酵母实验操作方案
酵母制作馒头实验报告
酵母制作馒头实验报告实验目的本次实验旨在探究酵母在制作馒头过程中的作用，并比较不同参数下的馒头质地，以便寻找最佳制作条件。
实验材料和方法材料1. 高筋面粉300克2. 酵母10克3. 白糖10克4. 温水100克5. 盐适量方法1. 将面粉放入容器中，加入白糖和盐，充分搅拌均匀。
2. 在面粉中挖一个小坑，将酵母溶解在温水中。
3. 将溶解好的酵母水倒入面粉中，用筷子搅拌均匀。
4. 将面团放在桌面上，揉搓约10分钟，直到面团光滑且有弹性。
5. 将揉好的面团放入盆中，用湿布盖好，放置在温暖通风的环境中发酵1至2小时，直到面团体积明显增大。
6. 取出面团，揉搓排除气泡。
7. 将面团分割成适当大小的小块，搓圆。
8. 将搓好的小面团放在蒸锅中，蒸15至20分钟，直到馒头变得蓬松。
9. 取出馒头，稍稍晾凉后即可食用。
实验结果及分析在本次实验中，我们尝试了不同条件下制作馒头：实验一：发酵时间对馒头质地的影响在这一实验中，我们将发酵时间设置为1小时和2小时进行对比。
结果显示，发酵时间为2小时的馒头比发酵时间为1小时的馒头更加蓬松，质地更加绵软。
这是因为在较长时间的发酵过程中，酵母可以更充分地分解淀粉和蛋白质，产生更多的气体，从而使馒头发酵得更好。
实验二：酵母用量对馒头质地的影响在这一实验中，我们将酵母用量设置为5克、10克和15克进行对比。
结果显示，酵母用量为10克时的馒头比其他两组更加松软。
而酵母用量过多或过少，都会对馒头的质地造成不良影响。
过多的酵母会导致馒头过于发糖，而过少的酵母则会使发酵不充分，馒头质地较硬。
结论在本次实验中，我们发现馒头制作的关键因素是发酵时间和酵母用量。
较长时间的发酵和适量的酵母用量能够获得更加蓬松和绵软的馒头。
在实际制作中，我们可以根据自己的口味偏好和实际情况进行调整。
如果时间允许，可以选择较长的发酵时间以获得最佳的效果。
总之，酵母在馒头制作中起到了关键的作用，通过本次实验我们对制作馒头的原理和方法有了更深的了解。
酵母单杂交实验流程
酵母单杂交实验流程概述：酵母单杂交实验是一种常用的研究方法，用于确定基因的遗传方式和相互作用。
通过将两个不同的酵母菌株进行杂交，可以获得具有两个不同亲代特征的杂交子代。
本文将详细介绍酵母单杂交实验的流程。
实验材料和设备准备：1. 两个不同的酵母菌株，分别标记为A和B。
2. 酵母菌培养基。
3. 酵母菌培养皿。
4. 酵母菌细胞计数板。
5. 显微镜和显微镜玻片。
6. 移液器和移液管。
7. 离心机。
实验步骤：1. 预培养酵母菌株：将酵母菌株A和B分别接种到含有适宜培养基的培养皿中，分别培养过夜，以确保菌株处于最佳生长状态。
2. 制备酵母菌株的细胞悬液：用适量的酵母菌培养基将菌落转移到离心管中，用移液管充分混合。
然后，使用显微镜和细胞计数板计数酵母菌细胞的浓度。
调整浓度至所需的菌数。
3. 杂交：将菌株A和B的细胞悬液按照一定比例混合，然后在培养皿中滴加混合液。
确保混合液均匀分布在培养皿表面。
4. 孵育：将培养皿置于恒温培养箱中，培养一定时间，以便杂交子代形成。
5. 筛选杂交子代：从培养皿中挑选出杂交子代的克隆菌落。
使用显微镜检查克隆菌落的形态，选择具有两个亲代特征的菌落。
6. 单克隆培养：将所选菌落分别转移到新的培养皿中，培养过夜。
确保每个菌落都是来自单个细胞的纯系。
7. 验证杂交子代：对单克隆菌落进行遗传分析，以验证杂交子代的基因遗传方式。
可以使用多种遗传分析方法，例如基因重组实验、基因敲除实验等。
8. 结果分析：对杂交子代的遗传方式和相互作用进行统计和分析。
根据结果可以推断出酵母菌株A和B的基因遗传方式和相互作用。
实验注意事项：1. 实验过程中要保持无菌操作，避免外源性污染。
2. 实验室应保持干净整洁，设备要经过正确的消毒和清洗。
3. 实验过程中要注意安全，避免接触有害物质和操作过程中的伤害风险。
4. 实验结果应进行统计分析，并与控制组进行比较，以确保结果的准确性和可靠性。
总结：酵母单杂交实验是一种重要的遗传研究方法，通过将两个不同的酵母菌株进行杂交，可以获得具有两个不同亲代特征的杂交子代。
高中生物操作类实验教案
高中生物操作类实验教案
实验目的：通过观察酵母菌的呼吸作用，了解生物体呼吸过程中产生的能量来源以及呼吸产物。
同时培养学生动手能力和科学观察能力。
实验材料：
- 干酵母
- 盐水
- 试管
- 实验室天平
- 水槽
- 密闭容器
- 实验记录表
实验步骤：
1. 将干酵母加入盐水中搅拌均匀，制备成悬浮液。
2. 在试管中放入适量的悬浮液，并将试管放入水槽中。
3. 将密闭容器盖在试管口上方，确保试管内的气体不会泄露。
4. 观察一段时间后，记录观察到的现象和气泡的数量。
5. 将实验结果填写在实验记录表中。
实验原理：
酵母菌在呼吸作用中会消耗氧气，并释放二氧化碳和能量。
当酵母菌与水混合后，会在水中继续进行呼吸作用，产生气泡释放到空气中。
实验注意事项：
1. 操作时要小心，避免试管破裂或者溅出液体。
2. 注意实验室安全，勿将实验物品随意丢弃。
3. 实验结束后要清洗实验器材并归还。
实验结果分析：
通过观察气泡的数量和实验现象，可以了解酵母菌在呼吸作用中释放气体的过程和结果。
同时，可以进一步讨论生物体呼吸作用对环境的影响和生物体的生存条件。
酵母菌纯培养的实验步骤
酵母菌纯培养的实验步骤
酵母菌纯培养的实验步骤如下：
1. 取少量酵母菌样品，使用选择培养基（例如固体葡萄糖、面粉琼脂培养基，添加有特殊药液和增菌剂的选择培养基有利于酵母菌的筛选）进行分离纯化。
2. 筛选出发酵力良好的菌落并进行纯培养。
在酒精发酵实验中发现典型的酵母菌菌落可移种至综合生化管培养箱中进一步鉴定。
3. 使用液体培养基进行酵母菌扩大培养，准备好无菌吸管和无菌锥形瓶，将酵母菌从锥形瓶中转移到试管中。
4. 对酵母菌进行计数，准备血液培养皿和牛肉膏琼脂培养基，接种菌液到培养基中使其生长并繁殖，观察生长情况并进行计数。
通过以上步骤，就可以对酵母菌进行纯培养，请确保所有使用到的工具和试剂都经过灭菌处理。
以上步骤仅供参考，建议您咨询专业人士获取更具体的信息。
酵母单杂实验步骤
酵母单杂实验步骤酵母是一种微生物，常被用于食品发酵和酿酒过程中。
酵母单杂实验可以帮助我们更好地了解酵母的特性和行为。
下面是进行酵母单杂实验的步骤：第一步：准备所需要的实验器材和试剂。
包括培养皿、琼脂平板、酵母菌种、无菌的培养基、移液器等。
第二步：将培养皿和琼脂平板进行消毒处理。
使用高温和紫外线辐射等方法杀灭表面的微生物，保证实验的无菌环境。
第三步：准备酵母菌种。
从酒厂、面包店等地获取新鲜的酵母菌，用无菌的移液器将酵母悬液移到培养基的琼脂平板上。
第四步：将酵母菌培养在琼脂平板上。
将平板倒置放在恒温箱中，温度控制在30℃左右。
酵母菌在琼脂平板上生长，形成菌落。
第五步：观察菌落的形态和特征。
通过裸眼观察和放大镜观察菌落的大小、颜色、形状等，记录并比较不同菌落的特征。
第六步：选择出具有单一菌种的菌落。
用无菌的移液器将所选择的菌落转移到新鲜的琼脂平板上，以分离并纯化单一菌种。
第七步：进行酵母单杂实验。
在新鲜的琼脂平板上划线或者用无菌的吸管在培养基上进行划线，用已培养好的单一菌种接种。
第八步：观察和记录酵母菌的生长情况。
在指定的时间内，观察酵母菌在琼脂平板上的生长情况，包括生长速度和菌落的形态等，记录并分析实验结果。
第九步：对实验结果进行数据处理和分析。
根据实验结果，进行数据统计和图表绘制，比较不同菌落的差异。
酵母单杂实验是了解酵母菌的生长特性和行为的有效方法。
通过该实验，我们可以了解不同菌落的差异，为研究酵母菌的应用提供依据。
同时，该实验还可以培养学生的实验操作能力和科学观察能力，对培养科学素养有重要意义。
酵母实验操作方案
酵母实验操作方案一．质粒酶切及线性化1）用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2，可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液，终体积80ul。
2）线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒70μl内切酶（SacI，SalI，BglⅡ）2μl10 x buffer 8μl3）酶切3－16小时，一般3小时即可；二．乙醇回收酶切质粒1）2倍体积无水乙醇和0.1倍体积的3M NaAC（PH 5.2），混匀，沉淀DNA；2）－20℃数个小时（>2小时），13,200rpm离心10～20分钟，吸弃上清；3）300ul 70％乙醇洗一次，13,200rpm离心10分钟，吸弃上清（注意离心管位置，从含有DNA的离心管另一侧吸取）；4）37℃烘干水分和残留乙醇；5）用20μl ddH2O重溶；6）1ul样品电泳检测DNA量，计算DNA总量；三．电转化1．准备感受态细胞1）5ml YPD 接种GS115单菌落，250rpm，30℃，摇菌24 hours；2）100ml YPD，接种百分之一，同时留1ml空白YPD，30℃，250rpm，7～8 hours，直到OD600＝1.3～1.5；3）菌液转入500ml离心管，JA14，1500g，4℃离心5 min，弃上清；4）100ml冰水重悬，同上离心，弃上清；5）80～90ml冰水重悬【50ml】，同上离心，弃上清；6）20ml冰1M sorbitol 重悬【5ml】，然后转移到50ml 离心管中，同上离心，弃上清；7）约150μl 1M sorbitol重悬【250ul】，4℃备用，剩下的感受态细胞可以保存在－70℃冰箱大约3周。
2．转化1)100μl GS115感受态细胞加入＋20μl 线性化质粒，用枪打匀；2)冰浴5min，加入0.2cm转化杯中，轻轻将液体震到杯底，立即冰浴；3) 电转化，参数设定：电压1500V 电容25μF 电阻200欧姆，放电时间4～5ms4)立即加650μl 冰1M sorbitol 入转化杯，打匀；5) 迅速涂板，250μl/块MD板，共3块；6) 涂好的板放在30℃培养箱中培养4～5天，至菌落直径1mm即可。
酵母发酵实验
酵母发酵实验酵母是一种单细胞真菌，广泛应用于发酵过程中。
通过与酵母的接触，我们可以发现其在合适条件下，能够将糖分解为酒精和二氧化碳，产生酵母发酵现象。
本实验将介绍酵母发酵的基本原理和实验步骤。
一、实验目的本实验旨在探究酵母在不同条件下的发酵速度，并分析影响酵母发酵的因素。
二、实验材料- 干活性酵母- 白砂糖- 500毫升烧杯或容量瓶- 温水- 温度计- 塑料气球或气吹管- 实验记录表格三、实验步骤1. 准备工作a. 清洗和消毒烧杯或容量瓶，确保无细菌污染。
b. 准备适量的温水，并用温度计测量温度。
c. 准备记录表格，列出实验条件和观察结果的栏目。
2. 实验组设置a. 准备三组实验组。
b. 每组在一个烧杯或容量瓶中加入相同量的温水。
c. 将白砂糖按照不同浓度加入到三组实验组中，比如A组加入10克、B组加入20克、C组加入30克。
3. 酵母投放a. 每组实验组中加入相同量的干活性酵母，比如每组加入5克。
b. 快速搅拌，确保糖和酵母均匀混合。
4. 温度控制a. 使用温度计检测实验组中的温度，并保持恒温。
b. 调整温水的温度，分别为A组控制在25摄氏度、B组控制在30摄氏度、C组控制在35摄氏度。
5. 观察记录a. 开始观察并记录每组实验组的发酵情况。
b. 使用塑料气球或气吹管将实验组口部密封，以防二氧化碳逸出。
c. 每隔15分钟观察一次发酵结果，并记录到表格中。
6. 数据分析和讨论a. 对每组实验组的发酵速度进行比较，分析不同温度和糖浓度对发酵的影响。
b. 讨论可能的影响因素，例如温度、糖浓度、酵母菌量等。
c. 总结实验结果，得出结论。
四、实验注意事项1. 实验结束后，及时清理实验场地，并注意对实验器材进行清洗和消毒。
2. 在进行实验时，确保操作平稳，以避免酵母液溅出。
3. 在实验过程中，严格遵守实验室规章制度，确保安全操作。
五、实验结果与分析通过观察不同实验条件下的酵母发酵情况，我们可以看到以下结果：在较高温度下（35摄氏度），酵母的发酵速度更快，并且产生的气体量更大。
微生物实验教案：酵母培养的教学设计
微生物实验教案：酵母培养的教学设计酵母培养的教学设计一、实验目的通过酵母（葡萄酒发酵酵母）的培养实验，让学生了解酵母生长的条件、培养方式、菌落特征、代数增长等基本知识，提高其观察能力和实验操作能力。
二、实验原理酵母是一种微生物，即真菌类生物。
酵母是发酵工业和食品工业中的一个重要菌种。
在培养酵母时需要注意以下几个方面：1、生长基质的准备需要准备好的培养液可以是yeast extract peptone dextrose medium（YPDM），也可以是酵母液，基本配方为葡萄糖、酵母粉、肉汤粉和水。
其中，酵母粉是一个含有营养良好酵母的混合饲料，但不能单用酵母粉来制作培养基。
2、酵母的寿命酵母同样有寿命，它寿命短的原因是存在一定的基因缺陷和代谢毒物。
而以代谢产物进行培养则可以延长酵母的的寿命。
因此，在酵母孵育过程中，可以添加一定的异丙醇等代谢产物以延长酵母寿命。
3、培养条件对于酵母菌落的培养，需要选择适当的培养条件，包括适当的温度、适当的氧气浓度等。
4、培养时间培养时间是影响酵母的生长和代数增长的重要因素。
细胞分裂速度和代数增长速度与温度、细胞密度等有关，在适宜的条件下形成比较容易。
三、实验器材1、试管架2、移液管3、胶头针4、灭菌药水（70%酒精）5、生物安全柜6、显微镜7、光学显微镜8、培养盘四、实验步骤1、接种酵母从冰箱里用胶头针取一块酵母，将其在生物安全柜中接种到已经准备好的YPDM或酵母液中。
2、培养酵母将已经接种过的酵母培养于适宜的温度下，比如说30℃的恒温槽中。
3、鉴别酿酒酵母的特征观察酿酒酵母在YPDM或酵母液中生长的情况，可以根据它的菌落特征、质地等鉴别酿酒酵母。
4、计算酵母的代数增长可以通过观察酵母培养基中倒置培养盘中的菌落，计算酵母的代数增长。
五、实验注意事项1、实验前需要杀菌物品，防止菌群繁殖，保证实验安全性。
2、按操作规范进行实验操作，防止病菌交叉污染。
3、观察过程中需要光学显微镜，防止目光衰减造成伤害。
酵母发酵过程实验报告
一、实验目的1. 了解酵母发酵的基本原理和过程。
2. 掌握酵母发酵实验的操作方法。
3. 通过实验验证酵母发酵产生的气体主要是二氧化碳。
二、实验原理酵母发酵是一种生物化学过程，其中酵母菌利用糖类作为碳源，在无氧条件下进行无氧呼吸，产生酒精和二氧化碳气体。
在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，产生水和二氧化碳。
本实验主要研究酵母在无氧条件下的发酵过程。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：面粉、酵母粉、糖、水、锥形瓶、烧杯、滴管、橡皮塞、澄清石灰水等。
2. 实验试剂：葡萄糖、氯化钙、氢氧化钙等。
四、实验步骤1. 准备实验材料：将面粉、酵母粉、糖和水按一定比例混合，搅拌均匀，形成面团。
2. 分装面团：将面团平均分成两份，分别放入两个锥形瓶中。
3. 设置对照组和实验组：- 对照组：在锥形瓶中加入少量葡萄糖溶液，用橡皮塞封口，放入烧杯中。
- 实验组：在锥形瓶中加入面团，用橡皮塞封口，放入烧杯中。
4. 将两组锥形瓶置于37℃恒温培养箱中，分别培养24小时和48小时。
5. 观察并记录实验现象：- 对照组：观察锥形瓶内葡萄糖溶液的变化，记录溶液颜色、透明度等。
- 实验组：观察锥形瓶内面团的变化，记录面团体积、硬度等。
6. 将实验组锥形瓶中的气体导入澄清石灰水中，观察石灰水的变化。
五、实验结果与分析1. 对照组实验现象：24小时后，葡萄糖溶液颜色变浅，透明度降低；48小时后，葡萄糖溶液颜色消失，溶液浑浊。
2. 实验组实验现象：24小时后，面团体积明显增大，硬度降低；48小时后，面团体积继续增大，硬度进一步降低。
3. 实验组气体检验：将实验组锥形瓶中的气体导入澄清石灰水中，石灰水变浑浊，证明产生了二氧化碳气体。
六、实验结论1. 酵母发酵过程中，酵母菌利用糖类作为碳源，在无氧条件下进行无氧呼吸，产生酒精和二氧化碳气体。
2. 本实验通过观察面团体积变化和气体检验，验证了酵母发酵过程中产生了二氧化碳气体。
七、实验讨论1. 影响酵母发酵的因素有哪些？如何优化实验条件？2. 酵母发酵在食品工业中的应用有哪些？八、实验总结本实验通过观察酵母发酵过程中的面团体积变化和气体检验，验证了酵母发酵过程中产生了二氧化碳气体。
实验报告酵母的观察
实验报告酵母的观察引言酵母是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中。
它们具有重要的实验应用价值，尤其在食品发酵、酒精生产和生物学研究等领域。
本实验旨在观察酵母的生长情况和结构特征，通过实际操作探索酵母在不同环境条件下的生态适应和繁殖机制。
材料与方法材料：1. 酵母培养基2. 酵母菌液3. 显微镜4. 盖玻片5. 移液器6. 培养皿方法：1. 在培养皿中倒入酵母培养基，制备成0.5%的酵母悬浮液。
2. 准备好显微镜和盖玻片。
3. 使用移液器取一滴酵母菌液放在盖玻片上。
4. 在显微镜下观察酵母的形态和生长情况。
5. 记录观察结果。
结果与讨论结果经过观察，我们发现酵母细胞呈现圆形或椭圆形，大小约为5-10微米。
它们具有一个厚壁的细胞质，质地松软，呈浑浊的乳白色。
酵母细胞在显微镜下可以清楚地看到细胞壁和细胞质的各种细节结构。
讨论酵母是一种单细胞真菌，通过对于糖类物质的代谢而产生能量，并产生二氧化碳和乙醇等有机物质。
酵母在培养基中生长迅速，形成了很多的酵母菌群落。
在显微镜下观察，可以看到酵母细胞繁殖迅速，呈现出链状或团状的结构。
这些细胞通过分裂繁殖，形成新的酵母子细胞。
酵母细胞的细胞壁是一层坚韧的外壳，保护细胞不受外界环境的损害。
细胞壁主要由纤维素和蛋白质组成，可以提供细胞形态的稳定性和抗压强度。
酵母细胞在培养基中的生长是通过酵母菌液的代谢活动来完成的，它们摄取糖类物质，并通过发酵过程产生能量和二氧化碳。
这种代谢过程又进一步促进了酵母细胞的繁殖和生长。
酵母细胞的观察为我们提供了一种了解生物细胞结构和生命活动的途径。
通过对酵母细胞的观察和研究，我们可以更好地理解细胞的组成和功能，在食品和酒精等方面的应用也具有重要意义。
结论通过本次实验，我们观察了酵母细胞在显微镜下的结构和生长情况。
酵母细胞形态多样，大小均匀，细胞壁坚韧。
酵母细胞在培养基中生长迅速，形成了酵母菌群落。
这次实验为我们提供了一个了解酵母细胞结构和生态特征的机会，对于理解微生物生物学和相关应用有着重要的意义。
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酵母实验操作方案
一．质粒酶切及线性化
1）用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2，可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液，终体积80ul。
2）线性化质粒
使用80μl酶切体系
9KSF2质粒70μl
内切酶（SacI，SalI，BglⅡ）2μl
10 x buffer 8μl
3）酶切3－16小时，一般3小时即可；
二．乙醇回收酶切质粒
1）2倍体积无水乙醇和0.1倍体积的3M NaAC（PH 5.2），混匀，沉淀DNA；
2）－20℃数个小时（>2小时），13,200rpm离心10～20分钟，吸弃上清；
3）300ul 70％乙醇洗一次，13,200rpm离心10分钟，吸弃上清（注意离心管位置，从含有DNA的离心管另一侧吸取）；
4）37℃烘干水分和残留乙醇；
5）用20μl ddH2O重溶；
6）1ul样品电泳检测DNA量，计算DNA总量；
三．电转化
1．准备感受态细胞
1）5ml YPD 接种GS115单菌落，250rpm，30℃，摇菌24 hours；
2）100ml YPD，接种百分之一，同时留1ml空白YPD，30℃，250rpm，7～8 hours，直到OD600＝1.3～1.5；
3）菌液转入500ml离心管，JA14，1500g，4℃离心5 min，弃上清；
4）100ml冰水重悬，同上离心，弃上清；
5）80～90ml冰水重悬【50ml】，同上离心，弃上清；
6）20ml冰1M sorbitol 重悬【5ml】，然后转移到50ml 离心管中，同上离心，弃上清；7）约150μl 1M sorbitol重悬【250ul】，4℃备用，剩下的感受态细胞可以保存在－70℃冰箱大约3周。
2．转化
1)100μl GS115感受态细胞加入＋20μl 线性化质粒，用枪打匀；
2)冰浴5min，加入0.2cm转化杯中，轻轻将液体震到杯底，立即冰浴；
3) 电转化，参数设定：电压1500V 电容25μF 电阻200欧姆，放电时间4～5ms
4)立即加650μl 冰1M sorbitol 入转化杯，打匀；
5) 迅速涂板，250μl/块MD板，共3块；
6) 涂好的板放在30℃培养箱中培养4～5天，至菌落直径1mm即可。
注：
a）【】内为手册推荐量，相关文献报道，转化效率一般为103～104 / ugDNA，所需质粒量0.3－10ug不等；
b）放电是可好出现电击穿现象，原因有：酵母浓度不够；DNA溶液离子浓度过大；混合液体积不够；
c）MD板加入1M sorbitol ，转化时第2）步冰浴时间延长至1－2小时，均有利于提高转化效率
四．G418筛选多拷贝基因
1）取出长有克隆的3块板，可考虑先挑10－20个菌落先表达；
2）第一块加入2ml 灭菌的ddH2O，用涂布棒打匀，洗后，菌液吸入第二块；
3）第二块加入1ml，洗之，吸入第三块；
4）菌液吸入EP管，可适量补充ddH2o；
5）混匀后取适量稀释约50倍，4ul×50＝200ul每块G418板，G418浓度从0.25－4.0mg/ml 各一块；
6）注意涂布均匀，可适量补充ddH2O，
7）30℃烘箱培养，2－5day，其余菌液可4℃保存
注：
a）手册推荐方法：第4）步将菌液转入EP管中，振荡5－10秒，用分光光度计测菌体密度，1OD600＝5×107 cells/ml, 取一定体积稀释至200ul/每块G418板, 涂布～105 cells；注意agar的存在会干扰分光光度计的读数。
五．表达：
1）从G418板挑单克隆入4ml/管MGY接种，30℃，250rpm，2天左右至OD＝2－6，颜色乳白；
2）取1ml菌液于EP管中保种，余3ml菌液离心，1500g，5min，菌体换3ml BMMY，加千分之五甲醇，300ul/管；
3）每隔24小时加千分之五甲醇；
4）至表达之日起2天后每天取样80ul，留作电泳分析；
5）表达4天结束，1500g离心，5min，分别收集上清和沉淀；
6）上清用作蛋白分析，跑SDS-PAGE电泳，Western Blotting分析，ELISA分析，样品浓缩，纯化分析等
附录一
培养基
LB：
Tryptone 10g 1%
Yeast Extract 5g 0.5%
NaCl 5g 0.5%
【Agar】15g 1.5%（固体培养基另加）
dH2O稀释至1L，
高压灭菌
YPD：
Yeast Extract 10g 1%
Peptone 20g 2%
【Arga】20g 2％（固体培养基另加）
dH2O 900ml
高压灭菌，冷却至60度，加
10×Dextrose 100ml
YPD－G418：
250ml YPD加10×Dextrose后加适量G418，注意轻摇混匀，不要产生气泡，同时留空白对照板。
YNB 3.4g 0.34%
【Sorbitol】182.2g 1M
【Agar】15-20g 1.5%-2%
dH2O 800ml
高压灭菌，冷却至60度，加
10×(NH4)2SO4100ml 1%
500×biotin 2ml 4×10－5％
10×Dextrose 100ml 1％
MGY：
YNB 3.4g 0.34%
dH2O 800ml
高压灭菌，冷却至60度，加
10×(NH4)2SO4100ml 1%
10×Glycerol 100ml 1%
500×biotin 2ml 4×10－5％
BMMY：
Yeast Extract 10g 1%
Peptone 20g 2%
YNB 3.4g 0.34%
K2HPO4 3.013g
KH2PO4 11.813g (PH6.0 缓冲液)
dH2O 900ml
高压灭菌，冷却至60度，加
10×(NH4)2SO4100ml 1%
每次使用之前，分装后加2/1000体积500×biotin 2ml 4×10－5％
连接产物的质粒转化
1）－70℃取出Top10感受态细胞，50ul/管，取出后迅速分装城10ul或20ul/管；2）冰浴30min；
3）42℃，30秒（精确计时），置于冰水1－2min；
4）加等体积37℃预热的SOC培养基；
5）37℃，225rpm，培养45min；
6）100ul分别涂板，37℃培养；。