菌种的管理与操作技术_中国疾控
这样管理微生物菌种才有效!

这样管理微生物菌种才有效!一、菌株的采集试验室用菌种一是到国家法定机构选购,二是购买商业派生菌种,三是科研中菌种沟通。
不管是哪种来源,均统一采集。
采集中严格根据规范执行。
要求包装牢靠,采集快速,不泄漏不污染。
保证菌种合格和环境平安。
采集中要有菌种传代标识。
选择有资质的标准菌株的合格供应商,每批标准菌株必需附带有供应商的合格证或检测报告或说明书,来证明所选购的标准菌株是合格的。
二、标准菌株和验收试验室收到标准菌株,首先应进行符合性感官检查,记录菌株号和标准菌株来源途径信息,确保溯源性清晰。
同时还应记录标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等状况。
三、冻干标准菌株的复活1.开启产品包装:先用70%酒精棉擦拭外包装,再打开使用。
2.复活:选择合适的培育基和培育条件进行复活。
菌种的首次活化最好是在非选择性琼脂培育基上,除非特别状况或特殊推举,一般不用液体培育基。
冻干菌株的传代次数不得超过5代,从标准菌株保藏中心购买的冻干标准菌株为第F0代。
四、工作菌株确认方法及依据用无菌接种环取上述培育物,在相应的培育基平板(养分琼脂、大豆胰蛋白胨琼脂)上或相应的细菌鉴别平板(如伊红美蓝、麦康凯、BP等上划线分别单个菌落,置相宜条件下培育(若该类微生物为厌氧菌,则培育条件应为厌氧条件)。
以同样方法取真菌和酵母菌至SDA(萨布罗培育基)平板上或玫瑰红钠培育基平板上,23~28℃下培育7d;培育后观看是否具有典型的菌落状态,然后挑取单一纯菌落,进行革兰染色、镜检,观看其染色特征及菌体形态以确定菌种。
五、污染处理假如在该平板上发觉有其他菌落生长,则说明操作有污染或菌种不纯。
要将该污染培育物做灭菌处理,查找缘由,重新分别选择纯菌落。
六、菌种保存全部菌种均由试验室专人(双人双锁)保存于专用冰箱或其它保存方式。
要建立菌种登记台帐,具体记录菌种采集、保管、制备、使用、处置状况;每一种菌种肯定要有检测鉴定报告(详细的的鉴定方法见菌种质量报告鉴定证书上的方法);详细菌种保存方法一般为:将复苏后肉汤与灭菌甘油按15%甘油比例(肉汤8.5mL+甘油1.5mL)混合,-30 ℃冻存,(可用2mL冻存管冻存多管),作为保藏储备菌株F1代,也可使用商品化的菌种保存管。
菌种管理规范

菌种管理规范一、引言菌种管理是指对菌种进行有效的管理和监控,以确保菌种的质量和安全性,保障科研工作的顺利进行。
本文旨在制定一套菌种管理规范,以规范菌种的采集、保存、传递、使用和销毁等环节,确保菌种管理的科学性和规范性。
二、菌种采集1. 采集地点:菌种采集应选择无污染、无化学物质残留的环境,避免采集于工业区、高污染区域或者受到化学物质污染的地方。
2. 采集工具:采集菌种应使用无菌工具,如无菌匙、无菌刷等,以避免菌种污染。
3. 采集方法:采集菌种时,应遵循无菌操作规范,避免菌种与外界环境接触,以减少外部菌种的污染。
三、菌种保存1. 储存容器:菌种应储存于无菌的保存容器中,如培养皿、试管等,以避免菌种的污染和变质。
2. 储存条件:菌种的储存条件应根据菌种的特性确定,包括温度、湿度和光照等因素。
应定期检查保存设备的工作状态,确保储存条件的稳定性。
3. 储存记录:对每一个菌种的储存情况应进行详细的记录,包括菌种名称、储存时间、储存温度等信息,以便于追溯和管理。
四、菌种传递1. 传递方式:菌种的传递应采用无菌操作,避免菌种的污染和变异。
可以通过无菌传递工具、无菌培养基等方式进行传递。
2. 传递记录:对每次菌种传递的情况应进行详细的记录,包括传递时间、接收方信息等,以便于追溯和管理。
五、菌种使用1. 使用申请:对于需要使用菌种的科研工作,应提前向相关部门或者负责人提交使用申请,明确使用目的和时间等信息。
2. 使用条件:菌种的使用应遵循相关的实验室操作规范,确保操作过程的安全和准确性。
3. 使用记录:对每次菌种使用情况应进行详细的记录,包括使用日期、使用人员等信息,以便于追溯和管理。
六、菌种销毁1. 销毁方式:菌种的销毁应采用安全、环保的方式进行,如高温灭菌、化学消毒等,避免菌种的泄漏和传播。
2. 销毁记录:对每次菌种销毁情况应进行详细的记录,包括销毁日期、销毁方式等信息,以便于追溯和管理。
七、菌种管理责任1. 负责人:应指定专人负责菌种管理工作,包括菌种采集、保存、传递、使用和销毁等环节的监督和管理。
菌种管理规范

菌种管理规范引言概述:菌种管理规范是指在实验室或生产环境中对菌种进行科学、规范的管理和操作。
菌种管理规范的制定和实施,能够确保菌种的纯度、稳定性和可追溯性,保证实验结果的准确性和可重复性。
本文将从菌种的存储、标识、记录、分发和销毁等五个方面,详细阐述菌种管理规范的相关内容。
一、菌种的存储1.1 温度控制:菌种的存储温度应根据不同菌种的特性进行合理选择,常见的存储温度有4℃、-20℃和-80℃。
应定期检查和记录存储设备的温度,确保菌种的存储温度稳定。
1.2 冷冻保护剂的使用:在低温存储时,应添加适当的冷冻保护剂,如甘油、DMSO等,以保护菌种的生物活性和稳定性。
1.3 存储容器的选择:应选择符合菌种存储要求的容器,如冷冻管、培养基斜面等,并在容器上标明菌种的相关信息。
二、菌种的标识2.1 命名规范:为了方便识别和管理,应为每个菌种制定统一的命名规范,包括菌种名称、属名、菌株编号等,避免重名或混淆。
2.2 标签标识:在菌种存储容器上应贴上清晰可见的标签,标注菌种的名称、菌株编号、存储日期、存储温度等信息,以便追溯和管理。
2.3 标本保存:对于重要的菌种,应保存其原始标本,如培养基斜面、冷冻备份等,以备不时之需。
三、菌种的记录3.1 菌种信息记录:建立菌种信息数据库,记录每个菌种的相关信息,包括菌种名称、来源、存储温度、存储日期、使用记录等,以便查询和管理。
3.2 菌种存储记录:对每个菌种的存储情况进行详细记录,包括存储温度、存储容器、存储位置等,以确保菌种的追溯和可靠性。
3.3 菌种使用记录:每次使用菌种都应记录相关信息,如使用日期、使用用途、使用人员等,以便追溯实验结果和质量控制。
四、菌种的分发4.1 分发程序:制定菌种分发的程序和标准操作规程,包括菌种的选择、分离、传代等,确保分发的准确性和菌种的纯度。
4.2 分发记录:对每次菌种分发进行详细记录,包括分发日期、分发数量、接收人员等,以便追溯和质量控制。
疾病预防与控制实验室菌种、毒种(株)和阳性标本管理程序

疾病预防与控制中心实验室菌种、毒种(株)和阳性标本管理程序1 目的加强中心的菌种、毒种(株)和阳性标本的管理,确保菌(毒)种(株)及阳性标本收集、保管、领用及销毁工作符合规定,相关生物安全检测工作安全有序地进行。
2 范围适用于本中心菌种、毒种(株)和相应阳性标本的收集、保管、领用、销毁等工作。
3 职责3.1 微生物实验室负责菌(毒)种的采购计划及菌种验收。
3.2 微生物实验室配合后勤管理部门做好菌(毒)种的采购。
3.3 微生物实验室负责菌种、毒种(株)和相应阳性标本的收集、保管和销毁。
3.4 中心主任负责菌种采购及领用审批。
3.5 中心生物安全管理委员会负责经常性的监督检查。
4 分类与定义4.1 分类根据《中国医学微生物菌种保藏管理办法》与《病原微生物实验室生物安全管理条例》的规定,按病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,将病原微生物分为一类、二类、三类、四类,其中,第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。
具体分类参照有关规定执行。
4.2 定义《病原微生物实验室生物安全管理条例》所称病原微生物,是指能够使人或者动物致病的微生物;所称实验活动,是指实验室从事与病原微生物菌(毒)种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。
5 程序5.1 菌种、毒种(株)及阳性标本的收集下列菌、毒种(株)及阳性样本需移交中心菌、毒种库集中保存:5.1.1 常规检测、监测项目,科学研究分离获得的有保存价值的普通菌种、毒种(株)及相应的阳性标本。
5.1.2 外部购买的普通菌种、毒种(株)标准株。
5.2 菌种、毒种(株)和阳性样本的接收5.2.1 在生物安全防护水平相应的设备和条件下进行菌种、毒种(株)和阳性样本接收工作;对可疑高致病原微生物的接收应在生物安全柜内进行,并及时安排两人上送省疾控中心。
5.2.2 接收菌种、毒种(株)和阳性样本时,应有两人在场,一人登记相关信息资料,另一人戴上手套,做好个人安全防护后,检查菌种、毒种(株)和阳性样本包装容器有无破损和泄漏。
菌种管理规范

菌种管理规范一、引言菌种管理是指对菌种的采集、保存、鉴定和分发等工作进行规范管理,以确保菌种的质量和可追溯性。
本文将介绍菌种管理的标准化操作流程,以提高菌种管理的效率和可靠性。
二、菌种采集1. 采集来源:菌种的采集来源应包括自然环境、实验室分离和其他研究机构等。
采集来源的详细信息应被记录,包括地理位置、采集日期和采集者等。
2. 采集方法:采集菌种应使用无菌操作,避免污染和混合。
采集的样品应尽快送至实验室进行处理。
3. 样品处理:采集的样品应进行适当的处理,如消毒、分离和纯化等。
处理过程中应注意防止菌种的变异和污染。
三、菌种保存1. 保存条件:菌种应根据其特性和保存需求选择适当的保存方法,如低温冷冻、干燥和液氮冷冻等。
保存条件应确保菌种的长期存活和稳定性。
2. 保存容器:选择适当的保存容器,如冷冻管、培养皿和培养瓶等。
保存容器应具备防漏、防爆和耐高温等特性。
3. 标签标识:每一个保存容器应贴有清晰可辨的标签,标注菌种的名称、编号、保存日期和保存条件等信息。
四、菌种鉴定1. 鉴定方法:采用可靠的鉴定方法对菌种进行鉴定,如形态学观察、生理生化特性和份子生物学分析等。
鉴定方法应具备准确性和可重复性。
2. 鉴定记录:对菌种的鉴定结果进行详细记录,包括鉴定方法、鉴定依据和鉴定人等信息。
鉴定记录应保存至少5年,以备查证和追溯。
五、菌种分发1. 分发申请:接收菌种分发申请时,应核实申请人的身份和目的,并记录相关信息。
申请人应提供合理的理由和使用计划。
2. 分发方式:菌种可以通过传递菌种样品、发送冻干菌种或者提供菌种培养物等方式进行分发。
分发过程中应注意保持菌种的活力和纯度。
3. 分发记录:对菌种的分发情况进行详细记录,包括分发日期、分发数量和接收人等信息。
分发记录应保存至少5年,以备查证和追溯。
六、菌种管理1. 菌种登记:对每一个菌种进行详细登记,包括菌种名称、编号、来源、采集日期和保存条件等信息。
登记表应定期更新和维护。
微生物菌种毒株的管理规定与程序

微生物菌种毒株的管理规定与程序1.根据《中华人民共和国传染病防治法》有关规定特制订本制度。
2.实验室保存菌种主要为标准菌株和临床分离出的菌株。
《中华人民共和国传染病防治法》规定的传染病菌种、毒种不在本室管理范围之内。
本实验室无毒种保存。
3.菌株保存及使用规定3.1菌种保管有专人负责,保存于冰箱中,冰箱门加锁,确保菌种安全。
保管人员变动时,必须严格交接手续。
3.2菌种应有严格的登记,包括病人姓名,菌名、保存日期、药敏记录。
菌种的使用、转移、销毁应有记录和负责人签名。
3.3各种菌种应按规定时间接种,一般在接种三次后作一次全面的鉴定,注意菌种有无污染及变异,如发现变异时,应及时更换。
3.4菌种保存范围及向外单位转移,应按国家卫生部规定执行。
所有存在菌种应有清单。
4.管理程序4.1检验用菌种应来自认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株,或使用与标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株。
4.2检验用菌种的管理由专人负责。
负责菌种的申购、接收与复活、保藏、定期传代、检查及销毁。
根据需要及时提供菌种,并监督其使用。
负责填写菌种记录。
4.3菌种的申购、接收4.3.1根据检验要求申购所需菌种,写明购买菌种名称、标准菌号、数量、保藏机构。
4.3.2对新购进的菌种应仔细核对菌种标签、包装完整性和随菌种附有的说明书,及时填写菌种保管登记记录。
4.4菌种的保藏、传代4.4.1标准菌株的复活或培养物的制备应按供应商提供的说明或按已验证的方法进行。
4.4.2冻干管开启后可制备菌种甘油管和转种斜面。
4.4.3斜面菌种1~3个月传代一次,传代次数不得超过V代。
传代应及时填写制备及传代记录。
4.4.4除另有规定外,菌种冻干管、甘油管应保存于-20℃以下冰箱中,菌种斜面、菌液应保存于2~8℃冰箱。
4.4.5冷冻菌种一旦解冻转种制备工作菌株后,不得重新冷冻和再次使用。
4.4.6保藏的菌种都要有明显的标志,标明菌种名称、标准菌号、接种日期、传代数与菌种记录一一对应。
菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程

菌种管理制度1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程,规范微生物学检定用菌种的管理,最大限度降低变异率,确保菌种的溯源性与稳定性,从而确保微生物学检验结果的准确可靠。
2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。
3、定义➢标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。
➢传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。
➢工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。
➢菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。
4、职责4.1部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。
4.2微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。
5、规程5.1菌种的申购部门主管根据菌种的使用情况,提出年度购买计划(包括临时检验需要),填写申购流程,经审批后,向中检所菌种保藏中心或省(市)药检所购买冻干菌种(标准菌株)或传代用菌种,购买时,需确定菌种的代数,以便控制传代代数。
5.2菌种的接收菌种到达实验室后,由部门主管接收菌种,检查其名称和数量,以及每一支的完整性,同时将菌种的所有信息,填写在《标准菌株库存记录》上,内容包括:名称、数量、编号(无编号者按检定菌种的编号原则编号)、代数、来源、接收日期、接收人等,并将其暂贮存于4~8℃冰箱中,在一周内必须完成转种。
5.3菌种的保存5.3.1工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。
将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上,待菌生长充分以后,转移至4~8℃冰箱中保存。
此法仅用于工作用菌种的短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应灭活处理后销毁。
保存时间根据菌种种类而不同,细菌:每个月转种一次;酵母菌及芽胞:3~6个月转种一次;丝状真菌每年转种一次。
疾控中心检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程

检定菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程1.目的:为规范微生物学检定用菌的管理,确保菌种的溯源性与稳定性,从而确保微生物学检验结果的准确可靠。
2.范围:本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。
3、定义:标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。
传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。
工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。
菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。
4.职责:4.1检验科负责提出菌(毒)种的购买申请,并按国家有关生物安全法规的要求做好使用管理和销毁工作。
4.2总务科负责实施采购,检验科负责保存、验收。
5.规程:5.1.检定菌的申购检验科每年根据检定菌种的使用情况(包括临时检验需要),提出购买计划,交由中心分管主任审批后,向中检所菌种保藏中心购买冻干菌种(标准菌种);也可以直接向省(市)疾控部门申请提供传代用菌种,需询问与确定菌种的代数,以便传代时控制代数。
5.2.检定菌的接收菌种到达实验室后,由菌(毒)种保管人接收菌种,检查其名称和数量,以及每一支的完整性,同时将菌种的所有信息,填写在《检定菌种接收记录》(附表1)上,并将其暂贮存于4~8℃冰箱中,在一周内必须完成转种。
5.3.检定菌的保存5.3.1.工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。
将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌生长充分以后,转移至2~8℃冰箱中保存。
此法仅用于工作用菌种的短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应灭活处理后销毁。
保存时间根据菌种种类而不同,细菌:1个月;酵母菌:2个月;霉菌及芽胞:3个月。
5.3.2.传代用菌种的保存采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。
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菌(毒)种的管理与操作技术中国药品生物制品检定所 王国治 中国疾病预防控制中心 王秋娣摘要:菌(毒)种及样品的运输、保管、在实验中的应用与操作,是生物安全实验室(微生物实验室)安全管理的重要方面,为保证实验室安全和实验操作者免受其害,本文论述了菌(毒)种的管理和监督系统文件制定、微生物操作技术规范、避免感染性物质进入人体的的措施和对意外事故的处理方法。
关键词:生物安全实验室,菌(毒)种管理,微生物操作技术,事故处理保证生物安全实验室(微生物实验室)安全,对菌(毒)种及样品的运输、保藏、使用等方面的管理是重要内容之一。
如何建立和执行有效的管理与监督制度、标准操作规程和实验室操作技术规范是该类实验室的重中之重。
菌(毒)种的管理包括样品的运输、保藏、使用等方面的内容,而对管理而言则是保证生物安全实验室安全(包括微生物实验室)的重要内容之一。
然而,菌(毒)种的管理应建立规范和严格的管理制度以及对该制度的有效监督,才能真正地防止在传染病防治、科学研究以及生物制品生产过程中造成菌(毒)种的扩散或遗失,同时可避免发生实验室感染或由其引起的相关传染病的传播事件;而规范的菌(毒)种的管理又可避免菌种在使用过程中发生不应出现的差错,同时保证菌毒种保藏的质量以确保试验结果的可靠性。
在日常的实际工作中可以发现:大多数的实验室将“传代过程”与“数量”合并于研究记录中的现象,或者是存在着记录的不完整性,而记录不正确的现象更是较为普遍。
我们可以设想,如果在这一过程中缺少真正直接反应实际工作状况、独立的传代与销毁记录,将来则难以追踪培养物的去向,这会不利于研究单位的安全自查和上级有关单位的核查,那么国家级的督察也只能是形式上的监督作用,而事实上却无法真正确保生物安全实验室的安全。
因此,要求生物安全实验室应根据所从事的实际工作性质来制定独立的菌(毒)种保藏、开启、传代至销毁的原始记录,其中,记录的内容应包括传代菌(毒)种来源、传代时间、传代数量、传代用途以及备注等;销毁记录应包括销毁方式、销毁物品明细表(培养物、实验用具等)、灭菌温度与时间(开始时间,达到温度时间,停止灭菌时间,取出时间)。
当然,实验记录同时应有实验人与复核人并记录在案。
另则,实验室负责人应对记录内容负责,上级主管检查人员以及国家督察人员应将该项目作为重点检查的内容之一,并对整个检查过程进行认真而负责的督察,不应疏忽任何的点滴,严格地按照规范的管理制度执行,防止事故发生,为本单位和国家把好质量关和安全关。
一、菌(毒)种管理与监督系统的文件制定为保证菌(毒)种管理体系能规范化制度化的正常运作,可以通过制定符合本单位实际情况的菌(毒)种管理及监督标准操作规范(SOP)也是非常必要的,该(SOP)主要内容包括:菌(毒)种管理与监督标准操作细则,其内容应包括:菌(毒)种接收(分离)标准操作细则(SOP);种子批制备与质控标准操作细则(SOP);菌(毒)种使用、保藏、分发标准操作细则(SOP);菌(毒)种销毁标准操作细则(SOP);菌(毒)种事故应急处理的标准操作细则(SOP):菌(毒)种管理监督的标准操作细则(SOP)。
而对应于各个细则可根据所研究的实际内容或实验要求,制定更为详细的每一种实验的独立操作细则,并为其设计相对应的规范化表格化的原始记录。
以备日后各种验证和检查所需。
(一)菌(毒)种管理与监督标准操作细则对于总则的内容要包括菌(毒)种管理与监督的制定SOP的指导思想、各种实验内容SOP的形成与批准程序、主要内容提要以及全部SOP的目录、实施与监督。
1、菌(毒)种接收(分离)标准操作细则菌(毒)种接收标准操作细则(SOP)要求内容包括:①接收(外购、赠送)审批与接收程序;②菌(毒)种来源、背景资料、接收样品检验的要求有原始记录:③菌(毒)种外购(接受赠送)申请表;④菌种来源,背景资料登记记录菌(毒)种入库登记表;⑤外来菌种传代与检验记录菌(毒)种分离标准操作细则(SOP)取样程序;对菌种的来源,其背景资料的要求、样品的分离操作(如分离过程比较复杂的可分别书写各自独立的SOP)2、菌(毒)种种子批制备与质控标准操作细则(SOP)。
菌(毒)种种子批制备标准的操作细则(SOP)的内容应包括:①原代主代及工作种子批制备过程的各种工艺要求细则;②批准种子批发行使用程序,各过程还应制定相对应的实验原始记录。
需要注意的是:菌(毒)种种子批质控标准操作细则(SOP)应根据各菌(毒)种的不同特性,制定相关的形态学、血清学、生化特性、免疫原性、纯菌或外源因子检查、核酸序列分析等检定方法与结果判定。
这要求在各个过程中都应制定相对应的实验原始记录并保存在档。
针对各项检定项目应制定相对应实验原始记录,并有检定结果的汇总表,种子批申请放行使用申请表与审批表等。
3、菌(毒)种使用、分发与保藏标准操作细则(SOP)。
菌(毒)种使用、分发程序、菌(毒)种保藏方法的建立及验证,菌(毒种的备份制度、菌(毒)种定期稳定性检查制度。
①菌(毒)种出、入库登记表②菌(毒)种使用申请表③菌(毒)种保藏方法验证记录④菌(毒)种定期稳定性检查记录4、菌(毒)种灭活与销毁标准操作细则(SOP)。
该标准操作细则应由菌(毒)种销毁申报审批程序、销毁菌(毒)种复核程序、销毁菌(毒)种灭活验证方案等组成。
还应具备表格等的配套记录。
①菌(毒)种销毁申报表②菌(毒)种灭活与销毁记录③销毁菌(毒)种灭活验证试验记录5、菌(毒)种事故应急处理标准操作细则(SOP)。
各相关使用单位应建立发生菌(毒)种丢失、破损或实验室发事故的应急处理办法等标准操作细则。
①菌(毒)种备份制度②事故申报表及相关处理记录等报告6、菌(毒)种管理监督标准操作细则(SOP)。
应要求各单位的生物安全部门必须重视菌(毒)种的管理监督事项,定期了解本单位的菌(毒)种保管、检定及使用情况的相关规定,并进行人员抽查考核制度,有效预防事故的发生。
需建立以下记录与表格等文件化的监督标准。
①制定现场抽查记录(表)②制定人员考核记录(表)③样品来源,背景资料登记记录④菌(毒)种分离记录⑤外来菌种传代与检验记录⑥菌(毒)种入库或处理登记表二、生物安全实验室微生物操作技术规范在实验室内标本的操作:包括其采集、内部运输、接收和打开标本的方法正确与否,都会增加或造成相关人员发生实验室感染的危险性。
因此,在进行感染性标本的操作时应注意以下问题:(一)样品容器 样品容器的材料可以是玻璃的,但建议最好使用塑料制品为宜。
样品容器本身要求坚固,并正确地用盖子或塞子盖好后应检查是否无泄漏。
在容器外部不能有残留物。
容器上应当正确地粘贴标签以便于识别。
样品的要求或说明书不能卷在容器外面,而是要分开放置,最好能放置在防水的袋子里。
样品在设施内的传递为了避免意外泄漏或溢出,应当使用盒子等二级容器,并将其固定在架子上使装有样品的容器保持直立状态。
二级容器可以是金属或塑料制品,但应该可以耐高压灭菌或耐受化学消毒剂的要求。
密封口最好有一个垫圈并要求定期地清除污染。
(二)样品接收 需要接收大量样品的实验室应当具备专门的房间或空间。
众所周知,实验室事故、伤害以及与工作有关的实验室感染主要是由于人为失误、不良实验技术以及仪器使用不当而造成的,当实验室样品的收集以及内部传递和接收不当时,都能够带来相关人员感染的危险。
应建立完善的管理制度与操作细则,避免或尽量减少这类问题或事故的发生。
(三)包装开启作为接收和打开样品的工作人员应当了解样品对身体健康的潜在危害的知情权,要了解并接受过如何采用常规预防措施的培训,特别是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。
样品的开启要在生物安全柜内进行,并准备好消毒剂。
(四)移液管和移液辅助器的使用1、应使用移液辅助器,严禁用口吸取2、所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染3、不能向含有感染性物质的溶液中吹气4、感染性物质不能够用移液管反复吹吸混合5、不能将液体从移液管内用力吹出6、刻度对应(Mark—to—mark)移液管不需要吹出最后一滴液体的比较安全,因此最好使用这种移液管,以避免发生不必要的事故。
7、污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。
使用后的移液管应当在消毒剂中浸泡18或24小时后再进行处理。
8、盛放废弃移液管的容器应当放在生物安全柜内,直至高压灭菌后方能放置在外面。
9、固定有皮下注射针头的注射器不能够用于移液。
应当用钝头导管替代针头使用。
可以用工具打开瓶塞后再用移液管取样,从而避免使用注射器和针头。
10、为了避免感染性物质从移液管中意外滴出而扩散,在工作台面应当放置一块浸有消毒液的无纺布或吸有消毒液的纸,使用后将其高压灭菌或按感染性废物进行处理。
(五)避免感染性物质扩散的措施:1、在实验操作过程中为避免转移物质洒落,微生物接种环的直径应为2—3mm并完全封闭,手柄的长度应小于6cm以减小振动。
或者采用一次性灭菌棉签。
2、使用封闭式微型电加热器消毒接种环应避免在本生灯的明火上加热,否则容易引起感染性物质的爆溅。
最好使用不需要进行再消毒的一次性接种环。
3、为了避免产生气泡和气溶胶的扩散,不要在玻片上进行触酶试验,而应当采用试管、毛细管或盖玻片法。
4、准备高压灭菌和或处理的废弃样品和培养物应当放置在防漏的容器内,如实验室废物袋。
5、在每一阶段的实验工作结束后,必须采用适当的消毒剂清除工作区域的污染。
(六)生物安全柜的使用当出现溢出、破损或不良操作时,安全柜就将不再具备能保护操作者的功能应参考国家标准和相关文献,正确掌握生物安全柜的使用方法和了解其局限性。
并应当建有书面的操作步骤、安全操作手册等,在使用中应注意以下事项:1、生物安全柜必须运行正常时才能使用。
2、生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。
3、安全柜内应仅放置本次实验所需的器材或样品,否则将阻碍后部的气流循环。
样品在放人安全柜内的工作区前需要清除表面污染。
4、安全柜内不能使用酒精灯,否则因燃烧而产生的热量会干扰柜内气流并有可能将过滤器烧坏,致使过滤器损坏。
允许使用微型电加热器,但建议最好使用一次性无菌接种环。
5、所有工作必须在工作台面的中后部进行,并能够通过观察挡板观看到。
6、尽量减少操作者身后的人员流动,以免影响安全柜的气流。
7、操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。
8、实验记录、移液管以及其他物品不能够阻碍前面的空气格栅,因为这将干扰气体流动,引起物品的潜在污染和操作者的暴露。
9、工作完成后以及每天下班前,应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。
10、工作开始前和结束后,安全柜的风机应至少运行5分钟。
三、避免感染性物质注入人体(一)针头注射:1、通过认真练习和仔细操作,可以避免破碎玻璃器皿的意外刺伤。
但建议在实验室尽可能的用塑料制品代替玻璃制品。