转化生长因子β_1及白介素-1β对终板软骨细胞的作用

北方 药学 ２ ０ １ ３年第 １ ０卷第 ４ 期
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转化 生长 因子 ｐ， 及 白介素 一 １ ｐ对终板软 骨细胞 的作用
李 （ 贵州省铜仁市第二人民医院病理科 铜仁 ５ ５ ４ ３ ０ ０ ）
摘要 ： 目的 ： 探讨椎 间盘退 变中转化生长因子 ｐ 。 （ Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ １ ） 与白介素一 ｌ ｐ （ Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ ） 在终板软 骨细胞 中的相关表 达情 况。方法 ： 通过 免疫组化 ｓ Ｐ染色法检验 Ｔ Ｇ Ｆ 一 ３ １ 与Ｉ Ｌ 一 １ ｐ在颈椎病患者及对 照组椎体软骨终板 中的表达情况。 结果 ： 颈椎病患者的 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 及 Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ的阳性 率与对照组具有统计学差异 （ 尸 ＜ ０ ． ０ ５ ） 。结论 ： Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 与Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ参与 了椎 间盘退 变及病情发展 ， 在 整个椎 间盘退变 及发 病过 程 中起 到 了至 关重 要 的 作 用 。 关键 词 ： Ｔ Ｇ Ｂ — ｐ Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ 终板 软 骨 细胞 椎 间盘
中 图分 类号 ： Ｒ ３ ９ ２ ． １ ２ 文献 标 ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ３） ０ ４ — ０ ０ ７ ７ — ０ １
软骨终板 位于椎体 与椎 间盘之间 ，是一层薄而透 明的软 性细胞数进行计算 。 骨组织 。主要 由软骨细胞与细胞外基质组成 ， 并作为髓核与外 １ ． ３统计学分析 ： 采用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ ２ ２ ． ０软件进行统计学分析 ， 计数资 界交换营养及进行代谢 终产 物的重要途径【 １ １ 。正常的椎 体形 态 料采 用 ｘ 检验 ， 计量资料用 ｘ ￣ ｓ ） 表示 ， 组 间比较采用 ｔ 检验 ， 及椎 间盘应力 均需要 软骨终 板进行 维持 ，若其造成损伤将会 Ｐ ＜ ０ ． ０ ５为具有统计 学差异 。 导致椎 间盘发生不 同程度 的退变 。软 骨细胞又作为软骨终板 ２ 结 果 的唯一细胞类型 ， 功能状态对软骨终板具有直接影响。本次对 免疫组 化检测 中 ，椎 问盘病变组 Ｔ Ｇ Ｆ — ｐ ， 低表达 ， Ｉ Ｌ — ｌ Ｂ 细胞 因子 与细胞分 化之 间的关 系进行 了研 究 ，探讨了椎 间盘 高表达 。无病变对 照组恰巧与病变组表达相反 ， 两组 比较具有 退变与 Ｔ Ｇ Ｂ — Ｂ 和Ｉ Ｉ １ １ ３ 之间的关系。 统计学差异（ Ｐ ＜ Ｏ ． ０ ５ ） ， 详见表 １ 。
１ 资料 和 方 法
表 １ 两组 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 、 Ｉ Ｌ 一 １ １ ３ 在椎体软骨终板的表达（ ｉ ± ｓ ）
１ ． １ 一般资料 ： 研究对象为 ２ ０ ０ ９年 ３ 月～ ２ ０ １ ２年 ３月之 间收治 的颈椎病患者 ， 均行前路手术对终板进行切除共 ２ ５例 。其 中， 男性 １ ９ 例， 女性 ６例 ， 年龄 ３ ５ ～ ５ １ 岁， 平均（ ４ ２ ． ５ ４ － ２ ． １ ） 岁。 对照 组２ ５例为 同期 颈椎骨折 前路手术治疗 后所取 得软骨终 板标 本， 无 颈椎退行 病变患者。其中 ， 男性 １ ５例 ， 女性 ｌ ０例 ， 年龄 ３ １ — ４ ８ 岁， 平均 （ ４ ０ ． ８ ＋ １ ． ４ ） 岁。 两组患者基本资料无 统计学差异 ３ 讨 论 （ Ｏ ． ０ ５ ） ， 可纳入 同一研究组进行 比较。 软骨 终板作 为维 持椎 体正 常形态 及应 力缓 冲保 护作用 １ ． ２ 方法 其与椎 间盘退变在某种程 度上具有相 关性 。近 １ ． ２ ． １ 组织学检查 ： 所有软骨终 板进行编号排序后置入 ４ ％多聚 的重 要组织 ， 椎体 软骨终板损伤 直接参 与 甲醛 ， 于４ ￣ Ｃ 温度下进行 固定 。待 ２ ４ ｈ 后放人 １ ０ ％乙二胺 四乙 年来 对椎间盘退 变的研究表 明 ， ２ １ 。Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 主要促 进细胞基 质合成 、 调 酸脱钙液 中， 同样于 ４ ￣ Ｃ 进行脱钙处 理 １ ４ ｄ 。梯度 乙醇脱水后 了椎 间盘病变 的过程 『 使用石蜡包埋 ， 对石 蜡进行切 片处理 ， 厚度为 ３ １ ａ ， ｍ， 苏木 素伊 控细胞增 殖 、 调节分化 ， 同时具 有免疫抑制 、 损 伤修 复及抗炎 等重要 作用 ， 来源广泛 ， 在 细胞 分化所有 阶段均会产生 ， 但在 红染色 ， 对软骨终板组织形 态学进行 了解 。 １ ． ２ ． ２免疫组化染 色 ： Ｓ Ｐ法免疫组 化染 色 ， 兔抗人 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 多克 血小板及 骨组 织 中含量最 为丰富 。相关 研究表 明 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 。 可 隆抗 体 ， Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ多 克隆抗体试剂盒 。烤 片 ６ ８ ￣ Ｃ 过夜 ， 与二甲苯 促进最键 盘髓核细胞 表达合成胶原 ，从而延缓椎 间盘退 化。 Ｌ 一 １ Ｂ是 构 成 细胞 外 基 质 中 Ｉ Ｌ 一 １ 的主要成分 ， 为强力致痛性 脱蜡 ２ ０ ｍｉ ｎ ，梯 度乙醇至水 ；进行柠 檬酸高 温高压抗原 修复 Ｉ 作 为负 性调节 因子存 在 ， 可 以引起 软骨基 质 的降 ２ ａｉ ｒ ｎ ； 待降至室温后 ， 使用磷酸盐缓 冲液进行 ５ ａｉ ｒ ｎ冲洗 ， 反复 炎症 因子 ， 所以， 病 变组 Ｔ Ｇ Ｆ — ｐ 与Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ表达呈现相 ３次 ； ３ ％Ｈ ０ 去离子水孵 育 ｌ Ｏ ｍ ｉ ｎ后滴加封 闭用赡养血 清工 解从而破坏软 骨。 Ｔ Ｇ Ｆ — ｐ 。 与Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ的表达与椎间盘损伤具有重 作液 ， 室温下孵 育 １ ５ ｍ ｉ ｎ ； 弃 去后底 价一 抗 ， 室温 下孵 育 ３ ｈ ， 反情况 。综上 ， 前者具 有维 持正 常代谢 作用 ， 后 者可破 坏正 常代谢 Ｐ Ｂ Ｓ液冲洗 ５ ｍ ｉ ｎ ， 反复 ３次 ； 滴 加生物素 化二抗工作液 ， 室温 要关 系 ， 下孵育 ２ ０ ｍ ｉ ｎ ， Ｐ Ｂ Ｓ液 冲洗 ５ ｍ ｉ ｎ ， 反复进 行 ３次 ； 滴 加辣 根酶 平 衡 。 标 记链酶卯 白工作 液 ，室温下孵育 ４ ０ ｍ ｉ ｎ ， Ｐ Ｂ Ｓ液冲洗 ５ ｍ ｉ ｎ ， 参 考 文 献 １ ］ 王栋琪 ， 刘淼 ， 宋焕瑾 ， 等． 人退 变腰 椎 间盘 中细胞 凋亡 与 反 复进行 ３次 ； Ｄ Ａ Ｂ显色 ３ ｍ ｉ ｎ ， 使用 自来水 冲洗 ， 苏木 素复染 【 色。进行常规脱水 、 透明 、 干燥 、 封片后 ， 于显微镜下观察 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ ａ ｘ及 半 胱 胺 酸 人 退 变腰 椎 间 盘 中细 胞 凋 亡 与 Ｂ ａ ｘ及 半 胱 胺 酸蛋 白酶蛋 白 ３基 因的表 达 ［ Ｊ ］ ．中 国修 复 重建 外科 杂 志 ， ｐ ． 与Ｉ Ｌ 一 １ ｐ的表 达 。 ０ ０ ８ ， ２ ２ （ ４ ） ： ４ ２ １ — ４ ２ ５ ． １ ． ２ ． ３指标判断 ： 本次 阳性产物定 位于细胞质 ， 棕黄染 色 ， 偶 尔 ２ ２ ］ Ｗａ ｌ ｓ ｈ Ａ Ｊ ，Ｌ ｏ ｔ ｚ Ｊ Ｃ ． Ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｓ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｖ ｅ ｒ ｔ ｅ ｂ ｒ ａ ｌ 出现少量胞核着色 。阳性 细胞组织清晰切片 ， 随机取镜下 ５ 个 ［ ｉ ｓ ｃ ｔ ｏ ｄ ｙ — ｎ ａ ｍ ｉ ｃ ｌ ｏ ａ ｄ ｉ ｎ ｇ ［ Ｊ １ ． Ｊ Ｂ ｉ ｏ ｍ ｅ ｃ ｈ ， ２ ０ ０ ４ ， ３ ７ （ ３ ） ： ３ ２ ９ — ３ ３ ７ ． 视野， 并对 Ｔ Ｇ Ｆ — ｐ ． 及Ｉ Ｌ 一 １ ｐ阳性细胞数 、 细胞 总数及平 均阳 ｄ