溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL_1_的影响_刘汝专_刘金浪_郭艳军_等
化学溶核术治疗腰椎间盘突出症临床分析
化学溶核术治疗腰椎间盘突出症临床分析毕业
作者：田乃宜，郭义城，贾明锁，张小威，李勇，唐昭惠
【关键词】胶原酶；腰椎间盘突出；临床效果
1临床资料
2讨论
2.2正确选择适应证适应证选择正确与否与疗效有直接关系，1般来说，本方法只适用于椎间盘突出症患者，适应青壮年首次发病，而且病程短者。
对椎管或神经根管狭窄者，有椎间盘钙化或破入椎管者，部分病人有腰椎轻度滑脱者均不宜采用此术式。
刚开展此技术时未严格掌握此手术适应证，随着时间的推移临床病人逐渐增多，适应证的选择较严格。
2.4化学溶核术治疗腰椎间盘突出症的优点操作简单，安全可靠，基本上属无创操作，痛苦小，并发症少，住院时间短，费用低，临床效果可靠，不需特殊设备，病人能接受。
【参考文献】
［1］杨述华，杜靖远，罗怀灿，等.化学溶解术治疗椎间盘突出症的临床研究［J］.中华普外杂志，1996，16(7)：415417.
［3］王鲁博，汤华丰，张佐伦，等.化学髓核溶解术治疗腰椎间盘突出症后疼痛原因分析［J］.中华矫形外科学杂志，1997，4(5)：395.。
通络汤对腰椎间盘突出症模型大鼠的影响
Effect of Tongluo Decoction on Luber Intervertebral Disc Herniation in Rats HUANG Yahong1, LIU Tao2, PENG Qiliang3, QIU Hongdeng4, LUO Huiying1,5*(1.Department of Pharmacology,
Gansu College of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China; 2.Dongzhimen Hospital, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China; 3.Anfu Hospital of Traditional Chinese Medicine, Anfu 343200,China; nzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou 730000 ,China; 5.Gansu Province Key Laboratory of Pharmacology and Toxicology for TCM, Lanzhou 730000 ,China) ABSTRACT: OBJECTIVE To explore the curative effect of Tongluo decoction on luber intervertebral disc herniation(LIDH) in rats. METHODS The 48 rats were randomly divided into 6 groups: normal group, model group, positive control group, Tongluo decoction high, middle and low dose groups. Non-compressive animal model of lumbar nucleus pulposus prolapse were established by operation. Pain threshold was determined by hot plate method. Clotting time was detected by slide method. Changes of hemorheology were detected by hemorheometer. The level of tumor necrosis factor-α(TNF-α), prostaglandins 2(PGE2) and nitric oxide(NO), nitric oxide synthase(NOS) were measured by enzyme linked immunosorbent assay. Pathological changes of nerve root were observed by pathological detection. RESULTS In rats with LIDH, the pain threshold decreased; clotting time shorten, blood viscosity increased; the level of inflammatory cytokines such as NO, NOS, TNF-α and PGE2 rised, and the inflammatory infiltrates were observed in nerve root tissue. Tongluo decoction could ameliorate those symptoms, presented as increasing pain threshold; prolonging clotting time; lowering blood viscosity; inhibiting inflammatory cytokines(NO, NOS, TNF-α and PGE2) in serum and reducing the inflammatory cell infiltration in the nerve root tissue. CONCLUSION The curative effect of Tongluo decoction on LIDH in rats may be associated with its ability of anti-inflammatory, analgesic action; improve blood circulation, and degrade the level of inflammatory factors(NO, NOS, TNF-α and PGE2). KEY WORDS: lumbar intervertebral disc herniatio; Tongluo decoction; curative effect
褪黑素对脊髓损伤大鼠突触可塑性的作用
褪黑素对脊髓损伤大鼠突触可塑性的作用荆瀛黎;刘小野;白帆;董浩;陈惠【摘要】Objective To observe the effects of melatonin on synaptic plasticity impaired by spinal cord injury in rats. Methods A total of 54 female Sprague-Dawley rats were divided into sham group (n=18), control group (n=18) and melatonin group (n=18). Spinal cord inju-ry model was established with modified Allen's method at T10 (10 g from 25 mm height). The number of neurons and the expression of the Nissl body were detected with immunofluorescence and Nissl staining. The expression of neurofilament-200 (NF-200), brain-derived neuro-trophic factors (BDNF), Synapsin I and growth-associated protein-43 (GAP-43) was detected with Western blotting. Results Seven days af-ter injury, the number of motoneurons, the expression of Nissl body in motoneurons, and the expression of BDNF, Synapsin I and GAP-43 decreased in the control group compared with those in the sham group, and they increased in the melatonin group compared with those in the control group. Conclusion Melatonin can repair the impaired synaptic plasticity, which might promote the functional recovery after spi-nal cord injury.%目的：探讨褪黑素对脊髓损伤后突触可塑性的影响。
IL-1对椎间盘退变影响
。
人和小鼠IL-1基因定位于2号染色体(2q13-21)，均 含7个外显子。 [Dongli Wang 2010Y]、 [Axel Weber 2010Y]
John E. Sims, Martin J.H. Nicklin, J. A new nomenclature for IL-1-family genes. TRENDS in Immunology Vol.22 No.10 October 2001
基质会属蛋白酶(MMPs)及抑制剂（TIMPs）
基质会属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)为Zn2+、 Ca2+金属离子依赖的蛋白水解酶类，是自然界高度保守的 一类酶，可降解除蛋白多糖以外细胞外基质的所有成分， 并激活其他MMPs产生连锁放大效应，是调节细胞外基质 动态平衡最为重要的酶。MMPs以酶原的形式分泌，水解 掉N端的半胱氨酸后被激活，使催化性Zn2+结合位点暴露。 基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMPs)是MMPs活性调节的重要途径， 是MMPs的特异性抑制剂。已知TIMPs家族有四个成员， 其中研究较多的是TIMP-l和TlMP-2。
Theresa T. Pizarro and Fabio Cominelli.Cloning IL-1 and the Birth of a New Era in ytokine Biology. J Immunol.2007;178;5411-5412
抑制IL-1β步骤
在IL-1Ra完全抑制IL-1β的过程分两个互补的步骤。 IL-1Ra捕获IL-1β与IL-1RⅡ结合而抑制IL-1β的； IL-1Ra隔离IL-1RacP而抑制IL-1β形成IL-1β-IL-1RⅡ-IL1RAcP，属于竞争性抑制[10-14]。
中药复方干预椎间盘退变的实验研究进展
·综 述·
中药复方干预椎间盘退变的实验研究进展
关键词 椎间盘退行性变；中草药；复方；综述
腰腿痛在临床较为常见，研究发现椎间盘退变是 引起颈椎病、腰椎间盘突出症等疾病的根本原因［１］， 而椎间盘退变的患病率在中老年人群中 达 ９０％ 以 上［２］，因此预防或延缓椎间盘退变是治疗此类疾病的 关键。目前临床上主要针对椎间盘退变引起的腰腿 痛等一系列临床症状进行治疗，而不能从根本上延缓 椎间盘的退变［３］。中药复方对椎间盘退变具有良好 的延缓作用，主要表现为保护椎间盘髓核细胞、抑制 细胞凋亡、减少椎间盘细胞外基质的降解、抑制椎间 盘炎症 因 子 的 表 达 以 及 保 护 椎 间 盘 软 骨 终 板 等。 现就中药复方干预椎间盘退变的实验研究进展进行 综述。
及抑制退变椎间盘软骨终板中 Ｆａｓ／Ｆａｓｌ基因的过度 菟丝子、当归尾、没药内细胞凋亡，发挥防治椎间盘的 作用。刘汝专等［２０－２１］通过应用溶髓方 （由当归、白
２ 中药复方对椎间盘软骨终板的影响
椎间盘软骨终板是椎间盘的重要组成部分，其主 要生理功能是保护椎体、椎间盘以及营养椎间盘 。 ［１２］ 由于椎间盘 无 血 液 供 应［１３］，其 营 养 物 质 与 代 谢 产 物 的交换和代谢主要是通过软骨终板进行，而软骨终板 的钙化和退变所导致的椎间盘组织营养物质供应的 减少及代谢产物的堆积是引起椎间盘退变的重要机 制之一［１４－１５］。朱 立 国 等 应 ［１６］ 用 补 肾 活 血 方 （由 杜 仲、补骨脂、川牛膝、丹参组成）干预自然增龄的沙鼠 椎间盘退变模型，结果显示补肾活血方可增加软骨终 板血管芽数量，减轻软骨终板钙化程度，提高椎间盘
中医干预颈椎间盘退变的基础研究进展
中医干预颈椎间盘退变的基础研究进展姜海涛;李四波;居宇峰;顾小华;洪潮【摘要】颈椎间盘退行性病理改变引起脊髓神经病变,主要由异常的应力状态,炎性因子的参与,基质蛋白多糖的改变,导致细胞凋亡等诸多因素形成.在中医学认为,该病属中医的"痹证"范畴.中医辨证主要为肝肾虚损、风寒湿痹两大方面,是颈椎间盘退行性变的病理基础.文章总结近10年中医药治疗此疾病的基础研究文献,发现中医药可以抑制椎间盘内炎性因子的产生,调节退变椎间盘的胶原及蛋白多糖的表达、抑制细胞的坏死凋亡、调控细胞外基质酶系统的活性,在颈椎病的保守治疗方面显示出了独特的优势.相信随着未来中医药在防治颈椎病方面必将发挥更大作用.%Objective:The degeneration of cervical intervertebral disc leads to spinal cord neuropathy,which is mainly caused by the abnormal stress state,the participation of inflammatory factors,the alteration of matrix pro-teoglycan,and the apoptosis.In Chinese medicine,this disease belongs to Chinese medicine "arthromyodynia"cate-gory.TCM syndrome differentiation mainly includes two aspects:deficiency of liver and kidney,wind cold damp-ness arthralgia,which is the pathological basis of degeneration of cervical intervertebral disc.The Chinese medicine treatment of this disease,nearly 10 years of basic research literature,found that Chinese medicine can inhibit the production of inflammatory cytokines in the intervertebral disc degeneration of intervertebraldisc,regulation of col-lagen and proteoglycan expression,inhibit cell necrosis and apoptosis,regulation of extracellular matrix enzyme sys-tem activity,in terms of conservative treatment of cervical spondylosis show aunique advantage.I believe that with the future,Chinese medicine in the prevention and treatment of cervical spondylosis will play a greater role.【期刊名称】《陕西中医》【年(卷),期】2018(039)002【总页数】3页(P271-273)【关键词】椎间盘退化;中医药疗法;肝肾亏虚;风寒【作者】姜海涛;李四波;居宇峰;顾小华;洪潮【作者单位】上海中医药大学附属第七人民医院骨伤及骨伤康复科上海200138;上海中医药大学附属第七人民医院骨伤及骨伤康复科上海200138;上海中医药大学附属第七人民医院骨伤及骨伤康复科上海200138;上海中医药大学附属第七人民医院骨伤及骨伤康复科上海200138;上海中医药大学附属第七人民医院骨伤及骨伤康复科上海200138【正文语种】中文【中图分类】R681.5颈椎位于胸部与头部之间、是脊柱椎骨的最高端，其体积最小，灵活度却最大。
补肾活血舒筋方对颈椎病模型大鼠颈椎间盘退变的影响
补肾活血舒筋方对颈椎病模型大鼠颈椎间盘退变的影响
赵乔珍;谢林;康然;刘彬彬
【期刊名称】《中医药通报》
【年(卷),期】2009(008)003
【摘要】目的:检测颈椎病大鼠颈椎间盘的退变程度,研究补肾活血舒筋方康颈汤对大鼠颈椎间盘退变的影响.方法:125只SD大鼠随机分成5组,每组25只,进行大鼠颈椎病造模.于术后3月造模成功后给药、术后6月分别处死各组,对颈椎间盘进行组织学观察.结果:各组与模型对照组比较差异显著,各治疗组与正常假手术组比较无显著差异.结论:芬必得、康颈汤和颈复康都能够有效地抑制颈椎间盘的退变.
【总页数】2页(P56-57)
【作者】赵乔珍;谢林;康然;刘彬彬
【作者单位】江苏省中西医结合医院,210028;江苏省中西医结合医院,210028;江苏省中西医结合医院,210028;江苏省中西医结合医院,210028
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.补肾活血舒筋方治疗颈椎病62例疗效观察 [J], 谢林;王昆;康然;何卫东;陶永飞;周中;洪友松;刘光旺;江宁
2.补肾活血舒筋方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、迁移的影响及其机制[J], 王彦超;邓蓉蓉;叶亚东;席志鹏;康然;谢林
3.溶髓方对颈椎间盘退变大鼠软骨终板细胞凋亡的影响 [J], 刘汝专;潘汉升;唐晓菊;
郭艳军;刘金浪;刘锐
4.溶髓方对颈椎间盘退变大鼠软骨终板细胞凋亡的影响 [J], 刘汝专;潘汉升;唐晓菊;郭艳军;刘金浪;刘锐;
5.芪麝颈康丸对老龄大鼠颈椎间盘退变模型退变程度与椎体骨髓血窦影响的扫描电镜观察 [J], 周锦鹏;孙银强;杨静莹;孙银强;谢林;施杞;沈培芝;施杞;徐宇;施杞;王拥军;施杞
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益气化瘀补肾方对大鼠损伤椎间盘软骨终板细胞的影响
化瘀补 肾方对 软骨终板细胞凋亡 的影 响。结果
正常组软骨终板 细胞 正常生长 ， 增殖 良好 ， 诱导损伤组椎 间盘 软骨终
板细胞 的增殖 受到明显抑制 ， 给药组软骨终板细胞增 殖缓慢 ， ３组之 间比较差异有 统计学 意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） 。与正 常组 比较 ， 诱导损伤组软 骨终 板细胞蛋 白聚糖 、 Ⅱ型胶原基 因表达 下调 ， 基质金属 蛋 白酶一 １ ３基 因表 达上调 ， 差异 均有统 计 学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。而给药组较诱导损伤组软 骨终板 细胞 蛋 白聚糖 、 Ⅱ型胶原基 因表 达上调 ， 基 质金属 蛋 白酶・ １ ３基
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ５ ８ ８ ７ ／ ｊ ． ｅ ｎ ｋ ｉ ． １ ３ － １ ３ ８ ９ ／ ｒ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ４ ． ０ ２ ２
椎 间盘损伤退变临床 患病 率较 高 ， 病 情严 重者 ， 严重影 响
患者 日程 生活质量。椎间盘是人体 负重缓 冲的重要组织 ， 软骨 终板是椎 间盘结构和功 能 的重 要组成 部分 。软骨终 板损 伤退 变可 以加 重椎 间盘损 伤 程度 … 。有研 究表 明 ， 炎性 因子 白介 素・ １ Ｂ （ Ｉ Ｌ － １ Ｂ ） 是催化软 骨终板 损伤 的重 要 因子 。如何 有效 减 少椎 间盘 炎症细胞 因子反 应损 伤 ， 可 能有 助 于椎 间盘退 变 发 展 。益气化瘀 补肾方为临床 基础方 药。临床 应用 从气 血人 手， 兼 之补 肾， 可用于气滞 血瘀或气 虚血 瘀等症 引起 的疼 痛症
２ ０ １ ５年 ２月 第 ８卷 第 ２ Ａ期
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DOIʒ10．13192/j．issn．1000-1719．2014．06．089溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL －1β的影响刘汝专1，刘金浪2，郭艳军2，潘汉升1，唐晓菊1（1．广西中医药大学附属瑞康医院，广西南宁530001；2．广西中医药大学研究生学院，广西南宁530001）摘要：目的:观察溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL －1β的影响。
方法:选取36只wista 大鼠，鼠龄6周，体重为(100ʃ20)g ，随机分成假手术组、模型对照组、溶髓方实验组，每组12只。
建立大鼠颈椎动力平衡失调模型，诱导椎间盘退变(假手术组仅作颈背后正中皮切开缝合)，造模1周后实验组予以溶髓方中药灌胃1月，假手术组和模型对照组喂等量生理盐水。
在术后9周、18周、36周处死每组四只动物，用酶联免疫吸附试验(Elisa )检测椎间盘中白介素－1β含量，并在形态学上评定椎间盘退变程度。
结果:对照组中椎间盘中白介素－1β含量明显升高，椎间盘细胞数量减少、细胞形态变化明显，细胞外基质中胶原水平减少，并出现大量裂隙，溶髓方可部分延缓这一过程:溶髓方可以部分抑制椎间盘细胞减少，随着培养时间延长，对照组各组椎间盘软骨终板的白介素－1β含量明显增加，溶髓方则可抑制IL －1β含量的增加。
结论:溶髓方可抑制炎性因子白介素－1β含量的增加，阻止椎间盘细胞数量的凋亡，对椎间盘具有保护作用。
关键词：椎间盘;软骨终板;溶髓方;白介素－1β中图分类号：Ｒ681．53文献标志码：B 文章编号：1000-1719（2014）06-1284-04Influence of Ｒongsui Formula on IL －1βin Cartilage Endplate ofＲats with Intervertebral Disc DegenerationLIU Ｒuzhuan 1，LIU Jinliang 2，GUO Yanjun 2，PAN Hansheng 1，TANG Xiaoju 1（1．Ｒuikang Hospital of Guangxi University of TCM ，Nanning 530001，Guangxi ，China ；2．Graduate School of Guangxi University of TCM ，Nanning 530001，Guangxi ，China ）Abstract ：Objective ：To observe the effects of Ｒongsui Formula on IL －1βlevel in the cartilage endplate for the rats with in-tervertebral disc degeneration．Methods ：Thirty －six Wistar rats were randomly divided into 3groups ：the sham －operation group ，the model group （control group ）and Ｒongsui Formula group （experimental group ），12rats in each group．The rat model of power imbalance that induced cervical intervertebral discs degeneration was established．One week after the model accomplished ，rats of experimental group took Ｒongsui Formula drugs by intragastric administration a month ，and meantime ，rats of sham －operation group and model control group were fed with isodose normal saline respectively．Four animals were sacrificed in each group at the end of week 9，18，36，respectively．IL －1βlevel in the cartilage endplate was tested simultaneously and the cell morphology chan-ges of the endplate cartilage degeneration were assessed．Ｒesults ：Prolonged incubation and extensive culturing lowered the IL －1βlevel of discs and inhibited the decrease of intervertebral discs cells significantly in the experimental group．Conclusion ：Ｒongsui Formula may have the protective effects of intervertebral discs by lowering the IL －1βlevel in the intervertebral discs．Key words ：intervertebral discs ；cartilage endplate ；Ｒongsui Formula ；IL －1β收稿日期：2013－12－14基金项目：2011年度广西壮族自治区中医药管理局中医药科技专项课题（GZKZ1128）作者简介：刘汝专（1964－），男，广西合浦人，教授、主任医师，研究方向：脊柱外科疾病研究。
通讯作者：潘汉升（1964－），男，广西贵港人，副教授、副主任医师，研究方向：脊椎外科疾病。
椎间盘退变可导致椎间盘突出、神经根与脊髓病变、椎管狭窄、脊柱不稳以及下腰痛等一系列临床症状，中医认为此病属“腰腿痛”及“痹症”范畴，因病致局部络脉瘀阻，停滞积聚，气机运行失常，蕴湿壅热，以致经气停滞，闭阻不通。
不通则痛，腰痛引腿，窜痛至趾或足跟。
溶髓方为全国名老中医经验方，可以改善全身或局部的血液循环，促进无菌性炎症的吸收和组织的修复，改善受损神经的营养状态，恢复病变组织的生理状态，但目前关于溶髓方治疗该病的研究尚未见公开报道，因此，本实验通过建立大鼠颈椎动力平衡失调模型，诱导椎间盘退变，通过给予溶髓方干预，测定其软骨终板白介素－1β（IL －1β）含量变化，阐明溶髓方是否对椎间盘具有保护作用。
1材料和方法1.1设计：随机分组设计，对照观察时间和地点：实验于2012年4月—2013年1月完成，其中组织培养及生化指标检测在广西中医药重点实验室完成，染色检测及光镜摄片在广西中医药大学分子生物学实验室完成。
1.2材料实验动物：36只健康的Wista 大鼠，鼠龄6周，体重为（100ʃ20）g ，雌雄各半，由广西医科大学动物中心提供。
实验过程中对动物的处置符合中华人民共和国科技部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》标准［1］。
药物：溶髓方（全国名老中医李桂文教授经验方），由广西中医药大学附属瑞康医院制备，主要成分为：当归15g，白芍15g，赤芍12g，乳香9g，没药9g，田七9g，鸡血藤20g，秦艽12g，五加皮12g，川续断12g，牛膝10g，延胡索12g，甘草10g，按以上比例研磨成粉。
表1主要试剂及仪器试剂及仪器来源大鼠IL－1βELISA试剂盒48T厦门慧嘉生物科技有限公司电热恒温培养箱上海跃进公司全自动石蜡切片机德国美康公司研究级显微镜日本奥林巴斯公司TUNEL美国罗氏公司显微摄像单反照相机日本尼康公司酶标仪美国BioTek公司1.3方法将36只健康的Wista大鼠随机分成3组：假手术组、模型对照组、溶髓方实验组，每组12只。
假手术组麻醉后沿颈背后正中作皮切开缝合手术，将模型对照组和溶髓方实验组大鼠造模，沿颈背部棘突做后正中切口，切开皮肤后，沿骨膜下剥离，咬骨钳去除颈4 7的棘突、关节突，棘上棘间韧带，切断双侧竖棘肌，诱发脊柱及椎间盘加速退变。
溶髓方实验组所用生药剂量按照人与动物千克体重换算，溶髓方用生药0.74g/（kg·d），相当于临床60kg体重人的等效剂量，于造模1周后灌胃，每日1次，连用1个月。
假手术组和模型对照组只喂生理盐水。
分别在术后9周、18周、36周处死每组四只动物。
完整取下颈4－7椎体，剔除椎间盘周围的肌肉及脂肪组织，分离椎体和带软骨终板的椎间盘，收集颈4/5、5/6、6/7三个节段中外形完整的任意两块带软骨终板的椎间盘，将切取的带软骨终板的椎间盘按假手术组、模型对照组、溶髓方实验组的组别分为3个对照组，同时按9周、18周、36周分批处死动物，每组再随机分为3个亚组，即9周对照组、18周对照组、36周对照组，每个亚组4个样本。
分别于术后9周、18周、36周后检测软骨终板用酶联免疫吸附试验（Elisa）检测椎间盘中IL－1β含量，并在形态学上评定椎间盘退变程度。
Hematoxylin－Eosin（H.E苏木精.伊红）染色法在光镜下观察椎间盘显微结构：将各组动物颈椎间盘标本浸泡于10倍标本体积的4%多聚甲醛溶液中固定24h，乙醇逐级脱水，二甲苯透明，浸蜡，石蜡包埋，沿椎间盘冠状面制作石蜡切片，厚度为6μm。
经H.E 苏木精及伊红染核5 10min，中性树胶封片，光学显微镜下观察形态学改变并拍照。
TUNEL细胞凋亡检测程序（罗氏公司）观察椎间盘形态学变化：分别用二甲苯浸洗、梯度乙醇浸洗，并用PBS漂洗2次，用Proteinase K工作液处理组织15 30min，PBS漂洗2次，制备TUNEL反应混合液，玻片干后，加50μl TUNEL反应混合液于标本上，加盖玻片或封口膜在暗湿盒中反应37ħˑ1h，PBS漂洗3次，玻片干后加50μL converter－POD于标本上，加盖玻片或封口膜在暗湿盒中反应37ħˑ30min，PBS漂洗3次，在组织处加50 100μ1DAB底物，反应15 25ħˑ10min，PBS漂洗3次，拍照后再用苏木素复染，几秒后立即用自来水冲洗。
梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片。
加一滴PBS，用光学显微镜观察凋亡细胞并拍照。
软骨终板IL－1β含量测定：将实验收集的软骨终板，称量、研磨、匀浆、离心，分装于Ependorf管中，即可测定IL－1β含量，采用酶联免疫分析（Elisa）检测法测定各组软骨终板中IL－1β含量，使用大鼠IL－1β酶联免疫分析试剂盒，通过使用说明书，按步骤进行实验。