附录二常用的培养基及试剂
细胞培养基本实验操作一般培养试剂介绍常用培养基及基本特性 HBSS的配制和使用攻略
常用培养基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mM HEPES缓冲液。
6、McCoy’s 5AMcCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
常见微生物培养基
常见微生物培养基1. 肉汤培养基（Nutrient Broth）：这是一种常用的基础培养基，适用于多种微生物的生长。
它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分，提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。
2. 肉汤琼脂（Nutrient Agar）：在肉汤培养基的基础上添加琼脂，使其成为固体培养基。
这种培养基常用于分离和鉴定微生物，因为固体培养基可以形成单个菌落，便于观察和计数。
3. 血琼脂（Blood Agar）：在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。
这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物（如链球菌和肺炎球菌）特别有效。
4. 麦康凯琼脂（MacConkey Agar）：这是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道杆菌。
它含有胆盐和结晶紫，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，同时促进革兰氏阴性菌的生长。
5. 沙保罗琼脂（Sabouraud Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。
它还含有抗生素氯霉素，可以抑制细菌的生长。
6. 鲁哥氏碘液（Lugol's Iodine）：这是一种用于检测细菌的染色剂，通常与革兰氏染色法一起使用。
它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有马铃薯提取物和葡萄糖。
它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。
8. 三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）：这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基，含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。
通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况，可以区分不同的肠道杆菌。
9. 革兰氏染色法（Gram Stain）：这是一种用于区分细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的颜色，可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
10. 荧光染色法（Fluorescent Stain）：这是一种用于检测细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的荧光颜色，可以区分不同的细菌种类。
146种常用培养基配方
146种常用培养基配方以下是一些常见的培养基配方：1.LB培养基：-牛肉浸液：10g-酵母浸粉：10g-纯化水：1L-加热溶解牛肉浸液和酵母浸粉在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
2.菌落计数培养基：-蛋白胨消化物：5g-酵母浸粉：2.5g-葡萄糖：1g-纯化水：1L-加热溶解蛋白胨消化物、酵母浸粉和葡萄糖在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
3.大肠杆菌选择性培养基：-精制豆粉精：10g-纵剖海藻酸钠：10g-氯化钠：5g-硫酸镁：0.2g-活性炭：1g-纯化水：1L-加热溶解精制豆粉精、纵剖海藻酸钠、氯化钠、硫酸镁和活性炭在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
4.SDA培养基（用于真菌培养）：-磷酸二氢钾：1g-葡萄糖：20g-氯化钠：5g-氯化钠：5g-酵母浸粉：10g-酪蛋白胨：5g-地蜡：20g-纯化水：1L-加热溶解磷酸二氢钾、葡萄糖、氯化钠、酵母浸粉、酪蛋白胨和地蜡在纯化水中，煮沸溶解后，灭菌。
5.霍乱弧菌选择性富营养培养基：-精制海藻剖面：23g-麦芽浸粉：10g-氯化钠：10g-磷酸二氢钠：1.5g-纯化水：1L-加热溶解精制海藻剖面、麦芽浸粉、氯化钠和磷酸二氢钠在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
这只是一些常用的培养基配方的例子，根据不同的微生物需要，还有更多类型的培养基配方可供选择。
每个培养基的配方具体组成和浓度可以根据实验需要进行调整和优化，以获得最佳的培养条件。
同时，配方中的成分应根据实验目的和研究对象的特性进行选择，以确保培养基能够提供必要的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和培养。
实验室常用培养基及试剂清单完整版
3
高锰酸钾
分析纯、500g/瓶
2瓶
4
无水乙醇
分析纯、500mL/瓶
1箱
5
邻苯二甲酸氢钾
工作基准试剂50g—100g/瓶
1瓶
碘量瓶
150mL、250mL
各10个
实验室常用培养基及试剂清单
1菌落总数
序号
培养基和试剂名称
规格
数量
1
平板计数琼脂培养基
250g/瓶
2瓶
2
磷酸二氢钾
分析纯、500g/瓶2瓶来自3氢氧化钠分析纯、500g/瓶
1箱
4
浓盐酸
分析纯、500mL/瓶
1箱
2 大肠杆菌
11
乳糖胆盐发酵培养基
250g/瓶
2瓶
12
碘
分析纯、25g/瓶
1瓶
13
碘化钾
分析纯、500g/瓶
1瓶
3
甲基红
分析纯、25g/瓶
1瓶
4
甲基蓝
分析纯、25g/瓶
1瓶
5
次甲基蓝
分析纯、25g/瓶
1瓶
6测定还原糖、总糖
1
无水硫酸铜
分析纯、25g/瓶
1瓶
2
无水葡萄糖
分析纯、500g/瓶
1瓶
3
酒石酸钾钠
500g/瓶
1瓶
4
亚铁氰化钾
分析纯、500g/瓶
1瓶
7其他
1
氯化钠
分析纯、500g/瓶
2瓶
2
浓硫酸
分析纯、500mL/瓶
1瓶
3 霉菌和酵母菌
1
马铃薯-葡萄糖琼脂培养基
250g/瓶
1瓶
实验室常用培养基配方
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基，用于微生物的一般培养、分离和鉴定，其配方如下：-水：1000mL-肉浸膏或胨：三到五克-水解酪蛋白：五克-氯化钠：五克-琼脂：十五克2. 培养基ONE（BHI Agar）培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏，配方如下：-砂糖：十五克-胨：二十克-水：1000mL-酵母膏：二十克-酵母蛋白胨：十克-溶血素：十克-十％NaCl：五百毫升-甘油：百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基（TCBS Agar）TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测，配方如下：-水：1000mL-TCBS粉：一百克4. MacConkey琼脂培养基（MacConkey Agar）MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基，用于大肠杆菌的分离和检测，配方如下：-水：1000mL-肉浸膏：十七克-水解酪蛋白：十五克-氯化钠：五克-紫蘑菇素：六十毫克-琼脂：十五克5. Sabouraud琼脂培养基（Sabouraud Agar）Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水：1000mL-葡萄糖：四十克-琼脂：十五克-氯化钠：五克-氯已二维硫酸钾：二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方，实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外，还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离，如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时，需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
常用的药品试剂和培养基的配制方法
常用的药品试剂和培养基的配制方法药品试剂和培养基在生物化学实验室和微生物实验室中是非常常见而且必需的。
本文将介绍一些常用的药品试剂和培养基的配制方法。
一、药品试剂配制方法1.蒸馏水（distilled water）的制备：将自来水倒入蒸馏水机，设定适当的温度，蒸馏水机将自来水蒸发并再冷凝成蒸馏水，收集蒸馏水即可。
2.缓冲液（Buffer solution）的制备：缓冲液是具有稳定pH值的溶液，常用于生物实验中。
其中一种常见的缓冲液是Tris缓冲液的制备方法：a. 准备50mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.6），称取6.051g Tris粉末，加入适量的蒸馏水，溶解并调节pH到7.6b.将溶液用蒸馏水加至总体积1L。
最后，用自来水稀释至适当浓度即可。
3.乙醇（Ethanol）的制备：乙醇是实验室中常见的抗菌剂，用于消毒和杀死细菌和病毒。
一般来说，70％乙醇是最常见的浓度，可以按以下方法配制：a.取足够的无水乙醇（100％）和蒸馏水。
b.以70/30的体积比例混合乙醇和蒸馏水，搅拌混合均匀。
c.最后，将乙醇溶液过滤并储存在干燥、暗处。
4.洗涤液（Washing buffer）的制备：洗涤液用于洗涤和清洁生物实验中的试剂和器皿。
以下是一种简单的洗涤液的制备方法：a. 称取0.05M Tris-HCl缓冲液（pH 7.4），加入适量的NaCl溶液，混合均匀。
b. 在溶液中加入适量的Tween-20（如0.1％）或Triton X-100（如0.5％），混合均匀。
c.用蒸馏水稀释至适当浓度，最后pH值调整到合适的范围内。
二、培养基配制方法1.琼脂培养基（Agar medium）的制备：以下是一种适用于大部分微生物培养的琼脂培养基的制备方法：a.称取适量的琼脂粉末，并加入适量的蒸馏水中，迅速搅拌均匀，但要避免气泡产生。
b.在生物安全柜下，将混合溶液加热至沸腾，同时不断搅拌，直到琼脂完全溶解。
c.将溶液冷却至接近50℃，然后将适量的细菌营养物（如氨基酸和碳源）加入到培养基中。
实验二++细菌的形态学检查(1)
实验二细菌的形态学检查【目的和要求】1．熟悉细菌染色的常用染料和一般程序。
2．掌握革兰染色的方法、原理、结果观察及意义。
3．熟悉不染色标本检查法（压滴法和悬滴法）的方法与结果观察。
4．熟悉细菌的特殊染色法。
【试剂与器材】1．菌种：葡萄球菌、大肠埃希菌。
2．试剂：革兰染色液、细胞壁染色液、芽胞染色液、鞭毛染色液、生理盐水等。
3．其他：载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、香柏油、蜡笔、擦镜纸、脱油剂等。
【实验内容】一、细菌染色的一般程序细菌染色法分单染法和复染法。
单染法是用一种染料去染，所有细菌都染成一种颜色；复染法是用多种染料对细菌进行染色，不同细菌可染成不同的颜色。
大部分细菌染色的基本程序相同，即：涂片→干燥→固定→染色，根据实验目的选择不同的染色方法，在实际工作中，应用最广泛的是革兰染色法。
二、革兰染色1．染色原理（1）等电点学说：革兰阳性菌的等电点（pI2～3）比革兰阴性菌（pI4～5）低，在同一pH条件下革兰阳性菌带负电荷比革兰阴性菌要多，与带正电荷的碱性染料（结晶紫）结合性牢固，不易脱色。
（2）化学学说：革兰阳性菌含有大量的核糖核酸镁盐，与进入胞浆内的结晶紫和碘牢固结合成大分子复合物，不易被95%酒精脱色；而革兰阴性菌含此种物质少，故易被乙醇脱色。
（3）通透性学说：革兰阳性菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层较厚，含脂质少，脱色时，乙醇不易进入，而且95％乙醇可使细胞壁脱水，细胞壁间隙缩小，通透性降低，阻碍结晶紫和碘复合物渗出。
而革兰阴性菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层较薄，含脂质多，易被乙醇溶解，致使细胞壁通透性增高，细胞内的结晶紫与碘复合物易被溶出而脱色。
2．方法（1）涂片：取清洁无油迹的载玻片1张，用蜡笔划线将其分成左右两格。
用接种环先挑取生理盐水1~2环于载玻片每格中央，再分别挑取大肠杆菌和葡萄球菌少许菌落与生理盐水研匀，涂成直径约1.5cm的菌膜。
（2）干燥：让涂片自然干燥，也可在酒精灯火焰较远处微微加热烘干，但切勿靠近火焰。
附录二、微生物细菌学药敏培养基编码
附表二药敏培养基编码编码名称用途3001 MH琼脂培养基非苛养菌药敏试验3002 MH-羊血琼脂培养基肺炎链球菌药敏试验3003 HTM琼脂培养基流感嗜血杆菌药敏试验3004 GC琼脂培养基淋病奈瑟球菌附表三药敏培养基生产商编码附表六仪器编码编码名称编码名称4001 Oxoid 7001 VITEK-AMS系统4002 bioMeruex法国生物梅里埃7002 VITEK-IMS系统4003 Difco 7003 MicroScan-Walkaway 404004 BBL 7004 MicroScan-Walkaway 964005 北京天坛生物制品检定所7005 Autoscan-44006 自制7006 A TB Expression4007 其它7007 Sensitire-全自动4008 天津市金章技术研究所7008 Sensitire-半自动4009 上海市医学化验所试剂厂7009 Sensitire-手工4010 浙江军区后勤部卫生防疫检验所7010 Sceptor4011 杭州天和微生物试剂有限公司7011 上海复星公司细菌鉴定仪附表四药敏纸片生产商编码编码名称5001 Oxoid 附表七试剂编码5002 bioMerieux法国生物梅里埃编码名称5003 Difco 8001 VITEK5004 BBL 8002 MicroScan5005 北京天坛生物制品检定所8003 API5006 其它8004 自制5007 自制8005 诊断血清5008 华山医院抗生素研究所8006 Sceptor (BD)5009 浙江军区后勤部8007 Sensitire5010 杭州天和微生物试剂有限公司8008 显微镜5011 天津市金章技术研究所附表五药敏方法编码名称附表八G染色编码6001 纸片扩散法(K-B) 编码名称6002 VITEK 2 9001 G阴性杆菌6003 VITEK-IMS 9002 G阴性球菌6004 VITEK-AMS 9003 G阳性杆菌6005 MicroScan-Walkaway96 9004 G阳性球菌6006 MicroScan-Walkaway406006 MicroScan-auto4 6007 A TB Expression 6008 微量肉汤法6009 E-test法。
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附录二常用的培养基及试剂1、糖发酵管成分：牛肉膏 5g 磷酸氢二钠 2g蛋白胨 10g 0.2溴麝香草本分蓝深液 12 ml氯化钠 3g 蒸馏水 1000 mlpH7。
4制法：（1）葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装有一个倒置小管的小试管内，高压灭菌121℃15min。
（2）其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100ml,高压灭菌121℃15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。
将糖溶液5ml加入100ml培养基内以无菌操作分装小试管。
试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36±1℃培养，一观观察2-3天，迟缓反应应需观察14-30天。
附注：蔗粮不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
2、ONPG增减基成分：邻基粉β-D-半乳糖苷（ONPG） 60mg（O-Nitropheny1-β-D-galactopyranoside）0．01%MpH7.5磷酸钠缓冲液 10ml1%蛋白胨（pH7.5） 30ml制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以滤过法除菌，分装10×75mm试管，每管0.5ml，用橡皮塞塞紧。
试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物，满环接种，于36±1℃培养1-3h和24h观察结果。
如有β-半乳糖苷酶产生则于1-3h变黄色，如无此酶则24h不变色。
3、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g 葡萄糖 5g 多胨 7g 蒸馏水 1000ml 制法：溶化后校正pH，分装试管每管1ml,高压灭菌121℃15min。
甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，放36±1℃培养2-5天，哈夫尼亚菌则应在22-25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。
鲜红色为阳性，黄色为阴性。
甲基红试剂配法：甲基工10mg溶于30ml95%酒精中，然后加入20ml蒸馏水。
V-P试验：用琼脂培养物接种本培养基中，放36±1℃培养2-4天。
哈夫尼亚菌则应在22-25℃培养。
加入6%。
A萘酒精溶液0.5ml 和40%氢氧化钾溶液0.2ml，充分振摇试管，观察结果。
阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃4h再进行观察。
4、西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠 5G柠檬酸钠 5g硫酸镁（MgS04 7H20） 0.2g琼脂 20g磷酸二氢铵 1g蒸馏水 1000ml磷酸氢二钾 1g0.2%溴麝香草本分蓝溶液 40mlpH6.8制法：先将盐类溶解于内，校正pH再加琼脂，加热溶化然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，高压灭菌121℃15min，放成斜面。
试验方法：挑取少量琼脂增物接种，于36±1℃培养4天，每天观察结果。
阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。
5、丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏 1g 氯化钠 2 g磷酸氢二钾 0.6g 0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12ml磷酸二氢钾 0.4g 蒸馏水 1000mlpH6.8制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水,分装每瓶100ml 分别加入各种氨基酸。
赖氨酸和鸟氨酸按0.5%加入，dl-氨基酸按1%加入。
再行校正pH至6.8。
对照培养基不加氨基酸。
分装于灭菌的小式管内管每0.5ml，上面滴加一层液体石蜡，高压灭菌115℃10min。
试验方法：从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36±℃18-24h，观察结果。
氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。
阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使增基变为黄色。
对照管应为黄色。
9、蛋白胨水（靛基质试验用）成分：蛋白胨（或胰蛋白胨） 20g 蒸馏水 1000ml氯化钠 5gpH7.4制法：按上述成分配制，分装小试管，高温灭菌121℃±15min。
靛基质试剂：（1）柯凡克试剂将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75ml戊醇中然后缓慢加入浓盐酸25ml。
（2）殴-波试剂将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95%酒精95ml，然后缓慢加入浓盐酸25ml。
试验方法：挑取小量培养物接种，在36±1℃培养1-2天，必要时可培养4-5天。
加入柯凡克试剂0.5ml，轻摇试管，阳性者于试剂层呈红色。
或加入殴-波试剂约0.5ml，沿管壁流下，覆盖于培养液表面，阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。
附注：蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。
每批蛋白胨买来后，应先用已知菌咱鉴定后方可使用。
10、尿素琼脂成分：蛋白胨 1g 0.4%本分红溶液 3ml氯化钠 5g 琼脂 20g葡萄糖 1g 蒸馏水 1000ml磷酸二氢钾 2g 20%尿素溶液（后加）100mlpH7.2±0.1制法：先将尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶，高压灭菌121℃±15min。
冷至50-55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液，尿素的最终浓度为2%，最后pH应为7.2±0.1。
分装于灭菌试管内，放成斜面备用。
试验方法：挑取琼脂培养物接种，在36±1℃培养24h观察结果。
尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。
11、氰化钾培养基成分：蛋白胨 10g 磷酸氢二钠 5.64g氰化钠 5g 蒸馏水 1000ml 磷酸二氢钾 0.225g 0.5%氰化钾溶液(后加) 20ml制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,高压灭菌121±1℃15min,放在冰箱内使其充分冷却。
每100ml培养基加入0.5%氰化钾20ml（最后浓度为1：10000），分装于12×100mm灭菌试管，每管约4ml，立刻用灭菌橡皮塞塞紧。
放在4℃冰箱内，至少可保存两个月。
同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。
试验方法：将琼脂培养物种于蛋白胨水内成为稀释菌液，挑取1环接种于KCN培养基，并另挑取1环接种于对照培养基。
在36±1℃培养1-2天，观察结果。
如有细菌生长即为阳性（不抑制），经2天细菌不生长为阴性（抑制）。
附注：氰化钾是剧毒物，使用时应小心，切勿沾染，以免中毒。
夏天分装培养基应在冰箱内进行。
试验失败主要原因是超过计划口不平，氰化钾逐渐分解产生氢氰酸气体逸出，以致药物浓度降低，细菌生长，因而造成假阳性反应。
试验时对每一环节都要特别注意。
12、氧化酶试验试剂：（1）1%盐酸二甲基对苯二胺溶液，少量新鲜配制，于冰箱内避光保存。
试验方法：（1）取白色洁净滤纸沾取菌落。
加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳性者呈粉红色，并逐渐加深。
（2）以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同。
13、明胶磷酸盐缓液成分：明胶 2g 蒸馏水 1000ml磷酸氢二钠 4gpH6.2制法：加热溶解，校正pH，高压灭菌121±1℃15min。
14、乳酸苯酚溶液成分：苯酚 10g 甘油 2g乳酸（比重1.21） 10g 蒸馏水 1000ml制法：将酚在水上加热溶解，然后加入乳酸及甘油用途：检验真菌形态。
15、肉浸液肉汤成分：绞碎牛肉 500g 磷酸氢二钾 2g氯化钠 5 g 蒸馏水 1000ml蛋白胨 10g制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，加蒸馏水100ml，混合后放冰箱过液，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒纸过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量,加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH7.4-7.6煮沸并过滤，分装烧瓶，高压灭菌121±1℃15min。
16、血琼脂成分：豆粉琼脂pH7.4-7.6 100ml脱绺维羊血（或免血） 5-10ml制法：加热溶化琼脂，冷却50℃，以无菌手续加入脱纤维羊血，摇匀、倾注平板。
变可分装灭菌试管，置成斜面。
变可用其他营养丰富的基础培养基配制血液琼脂。
17、营养琼脂成分：蛋白胨 10g 琼脂 15-20g牛肉膏 3g 蒸馏水 1000ml氯化钠 5g制法：将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内。
加入15%氢氧化钠溶液约2ml，校正pH至7.2-7.4。
加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。
分装烧瓶，高压灭菌121±1℃15min。
附注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面，如用于菌数计数，琼脂量为1.5%，如作成平板或斜面，则应为2%。
18、营养牛肉汤成分：蛋白胨 10g 氯化钠 5g牛肉膏 3g 蒸馏水 1000mlpH7.4制法：按上述成分配合，溶解后校正pH、分装烧瓶，每瓶225ml 高压灭菌121±1℃15min。
19、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g 0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml 猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g 蒸馏水 1000ml乳糖 10gpH7.4制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10ml，并放入一个小试管，高压灭菌121±1℃15min。
附注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
20、乳粮发酵管成分：蛋白胨 20g 0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml 乳糖 10g 蒸馏水 1000ml pH7.4制法：将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30ml、10ml或3ml，并放入一个小试管，高压灭菌121±1℃15min。
附注：（1）双料乳糖发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
（2）30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用，3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。
21、缓冲蛋白胨水（BP）成分：蛋白胨 10g 磷酸二氢钠 1.5g氯化钠 5G 蒸馏水 1000ml磷酸氢二钠（含12H2O） 9gpH7.2制法：配好后以大烧瓶装，高压灭菌121±1℃15min。
临用时以无菌操作分装，每瓶225ml。
附注：本培养基供沙门氏菌前增菌用。
22、氯化镁孔雀绿增菌液（MM）甲液：胰蛋白胨 5g 磷酸二氢钾 1.6g氯化钠 8g 蒸馏水 1000ml乙液：氯化镁（CP） 40g 蒸馏水 100ml丙液：0.4%孔雀绿水溶液制法：分别按上述成分配好后，高压灭菌121±1℃15min备用。
临用时取甲液90ml，乙液9ml，丙液0.9ml，以无菌操作混合即可。
附注：本培养基变称Rappaport（R）增菌液。
23、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）基础培养基：多胨或月胨 5g 硫代硫酸钠 30g胆盐 1g 蒸馏水 1000ml碳酸钙 10g碘溶液:碘 6g 蒸馏水 20ml碘化钾 5g制法：将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100 ml。
分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀，高压灭菌121±1℃15min备用。
临用时每100ml基础培养基中加入碘溶液2ml，0.1%煌绿溶液1ml。