萼花臂尾轮虫
氯氰菊酯和溴氰菊酯对萼花臂尾轮虫生殖的影响
氯氰菊酯和溴氰菊酯对萼花臂尾轮虫生殖的影响黄林;刘昌利;韦传宝;夏林【摘要】以萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)为受试动物,运用3d种群增长和4d休眠卵产量实验方法研究了不同浓度的氯氰菊酯(31.25、62.5、125、250、500、1000 μg/L和2000 μg/L)和溴氰菊酯(15.63、31.25、62.5、125、250μg/L和500 μg/L)对轮虫生殖的影响.结果显示,氯氰菊酯浓度对轮虫种群增长率、轮虫种群中的OF/NOF值和MF/AF值、混交率和休眠卵产量均有显著影响(P均＜0.001),但对轮虫混交雌体受精率无显著的影响(P＞0.05)；溴氰菊酯浓度对轮虫种群增长率、轮虫种群中的MF/AF值、混交率和休眠卵产量均有显著影响(P 均＜0.05),但对轮虫种群中的OF/NOF值和混交雌体受精率均无显著的影响(P＞0.05).与空白对照组相比,31.25-125 μg/L的氯氰菊酯和除31.25 μg/L外所有浓度的溴氰菊酯都显著升高了轮虫的种群增长率,而1000 μg/L和2000 μg/L的氯氰菊酯却显著降低了轮虫的种群增长率；500 μg/L的氯氰菊酯使轮虫种群中的带卵雌体数/不带卵雌体数显著升高,而各浓度的溴氰菊酯对其无显著影响；62.5 μg/L和125 μg/L的氯氰菊酯显著升高了轮虫种群中的混交雌体数/非混交雌体数,而15.63 μg/L的溴氰菊酯却显著降低了轮虫种群中的混交雌体数/非混交雌体数；62.5-250 μg/L的氯氰菊酯显著升高了轮虫混交率,而500-2000 μg/L的氯氰菊酯以及15.63、31.25、250 μg/L和500μg/L的溴氰菊酯却均显著降低了轮虫混交率；62.5 μg/L和125 μg/L的氯氰菊酯以及15.63 μg/L和125 μg/L的溴氰菊酯均显著升高了轮虫的休眠卵产量.包括空白对照组在内,所有测试液内的轮虫混交雌体受精率均为零.在实验设置的浓度范围内,氯氰菊酯浓度与轮虫的种群增长率、轮虫种群中的混交雌体数/非混交雌体数及轮虫混交率间均具有显著的剂量-效应关系.【期刊名称】《生态学报》【年(卷),期】2011(031)024【总页数】7页(P7632-7638)【关键词】萼花臂尾轮虫;种群增长率;混交率;拟除虫菊酯类;氯氰菊酯;溴氰菊酯【作者】黄林;刘昌利;韦传宝;夏林【作者单位】皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012【正文语种】中文氯氰菊酯和溴氰菊酯为拟除虫菊酯类杀虫剂，继20世纪70年代由Elliot合成以来，由于其比天然除虫菊酯活性强，且对日光稳定［1-2］，只要使用相当于有机磷、氨基甲酯10%—20%的药量就能得到同样的防治效果，因而得到了广泛的应用，特别是作为鱼用杀虫剂在水产养殖业的应用，使其进入水环境的途径越来越多，剂量也越来越大，其在鱼体内的残留会通过食物链威胁到人体健康。
萼花臂尾轮虫的培养及营养强化技术
适宜 范 围为 ２ ～０℃【 ５３ ５ ｌ 。
２２ 溶解 氧 ．
萼 花臂 尾轮 虫 对 溶解 氧 的适 应 范 围很 广 ， 低 耐 氧 的能力 很强 １ 生产 中应 采取适 中 的低 充气 量 。如 ６ ］ ， 在一 个 １ ， 槽 中装 ８ １ 散气 石 ， ０ｍ 水 ～ Ｏ个 每个 散气 石 以 ８Ｉｍｉ ｎ的气 量充 气 。总 之 ，在 轮虫 的培养 过 程 Ｊ
养条件 相 同 。 ３ 室 内简 易培 养 ． ３ 在 室 内可 用 水 族箱 、 玻璃 钢 水槽 、 泥池 培养 。 水 小 规 模 培 养 用 水 ， 经 筛 绢 过 滤 或 砂 层 过 滤 ， 另 需 在 外 的容 器 中繁 殖 单 胞 藻 类 ， 作 轮 虫 饵 料 ， 供 同时 用
水 体施 入硫 酸 氨 １０ｇ ０ 、过 磷 酸钙 １ 及 尿素 ５ｇ ５ｇ ， 每 隔 ３ ５ｄ施 用 一 次 。施 肥 后应 即接 种 藻 液水 ， ～ 接 种 量 以水色 略呈 绿 色为 宜 。池 水变 为绿 色 即可接 种
轮虫。 当轮 虫 的密度 达 ５ ～ ０个 ／ ０６ ｍＬ时 ， 应立 即问 收
中， 氧量应 保 持在 １ ／ 溶 ． ｍｇ ５ Ｌ以上 。
２３ 氨 氮 ．
氨 氮 中非 离 子 氨 （ 子 态 氨 ） 水 生 生 物 的 毒 分 对 性 很 高 。在轮 虫 的 培养 过 程 中 ， 排泄 物 和 残饵 的分 解 易造 成氨 氮 的积 累 。非离 子 氨是 限制 轮虫增 长 的 主要 因素 。 萼花 臂尾 轮虫 对 氨氮 的可 容忍 范 围为 ６ ～ １ ／ ， 离子 氨 的浓度 不宜 超过 １ｍｇ Ｆ ０ｍｇ 非 Ｌ ／ｏ Ｌ。
３ ． 接 种 ２
接种 前 的准 备 ： 养 轮虫 或 培养 单 细胞 藻 的水 培 泥 池 要进 行 消毒 。培 养 轮 虫 的水 需 经砂 滤 池过 滤 ， 再 经３０目密 筛 网过滤 ，以去 除小 型 甲壳类 等 敌 害 ０
两种拟除虫菊酯类杀虫剂对萼花臂尾轮虫的急性毒性研究
两种拟除虫菊酯类杀虫剂对萼花臂尾轮虫的急性毒性研究黄林;刘昌利;韦传宝;李军军【摘要】[目的]研究常见拟除虫菊酯类杀虫剂氯氰菊酯和溴氰菊酯对轮虫的24、48h急性毒性大小.[方法]以广州品系萼花臂尾轮虫为受试动物,采用标准毒性试验方法进行急性毒性试验,机率单位法测定氯氰菊酯和溴氰菊酯对轮虫的LC50值.[结果]氯氰菊酯对萼花臂尾轮虫的24、48 h LC50分别为3 376.87、5.87 μg/L；溴氰菊酯对萼花臂尾轮虫的24、48 h LC50分别为594.56、74.17 μg/L.[结论]氯氰菊酯和溴氰菊酯对轮虫24、48h的急性毒性大小不同；氯氰菊酯和溴氰菊酯对轮虫的48 h LC50值比其24 h LC50值用来监测水体中的此类化学污染物更为敏感.%[Objective]The paper was to study the 24 and 48 h acute toxicity of common pyrethroid pesticides of cypermethrin and deltamethrin to Brachionus calyciflorus. [ Method ] With Guangzhou strain of B. Calyciflorus as test animal, the standard toxicity test method was used to carry out acute toxicity test,and LC50 of cypermethrin and deltamethrin to rotifer was determined using probability unit method. [ Result]24 or 48 h LC50 of cypermethrin to rotifer was 3 376.87 and 5.87 ng/L,and those of deltamethrin to rotifer was 594.56 and 74.17 μg/L,respectively.[ Conclusion]Acute toxicity of cypermethrin and deltamethrin on rotifer to 24 and 48 h was different ,48 h LC50 of cypermethrin and deltamethrin to rotifer was more sensitive than 24 h LC50 on monitoring this chemical contamination in water body.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)023【总页数】3页(P14172-14174)【关键词】萼花臂尾轮虫;品系;急性毒性;拟除虫菊酯类;氯氰菊酯;溴氰菊酯【作者】黄林;刘昌利;韦传宝;李军军【作者单位】皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,安徽六安237012【正文语种】中文【中图分类】S482.3拟除虫菊酯类杀虫剂是一类含有苯氧基的环丙烷酯，他在农业上的应用是继有机氯杀虫剂、有机磷杀虫剂、氨基甲酸酯杀虫剂之后的一个新突破，拟除虫菊酯类杀虫剂的问世是杀虫剂历史上的第三个里程碑。
粉煤灰污染影响萼花臂尾轮虫(Brachionuscalyciflorus)种复合体空间分布的原因
轮虫姐妹种 Ⅱ 种群 中的混交雌体数／ 非混交雌体数和休 眠卵产量 均极 低 ， 对照组 中的混交雌 体数／ 非混交雌体 数和休 眠 卵产量均为 ０ 这是存在于汀棠湖和风 呜湖 中的轮虫姐妹种 Ⅱ无法通过扩散 而出现在灰湖 中的主要原 因． 清灰湖水 的 ， 澄
含量仅对汀棠湖 中两轮虫姐妹种的种群增长率具有显著的影 响． 各浓度 的澄清灰湖水使 轮虫姐妹 种 Ｉ的种群 增长率显 著高于对照组 ，０ 、０ ６ ％ ８ ％和 １０ 的澄清灰湖水使 轮虫姐妹种 Ⅱ的种群增长率显著高于对 照组 ， ０％ 这表明粉煤灰污染导致 已报道的相关水体 中轮虫种群密度的下降并非 由于其 中所含 的污染 物（ 较高浓度的碱性 氧化物 、 硫化 物和金属元素等 ） 和水体 ｐ Ｈ值 的改变等对轮虫的直接毒性作用． 关键词 ： 粉煤灰污染 ； 萼花臂尾轮虫 ； 种复合体 ； 生殖 ； 空间分 布
ｃｅ ａ ｅｂ ｅ ｏｌｃｅ ｏ Ｌ ｋ ｉ ａ ｅＴ ｎ ｔｎ ｎ ａ ｅＦ ｎ ｍｉｇａ ｄ ｓｂｉｇｓｅ ｉｓ Ｉ ａ ｅｂ ｅ ｏｌｃｅ ｏ Ｌ ｋ ｉｓＩｈ ｖ ｅｎ ｃ ｌ ｔｄｆ ｍ ａ ｅＨｕ ，Ｌ ｋ ｉｇａ ｇａ ｄ Ｌ ｋ ｅ ｇ ｎ ｉｌ ｐ ｃｅ ｌ ｖ ｅ ｎｃ ｌ ｔｄｆ ｍ ａ ｅ ｅ ｒ ｎ ｎ ｈ ｅ ｒ
粉 煤 灰 污 染 影 响 萼 花 臂 尾 轮 虫 （ ｒｃ ｉｎ ｓｃ ｌｃｆ ｒｓ 种 复 合 体 Ｂ ａ ｈｏ ｕ ａｙ ｉｏ ｕ ） ｌ 空 间分 布 的原 因
薛颖昊 ， 贻龙 ， 席 张 根
（ 安徽师范大学生命科学学 院安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室 ， 芜湖 ２ １０ ） ４ ０ ０ 摘 要： 为探讨粉煤灰污染影响萼花臂尾轮虫（ ｒｃｉ ｕ ｃ ／ｏ￣） Ｂａｈｏ ｓ 。 ｆ ｒ 种复合体在灰湖 、 ｎ ｌ 汀棠湖和风鸣湖分布的生态学机
亚致死浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群动态的影响
第44卷第2期2021年3月 安徽师范大学学报(自然科学版)Journal of Anhui Normal University (Natural Science) Vol.44No.2Mar .2021 DOI:10.14182/ki.1001-2443.2021.02.008收稿日期:20201028基金项目:国家自然科学基金项目(31971562);安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室专项基金项目(2004sys003).作者简介:葛乐乐(1996 ),男,安徽蚌埠市人,硕士研究生,主要研究方向为浮游动物生态学;通讯作者:席贻龙(1965 ),男,安徽肥东县人,博士,教授,博士生导师,主要从事轮虫生态学研究,E-mail:ylxi1965@.引用格式:葛乐乐,白琰,孙帆,等.亚致死浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群动态的影响[J].安徽师范大学学报(自然科学版),2021,44(2):153-159.亚致死浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群动态的影响葛乐乐1,2, 白 琰1,2, 孙 帆1,2, 江 姗1,2, 席贻龙1,2(1.安徽师范大学生态与环境学院,安徽芜湖 241002;2.皖江流域退化生态系统的恢复与重建省部共建协同创新中心,安徽芜湖 241002)摘 要:吡虫啉(Imidacloprid )是一种新烟碱类杀虫剂,但其对轮虫等水生无脊椎动物的毒性尚无从知晓㊂本文以萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus )为受试生物,应用种群增长㊁休眠卵产量和生命表实验等方法,研究了不同浓度的吡虫啉(0㊁1.56㊁3.12㊁6.25㊁12.5㊁25㊁50和100mg /L )对其种群增长和生命表统计学等参数的影响㊂结果表明,吡虫啉浓度对轮虫存活(以生命期望为指标)㊁发育(世代时间)㊁生殖(净生殖率)和种群增长(内禀增长率和种群增长率)等参数均有显著性影响(P <0.01),但对有性生殖(后代混交率㊁种群混交率和休眠卵产量)等参数都无显著性影响(P >0.05)㊂与对照组相比,12.5mg /L 吡虫啉处理组中轮虫种群增长率显著升高(P <0.05),而50和100mg /L 吡虫啉处理组中轮虫种群增长率则显著降低(P <0.05)㊂3.12~12.5mg /L 吡虫啉处理组中轮虫的生命期望显著延长(P <0.05),而25~100mg /L 吡虫啉处理组中轮虫的生命期望则显著缩短(P <0.01)㊂1.56~12.5mg /L 吡虫啉处理组中轮虫的世代时间显著延长(P <0.05),净生殖率显著升高(P <0.01),而50~100mg /L 吡虫啉处理组中轮虫的世代时间显著缩短(P <0.01),25~100mg /L 吡虫啉处理组中轮虫的净生殖率显著降低(P <0.01)㊂50~100mg /L 吡虫啉处理组中种群内禀增长率显著降低(P <0.05)㊂吡虫啉浓度与轮虫存活㊁发育㊁生殖和种群增长等参数之间均具有显著的剂量-效应关系㊂在监测吡虫啉的慢性毒性时,净生殖率是较敏感的指标㊂关键词:萼花臂尾轮虫;吡虫啉;存活;生殖;种群增长中图分类号:Q 958 文献标志码:A 文章编号:1001-2443(2021)02-0153-07新烟碱类杀虫剂是于20世纪90年代初被引入市场的一类重要杀虫剂,具有广谱㊁高效㊁低毒㊁害虫不易产生抗性等优点[1]㊂吡虫啉是世界上使用最广泛的一种新烟碱类杀虫剂,已在120个国家注册并用于140多种作物的害虫防治[2]㊂吡虫啉的作用机理是通过摄食或直接接触作用于靶物种,阻断其乙酰胆碱受体神经元通路,使其产生突触的持续性兴奋,最终使靶物种瘫痪或者死亡[3-4]㊂由于对哺乳动物具有低毒性,吡虫啉还被用于宠物或者伴侣动物体表跳蚤的有效控制[3]㊂然而,由于其在土壤中的持久性(半衰期为48~190天)㊁高溶解度(514mg /L,20℃)和低辛醇水分配系数(Log Kow =0.57),吡虫啉可以通过漂移㊁溶解径流或浸出而成为地表和地下水的潜在污染物[5]㊂随着吡虫啉广泛的使用,其在越来越多的水体中被检出㊂在日本东京Sagami 湖中检测到的吡虫啉含量为0.104μg /L [6],在加拿大安大略省湖泊中检测到的最大浓度为972ng /L [7],在希腊色雷斯湖泊中检测到的最大含量为102ng /L [8];在我国广州珠江检测到的最大浓度为154ng /L [9],在长江扬州支流的最高浓度为1886ng /L [10]㊂水体中残留的吡虫啉会对线虫(Caenorhabditis elegans )[11]㊁节肢动物[12-15]㊁斑马鱼[16]等产生毒性作用,影响生物群落结构[17-19],最终可能通过食物链影响人类健康[20]㊂因此,全面评估吡虫啉等农用化学品对水生生物的生态风险具有重要的意义㊂作为藻类等的消费者以及鱼类等幼体的食物,轮虫在水生食物链中具有重要的作用㊂因此,吡虫啉等污染物对轮虫存活㊁生殖和种群增长等的影响势必会影响水生态系统的结构和功能㊂然而,目前有关吡虫啉对451安徽师范大学学报(自然科学版)2021年 轮虫的毒性作用尚鲜有报道㊂本研究采用种群增长㊁休眠卵产量和生命表实验等方法研究了不同浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群增长参数和生命表统计学参数的影响,旨在了解吡虫啉对萼花臂尾轮虫存活㊁生殖和种群增长的影响,同时比较各参数对吡虫啉污染的敏感性㊂1 材料与方法1.1 轮虫的采集和培养萼花臂尾轮虫由采自芜湖市龙窝湖水体沉积物中的休眠卵孵化而得,实验室内在(24±1)℃㊁无光照的培养箱中进行克隆培养㊂以EPA[21]作为培养液,用HB⁃4培养液[22]培养的斜生栅藻作为食物㊂当斜生栅藻种群处在指数增长期时,先离心收集,然后在光学显微镜进行计数㊂实验前对轮虫种群进行一周以上的预培养,预培养期间轮虫的喂食密度在1.5×106个细胞/mL,种群始终被维持在指数增长期㊂1.2 吡虫啉浓度的设置和测试液的配制实验用吡虫啉原药(分子式C9H10ClN5O2,晶体状,纯度为99.1%)购于北京勤诚亦信科技开发有限公司,4℃下避光㊁干燥保存㊂测试液浓度按等比间距设为7个梯度,分别是1.56㊁3.12㊁6.25㊁12.5㊁25㊁50和100mg/L,另设一个空白对照组㊂利用EPA培养液预先配制好100mg/L的母液,然后逐步稀释得到所需浓度的测试液㊂母液于4℃冰箱中避光保存,3d更换一次㊂1.3 3⁃d种群增长和4⁃d休眠卵产量实验实验参照Xi和Feng的方法[23]进行㊂以龄长在4h以内的轮虫幼体作为受试动物,实验条件与预培养时相同㊂实验前,由预培养的轮虫种群中挑出20只轮虫幼体置于容积为12mL的玻璃试管中,然后向试管中加入相应浓度的测试液10mL(内含1.5×106个细胞/mL的斜生栅藻)㊂每组设置3个重复㊂实验过程中,每12h悬浮一次沉积在试管底部的斜生栅藻,每24h将试管内的萼花臂尾轮虫移至干净试管中,并加入新鲜配制的测试液和所需数量的斜生栅藻,同时计数试管底部的轮虫休眠卵㊂3d后,抽样计数各试管中带卵的非混交雌体和混交雌体数以及不带卵的雌体数㊂待全部计数完成后,将所存活的个体放入试管中继续培养24h,24h后记录试管底部和轮虫身体末端所带的休眠卵数㊂基于上述计数结果,按照Xi和Feng的方法[23],计算或统计种群增长率㊁种群混交率和休眠卵产量:种群增长率r=(ln N t–ln N0)/t,其中,N t为3天后的种群密度,N0为实验开始时的种群密度(2只/mL), t=3d;种群混交率=种群中带卵的混交雌体数目/种群中各类雌体总数;休眠卵产量=种群在10mL培养体积中于4d内所产的休眠卵总数㊂1.4 生命表实验实验在8mL玻璃烧杯中进行,每杯中加入相应浓度的测试液5mL(内含1.5×106个细胞/mL的斜生栅藻)和龄长在4h以内的萼花臂尾轮虫幼体10只,每组设置3个重复,实验条件与种群增长实验相同㊂实验过程中,每12h观察并记录每个烧杯里存活的轮虫母体数和孵化出的幼体数,去除死亡母体,将孵化出的幼体转移到干净的烧杯里继续培养,根据其所产的卵的类型确定雌体类型,由此计算出轮虫母体所产全部后代中混交雌体所占的比例(后代混交率PS)㊂每24h将存活的母体转移至含有新鲜测试液和藻类食物的烧杯中㊂实验至母体全部死亡时结束㊂根据实验过程中记录的相关数据,按照朱韩等[24]的方法,计算出特定年龄存活率(l x)和繁殖率(m x)㊁净生殖率(R0)㊁生命期望(e0)㊁世代时间(T)和种群内禀增长率(r m)等生命表统计学参数㊂1.5 数据处理采用SPSS19.0和Excel2003软件对种群增长和生命表统计学等参数进行统计学分析㊂用生存分析中的Kaplan⁃Meier模型分析各处理组和对照组之间轮虫同生群存活时间的差异显著性㊂采用单因素方差分析(One⁃way ANOVA)和多重比较(LSD检验)分析吡虫啉浓度对各参数影响的显著性以及各浓度处理组与对照组之间的差异显著性;通过回归分析方法分析轮虫各种群增长参数和生命表统计学参数与吡虫啉浓度间的关系[24]㊂2 结果与分析2.1 吡虫啉浓度对轮虫种群增长参数的影响 单因素方差分析显示,吡虫啉浓度对轮虫种群增长率有显著性影响(P <0.01),但对种群混交率和休眠卵产量无显著性影响(P >0.05)㊂多重比较显示,与对照组相比,12.5mg /L 吡虫啉处理组中轮虫种群增长率显著升高(P <0.05),而50和100mg /L 吡虫啉处理组中轮虫种群增长率则显著降低(P <0.05)(表1)㊂回归分析结果表明,吡虫啉浓度与轮虫种群增长率之间呈现出显著的剂量-效应关系,两者之间的关系可以描述为y =1.511×10-6x 2-0.003x +0.69(R 2=0.481,P <0.01)㊂表1 暴露于不同浓度吡虫啉溶液中萼花臂尾轮虫的种群参数(均数±标准误差)Table 1 Population parameters of B.calyciflorus exposed to different concentrations of imidacloprid 吡虫啉浓度Imidacloprid concentration (mg /L)种群增长率Population growth rate (/d)种群混交率Mictic rate 休眠卵产量Resting egg production [ind./(4d×10mL)]00.6436±0.008 0.0242±0.0032.33±0.881.560.6488±0.049 0.0116±0.0044.67±2.673.120.6464±0.036 0.0189±0.0043.67±1.766.250.7116±0.044 0.0000±0.0002.33±1.3312.50.7738±0.031*0.0217±0.0051.33±0.33250.6464±0.027 0.0224±0.0120.33±0.33500.4934±0.043*0.0000±0.0000.33±0.331000.4556±0.041*0.0294±0.0300.00±0.00*与对照组相比有显著性差异Significantly different from the controls(P <0.05).2.2 吡虫啉浓度对轮虫生命表统计学参数的影响暴露于各浓度吡虫啉溶液中的轮虫存活率和繁殖率如图1所示㊂存活分析结果表明,吡虫啉浓度对轮虫存活率和繁殖率峰值均有显著性影响(P <0.05)㊂和对照组相比,100mg /L 吡虫啉处理组中轮虫的存活率和繁殖率峰值均显著降低㊂图1 暴露于不同浓度吡虫啉溶液中萼花臂尾轮虫的存活率和繁殖率Fig.1 Survivorship and fecundity of B.calyciflorus exposed to different concentrations of imidacloprid 551 44卷第2期 葛乐乐,白琰,孙帆,等:亚致死浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群动态的影响□存活率 Survivorship■繁殖率Fecundity 时间Time (h)1.56 mg/L3.12mg/L6.25mg/L 12.5mg/L 100mg/L25mg/L50mg/L 繁殖率A g e -s p e c i f i c f e c u n d i t y (o f f s p r i n g /f e m a l e /12h ) 0 mg/L单因素方差分析显示,吡虫啉浓度对轮虫存活(以生命期望为指标)㊁发育(世代时间)㊁生殖(净生殖率)和种群增长(内禀增长率)等参数均有显著性影响(P<0.01),但对后代混交率无显著性影响(P=0.135)㊂多重比较表明,与对照组相比,3.12~12.5mg/L吡虫啉处理组中轮虫的生命期望显著延长(P< 0.05),而25~100mg/L吡虫啉处理组中轮虫的生命期望则显著缩短(P<0.01)㊂1.56~12.5mg/L吡虫啉处理组中轮虫的世代时间显著延长(P<0.05),而50~100mg/L吡虫啉处理组中轮虫的世代时间则显著缩短(P<0.01)㊂1.56~12.5mg/L吡虫啉处理组中轮虫的净生殖率显著升高(P<0.01),而25~100mg/L吡虫啉处理组中则相反(P<0.01)㊂50~100mg/L吡虫啉处理组中种群内禀增长率显著降低(P<0.05)(表2)㊂表2 暴露于不同浓度吡虫啉溶液中萼花臂尾轮虫的生活史参数(均数±标准误差)Table2 Life history parameters of B.calyciflorus exposed to different concentrations of imidacloprid吡虫啉浓度Imidacloprid concentration(mg/L)生命期望e0(h)世代时间T(h)净生殖率R0(offspring/female/life)内禀增长率r m(/d)后代混交率PS0154.4±3.2 83.4±0.8 14.2±0.7 0.9562±0.02104 0.013±0.0061.56158.8±1.4 93.5±3.4*19.2±0.7*0.9918±0.03655 0.018±0.0053.12172.0±2.2*94.6±3.4*19.1±0.7*0.9822±0.03672 0.015±0.0076.25166.4±2.2*91.7±1.1*17.9±0.5*0.9753±0.01492 0.020±0.0912.5168.4±1.1*90.8±3.3*18.7±0.4*1.0322±0.02910 0.036±0.07025130.0±5.4*79.2±1.1 11.0±0.1*0.8837±0.03510 0.017±0.00250110.8±5.0*71.1±2.6* 8.7±0.9*0.8455±0.02772*0.013±0.007100 98.8±2.8*70.7±2.0* 5.1±0.4*0.6164±0.04097*0.005±0.005 *与对照组相比有显著性差异Significantly different from the controls(P<0.05).回归分析结果显示,在本实验设置的吡虫啉浓度范围内,吡虫啉浓度与轮虫的存活㊁发育㊁生殖和种群增长等参数之间均具有显著的剂量-效应关系(P<0.01)(表3)㊂表3 萼花臂尾轮虫的生命期望㊁世代时间㊁净生殖率和内禀增长率与吡虫啉浓度(mg/L)间的关系Table3 The relationships between life expectancy at hatching,generation time,net reproduction rate as well as intrinsic rate of population increase of B.calyciflorus and imidacloprid concentration参数Parameters回归方程Regressive equation显著性差异Significance test生命期望e0y=0.007x2-1.434x+168.413R2=0.846,P<0.01世代时间T y=0.003x2-0.562x+92.704R2=0.699,P<0.01净生殖率R0y=0.001x2-0.244x+18.467R2=0.801,P<0.01内禀增长率r m y=-1.656×10-5x2-0.002x+0.990R2=0.830,P<0.013 讨论3.1 吡虫啉对水生生物的急性毒性已有研究表明,吡虫啉对斑马鱼幼体的LC50值为143.7mg/L[16],对大型溞的24h LC50值为118.9mg/L,对鲤鱼(Cyprinuscarpio)幼体的24h LC50为208.3mg/L,对日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)成虾的24h LC50为0.089mg/L[25],对泽蛙(Rana limnocharis)蝌蚪的24h LC50为177.3mg/L[26],对介形纲(Cypridopsis vidua和Ilyocypris dentifera)的24h LC50分别为0.542和0.759mg/L[13]㊂本研究中,在最大溶解范围内(510mg/L)吡虫啉并未对萼花臂尾轮虫造成50%以上的死亡率,因此我们估计吡虫啉对轮虫的毒性较低㊂究其原因可能在于轮虫神经系统进化程度低,对神经性药物的敏感性相对较差[27]㊂3.2 杀虫剂对轮虫种群增长率㊁种群混交率和休眠卵产量等参数的影响种群增长实验是以轮虫为受试生物进行生态毒理学研究的常用方法,实验研究的种群增长率㊁种群混交率和休眠卵产量等参数是监测污染物对轮虫孤雌生殖和有性生殖影响的常用指标[28,29]㊂已有研究表明,总体上,较高浓度的杀虫剂使轮虫种群增长率㊁种群混交率和休眠卵产量显著降低㊂如浓度高于0.4㊁0.1和0.05mg/L的甲基托布津(thiophanate-methyl)分别使萼花臂尾轮虫的种群增长率㊁种群混交率和休眠卵产量显著降低[23],浓度高于0.64mg/L的DDT㊁0.8和1.2mg/L的三氯杀螨醇(dicofol)㊁7.0mg/L的硫丹651安徽师范大学学报(自然科学版)2021年 (endosulfan)和14.0mg /L 的林丹(lindane)使萼花臂尾轮虫的种群增长率显著降低,浓度高于0.16mg /L 的DDT㊁0.025mg /L 的三氯杀螨醇㊁0.875mg /L 的硫丹和14.0mg /L 的林丹使萼花臂尾轮虫的种群混交率显著降低[30],浓度高于1.62和0.54mg /L 的西维因(Carbaryl)分别使萼花臂尾轮虫的种群混交率和种群增长率显著降低[31]㊂与上述研究结果不同,本研究发现较高浓度(50和100mg /L)的吡虫啉也使萼花臂尾轮虫的种群增长率显著降低,但较低浓度(12.5mg /L)的吡虫啉使种群增长率显著升高,此外,吡虫啉浓度对轮虫种群混交率和休眠卵产量无显著性影响㊂这些结果之间存在的差异可能与杀虫剂的种类以及所设置的浓度范围有关㊂3.3 杀虫剂对轮虫生活史参数的影响之前有报道显示,较高浓度的杀虫剂对存活㊁生殖和种群增长具有抑制作用,而较低浓度的杀虫剂则起促进作用,抑制作用和促进作用的显著性有时因杀虫剂种类的不同而存在差异㊂如较高浓度的西维因㊁甲基对硫磷(methylparathion )㊁林丹㊁二氯苯胺(3,4-dichloroaniline )㊁杀螟硫磷(fenitrothion )㊁毒死蜱(chlorpyrifos)㊁DDT 和三氯杀螨醇等杀虫剂使萼花臂尾轮虫的生命期望显著缩短,净生殖率和种群內禀增长率显著降低[32-37],较低浓度的艾氏剂(aldrin)使轮虫的生命期望显著延长,净生殖率和种群內禀增长率显著升高[38]㊂然而,较低浓度的十氯丹(chlordecone)使萼花臂尾轮虫的净生殖率升高,但对生命期望和种群內禀增长率无显著性影响[39]㊂本研究中,较高浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫的存活㊁生殖和种群增长具有显著的抑制作用,较低浓度的吡虫啉对轮虫的存活和生殖具有显著的促进作用,但对种群增长无显著性影响㊂低浓度的杀虫剂等污染物对轮虫存活㊁生殖或种群增长的促进作用通常被归因于其 毒物兴奋效应(hormesis)”[40],而较高浓度的抑制作用被认为是其毒性作用所致㊂3.4 轮虫各种群参数和生活史参数对杀虫剂的敏感性以轮虫为受试生物开展的短期慢性毒性测试中,种群增长率和种群混交率对大多数杀虫剂均是敏感的指标[23,30,31,41-43]㊂在现在的研究中,种群增长率对吡虫啉污染敏感,但种群混交率却不敏感㊂轮虫各生活史参数对杀虫剂的敏感性也常因杀虫剂种类的不同而存在着差异[32-39]㊂本研究发现,在监测较低浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫存活㊁发育和生殖的促进作用时,世代时间和净生殖率是较敏感的指标,而在监测较高浓度的吡虫啉对轮虫存活㊁发育和生殖的抑制作用时,生命期望和净生殖率是较敏感的指标㊂在研究环境胁迫条件下轮虫实验种群变动过程中,生命表实验和种群增长实验是互为补充的两种方法,两者的结合有利于揭示轮虫种群动态的过程和机理[44]㊂已有研究表明,种群增长实验得出的种群增长率不仅在数值上低于生命表实验得出的种群內禀增长率,而且在对食物密度和污染物浓度等变化的敏感性方面也存在着差异[44,45]㊂本研究结果表明,种群增长率在数值上低于种群內禀增长率,但在对较高浓度吡虫啉的抑制作用的敏感性方面与种群內禀增长率相同,在对较低浓度吡虫啉的促进作用的敏感性方面高于种群內禀增长率㊂参考文献:[1] 罗雪婷,吴迪,尹硕.新烟碱类农药发展概述[J].农药市场信息,2020(15):26-27.[2] JESCHKE P,NAUEN R.Neonicotinoids⁃from zero to hero in insecticide chemistry[J].Pest Management Science,2010,64:1084-1098.[3] TOMIZAWA M,CASIDA J E.Neonicotinoid insecticide toxicology:mechanisms of selective action [J ].Annual Review of PharmacologicalToxicology,2005,45(1):247-268.[4] MATSUDA K,BUCHINGHAM S D,KLEIER D,et al.Neonicotinoids:Insecticides acting on insect nicotinic acetylcholine receptors[J].Trends inPharmacological Sciences,2001,22:573-580.[5] MORRISSEY C A,MINEAU P,DEVRIES J H,et al.Neonicotinoid contamination of global surface waters and associated risk to aquaticinvertebrates:A review[J].Environment International,2015,74:291-303.[6] YAMAMURO M,KOMURO T,KAMIYA H,et al.Neonicotinoids disrupt aquatic food webs and decrease fishery yields[J].Science,2019,366:620-623.[7] METCALFE C D,HELM P,PATERSON G,et al.Pesticides related to land use in watersheds of the Great Lakes basin[J].Science of the TotalEnvironment,2019,648:681-692.[8] PAPADAKIS E N,TSABOULA A,KOTOPOULOU A,et al.Pesticides in the surface waters of Lake Vistonis Basin,Greece:Occurrence and environmental risk assessment[J].Science of the Total Environment,2015,536:793-802.751 44卷第2期 葛乐乐,白琰,孙帆,等:亚致死浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群动态的影响851安徽师范大学学报(自然科学版)2021年 [9] YI X,ZHANG C,LIU H,et al.Occurrence and distribution of neonicotinoid insecticides in surface water and sediment of the Guangzhou section ofthe Pearl River,South China[J].Environmental Pollution,2019,251:892-900.[10] YING P,FANG W,KRAUSS M,et al.Screening hundreds of emerging organic pollutants(EOPs)in surface water from the Yangtze River Delta(YRD):Occurrence,distribution,ecological risk[J].Environmental Pollution,2018,241:484-493.[11] NUERY⁃OOMANNI J,DOOSE C,MAJDI N,et al.Tolerance of free⁃living nematode species to imidacloprid and diuron[J].Invertebrate Biology,2019,138:e12272.[12] SONG M Y,STARK J D,BROWN J parative toxicity of four insecticides,including imidacloprid and tebufenozide,to four aquatic arthropods[J].Environmental Toxicology and Chemistry,1997,16:2494-2500.[13] SÁNCHEZ⁃BAYO F,GOKA K.Influence of light in acute toxicity bioassays of imidacloprid and zinc pyrithione to zooplankton crustaceans[J].Aquatic Toxicology,2006,78:262-271.[14] HAYASAKA D,KORENAGA T,SUZUKI K,et al.Differences in susceptibility of five cladoceran species to two systemic insecticides,imidaclopridand fipronil[J].Ecotoxicology,2012,21:421-427.[15] HAYASAKA D,SUZUKI K,NOMURA T,et parison of acute toxicity of two neonicotinoid insecticides,imidacloprid and clothianidin,to fivecladoceran species[J].Journal of Pesticide Science,2013,38:44-47.[16] WANG Y,YANG G,DAI D,et al.Individual and mixture effects of five agricultural pesticides on zebrafish(Danio rerio)larvae[J].Environmental Science and Pollution Research,2017,24:4528-4536.[17] RICO A,ARENAS⁃SÁNCHEZ A,PASQUALINI J,et al.Effects of imidacloprid and a neonicotinoid mixture on aquatic invertebrate communitiesunder Mediterranean conditions[J].Aquatic Toxicology,2018,204:130-143.[18] SUMON K A,RITIKA A K,PEETERS E T H M,et al.Effects of imidacloprid on the ecology of sub⁃tropical freshwater microcosms[J].Environmental Pollution,2018,236:432-441.[19] CHARÁ⁃SERNAA M,EPELEC L B,MORRISSEY C A,et al.Nutrients and sediment modify the impacts of a neonicotinoid insecticide onfreshwater community structure and ecosystem functioning[J].Science of the Total Environment,2019,692:1291-1303.[20] LIMA FERNANDES E,BUNDSCHUH M,BAKANOV N,et al.Effects of a systemic pesticide along an aquatic tri⁃trophic food chain[J].Bulletinof Environmental Contamination and Toxicology,2019,103:507-514.[21] US EPA.Methods for measuring the acute toxicity of effluents to freshwater and marine organisms[D].Peltier WH,Weber CI ed.EPA/600/4-85/013.Washington DC:US Environ.Protec.Agency,1985:1-163.[22] 章宗涉,黄祥飞.淡水浮游生物研究方法[M].北京:科学出版社,1991:513-515.[23] XI Y L,FENG L K.Effects of thiophanate⁃methyl and glyphosate on asexual and sexual reproduction in the rotifer Brachionus calyciflorus Pallas[J].Bulletin of Environmental Contamination&Toxicology,2004,73:644-651.[24] 朱韩,席贻龙,徐秋磊,等.不同藻密度下诺氟沙星对萼花臂尾轮虫生命表统计学参数的影响[J].生态毒理学报,2019,14(3):163-173.[25] 龚瑞忠,陈锐,陈良燕.吡虫啉对环境生物的毒性与安全性评价[J].农药科学与管理,1999,20(3):12-16.[26] 王冬兰,余向阳,张存政,等.阿维菌素与吡虫啉㊁三唑磷对泽蛙蛙(Rana limnocharis)蝌蚪的毒性研究[J].江苏农业科学,2008(2):203-205.[27] 刘泽君,唐雅丽.5种杀虫剂对3种淡水浮游动物的急性毒性[J].安全与环境学报,2017,17:793-799.[28] SNELL T,JANSSEN C.Rotifers in ecotoxicology:A review[J].Hydrobiologia,1995,313:231-247.[29] DAHMS H U,HAGIWARA A,LEE J S.Ecotoxicology,ecophysiology,and mechanistic studies with rotifers[J].Aquatic Toxicology,2011,101:1-12.[30] XI Y L,CHU Z X,XU X P.Effect of four organochlorine pesticides on the reproduction of freshwater rotifer Brachionus calyciflorus Pallas[J].Environmental Toxicology and Chemistry,2007,26:1695-1699.[31] LU Z,ZHAO B,YANG J,et al.Effects of atrazine and carbaryl on growth and reproduction of the rotifer Brachionus calyciflorus Pallas[J].Journalof Freshwater Ecology,2012,27:527-537.[32] FERNANDEZ⁃CASALDERREY A,FERRANDO M D,ANDREU⁃MOLINER E.Chronic toxicity of methylparathion to the rotifer Brachionuscalyciflorus fed on Nannochloris oculata and Chlorella pyrenoidosa[J].Hydrobiologia,1993,255/256:41-49.[33] FERRANDO M D,JANSSEN C R,ANDREU E,et al.Ecotoxicological studies with the freshwater rotifer Brachionus calyciflorus II.An assessmentof the chronic toxicity of lindane and3,4-dichloroaniline using life tables[J].Hydrobiologia,1993,255/256:33-40.[34] FERRANDO M D,SANCHO E,ANDREU⁃MOLINER E.Chronic toxicity of fenitrothion to an algae(Nannochloris oculata),a rotifer(Brachionuscalyciflorus),and the cladoceran(Daphnia magna)[J].Ecotoxicology and Environmental Safety,1996,35:112-120.[35] 刘剑锋,耿红,贺萌.杀虫剂西维因对萼花臂尾轮虫急性毒性和生活史参数的影响[J]㊂农业环境科学学报,2014,33(12):2315-2320.[36] KIM R O,KIM B M,JEONG C B,et al.Effects of chlorpyrifos on life cycle parameters,cytochrome P450S expression,and antioxidant systems inthe monogonont rotifer Brachionus koreanus[J].Environmental Toxicology and Chemistry,2016,35:1449-1457.[37] XU X P,XI Y L,WANG X M.Effects of DDT and dicofol on life table demography of the freshwater rotifer Brachionus calyciflorus Pallas[J].Polish Journal of Environmental Studies,2020,29:1945-1951.[38] HUANG L,XI Y L,ZHA C W,et al.Responses in the population growth and reproduction of freshwater rotifer Brachionus calyciflorus to fourorganochlorine pesticides[J].Annales de Limnologie⁃International Journal of Limnology,2013,49:79-85.[39] ZHA C W,XI Y L,HUANG L.Effect of sublethal exposure to chlordecone on life history characteristics of freshwater rotifer Brachionus calyciflorus Pallas[J].Bulletin of Environmental Contamination &Toxicology,2007,78:79-83.[40] CALABRESE E J.HORMESIS:why it is important to toxicology and toxicologists[J].Environmental Toxicology and Chemistry,2008,27:1451-1474.[41] PRESTON B L,SNELL T W,ROBERSTON T L,et e of freshwater rotifer Brachionus calyciflorus in screening assay for potential endocrinedisruptors[J].Environmental Toxicology and Chemistry,2000,19:1097-1101.[42] RADIX P,SEVERIN G,SCHRAMM K W,et al.Reproduction disturbances of Brachionus calyciflorus (rotifer)for the screening of environmentalendocrine disruptors[J].Chemosphere,2002,47:1097-1101.[43] MARCIAL H S,HAGIWARA A,SNELL T W.Effect of some pesticides on reproduction of rotifer Brachionus plicatilis Muller[J].Hydrobiologia,2005,546:569-575.[44] SARMA S S S,NANDINI S.Life table demography and population growth of Brachionus variabilis Hempel,1896in relation to Chlorella vulgarisdensities[J].Hydrobiologia,2001,446-447(1):75-83.[45] PAN L,XI Y L,CAO H Y,et bined effects of temperature and prey (Brachionus angularis )density on life⁃table demography and population growth of Asplanchna brightwelli (Rotifera)[J].Annales de Limnologie⁃International Journal of Limnology,2014,50:261-268Effects of Sublethal Concentrations of Imidacloprid on Population Dynamics of Brachionus calyciflorusGE Le⁃le 1,2, BAI Yan 1,2, SUN Fan 1,2, JIANG Shan 1,2, XI Yi⁃long 1,2(1.School of Ecology and Environment,Anhui Normal University,Wuhu 241002,China;2.Center of Cooperative Innovation for Recovery and Reconstruction of Degraded Ecosystem in Wanjiang City Belt Co⁃Funded by Anhui Province and Ministry of Education of the People’s Republic of China,Wuhu 241002,China)Abstract :Imidacloprid is a neonicotinoid insecticide,but its toxicity to rotifers remains unknown.With Brachionus calyciflorus as test animals,and by means of population growth,resting egg production and life table experiments,the effects of different concentrations of imidacloprid (0,1.56,3.12,6.25,12.5,25,50and 100mg /L)on population parameters and life history parameters of Brachionus calyciflorus were investigated.The results showed that imidacloprid concentration affected significantly population growth rate,life expectancy at hatching,generation time,net reproductive rate and intrinsic rate of population increase of the rotifers (P <0.05),but did not affect mictic rate,resting egg production and proportion of sexual offspring (P >0.05).Compared with the controls,treatment with imidacloprid at 12.5mg /L increased the population growth rate of the rotifers (P <0.05),but those at 50and 100mg /L decreased it (P <0.05).Treatments with imidacloprid at 3.12-12.5mg /L increased the life expectancy at hatching (P <0.05),but the opposite was also true for those at 25-100mg /L (P <0.01).Treatments with imidacloprid at 1.56-12.5mg /L increased the generation time (P <0.05),but those at 50-100mg /L decreased it (P <0.01).Treatments with imidacloprid at 1.56-12.5mg /L increased the net reproductive rate (P <0.01),but those at 50-100mg /L decreased it (P <0.01).Treatments with imidacloprid at 50-100mg /L decreased the intrinsic rate of population increase (P <0.05).In the range of tested imidacloprid concentrations,significant effect⁃dose relationships were observed between population growth rate,life expectancy at hatching,generation time,net reproduction rate as well as intrinsic rate of population increase and imidacloprid concentration,and could be described as y =1.511×10-6x 2-0.003x +0.69,y =0.007x 2-1.434x +168.413,y =0.003x 2-0.562x +92.704,y =0.001x 2-0.244x +18.467and y =-1.656×10-5x 2-0.002x +0.990,respectively.Among all the endpoints,net reproduction rate was more sensitive to imidacloprid.Key words :Brachionus calyciflorus ;imidacloprid;survival;reproduction;population growth(责任编辑:巩 劼)951 44卷第2期 葛乐乐,白琰,孙帆,等:亚致死浓度的吡虫啉对萼花臂尾轮虫种群动态的影响。
汀棠湖冬季出现的萼花臂尾轮虫对水温的适应
汀棠湖冬季出现的萼花臂尾轮虫对水温的适应王爱民;席贻龙;牛翔翔;李瑶;温新利【摘要】为了解汀棠湖冬季出现的萼花臂尾轮虫对水温的适应,探讨其在春季的种群消长机制,运用生命表统计学方法研究了温度(12℃、16℃、20℃和24℃)和斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)密度(1.0×106、3.0× 106和5.0× 106个/mL)对冬季采自芜湖市汀棠湖水体中的萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)出生时的生命期望、世代时间、平均寿命、总生殖率、净生殖率和种群内禀增长率等生活史参数的影响.结果表明,温度对轮虫出生时的生命期望、世代时间、平均寿命、净生殖率和种群内禀增长率均有显著性影响(P＜0.05),但对总生殖率无显著性影响(P＞0.05);食物密度以及食物密度与温度之间的交互作用对轮虫所有生命表统计学参数均无显著性影响(P＞0.05).轮虫出生时的生命期望和平均寿命在12℃下较长,16、20℃和24℃下较短且三者间无显著性差异;轮虫的世代时间在12℃下最长,16℃和24℃下最短且两者间无显著性差异;轮虫的净生殖率在16℃下较高,12、20℃和24下较低且三者间无显著性差异;轮虫的种群内禀增长率在12℃下最低,16℃下最高,20℃和24间无显著性差异.汀棠湖冬季出现的萼花臂尾轮虫在16下的适合度最高,这或许是该水体中萼花臂尾轮虫种群密度在3月中旬(此时水温为17℃)达到春季最高峰的重要原因之一.【期刊名称】《生态学报》【年(卷),期】2014(034)016【总页数】8页(P4588-4595)【关键词】萼花臂尾轮虫;生活史特征;温度;食物密度;种群动态【作者】王爱民;席贻龙;牛翔翔;李瑶;温新利【作者单位】安徽师范大学生命科学学院,安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室,芜湖241000【正文语种】中文轮虫是各类水体中广泛分布的一类浮游动物，在水生态系统的结构组成、物质循环和能量流动过程中具有重要的作用。
温度对萼花臂尾轮虫实验种群的影响
Ｑ１ ５ １ 文 献 标 识 码 ４ ． Ａ 文 章 编 号 １ ７ — ３ １ ２ ０ ） ２－ ６ ２４ ２ （０ ８ Ｏ － 中图分类号
Ｅｆ ｅ ｔ ｏ ｍ ｐｅ ａ ｕｒ ｎ ｔ ｐｅ ｉ ｅ ａ ｐｕ ａ ｉ ｎ ｏ ｆ ｃ ｆ Ｔｅ ｒ ｔ ｅ ｏ ｈｅ Ｅｘ ｒ ｍ ｎｔ ｌ Ｐｏ ｌ ｔｏ ｆ
ｒ ｔ ｎ ｅ ｓ ｄ ｗｉｈ ｉ ｒ ａ ｅ ｉ ｅ ｐ ａ ｕ ｅ Ａ ｔｔ ａ ｅ ｔｍ ｅ，ｔ ａ ｍ ｕｍ ａ ｅ ｉｃｒ ａ ｅ ｔ ｎｃ ｅ ｓ ｎ ｔ ｍ ｅｒ ｔ ｒ ． ｈｅ ｓ ｍ ｉ ｈｅ ｍ ｘｉ ｐｏｐ ａ ｉ ｄｅ ｉｙ ｔ ｎ ｄ ｔ ｎｃ ｅ ｓ ｕｌ ｔｏｎ ｎｓｔ ｅ ｄｅ ｏ ｉ ｒ ａ ｅ ｉ ｉｉｌｙ ａｎ ｈｅ ｃｉ ｅｄ Ｔ ｈｕ ｎ ｔａ ｌ ｄ ｔ ｎ ｄｅ ｌｎ ． ｓ，ｉ ｑｕｉｕｌｕｒ ｎａ ｃ ｔ ｅ，ａｐ ｏｐｒａ ｅ ｔ ｍ ｐｅ ａ ｕ ｅ ｓ ｐｒ ｉ ｔ ｅ ｒ ｔ ｒ ｈｏｕ ｄ ｂｅ ｃ ｏｓ ｎ ａ ｃ ｄｉ Ｏ ｔ ｃ ｕ ｌ ｌ ｈ ｅ ｃ ｏｒ ｎｇ ｔ ｈｅａ ｔ ａ
ｃ ｎ ｉｉｎ．Ｉ ｈ ｏ ｉｅ Ｏ ｂ ｕ ｔｖ ｔ ｄ ｆ ｓ ｎ ａ ｖ ｒ ｈ ｒ ｉ ｅ ａ ｈ ｇ ｅ ｅ ｅ ａ ｕ ｅｏ ５ ℃ ｍｉ ｈ ｅ ｃ ｏ ｅ ｏ ｄ ｔｏ ｆ ｅ ｒ ｔｆ ｒｉ ｔ ｅ ｃ ｌ ａ ｅ ａ ｔｉ ｅ ｙ ｓ ｏ ｔｔ ｔ ｓ ｉ ｍ ， ｉ ｈ ｒｔ ｍｐ ｒ ｔ ｒ ｆ３ ｇ ｔｂ ｈ ｓ ｎ，
氟他胺对萼花臂尾轮虫的毒性影响
氟他胺对萼花臂尾轮虫的毒性影响吕林兰;杨家新;匡腾蛟;黄金田;董学兴【摘要】Toxic effects of flutamide to B. Calyciflorus were investigated by using 2-d population growth and life-table techniques. The result showed that the relationship between flutamide logarithmic concentration and population growth rate ( r) was linear negative correlation. The half-maximal effective concentration ( EC50 ) , lowest observed effect concentration ( LOEC) and no-observed effect concentration ( NOEC) of flutamide were 4. 31, 3. 17 mg/L and 1. 59 mg/L, respectively. The intrinsic rate of increase and generation time were significantly affected by flutamide (P <0. 05). The intrinsic rate of increase of B. Calyciflorus were significantly declined exposed to 1. 59 mg/L and 3. 17 mg/L flutamide, and the NOEC was 0. 8 mg/L. Exposed to 3. 17 mg/L flutamide, the generation time (T) of B. Calyciflorus was significantly prolonged ( P < 0. 05 ). All of above, the intrinsic rate of increase of B. Calyciflorus was the most sensitive index for flutamide.%采用两天种群增长和生命表,研究了不同浓度氟他胺对萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)的毒性影响.结果显示:轮虫种群增长率与氟他胺浓度对数负相关.氟他胺对萼花臂尾轮虫种群增长率的半效应浓度( EC50)、最低可见效应浓度(LOEC)和无可见效应浓度(NOEC)分别为4.31、3.17和1.59mg/L.氟他胺对萼花臂尾轮虫的内禀增长率和世代时间有显著的影响(P＜0.05)；内禀增长率随氟他胺浓度升高而下降,其中1.59mg/L和3.17mg/L氟他胺浓度组内禀增长率分别比对照组降低了8.98％和17.95％ (P＜0.05),其无效应浓度为0.8mg/L；而3.17mg/L浓度组的世代时间显著延长(P＜0.05).实验结果表明内禀增长率是检测氟他胺对萼花臂尾轮虫毒性最敏感的指标.【期刊名称】《淡水渔业》【年(卷),期】2012(042)004【总页数】4页(P63-65,90)【关键词】萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus);氟他胺;毒性;种群增长率;生命表【作者】吕林兰;杨家新;匡腾蛟;黄金田;董学兴【作者单位】江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室,江苏盐城224002;盐城工学院化学与生物工程学院,江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室,江苏盐城224051;南京师范大学生命科学学院,南京210046;南京师范大学生命科学学院,南京210046;盐城工学院化学与生物工程学院,江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室,江苏盐城224051;盐城工学院化学与生物工程学院,江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室,江苏盐城224051【正文语种】中文【中图分类】X171.5轮虫是水生态系统中重要组成部分之一，因具有生殖速度快、生活周期短、对毒物敏感、全球分布以及休眠卵可以通过商业途径获得的优点而成为生态毒理学研究的受试动物[1]。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
萼花臂尾轮虫萼花臂尾轮虫（Brachionus calyciflorus Pallas）隶属轮虫动物门、单巢纲、游泳目、臂尾轮虫科Brachionidae、臂尾轮虫属Brachionus。
小型个体，系池塘、湖泊、江河中常见的浮游动物，一般近岸较多。
体长一般为100-500μm，宽约200μm。
被甲透明，其前端具四个长而发达的棘状突起，中间一对突起较两侧的两个为大;被甲后端有一具环状沟纹的长足，能自由弯曲。
在周期性变异中其被甲后半部膨大之处，还生出一对刺状侧突起。
生活时，体表白色或淡棕色。
萼花臂尾轮虫体型较小。
繁殖力强，世代交替快(通常仅6d)，一年的大部时间由雌体进行孤雌生殖；运动缓慢，速度一般小于0.02cm/s，适合于水产动物的幼苗摄食。
萼花臂尾轮虫的地理分布范围广，对环境的适应能力强、易于大量培养，所以已成为许多水产动物幼体的重要饵料，特别是作为鱼、虾、蟹类幼体的开口饵料。
目前，水产动物育苗生产中大量培养的轮虫主要是褶皱臂尾轮虫(B．plicatilis)，但在纯淡水中培养褶皱臂尾轮虫难度很大。
种的分离和保种培养萼花臂尾轮虫所需的种可以自己分离，也可向有关单位购买。
在温暖季节(水温＞15℃)，用浮游生物网(200目)从池塘沟渠中捞取浮游生物样品，在解剖镜下比较容易将轮虫分离。
为避免其它浮游动物的混入，可先将轮虫吸于一清洁的玻片上，经观察后再转到小的三角烧瓶或烧杯中，以保证轮虫种的纯度。
将分离出来的纯净萼花臂尾轮虫分成几个小单位分别进行培养，防止可能发生的污染等情况而使轮虫培养失败，从而保持并储备数量充足的原种。
分离出的轮虫种可以连续培养保存，也可以冬卵的形式保藏。
当环境条件恶化时轮虫就会出现混交雌体，此时产出的卵叫冬卵。
冬卵经受精后分泌出一层比较厚的卵壳(借以抵抗不良环境)，形成休眠卵。
每一个混交雌体可能同时或陆续产生休眠卵或可以孵出雄体的冬卵。
休眠卵的份量较重，常下沉到水底，也有浮在水面的，有的留在母体上，随母体一同下沉。
这种卵可以耐受干燥、高温、冰冻及水质的剧烈变化。
萼花臂尾轮虫主要依靠休眠卵越冬，因此可用冬卵的形式保种。
冬卵的孵化萼花臂尾轮虫冬卵的孵化及培养用水应事先用80×106浓度的漂白粉溶液消毒，然后再用250目筛绢过滤。
冬卵一般可从当地淡水池塘的底泥中采集，先放在小烧杯或三角烧瓶中进行培养，在适宜温度(20℃±)下经5—7d的培养后取其上清液，经反复分离、过滤、筛选即可获得较纯净的轮虫。
培养及管理1．培养容器常用的培养容器有：各种玻璃器皿，不同规格的水族箱，大小不同的水桶，水泥池或土池等。
培养容器使用前应经严格消毒处理。
玻璃器体积较小，可将其直接放入锅中，加水煮沸，烧煮30min即可；规模培养用的大型容器及培养池等一般采用化学消毒法。
常用消毒药品为漂白粉、高锰酸钾等。
漂白粉大型容器、工具可使用20x106漂白粉进行浸泡消毒，1h后经清水3～4次冲洗即可使用。
大型培养池，特别是土池，可配成高浓度浆糊状溶液淋撒池壁，2 4h后可进清水使用。
高锰酸钾用10 x106浓度的溶液分几次淋洒池壁。
为防止氧化锰附着，应在消毒30min后用清水冲洗干净。
此法比较适用于小型容器及水泥池。
2．培养用水培养用水亦须严格消毒。
前期培养用水量较少，可采取高温煮沸法；大面积培养，水体须用药物消毒，常用药物为漂白粉。
漂白粉可以杀死大部分敌害生物及藻类，具体用量为80 x106，因其药效消失快，故经5—7d充分充气后即可使用。
但在正式使用前，应以少量轮虫试水，确认轮虫无不良反应后方可接种。
3．接种轮虫的接种密度一般以2～5个/mL为宜。
在适宜的温度、饵料、溶氧、光照等条件下，经8～10 d即可扩大培养或收获。
4．饵料投喂培养萼花臂尾轮虫的饵料以单胞藻及有机碎屑为主。
当光照条件较好时，可在培养轮虫的容器内先加入营养盐，以培育单胞藻，待容器内的水稍具颜色后再接种轮虫。
在培养过程中，保持一定光照条件是非常必要的；但随着轮虫密度的增加，单胞藻和有机碎屑已不能满足轮虫的营养需要，因此必须作补充投饵。
目前培养轮虫较理想的饵料为单胞藻、海洋酵母、面包酵母、啤酒醉母和光合细菌等。
关于单胞藻的培养技术，国内外有不少报道，在此不再赘述。
面包酵母可从酵母厂或食品厂购到。
一般用鲜酵母，也可用于酵母及酵母片(食母生)，鲜酵母应低温保存。
投喂前先绞碎，经250目筛绢过滤，投喂量为0．01g／万个轮虫·d，日投两次。
也可用光合细菌和鲜酵母混合投喂。
光合细菌对轮虫的种群增长具有明显的促进作用，投喂量为5x106—10x106个/m1。
并根据培养中的具体情况及轮虫胃中内含物的多少来调节投饵量，以吃饱且略有剩余为宜，过多或不足都不利于轮虫的增殖。
在小水体中培养轮虫，投喂酵母后应轻轻搅拌，使之分布均匀，并能增加水体的溶氧量。
采用稍大水体进行轮虫培养时，应连续充气，以保证培养水体中的溶氧量，并可防止饵料下沉；但充气量不宜过大，以利轮虫的快速生长和繁殖。
5．温度控制萼花臂尾轮虫适温范围较广，其最适生长温度为25—30℃。
为使培养的轮虫达到最快的生长繁殖速度，应注意保温加温。
6．水质控制轮虫的生长发育和繁殖与水质关系很大。
在培养过程中，随着轮虫密度的增加、饵料密度的变化以及轮虫排泄物的积累，水体中的理化因子会发生明显的变化，所以应定时观测水质，及时补加新水。
7．轮虫的扩大培养在适宜的温度、光照，充足的饵料，良好的水质及合理的培养方法下，经10d左右的培养，当轮虫的密度达到200个/ml以上时，即可进行扩大培养或采收。
8．营养强化用酵母培养的尊花臂尾轮虫，其缺点是缺乏(6—3系列不饱和脂肪酸，特别是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，而这两种营养成分对鱼类的生长、抗病力及成活率都有重要的影响。
因此，用酵母培养的轮虫，使用前必需进行营养强化。
轮虫的营养强化剂是从鱼油、乌贼油等海洋动物的脂肪中提取的，它含有多种不饱和脂肪酸及维生素，是经乳化制成的乳浊液，能较好地溶于水。
此外，还可投喂高浓度海洋微藻(小球藻、微绿球藻和螺旋藻)对轮虫进行营养强化。
采收当轮虫的密度达到200个／ml以上时可采收使用。
可用200目筛绢制成的专门网具捞取；也可利用轮虫的趋光特性进行光诱，使轮虫集群，然后进行捕捞。
为使轮虫培养得以延续，应确定合理的捕捞量，使水体中保持一定的轮虫密度，以利再生产。
敌害生物的防治轮虫培养中最常见的敌害生物是纤毛虫。
当轮虫排泄物较多，酵母投喂过量时，水质恶化，极易引起纤毛虫大量繁殖。
因此，在轮虫的培养生产过程中，应该防止水质污染，保证轮虫种的纯净，保持培养轮虫的生长及数量优势；事先做好轮虫种的分离及保藏。
这是使轮虫培养顺利、生产持续进行的关键。
若在轮虫培养初期即出现纤毛虫大量繁殖，干脆予以舍弃，重新培养。
在培养过程中发生纤毛虫病，应减少酵母的投喂量。
加大单胞藻的投喂量。
用200目筛绢反复过滤，清水漂洗，可基本去除纤毛虫。
一萼花臂尾轮虫的分离和保种实验一、实验目的通过人工分离和实验室培养，获得实验和规模生产所需纯净丹灶萼花臂尾轮虫，并进行保种。
二、实验器材和试剂：器材：250目筛绢、浮游生物网(200目) 、解剖镜、三角烧瓶、烧杯、培养皿试剂：光合细菌（101）、面包酵母、漂白粉、高锰酸钾、试验用萼花臂尾轮虫由南京师范大学生命科学学院提供杨家新、小球藻藻种（南京大学）or 蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)（中国科学院典型培养物保藏委员会淡水藻类库(FACHB）三、实验步骤：1、培养用水严格消毒，前期培养用水量较少，可采取高温煮沸法；2、培养器皿用10 x106浓度的高锰酸钾溶液浸泡。
为防止氧化锰附着，应在消毒30min后用清水冲洗干净；培养器皿也可使用20x106漂白粉进行浸泡消毒，1h后经清水3～4次冲洗即可使用。
3、用浮游生物网(200目)从池塘沟渠中捞取浮游生物样品，在解剖镜下将轮虫分离。
4、先将轮虫吸于一清洁的玻片上，经观察后再转到小的三角烧瓶或烧杯中，以保证轮虫种的纯度。
将分离出来的纯净萼花臂尾轮虫分成几个小单位分别进行培养，防止可能发生的污染等情况而使轮虫培养失败。
5、培养萼花臂尾轮虫的饵料，鲜酵母应低温保存。
投喂前先绞碎，经250目筛绢过滤，投喂量为0.01g／万个轮虫·d，日投两次，在小水体中培养轮虫，投喂酵母后应轻轻搅拌，使之分布均匀，并能增加水体的溶氧量。
也可用光合细菌和鲜酵母混合投喂，投喂量为5x106—10x106个/m1。
并根据培养中的具体情况及轮虫胃中内含物的多少来调节投饵量，以吃饱且略有剩余为宜，过多或不足都不利于轮虫的增殖。
6、在轮虫的培养生产过程中，应该防止水质污染，保证轮虫种的纯净，保持培养轮虫的生长及数量优势；事先做好轮虫种的分离及保藏。
这是使轮虫培养顺利、生产持续进行的关键。
若在轮虫培养初期即出现纤毛虫大量繁殖，干脆予以舍弃，重新培养。
在培养过程中发生纤毛虫病，应减少酵母的投喂量。
加大单胞藻的投喂量。
用200目筛绢反复过滤，清水漂洗，可基本去除纤毛虫。
7、当轮虫的密度达到200个／ml以上时可采收使用。
可用200目筛绢制成的专门网具捞取；也可利用轮虫的趋光特性进行光诱，使轮虫集群，然后进行捕捞。
为使轮虫培养得以延续，应确定合理的捕捞量，使水体中保持一定的轮虫密度，以利再生产。
轮虫培养液，培养液配方为：1000mL NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液(浓度为0．002mol／L pH值7.3)，其中含100mg KNO3 ，40mg k2HPO4．62mg MgSO4·H2O, 和144mg Ca(NO3)2·4H2O ,培养温度为25℃，光照强4，000Ix，光照昼长比(L D)为I6：8。
小球藻 HB4培养基。