丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书
Elabscience
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®丙酮酸比色法测试盒Pyruvic Acid Colorimetric Assay Kit产品货号：E-BC-K130-S产品规格：50 assays(48 samples)/100 assays(96 samples)检测仪器：紫外-可见光分光光度计（505 nm）使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测血清(浆)、动植物组织中的丙酮酸含量。
检测原理丙酮酸与显色剂反应，反应产物在碱性溶液中呈红棕色，颜色的深浅与丙酮酸含量成正比，通过比色可以计算出丙酮酸的含量。
本试剂盒检测组织样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法(货号：E-BC-K318-M)。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：紫外-可见光分光光度计（505 nm）试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl）或PBS(0.01 M，pH 7.4)试剂准备①检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。
②0.2 μmol/mL丙酮酸钠标准品应用液的配制：按试剂四：双蒸水为1:9的体积比混匀，现用现配，2-8℃可保存7天。
样本准备①样本处理血清血浆样本：可直接测定。
组织样本：取0.020-1.0 g新鲜组织块，按照重量（g）：体积（mL）=1:9的比例加入生理盐水（0.9% NaCl）或PBS(0.01 M，pH 7.4)，进行匀浆，4℃，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测。
丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)简介：丙酮酸(Pyruvic acid)又称2-氧代丙酸，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一，可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。
丙酮酸是糖无氧代谢的产物，科研工作者常将丙酮酸和乳酸一起研究，并用二者的比值推算循环衰竭的程度。
丙酮酸检测可采用酶催化法，该发是使用乳酸脱氢酶(LDH)催化丙酮酸氧化，生成乳酸和NAD +，通过分光光度法或荧光光度法测定NADH 的减少量，进而计算出丙酮酸含量。
通过分光光度比色法(自动分析仪或分光光度计)测定340nm 处吸光度的下降速率，据此通过比色分析就可以计算出PA 水平。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的丙酮酸含量。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：① 血浆、血清、尿液及其他体液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。
② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于PA 的检测。
③ 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的PA ，可以使用原有的裂解液或PBS 等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。
2、 配制标准品工作液：，即为标准品工作液-丙酮酸标准(0.5mmol/L)。
4℃避光保存24h编号 名称TC0755 50T Storage试剂(A): 丙酮酸标准(25mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): 丙酮酸标准稀释液 5ml RT 试剂(C): PA 显色液C1: PA Assay buffer90ml4℃ 避光临用前，按C1:C2=30ml:1支的比例混合，即为PA 显色液。
试剂(D): LDH solution 0.4ml-20℃ 避光 使用说明书1份有效。
丙酮酸激酶（PK）活性检测试剂盒说明书
丙酮酸激酶（PK ）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0545规格：100T/96S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存试剂三液体20μL ×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前在试剂二瓶中加入17mL 试剂一和1mL 蒸馏水充分溶解，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴5分钟，现配现用；2、试剂三：液体置于试剂瓶内EP 管中。
临用前根据用量按照试剂三:蒸馏水为17:1000的体积比例充分混匀，冰上放置备用，现用现配。
产品说明：PK （EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP 的关键酶之一，因此测定PK 活性具有重要意义。
PK 催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP 生成ATP 和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH 和丙酮酸生成乳酸和NAD +，在340nm 下测定NADH 下降速率，即可反映PK 活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV 板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）提取液体积（mL ）为500-1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或者200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。
发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究
发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究丙酮酸（英文：propanoicacid）称丁酸，是一种无色、液体或固体气味，常用于食物加工、医药工业和化学工业中。
由于丙酮酸溶解度很大，一般采用气相色谱-质谱或高效液相色谱（HPLC）技术来进行检测。
HPLC方法是一种测定发酵液中丙酮酸的有效方法。
HPLC技术是高效液相色谱液体色谱定性和定量技术的简称，用于测定发酵液中的丙酮酸含量。
它利用了凝胶的分离能力和吸附能力，将物质分离形成混合物，然后通过色谱分析技术在指定的条件下分离和分析混合物的组成，最终测定发酵液中的丙酮酸含量。
主要技术条件：HPLC技术是一种高效的发酵液中丙酮酸检测方法，需要使用色谱仪和配套软件。
HPLC技术需要调节色谱柱、溶剂、流速、流量等条件，确保HPLC技术正确测定发酵液中的丙酮酸含量。
样品的处理：在发酵液中检测丙酮酸，需要在发酵液中加入少量还原剂，将游离丙酮酸转变为丙酮酸盐，以确保正确测定发酵液中丙酮酸含量。
样品处理后，可以直接使用HPLC技术测定发酵液中丙酮酸含量。
样品分析：HPLC技术在指定条件下分析样品，利用质量流动控制器和色谱柱调节游离丙酮酸含量，然后进行定量分析，得到发酵液中丙酮酸含量的实时数据。
此外，HPLC也可以用于检测其他指标，如发酵度、游离糖含量等。
数据处理：HPLC技术可以根据测定结果自动计算发酵液中丙酮酸含量，并分析数据，实时反馈发酵过程中参数指标的变化。
结论：HPLC技术是一种有效的，可靠的发酵液中丙酮酸检测方法，可以获得实时的测试数据，且可以根据发酵过程的变化自动跟踪分析。
此外，HPLC技术还可以用来测定发酵液中其他指标，为发酵过程的研究和控制提供有效的参考数据。
丙酮酸检测 丙酮酸性能检测
丙酮酸检测丙酮酸成分检测
一：丙酮酸（003）
原称焦性葡萄酸，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一。
丙酮酸可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，因此，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。
二：丙酮酸的主要化学性质
在空气中颜色变暗。
加热时缓慢聚合，富有反应性，容易与氮化物、醛、卤化物、磷化物等反应，参与生物体的糖代谢、胶质、氨基酸、蛋白质等的生化合成、代谢、醇的发酵等。
当用力时，在肌肉中被还原为乳酸，休息时再次氧化并部分转变为糖原。
丙酮酸是人体的一种成分，在人体内主要参与糖、脂肪等的代谢，也是碳水化合物代谢的中间产物之一。
三：丙酮酸的主要检测
1.定性测定的结果：在测定一批样品前，先确定ELISA对照的吸收值，大于该值者为阳性，小于该值者为阴性。
2.定量测定的结果：测定标准浓度的抗原ELISA反应的光密度绘制标准曲线。
测得待测样品ELISA反应的光密度，从而查得抗原量。
在标记抗原竞争法中，定酶标记抗原的酶活性为100%，在加入作为标准样品的未标记抗原后，以酶活性降低的百分率绘制曲线，从曲线上查得待测抗原的量。
至于对抗体的定量，则要绘制出竞争抵制曲线。
在制作标准曲线时，需进行空白对照测定，进行校正。
或者在测定时，将对照液作为零点测定点。
科标能源检测中心专业提供丙酮酸检测、丙酮酸成分检测、丙酮酸含量测定、丙酮酸性能检测等相关检测项目（3.12）。
丙酮酸(PYR)测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求北京赛诺浦
丙酮酸（PYR）测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清或血浆中丙酮酸的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×15mL，试剂2：1×5mL；试剂1：2×30mL，试剂2：2×10mL。
试剂1：2×54mL，试剂2：2×18mL；试剂1：3×45mL，试剂2：3×15mL；试剂1：4×54mL，试剂2：4×18mL；试剂1：2×300mL，试剂2：1×200mL；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L。
校准品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。
质控品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。
1.2 试剂盒主要组成成分注：校准品和质控品存在批特异性，具体浓度见对应批次产品标签。
2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
质控品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于0.5。
2.4 分析灵敏度测定浓度在200µmol/L附近的样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.02。
2.5 线性在（30，1200）µmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.990。
在(150，1200）µmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（30，150]µmol/L时线性绝对偏差不大于±15µmol/L。
2.6 重复性重复测试高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于8%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度与已上市产品进行比对试验，在（30，1200）µmol/L范围内，与比对系统的相关系数r不小于0.975；在（100，1200）µmol/L区间内与比对系统的相对偏差应不大于±15%，（30，100] µmol/L区间内与比对系统的绝对偏差应不大于±15µmol/L。
丙酮酸质量标准
丙酮酸质量标准
丙酮酸（Pyruvic acid）是一种有机酸，化学式为C3H4O3，分子量为88.06 g/mol。
它是一种无色、有刺激性气味的液体，在工业和生物领域具有广泛的应用。
丙酮酸的质量标准涉及以下几个方面：
1. 外观：丙酮酸应为无色透明液体，允许略有黄色或绿色，但不得有沉淀、悬浮物或杂质。
2. 酸度：丙酮酸的酸度（以H+浓度表示）应符合相关产品和应用场景的要求。
例如，在某些应用中，丙酮酸的酸度可能要求在0.1~1.0 mmol/L范围内。
3. 纯度：丙酮酸的纯度应符合相关产品和行业的要求。
一般而言，丙酮酸的纯度应不低于99.0%。
4. 水分：丙酮酸中的水分含量应控制在一定范围内，以防止产品因水分过多而出现质量问题。
通常，丙酮酸的水分含量应不超过0.5%。
5. 灼烧残渣：丙酮酸的灼烧残渣应符合相关产品和行业的要求。
一般而言，丙酮酸的灼烧残渣应不超过0.1%。
6. 重金属含量：丙酮酸中的重金属含量应符合相关产品和行业的要求。
例如，在某些应用中，丙酮酸的重金属含量可能要求不超过10 mg/L。
7. 砷含量：丙酮酸中的砷含量应符合相关产品和行业的要求。
例如，在某些应用中，丙酮酸的砷含量可能要求不超过1 mg/L。
8. 溶液稳定性：丙酮酸在储存和使用过程中应保持稳定，不得发生分解、聚合或沉淀等现象。
9. 气味：丙酮酸具有一定的刺激性气味，但应符合相关产品和行业的要求，不得有过强的异味。
10. 包装和储存：丙酮酸的包装和储存应符合相关产品和行业的要求，以确保产品质量和安全。
一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用[发明专利]
![一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/055eb174daef5ef7bb0d3c90.png)
专利名称：一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用专利类型：发明专利
发明人：王飞,刘安娜,张强
申请号：CN201811001155.1
申请日：20180830
公开号：CN109212176A
公开日：
20190115
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种丙酮酸测定试剂盒，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；试剂R1中含有以下成分：还原型辅酶Ⅰ（NADH）、三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、表面活性剂、EDTA‑Na2、防腐剂；试剂R2：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、乳酸脱氢酶（LDH）、表面活性剂、稳定剂、防腐剂。
本发明同时提供了该试剂盒的制备方法和应用，该试剂盒是一种稳定性强，准确度高，重复性好的液体试剂盒。
申请人：中拓生物有限公司
地址：276000 山东省临沂市罗庄区创新大厦A座
国籍：CN
代理机构：济南泉城专利商标事务所
代理人：王翠翠
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货号：QS2204 规格：50管/48样丙酮酸（pyruvic acid PA）含量测定试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
测定原理：
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈色。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体5mL×1瓶，4℃避光保存；
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
丙酮酸提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），静置30min， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，25℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.1mL血清（浆）加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2、取300μL样本+100μL试剂一于1.5mL EP管中，混匀，静置2min，加入500μL试剂二，混匀，于520nm波长处测定管吸光值A。
丙酮酸含量计算：
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0466x + 0.0675； x为丙酮酸含量（µg/mL），y为吸光值。
2、按照血清（浆）体积计算
丙酮酸含量（μg/mL）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（V3×V1÷V2）=214.6×(A-0.0675) 3、按照蛋白浓度计算
丙酮酸含量（μg/mg prot）=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr
4、按照样品质量计算
丙酮酸含量（µg/g鲜重）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2）=21.46×(A-0.0675)
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÷W
3、按照细菌或细胞密度计算
丙酮酸含量（μg/104cell）＝[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（500×V1÷V2）=0.043×(A-0.0675)
V1：加入反应体系中样本体积，0.3mL；V2：加入提取液体积，1 mL；V3：加入血清（浆）体积，0.1 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
注意：最低检测限为1μg/mL或1μg/g鲜重或10ng/mg prot
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