维生素E片的含量测定(精)
维生素E的工艺路线及过程
维生素E的工艺路线及过程维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
生育酚能促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。
近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末梢血管扩张，改善血液循环，预防近视眼发生和发展。
维生素E苯环上的酚羟基被乙酰化，酯水解为酚羟基后为生育酚。
人们常误认为维生素E就是生育酚。
1.结构和性质1.1维生素E结构①维生素E是有8种形式的脂溶性维生素，为一重要的抗氧化剂。
维生素E包括生育酚和三烯生育酚两类共8种化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，α-生育酚是自然界中分布最广泛含量最丰富活性最高的维生素E形式。
图1-1维生素E的结构式②生化反应: 维生素E具有抗氧化的作用，对酸、热都很稳定，对碱不稳定，铁盐、铅盐或油脂酸败的条件下，会加速其氧化而被破坏。
③分子式生育酚主要有四种衍生物，按甲基位置分为α、β、γ和δ四种。
与生育酚相关的化合物生育三烯酚在取代基不同时活性是一定的，但生育酚的活性会明显降低。
下表列出用以下官能团取代后生育三烯酚与生育酚的活性比：1.2维生素E性质1.2.1物理性质外观：透明粘稠液体颜色：微黄绿色分子式：C29H50O2分子量：430.71沸点：485.9 °C at 760 mmHg折射率：1.495闪点：210.2 °C2.中国药典质量标准【检查】酸度取乙醇与乙醚各1 5 m l ，置锥形瓶中，加酚酞指示液0 . 5ml，滴加氢氧化钠滴定液（0. l m o l / L ) 至微显粉红色，加本品l.Og，溶解后，用氢氧化钠滴定液（0. lmol/L)滴定，消耗的氢氧化钠滴定液（0. l m o l / L )不得过0 . 5ml生育酚（天然型）取本品 0 . 10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈滴定液（0. Olmol/L)滴定，消耗的硫酸铈滴定液（0. O l m o l / L )不得过1 . 0ml有关物质（合成型）取本品，用正己烷稀释制成每 l m l 中约含2 . 5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，用正己垸定量稀释制成每l m l 中含2 5 p g 的溶液，作为对照溶液。
气相色谱法测定维生素E软胶囊含量
科技 一向导
◇ 科技之窗◇
气相色谱法测定维生素 Ｅ软胶囊含量
贾 黎 黎 ，
（ 哈药集 团制药总厂
黑龙江
哈尔滨
１ ５ ０ ０ ０ ０ ）
【 摘 要】 建立气相色谱 法测定维 生素 Ｅ软胶 囊中维生素 Ｅ的含量 。方法 ： 以正三十二炕 为内标 物 ， Ｄ Ｂ 一 ５ 毛细管柱 ， 进样 口温度 为 ３ ０ ０ — ３ １ ０ ￣ （ ２ ， 柱温为 ２ ９ ０ — ３ ０ ０ ￣ Ｃ， 氮气： ２ Ⅱ 正・ ｍｉ ｎ ＇ ￣ ＇ ； Ｆ Ｉ Ｄ检测 器， 检测温度 为 ３ ０ ０ — ３ １ ０ ￣ １ ２； 定量方法 ： 内标峰 面积法。维生素 Ｅ在 ０ ． ５ ￣ ４ ． ０ ｍｇ ・ ｍ Ｌ 一 范围内 呈 良好 的线性 关系（ ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ ６ ） 。维生素 Ｅ平均回收率分别为 ９ ９ ． ３ ％。结论 ： 本 法简便 、 准确 。 可用－ Ｉ － ￣ｇ素 Ｅ的含量测定 。
【 关键词 】 气相色谱 法； 舍量 ； 测定
维生 素 Ｅ软胶囊用于心 ， 脑血 管疾病及习惯性流产 、 不孕症的辅 浓度 ｆ Ｘ ） 为横坐标 ， 绘制标准 曲线 ， 计算 回归方程 。结果表明 。 维生 素 Ｅ 助治疗 。 维生索 Ｅ 亦称维他命 Ｅ 。 是一种有 ８ 种形式的脂溶性维生 素， 在Ｏ ． ０ ５ ０ ． ４ ０ ｍ ｇ ． ｍ Ｌ 一 范 围内呈 良好的线性关 系。 为一重要的抗氧化剂㈣ 。维生 素 Ｅ具有有效减少皱纹 的产生 、 减少细 ２ ６重 现 性 试 验 胞耗氧量 、 ． 抗氧化保护机体细胞免受 自由基 的毒 害、抗 动脉粥样硬 称取 同一批的维生 素 Ｅ样品 ６ 份， 按测定方法项下的方法制备供 化、 抑 制脂质 过氧化及形成 自由基 、 保 护组织 、 降低胆 固醇、 预防高血 试 品溶液 ， 测定含量 ， 并计算样品的 Ｒ Ｓ Ｄ值 ， 结果 Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ９ ５ ％， 结果 压、 防止血液 的凝 固 、 预防治疗 甲状腺疾病 、 改善血液循环 、 保 护皮肤 表 明此方法的重现性 良好 。 ． 免受紫外线和污染的伤 害、 加速伤 口的愈合等作 用［ ａ － ￣ ３ 。维生素 Ｅ适用 ２ ． ７准 确 度试 验 于体 内营养不足 、 内分泌紊乱 、 性欲低 下、 月经不调 、 体质虚弱 、 多病 、 取对照 品适量 ， 加入到样 品中 ， 加入 量分别相 当于样品含量的 ８ Ｏ 肌体缺乏活力 、 早衰 、 肿瘤 患者及化疗 中、 不孕人群 。本文采用气相色 ％、 １ ０ ０ ％、 １ ２ ０ ％。取模拟片照 “ 含量测 定” 项下方法试 验， 计算 回收率 谱法对维生素 Ｅ 软胶囊 中的维生素 Ｅ 进行 了含量测定 为９ ９ ＿ ３ ％． Ｒ Ｓ Ｄ为 Ｏ ． ７ ２ ％。
HPLC测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素E的含量(1)(精)
HPLC测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素E的含量(1)核心提示：【摘要】目的建立测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素E含量的方法。
方法采用HPLC法，色谱柱为Agilen【摘要】目的建立测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素E含量的方法。
方法采用HPLC法，色谱柱为Agilent ZORBAX ODS柱，甲醇乙腈（体积比25∶75）为流动相，流速1.0 mL/min, 检测波长290 nm，柱温为40 ℃。
结果维生素E在32.9~291.1 μg/mL范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.9%，RSD为1.0%（n=6）。
结论本文方法简便、准确，能有效地控制该制剂的质量。
【关键词】小麦胚芽油营养胶囊；维生素E；高效液相色谱法Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of vitamin E in wheat germ oil. Methods An Agilent ZORBAXODS column was used to analysis the sample by using methanolacetontril (25∶75) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL·min-1 and detective wavelength 290 nm.Results The standard curve for vitamin E was linear in the concentration range of 32.9~291.1 μg/mL. The average recovery was 99.9% with RSD 1.0% (n=6). Conclusion This method is simple, accurate and reliable for the quality control of wheat germ oil. Key words:wheat germ oil vitamin E; HPLC小麦胚芽油营养胶囊是中美合作安利（中国）日用品有限公司的产品，其主要成分为不饱和脂肪酸、维生素E、胆碱、植物固醇，还有谷胱甘肽等多种微量元素，具有抗不育、抗衰老、促进人体新陈代谢、增强体力和记忆力、降低胆固醇、防治动脉硬化、改善血液循环、增强人体免疫力的功能。
配合饲料中维生素E含量的测定
VE 具有抗氧化功能、 维持动物正常的繁殖机 能、 增强动物机体的免疫功能和抗应激功能等，对 动物具有重要的营养作用，也是配合饲料中不可缺 少的成分。 但是，由于脂溶性维生素不能经尿排出， 所以摄入过量脂溶性维生素易引起中毒，导致动物 代谢障碍和生长受阻。 因此，准确快速测定配合饲 料 中 VE 含 量 ，对 于 优 化 饲 料 配 方 、提 高 养 殖 效 率 具有十分重要的意义。
2 结果与讨论 2.1 色谱分离
称取维生素 E 乙酸酯标准品 10.0mg 于 150mL 带盖密封玻璃瓶中，按上述方法（1.3.1）皂化，最 后 用 50mL 甲 醇 溶 解 。 此 时 维 生 素 E 乙 酸 酯 浓 度 为
图 1 VE 标准样色谱图
200mg/L，再将上述 200mg/L 标准配制成 50mg/L 的 标准工作溶液。
作者简介：杨曦，工程师，研究方向为农产品质量安全 与检测。
* 通讯作者：王华朗，高级畜牧师，研究方向为动物营养 与饲料研究。
批量检测样本，本方法针对国标方法无法进行批处 理样品进行改进， 改进后的检测方法提高工作效 率，适合对大批量样品进行检测。
1 材料与方法 1.1 仪器与试剂
安捷伦 1260 Infinity 高效液相色谱仪，台式高 速冷冻离心机（德国 SIGMA），旋转蒸发仪（瑞士步 琪），分析天平（感量 0.0001g，德国赛多利斯），恒温 水浴锅（上海沪南科学仪器联营厂）。
标 准 品 ：VE （dl-а- 生 育 酚 乙 酸 酯 ） 标 准 品 ： （Sigma-Aldrich 公司）含量≥99.0%。
试剂：甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水 为超纯水。 1.2 色谱条件
A 色谱柱 XTerra MS C18，4.6×150mm，5μm B 进样量 20μL，柱温 27℃，流速 1.0mL /min C 检测器：紫外检测器 280nm 1.3 试样制备 1.3.1 皂化 称 取 2g（精 确 至 0.0001g）试 样 于 150mL 带 盖 密封玻璃瓶中，加 50mL 抗坏血酸溶液（5g/L），使试 样完全分散，浸湿，加 10mL 氢氧化钾溶液（500g/L）， 混匀。 充入氮气以隔绝空气，摇匀，置于 60℃水浴上 皂化 4h。 皂化后立即放入冰水中冷却。 1.3.2 提取 向皂化液中加入 50mL 乙醚（不含过氧化物），
饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法-最新国标
饲料中维生素E的测定高效液相色谱法1范围本文件描述了饲料中维生素E的高效液相色谱测定方法。
本文件中“第一法皂化提取法”适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、复合预混合饲料和维生素预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚）的测定，“第二法直接提取法”适用于维生素预混合饲料、复合预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚乙酸酯）的测定。
本文件“第一法皂化提取法”的定量限为1mg/kg，“第二法直接提取法”的定量限为20mg/kg。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
4第一法皂化提取法注意：使用的器皿不含有氧化性物质；分液漏斗活塞玻璃表面不涂油，处理过程在避光下操作；提取过程在通风柜中操作。
4.1原理试样用碱溶液皂化后，经液液萃取或固相萃取净化后，用高效液相色谱仪分离测定，外标法定量。
4.2试剂或材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
4.2.1水：GB/T6682，一级。
4.2.2无水乙醇：色谱纯。
4.2.3无水乙醇。
4.2.4石油醚（沸程30℃-60℃）。
4.2.5甲醇：色谱纯。
4.2.6乙腈：色谱纯。
4.2.7甲酸。
4.2.8L-抗坏血酸。
4.2.9二丁基羟基甲苯（BHT）。
4.2.10无水硫酸钠。
4.2.11氢氧化钾溶液（500g/L）：称取500g氢氧化钾，加水溶解，冷却后用水定容至1000mL，混匀。
4.2.1270%乙醇溶液：取无水乙醇70mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。
4.2.1310%甲醇溶液：取甲醇10mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。
4.2.140.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水稀释，定容至1000mL，混匀。
化学药品地标升国标第十五册
国家药品西药标准（化学药品地标升国标第十五册）（95种）氨酚烷胺咖敏胶囊拼音名：Anfen Wan’an Ka Min Jiaonang英文名：Paracetamol，Amantadine，Caffeine and Chlorphenamine Capsules书页号：D15-199 标准编号：WS-10001-(HD-1468)-2003本品每粒中含对乙酰氨基酚(C8H9NO2)应为225.0～287.5mg；含咖啡因(C8H10N4O2·H2O)应为27.0～34.5mg。
【处方】对乙酰氨基酚250g盐酸金刚烷胺30g咖啡因15g马来酸氯苯那敏2g辅料适量───────────────────制成1000粒【性状】本品为胶囊剂，内容物为白色或类白色粉末。
【鉴别】取本品内容物适量(约相当于对乙酰氨基酚0.25g)，加乙醇3ml，研磨使溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另分别取对乙酰氨基酚250mg、盐酸金刚烷胺30mg、咖啡因15mg及马来酸氯苯那敏3mg，各加乙醇2ml使溶解，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录ⅤB)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一硅胶HF<[254]>薄层板上；以氯仿-甲醇-氨水(90:10:1)为展开剂，展开后，晾干，然后再按同方向重复展开一次，取出晾干，置紫外光灯(245nm)下检视。
供试品所显主斑点的荧光和位置应与对照品的主斑点相同。
【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版二部附录ⅠE)。
【含量测定】对乙酰氨基酚取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量(约相当于对乙酰胺基酚0.3g)，加稀盐酸50ml，加热回流1小时，冷却至室温，加水50ml与溴化钾3g，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)迅速滴定，随滴随搅拌至近终点时，将滴定管的尖端插入液面，用力将尖端洗涤，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，用细玻璃棒蘸取溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板，即显蓝色条痕时，停止滴定，3分钟后，再蘸取溶液少许划过一次，如仍显蓝色条痕，即为终点。
GC法测定维生素E胶丸含量
实验七 GC 法测定维生素E 胶丸的含量【学习目的要求】1、 掌握气相色谱法定量方法中内标法的原理及计算。
2、 了解气相色谱仪的基本结构。
3、 了解气相色谱法在药物分析中的应用。
【实验教学内容】一、仪器及试剂仪器 日本岛津GC-14C 气相色谱仪 检测器 FID色谱柱OV-17（硅酮）毛细管柱试药 生育酚作内标物 维生素E 对照品 维生素E 胶丸 正己烷作溶剂二、内容与方法照气相色谱法（中国药典2010年版二部附录VI E ）1、色谱条件与系统适用性试验色谱柱：色谱柱OV-17（硅酮）毛细管柱（柱长30m ，内径0.32mm ，膜厚度0.25μm ），柱温：265℃；理论板数按维生素E 峰计算应不低于5000。
2、溶液配制2.1 内标液 精密称取内标物生育酚适量（约相当于生育酚50mg ）置25ml 量瓶中，用正己烷定容，即得。
2.2 对照液 精密称取维生素E 对照品适量（约相当于维生素E20mg ）置10ml 量瓶中，用10.00ml 内标液溶解，即得。
2.3 供试液 取维生素E 胶丸10丸，精密称定，用刀片逐个划破囊壳，挤出内容物，并用适量乙醚洗净囊壳，置通风处挥干乙醚，精密称定囊壳质量，计算内容物的平均重量。
精密称取内容物适量（约相当于维生素E 20mg ）置10ml 量瓶中，用10.00ml 内标液溶解，即得。
3、测定法 分别取上述对照液和供试液各1μl 注入气相色谱仪，计算校正因子，按内标法加校正因子法计算含量，即得。
【实验结果】定量方法——内标对比法：⑴求f⑵ 求标示量%【实验结论】ChP 规定，维生素E 胶丸中含维生素E 应为标示量的90.0%~110.0% 数据：内标物（生育酚）0.0564g ，对照品（维生素E 标准品）0.0177g ，供试品（维生素E 胶丸）0.0236g ，标示量100mg/丸平均装量0.1492g/丸。
项目：气相色谱法测定维生素E软胶囊的含量
w 1 标示量%=Cx实验数据的记录与计算 2.原始数据记录表
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二、 任务实施
（三）. 实验结果与检验报告
1. 采用内标法时，通常配制相当于80%、100%和120%的对 照品溶液，加人规定量的内标溶液，配成3 种不同浓度的溶 液，分别至少进样2 次，计算平均校正因子，其相对标准偏 差应不大于2. 0 % 。 2.结论： 应为标示量的 90. 0%〜110. 0% 。
12 P1236
12
3
（通则0521）
3
4
4
2 .系统适用性试验 除另有规定外，应照高效液相色谱 法（通则0512)项下的规定。
（通则0521）
4 样品的测定 5 仪器系统适用性试验应符合药典或 部颁标准各品种项下的要求。
5
P101
二、 任务实施
校正因子的测定 取正三十二烷适量，加正己烷溶解并 稀释成每lml中含l.0mg的溶液，作为内标溶液。另取维生 素E 对照品约20mg，精密称定，置棕色具塞瓶中，精密加 内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解，作为对照品溶液，取1 〜3μ l注入气相色谱仪，计算校正因子。 测定法 取装量差异项下的内容物，混合均匀，取适量 （约相当于维生素E 20mg)，精密称定，置棕色具塞瓶中， 精密加内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解，作为供试品溶 6 液；取1〜3μ l注人气相色谱仪，测定，计算，即得。
（通则0521）
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二、 任务实施
（二）. 实验数据的记录与计算 1. 公式
AS / CS f AR / CR
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气相色谱仪的应用
（1）内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分 （2）外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量。 （3）面积归一法 （4）标准溶液加入法测定供试品中某个杂质 或主成分 含量。 精密称（量）取某个杂质或待测成分对照品含量， 配制成适当浓度的对照品溶液，取一定量，精密加入 到供试品溶液中，根据外标法或内标法测定杂质或主 成分含量，再加除加入的对照品溶液含量，即得供试 液溶液中某个杂质和主成分含量。
（2）UV （3）酯键 易水解
2、鉴别
（1） 硝酸反应 （2） 三氯化铁－联吡啶反应
（3） UV法 0.01%无水乙醇中
λmax = 284nm λmin = 254nm 1% E1cm = 41.0～45.5
维生素EUV图
维生素E的紫外吸收图片
（4）TLC法
薄层板：硅胶G
展开剂：环己烷 -乙醚（4 ：1） 显色剂：硫酸 VitE Rf
（2） 共轭多烯侧链
易被氧化
O2、氧化剂 VitA 紫外线、
环氧化物
[O ]
VitA醛 VitA酸
△或有金属离子存在时氧化↑
（3） 与三氯化锑发生呈色反应
VitA 蓝色 紫红
SbCl3
（4） 溶解性 不溶于水
易溶于有机溶剂和植物油等
2、
鉴别
（1）三氯化锑反应
维生素E的化学结构
维生素E是一类与生殖功能有关的维生素，化学结 构均为苯并二氢吡喃衍生物，结构中有酚羟基，故亦称 生育酚。已知主要有α、β、γ、δ、ε、ζ1、ζ2、 η八种异构体，其中α-生育酚活性最强。
维生素E性质
1．维生素E醋酸酯为微黄色或黄色透明的粘稠液体。 2．结构中含有3个手性碳原子，具有旋光活性。目 前供药用的维生素E醋酸酯是人工合成的外消旋体。 3．维生素E结构中侧链上的叔碳原子(C-4′，C-8′， C-12′)易被氧化，维生素E醋酸酯遇光颜色变深。 用途：用于习惯性流产、不孕症、更年期障碍及延缓 衰老等。
脂溶性
VitA、D2、D3、 E、K1 等
维生素
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
维生素A
R:
-H
维生素A醇
-COCH3
-COC15H31
维生素A醋酸酯
维生素A棕榈酸酯
1
结构与性质
（1）为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯 具有UV吸收 存在多种立体异构化合物 易发生脱氢、脱水、聚合反应
b、维生素E测定的色谱条件
载气→N2、固定液→硅酮（OV-17） 担体→硅藻土或高分子多孔小球 柱温→265℃、内标→正三十二烷 检测器→氢火焰离子化检测器(FID) n ≥ 500、R≥2 内标法加校正因子
维生素E的气相色谱分析 1.溶剂正己烷 2.内标正三十二烷 3.维生素E
SbCl3 VitA 蓝色 紫红
CHCl3
条件 无水无醇 （2） UV法
VitA
去水VitA
△
无水乙醇
HC l
λmax为326nm
一个吸收峰
λmax为350～390nm 三个吸收峰
维生素A和去水维生素A的紫外吸收光谱 1.维生素A 2.去水维生素A
维生素E片的含量测定 张庆英
一、试剂及仪器
维生素E片、正三十二烷 、正己烷 、维生
素Ｅ对照品 棕色具塞锥形瓶、气相色谱仪、以硅酮 (OV-17) 为固定相，涂布浓度为2 ％；或 以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚硅氧烷）
为分析柱
二、实训内容
取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量 （约相当于维生素Ｅ20mg），置棕色具塞锥形 瓶中，照维生素Ｅ项下的方法，精密加入内标 溶液10ml，密塞，振摇使维生素Ｅ溶解，静置， 取上清液1 ～3μl注入气相色谱仪，并依法测 定校正因子，计算，即得。
（ 3）
TLC法
杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
显色剂 磷钼酸规定斑点颜色和Rf值
BP
USP
3、含量测定
UV法 立体异构体；氧化产物及光照产物；合成中间体； 去氢维生素A（ VitA2）；去水维生素A（ VitA3）
维生素E
1、结构与性质 苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链 （1）易溶于有机溶剂，不溶于水
= 0.7
3、检查
（1）原理
利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原 成硫酸亚铈
生2）试剂 硫酸铈滴定液（0.01mol/L） 二苯胺（亮黄→灰紫）
4、含量测定
（1） GC法 a、GC特点 选择性好 灵敏度高 速度快 分离效能好 挥发性低、不稳定、极 性强→衍生化易受样品 蒸气压限制