病理科工作流程
医学病理科室工作规范及操作流程

医学病理科室工作规范及操作流程在医学病理科室中进行工作,严格的规范和高效的操作流程是确保诊断准确性和病人安全的重要保障。
本文将介绍医学病理科室工作的规范要求和操作流程,以确保医生和技术人员能够按照标准化的方式进行工作。
一、标本接收与处理医学病理科室接收的标本种类繁多,包括组织活检、手术切除标本、尸检标本等。
为了确保标本质量和诊断准确性,以下操作流程必须遵循:1. 标本接收:及时接收来自临床科室的标本,确保标本的完整性和正确标注。
2. 标本登记:对每个标本进行登记,记录患者信息、标本种类、采集部位以及送检医生等重要信息。
3. 标本处理:根据不同的检测要求,对标本进行适当的处理,如固定、冷冻或切片等。
4. 标本保存:妥善保存标本,并按照规定时间进行销毁或归档。
二、组织切片与染色组织切片和染色是病理诊断的关键步骤,操作不当可能导致诊断错误。
以下是相关的规范要求和操作流程:1. 组织固定:将标本进行适当的固定处理,以保持组织的形态结构和细胞学特征。
2. 组织切片:使用切片机将固定的组织切成薄片,并将其放置在载玻片上。
3. 染色操作:按照标准染色流程对组织切片进行染色处理,如常规的血液学染色、肿瘤免疫组化染色等。
4. 切片检查:通过显微镜下观察和评估组织切片的染色效果,并记录相关的病理特征。
三、病理诊断与报告病理诊断是医学病理科室的核心工作之一,准确的诊断结果对于临床治疗决策具有重要意义。
下面是相关的规范要求和操作流程:1. 病理诊断:根据组织切片的形态特征和染色结果,医生进行病理诊断,并详细描述病变的类型、程度和其他相关信息。
2. 诊断审核:对诊断结果进行审核,确保诊断的准确性和一致性。
3. 诊断报告:编写病理诊断报告,报告中包括患者信息、标本特点、诊断结果、建议治疗方案等内容。
4. 报告签发:由负责的病理专家对报告进行签名,并确认报告的准确性。
四、质量控制与标准化管理为了提高工作质量和确保诊断结果的准确性,医学病理科室需要建立严格的质量控制制度和标准化管理流程:1. 质量控制:建立内部质量控制体系,进行定期的质量检查和外部质量评估,及时纠正和改进工作中的不足。
医学病理科室工作规范及操作流程

医学病理科室工作规范及操作流程病理科是医学领域中重要的科室之一,负责疾病诊断和鉴定工作。
为了保证工作的准确性和有效性,病理科室需要遵守一定的工作规范和操作流程。
本文将介绍医学病理科室的工作规范及操作流程,帮助科室成员更好地开展工作。
一、标本接收与登记1. 接收标本前,应仔细核对病员信息,确保标本与病员一致。
2. 标本接收时,应填写标本接收登记表,详细记录标本的类型、数量、来源等信息。
3. 对于特殊标本,如手术标本或病理切片,应单独进行登记,并加强保护措施。
二、标本处理与制片1. 标本处理时,应严格按照病理学原理和技术要求进行。
2. 标本切片前,应确保刀片的锋利度和切片机的正常运转。
3. 切片过程中,应注意标本的正确定位和切割方向,并避免切割损伤标本。
4. 制作标本切片后,应及时进行染色和固定等处理,保证切片的质量。
三、病理诊断1. 对于不同类型的病理标本,应由专业的病理学医师进行鉴定和诊断。
2. 在诊断过程中,应充分利用病理学知识和相关实验室检查结果,确保诊断的准确性和科学性。
3. 对于复杂病例或需要会诊的情况,应及时与其他科室专家进行讨论和协商。
四、病理报告1. 病理报告是病理科工作的重要成果,应准确、完整地记录诊断结果。
2. 在编写病理报告时,应按照规范的格式和要求进行,包括病人基本信息、标本描述、病理诊断等内容。
3. 对于难以确定诊断的病例,应在报告中注明可能的诊断范围,并提出进一步检查和鉴定的建议。
五、质量控制与质量保证1. 病理科室应建立健全的质量控制和质量评估体系,定期进行内部和外部质量评估。
2. 严格执行标本处理、操作规范和工作记录等要求,保证工作质量的稳定和可靠性。
3. 开展持续教育和培训,提高科室成员的专业素质和水平。
六、安全与防护1. 病理科室是涉及病原微生物和有害物质的工作环境,应加强安全教育和防护意识。
2. 严格遵守标本处理和废弃物处理的规定,确保员工和环境的安全。
3. 配备必要的个人防护用品,如手套、口罩、防护眼镜等,并定期更换和消毒。
病理科工作流程及报告发出时间

病理科工作流程及报告发出时间
病理科是医院中非常重要的科室之一,负责对组织标本进行病
理学检查,为临床诊断和治疗提供重要依据。
病理科的工作流程一
般包括标本接收、标本处理、镜下检查、病理诊断、报告撰写和报
告发出等环节。
首先是标本接收,医生或者外科手术室会将患者的组织标本送
到病理科,病理技师会接收标本并进行登记,确保标本信息的准确性。
接着是标本处理,病理技师会对组织标本进行处理,包括固定、包埋、切片等步骤,以便于后续的镜下检查。
然后是镜下检查,病理医师会使用显微镜对标本进行细胞学或
组织学的检查,以观察病变的形态特征。
随后是病理诊断,根据镜下检查的结果,病理医师会进行病理
诊断,判断组织的性质、是否存在病变以及病变的类型等。
最后是报告撰写和发出,病理医师会根据诊断结果撰写病理报
告,并将报告发送给临床医生,供其参考临床诊断和治疗。
报告的
发出时间通常取决于标本的复杂程度和工作量,一般情况下,常规
标本的报告发出时间为2-3个工作日,而对于急诊标本,病理科会
尽快完成诊断并发出报告,以便临床医生及时进行诊断和治疗。
总的来说,病理科的工作流程包括标本接收、处理、镜下检查、病理诊断和报告发出等环节,而报告的发出时间会根据标本的复杂
程度和工作量而定,以确保病理诊断的准确性和及时性。
病理科工作流程

病理科工作流程病理科工作流程是医院中非常重要的一项工作,病理科主要是负责疾病诊断、病理检查和病理解剖检查等工作。
病理学是临床医学的基础研究之一,通过对患者组织、细胞等进行检查和分析,可以为医生提供疾病的确诊、治疗等重要参考信息。
病理科工作流程包括标本收集、标本处理、组织切片、染色、镜检等多个环节,每个环节都需要病理科技师和临床医生紧密配合,才能确保诊断的准确性。
一、标本收集标本收集是病理科工作流程的第一步,需要确保标本收集的全面、准确和规范。
标本可以是活组织、活细胞、切片、培养物等,常用的收集方式有切除术、活检、穿刺、吸取等。
在收集标本的同时,病理科会收集病患的基本信息,例如患者的年龄、性别、疾病病史等,这些信息对临床医生做出诊断具有重要意义。
二、标本处理标本处理是病理科工作流程的第二步,主要是将收集到的标本进行处理,以便于后续的病理检查和分析。
处理方式因收集到的标本类型不同而不同。
对于固体组织标本,一般会使用福尔马林等固定液进行固定处理,以便于后续的切片和染色等操作。
对于液体标本,需要进行离心、沉淀等处理,以便于提取样品中的细胞和物质等。
三、组织切片组织切片是病理学检查中最重要的环节之一,需要将标本进行切片,以便于观察其组织结构和细胞形态等。
切片通常采用显微镜切片法进行,切片的厚度一般在2-4微米之间。
切片后的组织样本需要进行染色处理,以便于更好的观察其细胞结构和细胞形态等特征。
四、染色对经过切片处理的组织样本进行染色处理,可以使细胞和组织结构清晰、易于观察,并且便于做出病理诊断。
常用的染色方法有哈里染色、偏碱性染色、酸性染色等。
不同的染色方法可以突出不同的细胞或组织内的成分,染色后处理的标本会有明显的纹理和形态差异。
五、镜检镜检是病理科工作流程中最后一步,也是病理学检查的核心环节。
通过镜检,病理学家可以观察标本中细胞组织的结构、形态、细胞核形态、细胞排列等特征。
病理学家会和临床医生紧密配合,借助镜检来做出具体的诊断,包括疾病类型、疾病程度等。
病理科流程

病理科流程病理科是一门研究疾病形态学和病理生理学的学科,主要负责通过组织切片和细胞学检查等手段,对病变组织进行形态学诊断和病理生理学分析,并为临床医生提供疾病的诊断依据。
下面是病理科的一般工作流程:1. 标本接收和登记当临床医生在手术或活检等操作中获取病变组织时,将标本送到病理科进行检查。
病理科工作人员负责接收标本,检查标本的数量、质量和完整性,并登记相关信息。
2. 标本处理和固定为了保证病变组织在切片过程中能够保持其形态学结构,病理科将标本进行处理和固定。
处理包括将组织切割成适当的大小和形状,并去除周围的正常组织。
固定则是使用化学药品,通常是甲醛,对组织进行固定和防腐处理。
3. 组织切片固定后的组织标本通过组织切片机器进行切片。
切片的厚度通常在4-6微米之间,切片机器会将标本切割成一系列的组织切片,然后将切片放置在载玻片上。
4. 蜡块制备和染色切片好后的组织标本需要进行染色,以便病理医生观察和诊断组织病变。
首先,组织切片需通过蜡块制备,即将切片浸泡在醇中,然后逐渐转移到蜡中,最终将组织切片和载玻片封在一起。
5. 病理检查和分析病理医生使用显微镜对标本进行观察和分析。
他们会仔细检查组织切片的细胞形态学特征,并寻找任何异常改变,如肿瘤细胞的异常增生和异型性。
根据观察结果,病理医生可以确定组织病变的类型、程度和分级,并提出诊断意见。
6. 报告编写和沟通病理医生将他们的观察和诊断结果编写成病理报告,包括病变的描述、诊断、分级和预后等信息。
该报告会上传到医院的电子病历系统中,并发送给临床医生,作为他们进行治疗决策的重要参考依据。
病理医生也会与临床医生进行沟通,讨论诊断和治疗方案。
7. 质控和质量评估病理科会进行内部质量控制和质量评估工作,以确保病理诊断的准确性和一致性。
他们会定期参与外部质量评估项目,并与其他病理科进行比对,以发现和纠正任何可能存在的问题。
总之,病理科的工作流程包括标本接收和登记、标本处理和固定、组织切片、蜡块制备和染色、病理检查和分析、报告编写和沟通,以及质控和质量评估等环节,旨在提供准确可靠的病理诊断结果,为临床医生提供疾病的诊断依据。
病理主要工作流程图

病理科主要工作流程标本接收流程图负责人:标本处理流程图组织病理检查与快速病理诊断工作流程组织病理检查包括病灶局部穿刺、咬取、切取活检和手术切除标本,通过活检为临床提供定性诊断。
活检组织从患者病灶处取下后,到获得最后病理诊断结果过程中,主要工作流程如下:病灶处取下组织标本↓临床医师详细填写病理诊断申请单(包括病史、体征、术中所见、其它辅助检查结果、申请要求等)↓临床支持中心送达病理科↓病理标本的接收与确认(送检人与接收人核对签字备案)↓病理医师取下检测组织块(取材医生与技术人员核对签字备案)↓组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋↓石蜡组织切片、染色(病理医生与技术人员核对签字备案)↓病理医师阅片,分析病变特征,确定诊断结果↓采集病理改变特征性图象,描述病变特征,填写病理诊断报告↓上级病理医师审核病理报告后签发↓(病理收发人员与临床人员核对签字备案)免疫组织化学(免疫组化)检查流程病理诊断医师详细填写免疫组化工作单(包括病理号、组织块号码、检查项目、检查要求等)↓免疫组化工作单的接收与确认(送检人与接收人核对签字备案)↓技术人员准备组织块(再次核对检查项目,实验者填写工作记录单)↓组织切片、染色(病理医生与技术人员核对签字备案)↓病理医师阅片,记录免疫组化实验质量,如有问题填写改进意见,交免疫组化实验室↓免疫组化实验技术人员与诊断医生讨论,提出改进措施↓↓(免疫组化实验人员与诊断医生核对签字备案)(免疫组化检测的主要目的有两个方面:①确定肿瘤的组织发生和肿瘤分型:主要用于一些疑难疾病的确认,如胃肠道平滑肌瘤与间质瘤、神经鞘膜细胞瘤、间皮瘤的鉴别,恶性淋巴瘤的组织学分型。
②肿瘤预后评估与治疗方案相关免疫组化检测:免疫组化检查可用于疾病的预后评估、治疗方案的选择、可能出现的肿瘤耐药基因,如P53、Ki-67检测评价恶性肿瘤的预后,PR、ER、Her-2、VEGF检测选择治疗方案,gp100、GST-π检查是否表达肿瘤耐药基因。
医学病理科室工作规范及操作流程

医学病理科室工作规范及操作流程在医院中,病理科室承担着对病人组织、细胞以及尸体进行病理学诊断的重要任务。
为了确保工作效率和准确性,制定一套科学规范的工作流程对于病理科室的正常运转至关重要。
本文将详细介绍医学病理科室的工作规范及操作流程。
一、病理标本采集与处理1. 标本采集进行病理学分析的材料主要包括活体标本和尸体标本。
活体标本采集时要确保患者的配合度和采集部位的准确性,避免对患者的不必要伤害。
尸体标本采集需要根据实际情况进行,包括完整地获取尸检材料和适当的保存方式。
2. 标本处理标本取材后,需要根据不同类型进行不同的处置。
例如,活体标本需要迅速固定或冷冻保存,尸体标本需要进行切割、包埋和固定,以便后续进行病理学分析。
二、病理学分析操作流程医学病理学的分析流程主要包括以下几个环节:1. 样本标识与记录对于每一个标本,科室工作人员需要进行严格的标识和记录工作。
确保每个标本都能够与相关患者的个人信息进行绑定,避免混淆和误诊。
2. 标本制片制片是病理学分析的重要环节之一。
将标本切片制作成玻片,为后续的染色和镜下分析提供基础。
制片过程需要细致操作,确保切片质量的一致性和完整性。
3. 病理学染色病理学染色是病理学分析的另一个重要环节。
常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色等。
不同的染色方法可以帮助医生更好地观察和分析病理标本的细微变化。
4. 病理学镜下分析在染色完成后,病理学医生需要使用显微镜对标本进行仔细的观察和分析。
通过观察标本的细胞结构、组织构成以及异常变化,医生可以做出准确的诊断。
5. 病理学报告根据对病理学标本的观察和分析,病理学医生需要按照规定的格式和标准完成病理学报告。
报告中应包括病人的临床信息、病理学的详细描述、诊断结论及相应的建议。
三、工作规范与要求1. 实验室安全病理实验室是一个存在风险的工作环境,在进行工作时,必须遵循实验室的安全规范。
佩戴个人防护设备,保持实验室的整洁和通风良好。
2. 内部质量控制为了确保病理学分析结果的准确性和可靠性,病理科室需要建立完善的内部质量控制体系。
病理科基本工作流程是

病理科基本工作流程是:
外科或内镜等相关科室将病理组织从患者身上取下---浸入福尔马林固定(需做术中冷冻切片会诊或做科研有特别要求的除外)----送到病理科签收----病理医师按要求取材----重新固定----递度酒精脱水----二甲苯----浸蜡----包埋----切片----染色制片----病理医师阅片-诊断-签发报告;有特殊病变(如骨组织需用酸性液体脱钙变软后才能取用)的时间相应延长;疑难病例需做免疫组化、特殊染色、原位杂交、电镜等进行鉴别诊断,才能做出最后诊断。
随着科技发展,各种仪器设备的应用,病理科大约三分之一的工作由机器完成,大部分还需医技人员手工去一丝不苟的去完成。
我国大部分三甲医院遵循国家卫生部的要求从收到标本起三个工作日发出病理报告,特殊病例五个工作日发报告;二甲医院大多要求一周内发报告。
巨检室:一般放置有取材台,冰冻切片柜,记录台,大体冷藏标本柜,通风柜等。
脱水、包埋、染色程序都在通风柜中进行,有的也可根据要求使用落地式通风柜。
切片分为常规切片和冰冻切片,都在实验台上进行。
脱水至染色过程实验室均需配备水装置。
免疫组化室要配备水、通风柜。
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8.二甲苯后两步宜慢,以利于无水乙醇彻底脱净。封片后若
切片成云雾状,说明最后一步二甲苯不纯。
六、程序控制的自动组织切片染色机
• 徕卡-AUTO Stainer XL型自动染色机
• 一、结构与功能
1.带有全透明的机盖,可随时观察染色机的工作情况; 2.设有干燥加热装置。对切片再一次烘烤,去除切片残余水分;
二、全密闭程序控制自动组织脱水机
1、全密闭式程序控制自动组织脱水机的结构
控制面板、处理槽、石蜡箱、试剂柜等
2、全密闭式程序控制自动组织脱水机的功能
可设定密码、延时功能、小标本当日完成、加温功能、 报警功能等
3、全密闭式程序控制自动组织脱水机程序的设置
二、全密闭程序控制自动组织脱水机
试剂 甲醛 甲醛 甲醛 乙醇 乙醇 乙醇 无水乙醇 无水乙醇 无水乙醇 浓度 10% 10% 10% 80% 95% 95% 100% 100% 100% 时间 1h 1h 1h 1h 1h 1h 1h 1h 1h
熔蜡器、全自动组织包埋、冷台一体机 最常用的包埋石蜡熔点为56~58℃、58~60℃
三、组织包埋制作技术
• 全自动组织包埋、冷台一体机
三大组成部分:1.石蜡缸及出蜡口;2.左右储存槽 (100~120块);3.工作台面以及镊子加热孔 功能:温度调节(65~70℃)、时钟调节(24h)、工作时 间设定(每周的工作日期)、开关机时间设定(6~10: 30)、冷台装置(0~-15℃)、流量控制。 维护与保养:选择质量好的切片石蜡,注意定期清理熔蜡储 槽,并加入少许二甲苯清洗管道,以保证石蜡流出畅通, 并在每日工作完成后清洗机器外貌。散热孔要经常清理。
病理科常规技术室工作流程及 日常工作质量控制
2016年8月30日
病理科工作流程
接受标本(编号、登记)——固定——标 本取材、记录——脱水——常规制片(包
特殊染色
埋、切片、染色)—— 免疫组化 |——————
归档
目录
一、组织脱水、透明、浸蜡 二、全密闭程序控制自动组织脱水机 三、组织包埋制作技术 四、石蜡组织切片制作技术 五、苏木素-伊红染色技术 六、程序控制的自动组织切片染色机 七、全自动组织玻片封片机
试剂
浓度
时间
二甲苯
二甲苯 二甲苯 石蜡 石蜡
30min
45min 60min 30min 1h
石蜡
1h
二、全密闭程序控制自动组织脱水机
4、全密闭式程序控制自动组织脱水机液体的更换规 律及原则
理论上讲每次更换液体应该将脱水机内的液体全部更换。
(1)一般固定液每周更换一次。若组织块较多(每天 200~300块),固定液没三天更换一次。 (2)脱水剂梯度酒精每周更换一次(150块/天,如果每天 处理300块左右,应该3天更换一次乙醇)。方法是将第2缸 的80%乙醇倒弃,95%乙醇及无水乙醇依次迁移。 (3)透明二甲苯10~15天更换一次,二甲苯第一缸倒弃,第 二缸前移。 (4)石蜡必须干净无杂质。建议1500~2000块将第一缸石蜡废弃。
2.二甲苯的容器要密闭,严禁液体外溢。必须在通风橱柜中
进行操作。
3.苏木精-伊红的染色时间应根据组织不同、固定液不同、 固定时间、环境温度、染色液新旧、切片厚薄及染片数量 来决定。 4.苏木精染色后不宜在水中停留时间过长,防止染色质变 蓝后不易分化;伊红染色后水洗时间要短,否则易脱色。
整个过程要在显微镜下观察控制染色效果(理论)。
二、操作程序
1.染色前检查染色缸中的染色液量是否充足,染色缸的位置 排列是否正常,确认进水开关开启; 2.打开主电源插座的电源开关及仪器的总开关; 3.显示屏上显示出主菜单,按stain键,机械手移动到每个染 色缸的部位进行自检,仪器进入工作状态; 4.将装载切片的染色栏放入染色机,按load键; 5.自动染色机对每一个染色架染色结束后,停留在退出位置, 蜂鸣提示染色程序完成,按Exit键; 6.染色程序全部结束后,关闭仪器电源,将染色机内的染色 缸盖好。
二、全密闭程序控制自动组织脱水机
5、全密闭式程序控制自动组织脱水机液体的操作方 法
从取材室与取材医师完成标本核对后,将组织拿至脱水机, 此刻脱水机界面如下图所示
1.确认清洗程序完成,打开处理槽盖。 2.擦净槽盖面及槽内水气,槽内残渣。 3.将脱水栏按顺序平稳放好,盖紧槽盖、确认锁定。 4.选择层数(level)、选择并确认使用的程序(Progress Select) ,立即开始 (Immediate Start )处理组织。
三、组织包埋制作技术
• 石蜡包埋法及质量控制
1.包埋时要核对组织块与标本盒的标记是否一致(黄盒x几)。 2.严禁污染及交叉污染(随时纱布擦拭台面)。 3.根据组织的大小选择不同的包埋模具。 4.根据组织的不同结构层次、特点、标记面,包埋时应加以注意,如食 管黏膜或标注立埋的则需要立(垂直)埋。 5.皮肤组织包埋时应将组织块45°倾斜放入石蜡中包埋,2块及以上组织 并列倾斜包埋。 6.食管黏膜、胃肠类黏膜视黏膜组织大小、长短、厚薄,或90°垂直包 埋,或卷曲包埋。 7.肾、肝、前列腺、乳腺等穿刺标本视组织大小,包埋时平整的放入石 蜡中,轻轻按平,切片时才能切全,用力过重会使组织破碎,过轻会 使组织包埋不平,切片不完整。
五、苏木精—伊红染色技术
5.HE染色成败关键在于盐酸酒精分化及返蓝,一定要在镜 下控制,严格掌握时间。肉眼观察:切片由原来的深蓝色变成红
色至粉红色时即恰到好处,再冲水返蓝
6.切片脱水时在低浓度酒精中的时间不宜过长,因其对伊 红有分色及褪色作用。 7.在无水乙醇中脱水时间应稍长,保证最后一步酒精要纯,防
5.脱水程序处理完成,按(drain all chamber)将处理槽内的石蜡排空。 6.打开处理槽盖,取出脱水栏,将槽内残蜡擦拭干净。 7.盖好处理槽盖,按(flush start)清洗,整个处理程序完成。
二、全密闭程序控制自动组织脱水机
• 备注:
• 1.如果脱水过程中,有需要继续添加的组织,选择Lid Release键,然后将盖子打开,将组织放入脱水机,然后 按屏幕பைடு நூலகம்Restart所对应的按键即可 • 2.每次脱水完成前、后都应擦拭反应缸,脱水完成后,取 出组织,应将组织篮放入反应缸中运行冲洗程序,以脱去 反应缸及其组织篮中的石蜡以方便取材。 • 3.应定期检测石蜡液面,正常情况下每周检测一次,如一 段时间内标本过多或者过少,可以适当减少或者增加检测 周期,防止出现石蜡液面不够的情况。 • 4.脱水机需要定期擦拭保养,并填写设备维护保养记录。
切片带有热量进入二甲苯脱蜡速度快;能保持染色机内温度恒定,染 色效果好。
3.带有多个试剂槽,可移动,可变换,密封效果好; 4.具有装载、下载的通道; 5.设有水洗缸,可进行水流控制; 6.机械手臂可横向及纵向运动,带有抖动功能,幅度可调。 7.内置软件,精确的孵育时间;
六、程序控制的自动组织切片染色机
六、程序控制的自动组织切片染色机
三、试剂质控
1.建立档案 详细记录每天的染色数量,及时更换液体。(160180张切片轮转脱水酒精,1400-1600张切片轮转脱蜡二甲苯及透明二甲苯, 1400-1600张更换脱二甲苯的酒精、苏木素、盐酸酒精及伊红)
2.苏木精染色液每天要过滤后使用。(氧化膜) 3.根据工作量,经常添加或更换脱蜡用二甲苯,切片从干燥加热
五、苏木精—伊红染色技术
• 苏木精伊红染色手工操作程序及注意事项
• 染色程序:二甲苯Ⅰ(脱蜡)——二甲苯Ⅱ(脱蜡)——
3min 1min 1min 3s左右 20s 10s 1min 1min 1min 5-10min 10s 1min 1min 3min 3-5min
无水乙醇Ⅰ——无水乙醇Ⅱ——自来水冲洗——苏木素——
五、苏木精—伊红染色技术
• 二、返蓝的目的与控制:苏木精染色后经1%盐酸酒精液 分化;切片是在酸性环境中,这时颜色是红褐色。切片进 入弱碱性自来水冲洗或用返蓝液(0.5%氢氧化氨水溶液) 在碱性环境中就会由红褐色变成蓝色。 • 三、分化液、返蓝液的配制: 1.分化液 浓盐酸1ml,70%乙醇99ml。 2.返蓝液:氢氧化氨0.5ml,蒸馏水99.5ml。
自来水冲洗——1%盐酸酒精分化——自来水冲洗(去分
化)——伊红(醇溶)——自来水冲洗——85%乙醇(脱水)——
95%乙醇(脱水)——无水乙醇(脱水)——无水乙醇(脱水)——
二甲苯Ⅰ(透明)——二甲苯Ⅱ(透明)——二甲苯Ⅲ(脱蜡)
五、苏木精—伊红染色技术
• 染色的注意事项:
1.脱蜡要彻底。透明状,与温度、时间、二甲苯使用的时间及脱蜡 片数有关。
一、组织脱水、透明、浸蜡
• 组织浸蜡
1.组织浸蜡的目的:组织经过脱水、透明后用的石蜡、火 胶棉、明胶等支持剂浸入组织内,使组织变硬并将组织包 裹在内,有利于切片,这个过程称为浸蜡。 2.组织浸蜡的方法:经数次石蜡浸泡(一般为3~4个步骤, 每步50~60min)置换出组织内的透明剂,使纯净的石蜡浸 入组织内。浸蜡用的石蜡熔点一般为58~60℃。 3.浸蜡剂的种类:石蜡(最广泛应用)、火胶棉、明胶
一、组织脱水、透明、浸蜡
• 组织脱水
1.脱水的目的和原则:组织经固定后,含有大量水分,组 织在透明浸蜡前必须进行脱水,就是用某些溶剂将组织内 的水分逐渐置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入,这个 过程称为脱水。原则1.脱干净但又不过脱水;2.脱水剂自 低浓度至高浓度进行。 2.常用脱水剂:乙醇、丙酮 3.常用脱水顺序是:70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇Ⅰ、 95%乙醇Ⅱ、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ。
三、组织包埋制作技术
• 包埋的定义:组织块经过固定、脱水、透明剂(石蜡、
火胶棉、树脂、塑料等)浸透,用包埋剂(石蜡、火胶棉、 树脂、塑料等)包成块的过程称为包埋。
• 常用包埋方法:石蜡包埋法、火胶棉包埋法、树脂包埋