]自制消银油(紫草、苦参、白鲜皮、黄柏各30g,地榆、红花、白芷、乌梢蛇各30g,蜈蚣1条,上药入1000mL芝麻油中浸泡1日,以文火煎至药物枯黄(4层纱布过滤而成)的方法,配制成黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ,分别外用治疗豚鼠耳背部银屑病样改变,以评价黄药子软膏Ⅰ、Ⅱ外用的抗炎、抗增殖效应,旨在为中医药治疗银屑病探索出较好的外用治疗药物,为临床提供参考资料和技术支持来探讨黄药子外用治疗银屑病的疗效及作用机制。

正交实验法优选白疕消软膏中的药材提取工艺

正交实验法优选白疕消软膏中的药材提取工艺

正交实验法优选白疕消软膏中的药材提取工艺【摘要】目的优选白疕消软膏中的药材提取工艺。

方法以银屑病小鼠模型实验结果为指标,采用L9〔34〕正交实验法,对其关键步骤如加水量、煎煮时间、煎煮次数、醇沉时加醇量等条件进行优眩结果煎煮次数对小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层生成有显著性影响〔P<0.05〕。

结论最正确工艺为加药材量8倍的水煎煮3次,1.5h/次,浓缩液加等量乙醇使沉淀。

【关键词】白疕消软膏正交实验银屑病小鼠模型提取工艺白疕消软膏为中药外用制剂,具有清热解毒、活血化淤、疏风通络成效,用于白疕血热、血淤证〔寻常性银屑病〕。

其中的大黄等药材是通过银屑病抗体搭桥角朊/单一核白细胞粘连实验筛选出的抗银屑病中草药,因在进行抗银屑病中草药试验筛选时各实验药液的制备均采用的是水提醇沉法,故本制剂中对大黄等药材提取也采用同一方法。

本文小鼠银屑病模型实验结果为指标,对影响水提醇沉的主要因素如加水量、煎煮时间、煎煮次数、醇沉时加醇量,进行正交实验优选,为合理筛选大黄等药材的提取工艺提供科学依据。

1仪器与试药显微镜〔日本奥林巴斯BX51,带JV摄像头及图像采集处理系统〕。

哈西奈德溶液〔唐山集川药业利康制药生产,批号050501〕,0.9%氯化钠注射液〔生理盐水,武汉滨湖双鹤药业有限责任公司生产,250l/瓶,批号060113306〕。

2方法与结果2.1正交实验设计以影响提取的几个主要因素如煎煮时间、煎煮次数、加水量、醇沉时加醇量为考察因素,每个因素设立3个水平,因素水平安排见表1表1因素水平2.2样品的制备按5倍处方量称取大黄等药材,共9份,分别按表2的实验条件煎煮,过滤,减压浓缩至适量,加乙醇使沉淀,过滤,滤液减压回收乙醇,调整全量至每毫升相当于生药2g,即得。

表2正交实验结果与分析2.3银屑病小鼠模型实验[1~5]〔27.2±2.7〕g,普通级,由湖北省实验动物中心提供。

〔约0.5l〕,2次/d,连续15d,次日处死小鼠,取距离根部约0.5~1.5处尾部皮肤,10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,HE染色,在光学显微镜下观察每个小鼠的尾部鳞片〔见图1〕。

消银1号对5%普萘洛尔诱导的豚鼠银屑病样模型的病理改变及IL-17A、IL-18的影响

消银1号对5%普萘洛尔诱导的豚鼠银屑病样模型的病理改变及IL-17A、IL-18的影响

消银1号对5%普萘洛尔诱导的豚鼠银屑病样模型的病理改变及IL-17A、IL-18的影响李钦;刘海刚;祁燕;叶建州【摘要】目的探讨消银1号治疗银屑病的机制.方法使用5%普萘洛尔乳膏外涂豚鼠耳部皮肤,复制银屑病样动物模型,48只豚鼠随机分为消银1号低、中、高剂量组,消银颗粒组,模型组,空白组,按照既定药量进行灌胃.分别观察复制模型1、2、3周及治疗2周后豚鼠的一般情况及双耳病理切片Baker法评分及炎症细胞计数,检测各组豚鼠耳组织中IL-17A、IL-18表达情况.结果消银1号能改善豚鼠银屑病样模型的精神状态、饮食等一般情况及红肿、鳞屑等类银屑病样外观;能降低病变组织Baker评分及炎症细胞计数,其高、中剂量与消银颗粒组相比有统计学意义(P<0.05).消银1号能降低豚鼠银屑病样模型局部皮损中IL-17A、IL-18的表达,其高、中剂量与消银颗粒组相比有统计学意义(P<0.05).结论消银1号能降低普萘洛尔诱导的豚鼠银屑病样模型的组织中IL-17A、IL-18的表达水平.通过降低细胞因子IL-17A、IL-18的表达来调节Th17及Th1细胞的免疫应答,可能是消银1号治疗寻常型银屑病作用机理之一.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2015(036)009【总页数】4页(P49-52)【关键词】银屑病;消银1号;豚鼠银屑病模型;病理改变;IL-17A;IL-18【作者】李钦;刘海刚;祁燕;叶建州【作者单位】云南中医学院,云南昆明650011;云南中医学院,云南昆明650011;云南省中医医院,云南昆明650021;云南省中医医院,云南昆明650021【正文语种】中文【中图分类】R285.5中医将银屑病(psoriasis)称之为“干癣、白壳疮、风癣、白疕”等,是一种临床常见的慢性炎症性和增殖性皮肤病。

银屑病的发病机制尚未明确。

中国传统医学对银屑病的认识及治疗经验极为丰富,近年来主要是从血热、血燥、血瘀等几个方面进行辨证论治,中医具有治疗方法多样、用药灵活、毒副作用小、疗效显著、禁忌症少、复发率低等特点。

中药白疕合剂治疗银屑病作用机制实验研究

中药白疕合剂治疗银屑病作用机制实验研究

中药白疕合剂治疗银屑病作用机制实验研究陈洪艳;李忻红【摘要】目的观察中药白疕合剂对银屑病小鼠T淋巴细胞凋亡及阴道上皮角质形成细胞增殖核抗原表达的影响,并探讨其可能的机制.方法 72只银屑病模型小鼠随机分为6组,连续用药灌胃4周后,透射电镜下观察各组小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡情况,SP免疫组化法(链霉卵白素-过氧化物酶连结法)检测各组小鼠细胞增殖核抗原PCNA的情况.结果 (1)造模后小鼠与空白对照组比较,自疕合剂高中低组均出现凋亡小体,消银颗粒见少量凋亡小体;(2)与空白对照组比较,白疕合剂高中低组模型均着色深,消银颗粒组着色较深.结论白疕合剂可通过诱导T淋巴细胞凋亡,抑制人角质形成细胞(KC)细胞增殖核抗原PCNA的作用机制发挥其治疗银屑病的作用.%Objective To observe the influence of herbal white mange mixture on mice psoriasis T fine apoptosis and vaginal epithelium keratinocyte proliferating nuclear antigen, and to explore its possible mechanism. Methods 72 psoriasis model mice were randomly divided into six groups, continuous intragastric administration after four weeks, under transmission electron microscope to observed the mice spleen T lymphocyte apoptosis situation, use SP immunohistochemical method (chain mildew avidin a peroxide enzyme link method) to detected the mice proliferation cell nuclear antigen PCNA situation. Results (l)The model group compared to the normal group, the apoptosis bodies in white mange mixture group were much more than Xiaoyinkeli group. (2) The model group compared to the normal group, white mange mixture group had a strong color, while the Xiaoyinkeli group had a light color. Conclusion White mange mixturecan induce T cell increasing apoptosis, inhibiting KC cell proliferation nucleus antigen PCNA , thereby it play a role in psoriasis treatment.【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2013(012)001【总页数】3页(P28-30)【关键词】银屑病,小鼠;白疕合剂;T细胞;凋亡;角质形成细胞;增殖核抗原【作者】陈洪艳;李忻红【作者单位】辽宁中医药大学附属医院,沈阳110032【正文语种】中文【中图分类】R758.63银屑病,中医称之为“白疕”,属于多基因遗传的疾病,可由多种激发因素诱发。

中药白疕合剂对实验性银屑病小鼠模型的影响

中药白疕合剂对实验性银屑病小鼠模型的影响

中药白疕合剂对实验性银屑病小鼠模型的影响郑海燕;李忻红【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2012(11)3【摘要】Objective To investigate the mechanism of White Mange medicine mixture on the mice models of psoriasis, and to observe its effects on mitosis index and serum chemokine IL-8. Methods 50 mice models of psoriasis were divided into five groups randomly. After four weeks medication gavage consecutively, the effect of White Mange mixture on mitosis exponential of vaginal epithelial cells was measured by HE staining, the production of IL-8 was detected by enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA), and 10 healthy mice were tested as controls. Results White Mange mixture could significantly inhibiting the vaginal epithelial mitosis of mice models of psoriasis, decreasing the expression of serum IL-8, (compared with control group, P<0.01). Conclusion White Mange mixture plays a role in the treatment of psoriasis, and it may via the inhibition of vaginal epithelial mitosis and the decreasing of serum IL-8,%目的观察中药白疕合剂对银屑病模型小鼠阴道上皮细胞有丝分裂及白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)产生的影响,并探讨其作用机制.方法将50只实验性银屑病模型小鼠随机分为5组,连续用药灌胃4周后,采用小鼠阴道组织HE染色法观察白疕合剂对上皮细胞有丝分裂指数的影响,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测各组小鼠血清中IL-8的水平,并与10只正常小鼠作对比.结果白疕合剂能显著抑制银屑病小鼠模型阴道上皮有丝分裂,降低血清中IL-8的产生(与对照组比较,P<0.01).结论白疕合剂可能通过抑制上皮细胞有丝分裂,降低血清IL-8的产生发挥治疗银屑病的作用.【总页数】3页(P149-151)【作者】郑海燕;李忻红【作者单位】辽宁中医药大学,大连116600;辽宁中医药大学附属医院,沈阳110032【正文语种】中文【中图分类】R758.63【相关文献】1.中药白疕合剂对银屑病样动物模型影响的实验研究 [J], 卢益萍;李忻红;马贤德;董灵玉2.白疕合剂、中药药浴联合NB-UVB治疗寻常型银屑病的临床观察 [J], 侯明;于萍3.中药白疕合剂治疗银屑病湿热证型临床应用体会 [J], 郭靓4.中药白疕合剂治疗银屑病作用机制实验研究 [J], 陈洪艳;李忻红5.中药白疕合剂对豚鼠银屑病模型T细胞活化调节作用的实验研究 [J], 原庆慧;李忻红因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

银屑病动物模型的研究进展

银屑病动物模型的研究进展

银屑病动物模型的研究进展杨素清;李东东;闫景东【期刊名称】《长春中医药大学学报》【年(卷),期】2017(33)6【摘要】总结当前银屑病动物模型,以及分析其各自原理、特点、优势和局限性发现:自发性突变鼠模型在研究中极少使用;生物医学型动物模型广泛应用于药物疗效评价;药物诱发性动物模型适宜在普通实验室推广应用;基因工程动物模型适合有条件的工作者选用;复合动物模型有利于研究银屑病发病机制的复合机制;异体移植动物模型因客观条件限制了推广应用;中医特定证型银屑病动物模型为中医工作者的研究提供了理想的模型.银屑病动物模型种类较多,但各自特点突出,因此研究者需要根据研究目的恰当选取实验模型.%Psoriasis is a chronic recurrent inflammatory dermatosis involved in genetic, immune, infection and other factorse, which etiology and pathogenesis is not yet fully clear. In clinical studies, animal models are widely used.Through reviewing the related papers and summarizing the current psoriasis animal models with analyzing their respective principles, characteristics, advantages and limitations, we get the conclusion that spontaneous mutant rat models are rarely used in research; biomedical animal models are widely used in the evaluation of drug efficacy;drug-induced animal models are suitable for general laboratories; genetic engineering animal models are suitable for conditional workers. Allogeneic animal model is limited by the objective conditions to promote the application;TCM syndrome type psoriasis-likeanimal model is suitable for the study of Chinese medicine workers. Therefore researchers need to properly select the experimental model according to the purpose of their study and characteristics of animal models.【总页数】4页(P1029-1032)【作者】杨素清;李东东;闫景东【作者单位】黑龙江中医药大学附属第一医院皮肤科,哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学研究生学院,哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学附属第一医院皮肤科,哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】R275.9【相关文献】1.银屑病免疫学发病机制及相关转基因动物模型研究进展 [J], 丁薇;马丽俐2.银屑病动物模型研究进展 [J], 杨建强;李伟;郑敏3.银屑病转基因动物模型研究进展 [J], 王娅;朱健平;赖奇伟4.银屑病的动物模型与细胞模型研究进展 [J], 彭玲玲;延祝;夏育民5.银屑病的动物模型研究进展 [J], 赵香花;黄矛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹模型皮损及组织形态学的影响

止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹模型皮损及组织形态学的影响

止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹模型皮损及组织形态学的影响隆红艳;吴柳;朱维娜;张亚杰;阮杰;周芙琼【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2016(038)010【摘要】目的观察止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹的抑制作用.方法采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)建立豚鼠变应性接触性湿疹模型,以青鹏软膏为阳性对照,以基质乳膏为阴性对照,评价止痒乳膏对模型动物皮损及组织形态学改变的影响.结果经治疗两周,与模型组比,止痒乳膏大、中、小剂量组皮损症状评分及(病理组织学检查)炎性细胞计数明显降低,各治疗组的疗效指数均大于40%.与模型组比,止痒乳膏各组右耳肿胀值显著降低,且大剂量组与青鹏软膏组比较有显著性差异;病理组织学检查显示,止痒乳膏各组可不同程度使表皮完整性及角质松解程度减轻、真皮层炎性细胞浸润减少.止痒乳膏对以上各指标均显示出良好的量效关系,随剂量增加作用增强.结论止痒乳膏对豚鼠变应性接触性湿疹具有明显抑制作用,其疗效主要表现为抗炎、抗变态反应及减轻皮损.【总页数】4页(P2256-2259)【作者】隆红艳;吴柳;朱维娜;张亚杰;阮杰;周芙琼【作者单位】南京市中医院,江苏南京210001;南京中医药大学,江苏南京210001;南京市中医院,江苏南京210001;南京市中医院,江苏南京210001;南京市中医院,江苏南京210001;南京市中医院,江苏南京210001【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.荆防止痒颗粒对豚鼠亚急性接触性湿疹的影响 [J], 杜铁良;赵自明;陈玉兴;曾晓会;黄雪君2.普鲁卡因对豚鼠接触性湿疹模型的影响 [J], 张汝芝;金慧玲;余其斌;高玉祥3.胫腓骨开放骨折外固定架术后局部变应性接触性湿疹1例 [J], 杨兵;陈谷才;朱兴建4.凉血祛湿止痒汤对小鼠急性湿疹模型皮损疗效研究 [J], 孙占学;王京军;余青5.肤悦康洗剂对豚鼠急性湿疹模型皮损的病理学影响 [J], 张玲;林素财;郑永平;王海棠因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

改良型银屑病小鼠模型的建立

改良型银屑病小鼠模型的建立

改良型银屑病小鼠模型的建立银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病,临床特征为皮肤表面出现红色斑块,并伴有痛痒、脱屑等症状。

目前已经建立了多种银屑病小鼠模型,但由于模拟程度不高、疾病发展过程较长等问题,仍然需要对现有模型进行改良。

为了建立一种更逼近银屑病病理过程的小鼠模型,可以从以下几个方面进行改良:1. 小鼠品系的选择:银屑病往往与免疫调节失衡有关,因此可以选择易受到免疫调节影响的小鼠品系作为模型动物,如IL-23引发的Th17细胞增多和炎症反应所致的小鼠模型。

还可以选择易感银屑病的小鼠品系,如SKG小鼠等。

2. 免疫刺激的方式:可以采用免疫刺激来诱导银屑病小鼠模型的建立。

传统的方法是使用新陈代谢失调剂量较大的制剂,如鱼雷致红毛细胞素(IMQ),通过外用或注射途径刺激小鼠免疫系统,从而诱导出银屑病样的炎症反应。

改良可以在使用免疫刺激前加入药物预处理,以提高模型的稳定性和可重复性。

3. 病变评估指标的选择:银屑病的病理特征包括表皮层的过度增殖、炎症反应等,因此可以选择适当的指标来评估模型的建立情况。

可以通过采集小鼠皮肤组织进行病理学检查,观察表皮层的增厚和角质层的增加情况;还可以通过ELISA或免疫组织化学等方法检测炎症因子的水平变化。

4. 干预治疗的应用:借鉴临床上的治疗方法,可以在模拟银屑病小鼠模型的建立同时进行干预治疗的应用。

可以给予免疫抑制剂、免疫调节剂或局部使用光疗、激光治疗等干预措施,观察其对病理过程的影响,从而更好地模拟临床治疗策略。

改良型银屑病小鼠模型的建立可以通过精确选择小鼠品系、优化免疫刺激的方式、选择合适的病变评估指标以及引入临床治疗干预等手段进行。

这样可以更好地模拟银屑病的病理过程,为研究银屑病的发病机制和药物治疗提供更有效的实验基础。

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白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究杨川1陈明岭1陶春蓉2(1.成都中医药大学,四川成都610075;2.成都市第二人民医院,四川成都610061)摘要:目的:探讨白疕软膏治疗银屑病的药效及作用机理。

方法:采用5%心得安乳剂建立豚鼠银屑病样模型,观察白疕软膏对豚鼠银屑病样模型组织病理改变的影响;采用放射免疫法检测豚鼠银屑病样模型皮损中细胞因子IL-2、IL-6、IL-8的水平,观察白疕软膏对豚鼠银屑病样模型皮损中细胞因子的影响。

结果:白疕软膏对豚鼠银屑病样模型组织病理改变有治疗作用。

结论:白疕软膏对豚鼠银屑病样模型的治疗作用机理可能是通过对角质形成细胞增殖的抑制及对细胞因子的调节而发挥作用。

白疕软膏是治疗银屑病的有效外用制剂,值得进一步研究和推广。

关键词:银屑病;白疕软膏;豚鼠银屑病样模型;角质形成细胞;细胞因子中图分类号:R285.5;R758.63文献标识码:A 文章编号:1004-0668(2011)01-0055-03基金项目:成都中医药大学科技发展基金资助项目作者简介:杨川,男,1972年生,讲师,研究方向:中医外科学基础与临床;通讯作者:陈明岭,男,1967年生,教授,研究方向:中医药防治皮肤病基础与临床。

Effect of Baibi Ointment to Psoriasis Guinea Pig ModelYANG Chuan ,CHEN Ming-ling ,TAO Chun-rong(Chengdu University of Traditional Chinese Medicine ,Chengdu ,610075)[Abstract ]Objective :The aim of this study is to investigate the effects and mechanisms of Baibi ointment for treating Psoriasis.Methods :5%propranolol emulsion was applied externally on the back of a guinea pig's ear to produce the poriasis-like der-matitis model to observe the effects of Baibi ointment on the histopathological changes of the model.Radioimmunoassay was used to ob-serve the levels of cytokines like IL-2、IL-6and IL-8,and the effects of the ointment to the cytokines.Results :Baibi ointment has therapeutical effects on the histopathological changes of the models of poriasis-like dermatitis in guinea pigs.The mechanism is proba-bly by inhibiting the multiplication of the Malpighian cell and regulating the cytokines.Thus ,Baibi ointment is an effective external preparation to treat psoriasis ,and is worthy of deeper reasearch and generalization.[Key words ]:Psoriasis ;Baibi ointment ;psoriasis-like dermatitis models of guinea pig ;malpighian cell ;cytokine银屑病是一种临床常见的病因不明的有特征性红斑、丘疹及鳞屑的慢性复发性炎症性皮肤病。

在其治疗过程中,外治占有相当重要的地位。

白疕软膏是我院皮肤科治疗银屑病的外用院内中药制剂,疗效显著、剌激性轻微、可长期使用。

本课题研究的目的拟通过豚鼠银屑病样模型及细胞培养,探讨白疕软膏治疗银屑病的疗效及作用机理。

1材料与方法1.1动物健康成年豚鼠40只,体重350 400g ,雌雄不限,雌雄分养,由成都中医药大学实验动物中心提供。

豚鼠标准颗粒饲料喂养,并每日供给足量新鲜蔬菜。

40只豚鼠随机分成4组,每组10只。

1组空白对照组,2组模型组,3组白疕软膏组,4组喜树碱软膏组。

1.2主要试剂及器材成都中医药大学学报2011年第34卷5%心得安乳剂:纯心得安粉剂,由西安制药厂提供;乳剂基质由成都市日用化工厂提供,取纯心得安粉剂加入乳剂基质中,并按同一方向随加随搅拌均匀均匀而成;白疕软膏由成都中医药大学药剂科配制;喜树碱软膏由成都鹤鸣山制药有限责任公司生产,药品批准文号:国药准字H20054000,生产批号:060304;AP280-123型包埋机购自德国MICROM公司,HM335E型切片机购自德国MI-CROM公司,XSZ-H型光学显微镜购自日本奥林巴斯公司;IL-2试剂盒购自北京福瑞生物工程公司; IL-6试剂盒购自北京福瑞生物工程公司;IL-8试剂盒购自北京福瑞生物工程公司。

1.3方法1.3.1造模将豚鼠适应性喂养3d后,将配制好的5%心得安乳剂均匀涂于2、3、4组豚鼠双侧耳廓背部,厚度约1.0mm,每日3次,连续2周。

1.3.2治疗造模2周后,停止外涂5%心得安乳剂,开始治疗。

空白组:治疗期间,正常饲养,不给予任何药物。

模型组:治疗期间,正常饲养,不给予任何药物。

白疕软膏组:双侧耳背外涂白疕软膏,每日1次,连续2周;喜树碱软膏组:双侧耳背外涂喜树碱软膏,每日1次,连续2周。

1.3.3检测指标:(1)肉眼观察:包括一般情况和豚鼠双耳形态。

(2)豚鼠左耳组织病理学观察:用药2周后,手术切取各组豚鼠左侧耳部标本,置10%福尔马林溶液中固定,石蜡包埋,切片,常规HE染色,光镜下逐一观察耳部皮肤病理变化,参照Baker评分进行组织学积分评估。

(3)皮损IL-2测定:用药2周后,手术切取各组豚鼠右侧耳部标本,用生理盐水冲洗,除尽杂质,拭干,切取300 400mg,放入有1mL生理盐水的小试管内,以10000r/min匀浆两次,每次10sec,匀浆后以4ħ3000r/min离心10min,留取上清液,置于-20ħ冰箱保存备用。

测定前冷水复融,4ħ3000r/min离心10min,取上清液,按试剂盒说明检测IL-2含量。

皮损IL-6测定同上。

皮损IL-8测定同上。

1.4统计学处理方法采用SPSS12.0软件,实验测定数据均以均数ʃ标准差表示,采用单因素方差分析。

2结果2.1一般情况造模1周后,除空白对照组外,2、3、4组实验动物均出现精神差,反应迟缓,搔抓耳廓,饮食减少,大、小便量减少,皮毛失去光泽,易脱落。

造模2周后2、3、4组动物上述症状加重。

空白对照组动物精神佳,反应灵敏,被毛密,有光泽,紧贴身体,饮食、二便正常。

经治疗2周后3、4组实验动物精神明显好转,饮食增加,二便量增加,搔抓耳廓现象消失,3、4组皮毛脱落减少,但3组实验动物毛发呈青黑色,外观略显污秽,4组实验动物毛发恢复光泽,外观较清洁;2组实验动物上述症状无明显变化。

2.2豚鼠双耳形态动物造模1周后,耳部涂药处毛发全部脱落,局部皮肤红肿,触之皮温高,并覆有少量细小银白色鳞屑,并见少许抓痕。

2周后红肿有所减轻,鳞屑稍有增多,部分豚鼠耳廓出现糜烂面及结痂。

空白对照组动物双耳毛发正常无脱落,局部皮肤无红肿,皮温不高。

用药2周后3、4组红肿基本消失,鳞屑减少,糜烂面已愈合,见新生毛发。

2组红肿、鳞屑无明显变化,仍有少许结痂,未见新生毛发。

2.3豚鼠左耳HE切片观察空白对照组豚鼠耳廓皮肤可见菲薄的角质层,颗粒层1 3层,棘细胞层3 7层,呈多角形,基底层为单层柱状细胞,真表皮交界呈波浪形,真皮内有散在少量单一核细胞浸润。

模型组见广泛角化过度及灶状角化不全,并见Munro微脓疡,颗粒层变薄或消失,棘层肥厚,表皮突延伸呈棒状,真皮乳头上伸杵状变,毛细血管扩展,血管周围可见较多单一核及多形核细胞浸润。

治疗后角化过度减轻,角化不全消失,棘层变薄,表皮突延伸、乳突上伸、毛细血管扩展及炎症细胞均明显减轻,其组织学评分见表1。

表1治疗组与模型组组织学评分(珋xʃs)组别n组织学评分空白组100.65ʃ0.34模型组10 6.20ʃ1.42*白疕软膏组10 2.70ʃ0.67▽▼喜树碱软膏组10 3.00ʃ0.58▽与空白组比较,P<0.05,与模型组比较,P<0.05,喜树碱组比较,P>0.05单因素方差分析结果表明,模型组与空白组组织学评分差异有显著性(P<0.05),说明造模是成功的,白疕软膏组、喜树碱组与模型组组织学评分差异有显著性(P<0.)疕软膏组与喜树碱组·65·第1期杨川等白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究组织学评分差异无显著性(P>0.05),说明白疕软膏与喜树碱软膏对银屑病皮损均有治疗作用。

2.4豚鼠耳廓皮损中IL-2含量测定(表2)表2治疗组与模型组皮损中IL-2含量(珋xʃs)组别n IL-2(ng/mL)空白组10 2.65ʃ0.98模型组10 5.12ʃ2.36*白疕软膏组10 2.06ʃ1.05▽▼喜树碱软膏组10 2.08ʃ1.04▽*与空白组比较,P<0.05,▽与模型组比较,P<0.05,▼与喜树碱组比较,P>0.05单因素方差分析结果表明,模型组与空白组皮损中IL-2含量差异有显著性(P<0.05),说明5%心得安乳剂所致豚鼠银屑病样模型皮损中IL-2含量水平升高,白疕软膏组、喜树碱软膏组与模型组皮损中IL-2含量差异有显著性(P<0.05),白疕软膏组与喜树碱组皮损中IL-2含量差异无显著性(P>0.05),说明白疕软膏与喜树碱软膏均能降低5%心得安乳剂所致豚鼠银屑病样模型皮损中升高的IL-2含量水平。

2.5豚鼠耳廓皮损中IL-6含量(表3)表3治疗组与模型组皮损中IL-6含量(珋xʃs)组别例数(IL-6ng/mL)空白组1075.22ʃ26.89模型组10162.66ʃ42.20*白疕软膏组1077.89ʃ32.50▽▼喜树碱软膏组1087.76ʃ15.13▽*与空白组比较,P<0.05,▽与模型组比较,P<0.05,▼与喜树碱组比较,P>0.05单因素方差分析结果表明,模型组与空白组皮损中IL-6含量差异有显著性(P<0.05),说明5%心得安乳剂所致豚鼠银屑病样模型皮损中IL-6含量水平升高,白疕软膏组、喜树碱软膏组与模型组皮损中IL-6含量差异有显著性(P<0.05),白疕软膏组与喜树碱组皮损中IL-6含量差异无显著性(P>0.05),说明白疕软膏与喜树碱软膏均能降低5%心得安乳剂所致豚鼠银屑病样模型皮损中升高的IL-6含量水平。

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