稀少／单精子冷冻保存体系建立进展
超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展
超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展鱼类是重要的水产资源之一，但其精子保存和利用面临着很多挑战。
传统的鱼精子保存技术主要是低温保存，但此方法存在精子损伤或死亡的问题。
近年来，超低温冷冻技术在鱼精子保存方面的应用成为了研究的热点，在提高精子储存质量方面取得了重要进展。
超低温冷冻技术是一种物理方法，采用低温存储方式将细胞或组织冷冻在极低温度下，从而达到保存和利用的目的。
该技术在人类和动物领域都有广泛应用，并逐渐在水产领域得到应用。
超低温冷冻技术可以减缓细胞代谢，防止细胞死亡，延长细胞储存寿命，同时保持细胞的完整性和功能。
超低温冷冻技术的成功应用离不开冷冻介质的选择和调控。
常用的冷冻介质有甘油、乳糖、蔗糖、酪蛋白和胆固醇等。
此外，添加不同的物质，如抗氧化剂、防抱死剂和增粘剂等，也可以改善鱼精子的冷冻质量。
超低温冷冻技术对鱼类精子保存的影响主要包括以下几个方面。
首先，超低温冷冻技术可以改善鱼精子的贮存稳定性。
通过优选冷冻介质和添加辅助物质，冷冻鱼精子可以达到长期储存的目的。
研究表明，用7.5%甘油作为冷冻介质可以明显提高鲤鱼、鳕鱼和金枪鱼等鱼类精子的存活率。
其次，超低温冷冻技术可以提高鱼精子的存活率。
研究表明，将鱼精子冷冻在极低温度下，保持其形态和活力，有望达到高存活率的目的。
以贤雄鱼为例，使用增粘剂和胆固醇为助剂，将鱼精子以极低温度（-196℃）保存5天，细胞存活率达到了80%以上。
第三，超低温冷冻技术可以保持鱼精子的生殖功能。
研究表明，细胞冷冻后，即使没有死亡，生殖功能也可能受到损害。
但通过超低温冷冻技术，可以在一定程度上恢复受损的生殖功能。
比如，经过良好保存的鳕鱼精子，在完成冷冻、解冻等程序后，仍可以在水中进行有效的受精作用。
总的来说，超低温冷冻技术在鱼精子保存方面的应用展现出了广泛的前景。
但是，仍需进一步探索该技术在不同鱼类的保存效果和规模化应用方面、冷冻介质和辅助物质的选择以及细胞死亡原因等方面的问题。
猪冷冻精液在我国的应用现状和存在的问题
2009 年起，国家对购买良种猪精液给予补贴，在全国范围内推广猪人工授精技术，种猪常温精液人工授精在我国全面普及。
具有一定规模和较强经济实力的社会化公猪站在全国各地建立起来，逐渐形成一个完备的全国种猪常温精液供精网络体系，积极推动了全国猪遗传改良计划的全面实施。
各大种猪场间通过优质种公猪精液的交流来建立和增强场间遗传联系和跨群联系。
但种猪常温精液保存时间短，保存条件和运输要求高等特点限制了其在远距离交流中的作用，而猪冷冻精液则能有效克服这些限制。
冷冻精液能最大限度地存留顶级公猪的遗传材料，为检测人员提供足够的时间检测精液中可能携带的各种病原，有效地提高了精液交流中的生物安全保障。
还可以在完成供精种公猪的后裔测定后，再确定是否扩大该公猪精液的配种母猪数，以获得更大的遗传进展。
但猪精子对“冷休克”敏感，猪冷冻精液在我国的应用现状和存在的问题潘红梅1，彭 刚2，吴 玲3，肖杰秋3，徐 荣3(1.重庆市畜牧科学院，重庆 402460;2.重庆市武隆区畜牧发展中心，重庆 408500;3.云南省绥江县动物卫生监督所，云南 绥江 657700)Application and problems of pig frozen semen in ChinaHongmei Pan 1；Gang Peng 2；Ling Wu 3；Jieqiu Xiao 3；Rong Xu 3(1.Chongqing Academy of Animal Science, Chongqing 402460,China; 2. Chongqing Wulong District Animal Husbandry Development Center, Chongqing 408500,China; 3. Yunnan Suijiang County Animal Health Supervision Office, Suijiang, Yunnan 657700,China)基金项目：十三五国家重点研发计划（2017YFD501902）; 重庆市财政专项资金项目（19514）作者简介：潘红梅（1979-）女，硕士，研究员，长期从事种猪常温精液质量检测和地方猪精液冷冻保存研究，E-mail ：******************使得冷冻和解冻过程中的所有的操作环节都会对精子造成损伤，很难保证精子解冻后质量的稳定性，以致猪冷冻精液在商业化的道路上进展缓慢。
超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展
超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展一、超低温冷冻技术的原理和特点超低温冷冻技术是一种将生物样本（如细胞、组织、精子等）在极低温条件下迅速冷冻，并存储在液氮罐中的技术。
其主要原理是通过将生物样本的温度降至极低温度（通常为零下196摄氏度），使生物样本处于一种叫做“玻璃态”的状态，从而避免了细胞内部结构和生物大分子的冻结破坏。
超低温冷冻技术在生物样本保存和维持其活力方面具有独特的优势，因此被广泛应用于细胞培养、生物医学研究等领域。
超低温冷冻技术具有以下特点：1. 低温保存稳定性好：超低温冷冻技术能够将生物样本保存在极低温度下，使其处于基本静止状态，从而实现长期稳定保存。
2. 保存有效性强：超低温冷冻技术在保存生物样本的活力和遗传信息方面具有独特的优势，保持样本的原貌和功能。
3. 保存成本低廉：相比于其他生物样本保存方法，超低温冷冻技术的保存成本较低，操作简单，易于推广应用。
二、超低温冷冻技术在鱼精子保存中的研究进展近年来，随着超低温冷冻技术的不断完善和推广，越来越多的研究者开始将其应用于鱼精子的保存。
通过对不同鱼种精子的冷冻保存实验，得出了一系列具有重要意义的研究成果，有效地推动了鱼类资源的保护和利用。
1. 鱼精子的冷冻保存条件的优化在超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究中，首要的问题是确定最适宜的冷冻保存条件。
研究者在选择冷冻保存液体、添加保护剂、采用不同的冷冻速率等方面进行了大量的实验研究，最终确定了适用于不同鱼种精子的最佳冷冻保存条件。
这为鱼精子保存的实际应用提供了有力的科学依据。
2. 对冷冻保存鱼精子的质量评估研究为了评估冷冻保存鱼精子的质量，研究者们进行了大量的质量评估研究，包括鱼精子的存活率、活力、形态以及遗传物质的完整性等指标。
通过大量的实验数据和对比分析，研究人员明确了超低温冷冻技术对鱼精子保存质量的影响规律，并提出了改进措施。
3. 鱼精子保存技术的实际应用除了在实验室条件下进行研究外，超低温冷冻技术在鱼精子保存领域也已得到了一定的实际应用。
牛精液冷冻保存技术研究进展
牛精液冷冻保存技术研究进展任忠伟1,苏智辉#，杜BC3,胡建宏3(1.西安草滩牧业华阴一场，陕西华阴714200；2.白水县雷牙畜牧兽医站；3.西北农林科技大学动物科技学院)摘要：牛精液冷冻保存的应用促进了我国牛人工授精技术的发展，通过冷冻保存可以延长精液保存时间，扩大良种公牛精液的使用范围，提高种用价值，加速品种的育成和改良步伐。
本文从牛冷冻精液稀释液的成分,卵黄稀释液与无动物源性稀释液的发展,冷冻保护剂对精子冷冻效果的影响，抗氧化剂和抗生素在牛精液冷冻保存中的应用等方面进行了综述，旨在为今后的牛精液冷冻保存研究工作提供一定的参考。
关键词:牛精液；冷冻保存;研究进展［中图分类号％S814.3［文献标识码％A［文章编号％1004-6704(2020)02-0050-04Research Progress on Bovine CryopreservationREN Zhong-wei1,SU Zhi-hui2,DU Ye-qing3,HU Jian-hong3(1.Xian Catan Animal Husbandry of Huayin First Dairy Farm,Huayin Shaanxi714200,China；2.Leiya Town Animal Husbandry and Veterinary Station of Baishui County；3.College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University)Abstract:The application of bovine semen cryopreservation promotes the development of bovine artificial insemination technology Bycryopreservation,thetimeofsemenpreservationcanbeprolonged,thescopeofsemenuseofimprovedbu l s canbeexpanded,thebreedingvaluecanbeimproved,andthebreedingandimprovementofbreedscanbeaccelerated Thisar-tide reviews the composition of bovine frozen semen dilution,the development of egg yolk dilution and animal-free dilution,the e f ectofcryoprotectiveagentadditiononspermfreezing,theapplicationofantioxidantsandantibioticsincryopreservationof bovinesemen,hopingprovideareferenceforfutureresearchoncryopreservationofbovinesemenKeywords：bovine semen；cryopreservation；research progress自从1951年世界上第一头通过冷冻精液进行人工授精的牛犊诞生,牛的精液冷冻技术就开始应用于生产中％1958年，我国开始进行精液冷冻保存研究，随后在全国推广，目前以奶牛应用最为广泛％近年来随着牛人工授精技术的快速发展，牛精液冷冻保存技术也在不断完善，将牛精液经过特殊处理保存在超低温下，可以有效抑制精子的新陈代谢，延长精子在体外生存时间，从而达到精液长期保存利用的目的。
家禽精液冷冻保存技术研究进展
家禽精液冷冻保存技术研究进展
邓溯顺; 燕海峰; 易康乐; Pavel Trefil; 陈铁桥
【期刊名称】《《家禽科学》》
【年(卷),期】2012(000)005
【摘要】家鸡精液冷冻保护是物种资源保存最廉价的方法。
本文从家鸡精液的稀释液、冷冻保护剂、冻精形式、平衡时间、冷冻速率、解冻速率、精液质量检测方法等几个方面,综述了国内外研究进展,并对目前家鸡精液冷冻技术应用存在的问题进行了分析,提出了初步研究思路。
【总页数】4页(P45-48)
【作者】邓溯顺; 燕海峰; 易康乐; Pavel Trefil; 陈铁桥
【作者单位】湖南农业大学动物医学院湖南长沙410081; 湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131; 捷克生物医药研究所布拉格25449
【正文语种】中文
【中图分类】S814.3
【相关文献】
1.牛精液冷冻保存技术研究进展 [J], 任忠伟; 苏智辉; 杜烨青; 胡建宏
2.大熊猫精液冷冻保存技术研究进展 [J], 程楷淇;刘国文;石亚男;冯晓岚;赵鹏鹏;林鹏飞
3.山羊精液冷冻保存技术研究进展 [J], 纪云飞
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5.家禽精液冷冻保存技术的研究进展 [J], 李昂;仲妍妍;章德育
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实验十五精液的冷冻保存
实验十五精液的冷冻保存一.实验特点实验类型：综合型实验实验类别：专业基础课计划学时：2学时每组人数：3～4人二、实验目的要求精子具有受温度变化直接影响本身活动力和代谢能力力的生物学特性。
利用这一特性，将精液特殊处理后，保存在超低温下，精子代谢活动完全受到抑制，停止能量消耗，处于生命静止状态，长期保存下来。
一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。
要求同学们了解精液冷冻保存的技术操作过程和精液冷冻保存原理，初步学会冷冻保存方法。
三．实验原理冰晶化是水在降温过程中的一定温度下，水分子重新按几何图形排列形成冰晶。
冰晶可造成精细胞（精子）内外的溶质浓度和渗透压增高，引起细胞内脱水、原生质变干、酸碱失去平衡、细胞膜和顶体以及整个组织和结构破坏等致死性伤害，最后导致精子发生不可逆的变化而死亡。
一般精液内含85%～95%的水分，精子内也含有及少量的水分，这些水分在降温过程中在-0.6～-60℃温度区内缓慢降温能形成冰晶。
降温速率越慢，所形成的冰晶越大，其中特别以-15～-25℃时冰晶形成最多。
在冷冻精液过程中只有避开这个有害温度区，才能得以长期保存。
快速升降温度的办法，难以达到完全玻璃化冻结条件。
为此，在制作冷冻精液的稀释液内，要加入一定量的甘油等抗冻害物质。
甘油具有极强的亲水性，可限制水分子形成冰晶而处于过冷状态，降低水形成冰晶的温度，即缩小精子的有害温度的上限。
此外甘油容易渗透精子内，可降低渗透压改变的不良影响及营养作用等，增强精子的抗冻害能力和无冻害生存环境。
精液在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶，精子能否生存的关键在于冰晶的大小，冰晶越大对精液伤害越大，反之冰晶越小，伤害越小甚至无损伤。
因此，只要避免大冰晶形成，并使精子稳定在微晶的状态下，一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。
四．实验材料和仪器精液、2.9%的柠檬酸钠溶液、50～100ml烧杯、滴管、10 ml试管、低温温度计、20～80目纱网、漏勺、灭菌纱布袋、液氮罐、液氮、载玻片、盖玻片、显微镜、保温箱。
精液的冷冻保存课件(共21张PPT)《畜禽繁殖与改良》
小结
精液冷冻保存的意义
精液的冷冻保存
精液冷冻保存原理精液冷冻技术Fra bibliotek液态→固态
结晶态：缓慢降温形成。水分子有序形成 冰晶对精子有害：机械和渗透压损伤。
（0～-60℃ ）（ -15～-25℃）
玻璃态：快速降温形成。水分子无序形成 玻璃样的超微粒结晶，对精子无害
（ -60～-250 ℃ ）
• 玻璃化是可逆的，不稳定的，当缓慢升温时又可能形成冰晶化。
3精液冷冻技术
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三、精液冷冻技术
2精液冷冻保存的原理
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二、精液冷冻保存的原理
利用超低温使精液和精子快速冷冻，快速越 过形成冰晶的温度范围（0～-60 ℃）、精液或 精子中的水分不形成冰晶，而是形成玻璃化。同 时在抗冻剂的存在下使精子免受冻伤，在温度上 升至体温精液解冻后精子能够保持完整的形态结 构、功能和受精能力。
二、精液冷冻保存的原理
0.08亿÷0.25mL=0.32亿/mL 细管冻精精子密度为：
0.32亿/mL÷0.35亿/mL=0.914亿/mL 稀释倍数为：
13.8亿/mL÷0.914亿/mL≈15(倍)
三、精液冷冻技术
➢ 精液稀释 • 稀释液的配制
三、精液冷冻技术
精液稀释
两次稀释法：缩短甘油与精子接触的时间，甘油添加量5%-7%
三、精液冷冻技术
精液分装
0.25mm细管冻精
精液分装机
三、精液冷冻技术
冷冻精液
三、精液冷冻技术
冷冻精液
三、精液冷冻技术
活率检查
冻精解冻
细管型：直接将其投入到38-40℃的温水中，待冻精融化到一半时，立即取出备用。
三、精液冷冻技术
保存精液
建立和规范生育力保存和操作流程
建立和规范生育力保存和操作流程一、引言随着社会的发展和人口的增长，生育力保存变得越来越重要。
生育力保存是指将男女生殖细胞（精子和卵子）或胚胎冷冻保存起来，以备将来生育需要。
这一技术已经在医学领域得到广泛应用，不仅可以帮助那些患有不育症的患者实现生育愿望，还可以帮助那些需要延迟生育计划的人群，如职业女性、癌症患者等。
然而，生育力保存并非一项简单的技术，其中涉及到许多复杂的流程和操作，需要进行规范和管理，以确保保存的生育力的质量和安全性。
为了建立和规范生育力保存和操作流程，本文将分为几个部分来探讨这一话题，包括生育力保存的意义和价值、生育力保存的技术原理和方法、生育力保存的管理和规范等内容。
二、生育力保存的意义和价值1. 解决不育问题：越来越多的夫妇在生育上遇到困难，导致不育问题成为一个全球性的社会问题。
通过生育力保存技术，可以帮助那些患有不育症的夫妇实现生育愿望。
2. 延迟生育计划：随着生活节奏的加快和职业竞争的激烈，许多人需要延迟生育计划，以追求事业和个人发展。
生育力保存技术可以帮助这些人在较高年龄时依然具备生育能力。
3. 防止疾病遗传：有些人患有遗传性疾病，通过生育力保存技术，可以选择健康的胚胎进行植入，以减少遗传疾病的传播。
4. 保护生殖系统：许多患有癌症等严重疾病的患者，在接受化疗或放疗的过程中会对生殖系统产生损害。
通过生育力保存技术，可以在治疗前保存自己的生育力，以备将来恢复生育能力。
总之，生育力保存技术具有重要的意义和价值，可以帮助更多的人实现生育愿望，延缓生育计划，预防遗传疾病传播，保护生殖系统健康。
因此，建立和规范生育力保存和操作流程显得尤为重要。
三、生育力保存的技术原理和方法生育力保存技术主要包括精子冷冻、卵子冷冻和胚胎冷冻三种方法。
不同的方法适用于不同的情况和需求，具体如下：1. 精子冷冻：精子冷冻是将男性的精子冷冻保存起来，以备将来生育需要。
精子冷冻技术成熟、简单、费用低廉，并且对男性生育力的影响较小，适用于那些需要延迟生育计划或患有不育症的男性。