转染癌基因的骨髓基质干细胞体外分化特征
关于对人胚胎干细胞研究进程的理解与认识
关于对人胚胎干细胞研究进程的理解与认识摘要对于生命科学及其相关科学术语，近些年已很深入地进入我们的生活。
诸如关于生物制药、基因工程、蛋白质、酶、抗生素等知识呈现一种强烈的冲击。
生命科学的前沿与人类的健康存在密切关系，主要研究现在比较前沿的科学，即尚处于研究阶段的科学。
本文就自己所了解的人体胚胎干细胞研究进程的了解我与认识，做了较为全面的探究，给人耳目一新之感。
关键词人胚胎干细胞；研究进程；理解与认识客观地说，在现实生活中，我们存在很多的无奈与伤感，比如：眼睁睁地看着亲人、朋友无望地离去却没有任何办法，我们无法摆脱对抗生素的依赖，因此我们就要去寻找更加安全、更加人性化的治疗方法和关键技术的突破！这，就是生命科学前沿技术研究要带给我们的不竭动力和最大的福音。
因此，对于人胚胎干细胞研究进程，让人们充满好奇与兴趣。
由于不能面面俱到，本文主要针对人胚胎干细胞当前研究与发展，梳理和传达一下相关观点。
什么是胚胎干细胞定义？是指使受精卵分裂发育成囊胚内团细胞的细胞，它具有体外培养、无限增殖、自我更新和多向分化的特性。
一般认为，全能性干细胞应具有三个特征：来源于一个全能性细胞群体；具有正常的细胞核型；具永生性，在胚胎状态下能无限制的分裂。
胚胎干细胞极为神奇：它发于当发，止于当止。
本质上，它不过是精子进入一个卵子并结合而成的受精卵而已。
但这之后，就神奇地由一个细胞变成两个细胞，再由2个而4个，再由4个变成8个，在该长耳朵的地方分化成组成耳朵的所有细胞，在该长胳膊的地方分化成组成胳膊的所有细胞。
当一个完整的人形成后，组成他身体的绝大部分细胞就停止分化，不再具有分化能力。
无论在体外还是体内环境，胚胎干细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。
它能够治疗诸多疑难杂症。
现在我们听到最多的，就是关于白血病的治疗用到胚胎干细胞的案例。
一般而言，白血病患者必须要找到与之相适应的骨髓才能进行移植。
而现在的孩子大多为独生子女，而两个不相干的人骨髓相配的概率几乎为十万分之一，所以就产生了很大麻烦。
干细胞研究进展综述
干细胞研究进展（综述）【摘要】：干细胞是人体及其各种组织细胞的最初来源，具有高度自我复制、高度增殖和多向分化的潜能。
干细胞技术是生物技术领域最具有发展前景和后劲的前沿技术，其已成为世界高新技术的新亮点，势将导致一场医学和生物学革命。
干细胞研究正在向现代生命科学和医学的各个领域交叉渗透，干细胞技术也从一种实验室概念逐渐转变成能够看得见的现实。
干细胞研究作为一门新兴学科已成为生命科学中的热点。
本文对近几年来国内外对干细胞的研究现况作一综述。
【关键词】：干细胞因子帕金森病神经干细胞糖尿病ABSTRACT : Stem cells are the body and cells of various tissues of origin, has high self replicati on, high proliferati on and multil in eage differe ntiati on pote ntial. Stem cell tech no logy is the field of biotech no logy has the most developme nt prospect and pote ntial of cutt in g-edge tech no logy, it has become a new bright spot in the world of high-tech, will lead to a revolutio n in medici ne and biology .The research of stem cell is to modern life science and medical fields intersection, stem cell tech no logy from a laboratory con cept gradually tran sformed to be able to see the reality. Stem cell research as a new discipli ne has become the hotspot of life scie nce. Based on the domestic and abroad in recent years on stem cell research summarizes.Keywords : Stem cell factor Parkinson disease Neural stem cells Diabetes mellitus干细胞技术最显著的特征就是能再造一种全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官。
骨髓间充质干细胞研究与应用概况
骨髓间充质干细胞研究与应用概况于雷;高俊玲【摘要】骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
【期刊名称】《华北理工大学学报：医学版》【年(卷),期】2018(020)002【总页数】5页(P164-168)【关键词】骨髓间充质干细胞;肺纤维化;缺血性脑卒中【作者】于雷;高俊玲【作者单位】[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells，BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞，但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究，发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群，在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长；1987年，又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell，MSC)。
力学刺激促进软骨细胞与骨髓基质干细胞共培养体外软骨分化的开题报告
力学刺激促进软骨细胞与骨髓基质干细胞共培养体外软骨分化的开题报告一、研究背景和意义软骨组织是一种特殊的结构和功能的组织，是人体关节和鼻子等部位的重要组织，同时也是一种不易治愈的组织。
软骨缺血坏死、创伤性骨与软骨撕裂和软骨退变都会导致软骨损伤和关节功能障碍。
现有的治疗手段，如短期外固定、关节镜下手术、软骨移植等，缺乏明确疗效且具有一定的副作用，为患者带来很大的痛苦和经济负担。
在软骨组织工程中，干细胞具有重要的作用，这些细胞可以通过分化成软骨细胞来重建软骨组织。
目前，骨髓基质干细胞（BMSCs）是一种常用的干细胞来源。
但是BMSCs 分化成软骨细胞需要较长时间，且存在多种生长因子来支持这一过程。
因此，寻找一种简单的方法来促进干细胞向软骨细胞的分化是非常必要的。
力学刺激是一种重要的因素，能够通过刺激小胶原纤维的生长和分布，调节干细胞的分化。
很多研究证明，通过载荷刺激迫使干细胞分化成软骨细胞，但是这一刺激条件并不明确。
二、研究目的本研究旨在探究力学刺激对 BMSCs 和软骨细胞共培养体外分化的影响，旨在寻找到一种更加简单有效的方法来促进软骨细胞向分化成骨骼组织。
三、研究内容和方法1. 细胞来源和分离从 4 周龄 SD 大鼠骨髓中分离得到 BMSCs。
在培养液中生长 11 d，扩增其细胞数量，然后应用酶溶解单元，获得单一细胞悬浮液，并对细胞进行表征。
从 SD 大鼠软骨中分离得到软骨细胞，进行处理并进行表征。
2. 共培养体外实验将 BMSCs 和软骨细胞共同培养在不同的力学刺激条件中，如高压电场、压缩培养等。
同时，观察和测定不同刺激条件下软骨细胞的分化和增殖情况。
分别应用不同方法来评估 BMSCs 分化成软骨细胞的程度，如特定基因和蛋白质的表达，特定基因和蛋白质水平的定量，细胞外基质成分和细胞形态学变化等。
四、研究预期成果本研究预期结果是证明力学刺激是促进 BMSCs 向软骨细胞分化的有效手段，同时可优化力学刺激参数，以优化细胞诱导的效果，为软骨组织工程发展提供重要的实验基础。
骨组织工程研究的新进展:修复骨缺损的完美技术
骨组织工程研究的新进展：修复骨缺损的完美技术李凯【摘要】骨组织工程自20世纪80年代诞生以来,取得了飞速的发展,为临床上骨缺损的治疗带来新的希望.纵观骨组织工程研究的二十多年里,其构成的三大要素:种子细胞方面、支架材料方面和组织构建方面都取得了一定的进展.但是距离组织工程骨在临床中正式使用尚有一定距离,有待进一步的研究.本文就目前骨组织工程研究的现状及最新进展作一综述.%Bone tissue engineering has developed rapidly since the 1980s and brought new hope for the treatment of bone defects. Throughout twenty years, the three major elements of bone tissue engineering: seed cells, scaffolds and organizations to build have made great progress. However, there is still certain distance for tissue engineered bone to be used officially in clinic. In this paper, the current status of bone tissue engineering research and the latest developments are reviewed.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2012(009)018【总页数】3页(P15-17)【关键词】骨组织工程;骨缺损;研究进展【作者】李凯【作者单位】哈尔滨医科大学附属第三医院骨科,黑龙江哈尔滨150081【正文语种】中文【中图分类】R681.2临床上由于各种原因导致的骨缺损很常见，然而修复骨缺损的惟一方法是通过骨移植来实现。
骨髓基质细胞分离培养、体外向神经细胞诱导分化及其在中枢神经系统疾病中的研究进展
流式细胞仪分离法
此法是以荧光抗体与细
胞表面标志物结合，然后用流式细胞仪进行分选。 该方法的优点是分离迅速、纯度高，但仪器昂贵，费 用较高，且含量太低的痕量细胞难以分离，要获得无 菌的细胞制剂较麻烦，分选步骤复杂，流程较长，对 细胞损伤大，而且不能处理大量样品，故主要用于细 胞鉴定ｕＪ。 １．４磁珠分选法 此法是将抗体或抗原结合在磁 珠上，磁珠上抗体或抗原与特异性抗原或抗体结合 后，形成抗原一抗体磁珠免疫复合物，这种复合物在 磁力作用下发生力学移动，从而达到分离特异性抗 原或抗体的目的。例如，兰玲等＂３依次向ＢＭＳＣｓ 悬液中加入ＦＩＴＣ标记的小鼠抗大鼠８２ｍ单克隆抗 体、ＦＩＴＣ分选试剂和微粒磁珠，然后将其置于磁性 分离器内１０ ｍｉｎ，回收上清获得８２ｍ一细胞。该方法 可以处理大最的细胞样品，因此在临床和基础研究 中有较好的应用前景，但价格昂贵、操作复杂，且易 造成污染。 目前贴壁筛选法因其操作简单、步骤少、污染机 会小，而被认为是分离培养ＢＭＳＣｓ的基本方法。
。【项目基金】深圳市科技局 【收稿日期】２００９ １０ ２８ 。【通讯作者】 易黎。Ｔｅｌ：８６—７５５—８３９２３３３３—５７２５。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｉｌｉｔｊ
＠ｈｏｔｍａｉｌ．ＣＯｒｎ。
ＢＭＳＣｓ的鉴定 为了使来自不同实验室的相关研究结果具有一
定的可比性，国际细胞治疗学会问充质及组织干细 胞委员会提出了鉴定人来源ＭＳＣｓ的３条最低标 准¨Ｊ：①在标准培养条件下，ＭＳＣｓ必须具备对塑料 底物的贴附性；②通过流式细胞术检测，ＭＳＣｓ群体 表达ＣＤｌ０５、ＣＤ７３及ＣＤ９０阳性率≥９５％，而 ＣＤ４５、ＣＤ３４、ＣＤｌ４或ＣＤｌｌｂ、ＣＤ７９ａ或ＣＤｌ９、
血管密度增大，神经功能也相应得到改善。以上试
综合以上研究推测ＢＭＳＣｓ能分化为神经样细 胞，而这种分化会随着诱导方案的变化『ｆｉｉ产生不同 的分化结果。化学诱导剂的可靠性与安全性有待进 一步研究，而细胞因子、中药、无血清培养液及与神 经细胞共培养这几种诱导方法均能成功地将ＢＭ— ＳＣｓ诱导成神经样细胞。Ｙａｎｇ等［１ｕ甚至用ｂ—ＦＧＦ 将ＢＭＳＣｓ诱导成具备特征性电生理特性的神经元 样细胞，而在与神经细胞共培养过程中很町能存在 细胞融合现象。这些诱导而来的神经元样细胞是否 具备神经元功能及是否具有释放神经递质的能力还 不清楚。基因调控是细胞分化的核心问题，而ＢＭ— ＳＣｓ体外诱导成神经细胞的具体基因调控机制仍需 进一步研究。
骨髓基质细胞的分离培养及转基因标记
（Ｇ１ 基 因标记方 法 ， Ｅｆ） ） 可提供大量纯度高 、 便于观察 的种子 细胞 。方 法 取成 年 ｓ 鼠四肢骨及胸 骨获 取 Ｄ大 骨髓细胞 冲洗液 ， 梯度离心 法分离后 培养 ，Ｅ染色观察细胞核浆 比， 密度 Ｈ 流式细胞 术测定细胞纯度 ； 逆转录 用 病毒载体转染 Ｅ Ｆ 标记基 因，４８ ＧＰ Ｇ １ 筛选后 传代培 养 ， 式细胞 术检测 Ｅ Ｆ 流 Ｇ Ｐ的表达率 。 结果 原代 培养 的
５ ． ％。结论 ５１ ６ 运用密 度梯度离心法 分离 培养 的 ＭＳ ｓ Ｃ 纯度高 ， 增殖能 力强 ； 体外 转入 Ｅ Ｆ 因是 一种 方 Ｇ Ｐ基
便、 特异性高的标记 Ｍ Ｃ 的方法， Ｓｓ 为脑损伤修复研究提供了依据。
关键词 ： 骨髓基 质细胞 ； 增强型绿色荧光蛋 白； 流式 细胞 术
・
论著 ・
骨 髓基 质 细胞 的分 离培 养 及转 基 因标记
文玉 军 秦 ， 毅 吴 均 张 ， ，
敏 魏 灵 荣 ，
１０５ ） ００４
（． １ 宁夏医学院人体解剖学教研室， 银川 ７００ ； ２ 首都医科大学 ， ５０ ４ ． 北京
摘 要： 目的 采用密度梯度离心法进行骨髓基质细胞 （ Ｓ ｓ 的分 离培 养 ， 合体外转 入增强型绿 色荧光 蛋 白 Ｍ Ｃ） 结
１１１ 动物 ： ．． 成年 Ｓｒ ｕ ｐａ ｅ—Ｄｗｅ （ Ｄ 大 鼠， 性 ， 重 于 ２ ｇ ａｌ ｓ ） ｙ 雌 体 倍体 积的淋 巴细胞分离 液之上 ， ２０ 以 ５ｏ～３ ３ｒｍｎ离 ００／ ｉ
２０ ２０，Ｐ 级， ０ ～ ３ｇＳＦ 由首都医科大学动物科学部提供。
心 ２ ３ｍｎ ５ ０ｉ 。用吸管吸取液 面交 界处 云雾状液 体 ， 到 加入
骨髓基质干细胞向心肌细胞分化的研究进展
Ｍａｒｒｏｗ Ｓｔｒｏｍａｌ Ｓｔｅｍ
Ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ
ＧＵＡＮ Ｃｈｕｎ—ｙａｎ， ＧＡＯ Ｈａｎｇ
（Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ
Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ
ｏｆＬｉａｏｎｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｎｚｈｏｕ 中图分类号：Ｑ２１
物¨２ｔ１”。５－Ａｚａ为一抗肿瘤药物，早在１９８５年就有人
ｃｅｌｌｓ，ＨＳＣｓ）和ＢＭＳＣｓ，前者可分
化成所有类型的造血细胞旧Ｊ，后者则是一类非造血细 胞的多能干细胞，属成体干细胞，可贴壁生长，形态类 似成纤维细胞。近年发现，ＢＭＳＣｓ不仅具有体外高度 扩增、多向分化潜能，还可被移植和抑制移植物抗宿主 病等特性，所以又被称为骨髓间质干细胞。
ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ ｎａｔｉｖｅ
ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｆｉｂｅｒｓ・ａｎａｔｏｍｉｃ
ｆｏｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｓ［Ｊ］．ＪＴｈｏｒａｃ
５９０．
Ｃａｒｄｉｏｖａｓｅ
Ｓｕｒｇ，２００２，１２４（３）：５８４－
［１５］Ｂｅｌｔｒａｍｉ
ｔｅｎｔ
ＡＰ，Ｂａｒｈｅｅｈｉ Ｌ，Ｔｏｒｅｌｌａ Ｄ。ｅｔ ａ１．Ａｄｕｌｔ ｃａｒｄｉａｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
增后的细胞能保持原有细胞正常的核型和端粒酶活 性。虽然ＢＭＳＣｓ约有２０％的细胞处于静止Ｇ０期，但 其足以维持增殖分化，满足移植需要。ＢＭＳＣｓ不仅有 一定的自我更新能力，可分化为骨、软骨和脂肪等多种
类型的基质细胞０７１，在一定外界环境条件下还能实现 跨系统分化（ｔｒａｎｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）。大量实验表明，ＢＭ—