实验三 种子生活力测定
三种常用检测种子生活力方法比较(1)
三种常用检测种子生活力方法比较(1)随着种子在种植中所占的重要地位，各种检测种子生活力的方法也应运而生。
常用的检测种子生活力的方法有三种，分别是发芽率法、荧光法和电导率法。
本文将对这三种方法进行详细介绍，并进行比较。
一、发芽率法发芽率法是最常用的检测种子生活力的方法之一。
其主要原理是把一定数量的种子在一定的条件下进行发芽，然后通过计算发芽率来推断种子的生活力。
条件包括温度、湿度、光照和通风等，不同的作物和品种有不同的最适条件。
发芽率法检测种子主要有以下几个优点：一是操作简单；二是可大批量检测；三是检测结果真实可靠。
但是同时也存在着一些缺点，如检测时间长、结果受环境因素的影响等。
二、荧光法荧光法是一种新兴的检测种子生活力的方法。
荧光法主要利用了种子的细胞色素氧化酶体系在氧化还原体系下发生反应而使荧光物质荧光素产生荧光。
通过测定产生的荧光的强度来判断种子的生活力。
三、电导率法电导率法是一种利用种子中质量和导电能力的变化来测定种子生活力的方法。
其主要原理是将一定数量的种子放入导电液中，通过测定电导率的变化来判断种子的生活力。
导电液可以是盐水、糖水、电导液等。
三种方法比较从上述的介绍可以看出，每种方法都有其优点和缺点，没有一种方法是完美的。
所以在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的方法。
一般来说，发芽率法适用于大批量检测，荧光法适用于单个种子检测，电导率法适用于不同品种间的比较。
除此之外，也可以选择不同的方法相互协作，如发芽率法和荧光法或者电导率法和发芽率法组合使用。
种子生活力的测定
欢迎阅读种子生活力的测定一、氯化三苯基四氮唑（TTC）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原时，可产生红色的三苯基甲（TTF），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC还原反应如下：TTC（无色）TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH试纸。
【试剂】TTC溶液的配制：取1gTTC溶于１L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。
药液pＨ应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1染色法测定种子生活力记载表方法种子名称供试粒数有生活力种子粒数无生活力种子粒数有生活力种子占供式粒数的%【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2.染色温度一般以25～35℃为宜。
3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。
4.判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；子叶不染色或丧失机能的组织超过1/2；胚染成很淡的紫红色或淡灰红色；子叶与胚中轴的连接处或在胚根上有坏死的部分；胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。
种子生活力快速测定——教案
种子生活力快速测定------红墨水染色法一、教学目标：知识与能力熟悉红墨水染色法测定种子生活力的原理和方法及其计算过程与方法通过实验，培养学生动手操作的能力情感态度与价值观通过观察和实验等教学活动，培养学生科学的思维方法，实事求是的科学态度以及协作精神。
二、教学重点和难点显色过程既是重点又是难点三、教学准备（一）教师准备1.仪器设备、材料和试剂（1）仪器：培养皿2套；镊子1把；单面刀片1片；垫板(切种子用)1块；烧杯1个；搪瓷盘1个；（2）试剂：取市售红墨水稀释20倍（1份红墨水加19份自来水）做为染色剂。
（3）材料：玉米或小麦2.实验操作准备浸种实验组将待测种子在30～35℃温水中浸泡(大麦、小麦、籼谷6～8h , 玉米5h左右,梗谷2h), 以增强种胚的呼吸强度,使显色迅速。
对照组取充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3～5min，3．学生分好组（二）、学生准备学生课前认真的自学，自己查找相关资料，了解与弄清所需实验用具或用品的用途和用法，做好预习案及实验前的一切准备。
四、教学方法、教学手段：1、教学方法：实验探究。
2、教学手段：本节课以学生亲自动手实践为主，教师演示与辅导为辅的教学手段。
五、教学设计：（一）创设情景，导入新课：教师讲述：种子生活力就是种子发芽的潜在能力，通过对种子生活力的测定可以快速预测种子的发芽能力，为我们的播种选种提供理论依据，本节课我们就是学习怎样动手快速测定种子生活力。
（二）讲授新课1.将在预习过程中遇到的疑惑，带到课堂师生共同解决，师生共同回顾种子生活力的相关知识。
2.红墨水染色法测种子生活力（1）教师示范操作（同时讲解操作要点）步骤：①. 显色取吸胀的种子和死种子各50粒,用刀片沿种胚中央纵切为两半, 其中一半放入培养皿中，加适量红墨水溶液（以浸没种子为度），染色10-20min后倒去红墨水溶液,用水反复冲洗多次,至冲洗液无色为止。
②.观察对比观察冲洗后两组种子胚部着色情况。
种子活力的测定
种子活力的测定【实验目的】学习掌握TTC法和红墨水染色法快速测定种子活力的原理和方法【实验原理】TTC法：活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。
当TTC渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯基甲腙（TTF）；如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
红墨水染色法：活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%TTC法：活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒数/实验种子的总粒数)×100%红墨水法：活种子百分率（%）=(不着色或着色很浅的种子粒数占实验种子/实验种子的总粒数) ×100%【实验材料、试剂】玉米、小麦种子0.3%(w/v)TTC5%红墨水（红墨水5ml+95ml自来水)【实验步骤】TTC法1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种子充分吸胀。
2. 随机取种子30粒，沿种胚中央准确切开，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜，置于30 ℃观察培养箱中培养30min ；另30半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30 ℃培养箱中染色处理作为对照观察。
3. 倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗2次，观察种胚被染色的情况。
4.观察：种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的为死种子。
5%红墨水显色1.同样将吸胀的玉米、小麦种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半；2.其中一半置于培养皿中，加入5%红墨水，以覆盖种子为宜，置于30 ℃培养箱中培养10min.染色后倒去红墨水并用水冲洗多次至冲洗液无色为止。
另30半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入5%红墨水置于30℃培养箱中染色处理作为对照观察；3.观察：凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
种子生活力测定
二、四唑测定法
(一)四唑染色的测定原理
四唑（2，3，5-氯化三苯基四氮唑）是一种可渗 透进种子组织中的无色溶液。它在种子组织里参与活 细胞的还原反应，从脱氢酶上接受氢离子，自身被还 原成红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲替， 沉积在活组织处使其显红色，而死种子或种胚的某一 部位无生活力时，则不显红色。 DPNH2 + TTC—— DPN + TTCH + HCl (辅酶ⅠH2) (四唑) (辅酶I) (甲替) (氯化氢) 据此，可鉴别种子有无生活力及无生活力种子死 组织的部位。
（四）四唑测定程序
1.配制溶液
常用的四唑溶液浓度为0.1%~1.0%。0.1%和 0.5%的溶液常用于切开种胚种子的测定，而1%的 溶液常用于不切开种胚种子的测定。
2.试验样品的数取
每次至少测定200粒种子，从经净度分析后并 充分混合的净种子中，随机数取，每重复100粒或 少于100数的若干副重复。 如是测定发芽末期休眠种子的生活力，则只 用试验末期的休眠种子。
4.染色前的样品准备
（1）目的：使四唑溶液快速和充分渗入种子 的全部活组织，加快染色反应和正确鉴定胚 的主要构造，必须按其胚的营养组织的位置 和特性，采用适当的方法使胚的主要构造和 活的营养组织暴露出来。
（2）方法：准备方法因种子构造和胚的位置 不同而异（详见《农作物种子四唑染色技术 规定》）。
5.四唑染色
快速预测种子的发芽能力，以便在短期内 了解种子发芽状况。
（三）种子生活力测定的方法
根据测定原理，种子生活力测定方法可分 为生物化学法、组织化学法、软X射线法和荧 光分析法四类。 具体的方法有四唑染色法、溴麝香草酚兰 法、中性红法、二硝基苯法、红墨水染色法、 软X射线法等。
种子活力快速测定
• 【实验步骤】
• TTC法
• 1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种子 充分吸胀。 • 2. 随机取种子30粒，沿种胚中央准确切开，其中一半置于 培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜，置于30 ℃ 观察培养箱中培养30min ；另30半粒玉米置于沸水中 2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30 ℃培养箱中染 色处理作为对照观察。 • 3. 倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗2次，观察种胚被 染色的情况。 • 4.观察：种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的 为死种子。
种子活力是种子发芽和出苗 率、幼苗生长的潜势、植株抗 逆能力和生产潜力的总和，是 种子品质的重要指标。
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长期以来都 用发芽试验检验 种子的质量，生 产实践表明，实 验室的发芽率与 田间的出苗率之 间往往存在很大 差距。
• 【实验原理】
• TTC法：活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧 化还原反应，而死种子则无此反应。当TTC渗入 活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶 (NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC 转变为红色的三苯基甲腙（TTF）；如果种胚死 亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅， 因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程 度来鉴定种子的生活力。
• TTC法：
• 活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒 数/实验种子的总粒数)×100% • 红墨水法： • 活种子百分率（%）=(不着色或着色很浅的 种子粒数占实验种子/实验种子的总粒数) ×100%
• 红墨水染色法：活种子细胞的原生质膜具 有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚 细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进 入死细胞而染色。 • 种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总 数×100%
实验三种子生活力测定
进行实验操作
种子处理
对种子进行适当的处理，如消毒、催芽等，以准备进行生活力测定。
实验操作
按照实验要求，对种子进行染色、培养等操作，观察种子的萌发情况。
记录实验数据
数据记录
详细记录每个种子样本的萌发情况， 包括萌发时间、萌发率等。
数据整理
对实验数据进行整理和分析，得出种 子生活力的结论。
04
实验结果与分析
实验收获与体会
实验收获
通过实验三，我们学会了使用染色法测定种子的生活力，掌握了种子萌发的原理和影响因素，了解了种子质量对 农业生产的重要性。
实验体会
实验过程中，我们深刻体会到了科学研究的严谨性和细致性，明白了种子生活力测定的实际意义和应用价值，增 强了我们对农业科学研究的兴趣和信心。
对实验的改进建议
掌握测定种子生活力的方法
01
常用的测定方法有：染 色法、发芽试验法和电 导率法等。
02
染色法是通过染色剂对 种子进行染色，根据染 色结果判断种子是否具 有生活力。
03
发芽试验法是将种子置 于适宜的发芽条件下， 观察其发芽情况，计算 子的电导率来间接反映 种子的生活力。
实验结论总结
实验结论
根据实验结果和分析，得出种子生活力的测定结论，包括发芽率、 发芽速度、幼苗生长状况等方面的评价。
实验意义
阐述实验对于农业生产的重要意义，如指导种子选择、提高种植效 益等。
实验不足与展望
指出实验存在的不足之处，并提出改进和进一步研究的方向，为后 续研究提供参考和借鉴。
05
实验总结与展望
实验三种子生活力测 定
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与展望
种子生活力测定原理及方法讲课讲稿
2012/03/10
种科092 雷红琴
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• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间 表现的差异。
• 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽 率的种子批中，
• 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率 高的种子具有较高的活力，但两者不存在正相 关。
• 四、种子活力测定方法分类 种子活力测定方法达数十种，其分类方法
2012/03/10
种科092 雷红琴
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出苗（如陈种子发芽率虽正常，但早春播种出苗 率低）。
• 二、种子活力测定的重要意义（同读本；颜启 传）
• 1、高活力种子的生产优越性 • 高活力种子具有明显的生长优势和生产潜力。 • (1)提高田间出苗率：高活力种子播到田间后
出苗迅速，均匀一致，保证苗全苗壮和作物的 田间密度，为增产打下良好的基础。
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种科092 雷红琴
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活力测定有助于育种工作者在选择抗寒、抗病、 抗逆、早熟、丰产的作物新品种。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活
力三个指标，三者有密切的关系，却有完全不 同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或 种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分 率。
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种科092 雷红琴
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室 控制条件下)长成
• 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常 幼苗数占样品总数的百分率，即发芽率表示。
• 在下列情况下，如果鉴定正确，生活力测定与 发芽率测定结果
• 基本是一致的： • ①无休眠、无硬实或破除了休眠和硬实。 • ②没有感染病害。
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实验方法和步骤
四唑染色 目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的健壮、衰
弱和死亡部分的差异显现出来，判断种子生活力。 染色方法：将经过样品准备或不须准备的规定数量种子分
别放入四唑溶液（0.1%）里染色。 将不同重复的样品分别放在小烧杯中，加入四唑溶液，以
淹没种子为宜； 移置在30℃的黑暗恒温箱内或弱光下进行染色2小时。因
为光线可能使四唑盐类还原而降低其浓度，影响染色效果。
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实验方法和步骤
观察鉴定 凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜
红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。 凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光
泽，并且活营养组织不染色部分已超过1/2，或超过 允许范围，以及组织软化的，为不正常种子。 凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色，且 组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。
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实验方法和步骤
结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复
间最大容许差距不得超过规定值； 平均百分率计算到最近似的整数。
实验三 种子生活力的测定
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一、实验目的和要求
1、实验目的
了解四唑法测定种子生活力的原理 掌握主要农作物种子四唑染色测定种子生
活力的方法步骤和判别有无生活力的鉴定 标准。
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一学独立完成同一材料的生活力 测定。
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二、实验原理
2、四唑染色法测定种子生活力的基本原理 利用四唑的无色溶液作为一种指示剂，以显示活
细胞中所发生的还原反应。 有生活力的种子胚部细胞具有脱氢酶，被种子吸
收的四唑盐类的无色溶液，参与了活细胞的还原 反应，从脱氢酶脱氢，被还原为红色而稳定的、 不扩散的、不溶于水的三苯基化合物。 无生活力的种子则无此反应。 借此可鉴别有生活力种子和无生活力种子。
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实验仪器设备
材料：玉米、大豆种子。 设备和药品 设备：冰箱、培养箱、镊子、解剖刀、刀
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片、吸水纸等。 药品：2，3，5-三苯氯化四氮唑。
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实验方法和步骤
样品准备 大豆：采用缓慢预湿后不须样品准备，但
在染色后观察鉴定前也需剥去种皮，以便 观察得更为清楚，鉴定更为可靠。 每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为 1次重复，共3次重复。
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实验方法和步骤
样品准备 玉米：沿胚纵切。通过胚中轴和胚乳，纵向切开，