基因克隆技术
基因克隆技术
基因克隆技术从20世纪中叶开始，分子生物学研究得到高速发展，主要原因之一是研究方法，特别是基因操作和基因工程技术的进步。
基因操作也称重组DNA技术，主要包括DNA分子的切割与连接、细胞转化、凝胶电泳、核酸分子杂交、核酸序列分析以及基因人工合成、定点突变和PCR扩增等，是分子生物学研究的核心技术。
基因工程是指在体外将核酸分子插入各种载体分子中，构成遗传物质的新组合，并使之进入新的寄主细胞内，进行持续稳定的繁殖和表达。
第一节重组DNA技术回顾第二节DNA的基本操作技术第三节RNA的基本操作技术第四节基因克隆技术第五节基因芯片技术第六节蛋白质组学及其研究技术重组DNA技术（Recombinant DNA Technique）又称为基因克隆（Gene Cloning）或分子克隆（Molecular Cloning）技术。
是按照人们意愿，在体外对DNA分子进行重组，再将重组分子导入受体细胞，使其在细胞中扩增和繁殖，以获得该DNA的大量拷贝。
重组DNA技术包括了一系列的基因操作步骤。
二、重组DNA技术的基本步骤①目的DNA的获得与载体的制备；②目的DNA与载体的连接；③重组DNA导入受体细胞；④重组DNA的筛选和鉴定；⑤目的DNA的表达及表达产物的检测与分离纯化。
三、重组DNA技术的四大要素目的DNA 载体（Vector）工具酶宿主细胞（一）目的基因（外源基因）的获取获得需要的目的基因常用的方法：1、分离的基因DNA片段或基因；2、mRNA逆转录合成的cDNA；3、化学合成人工目的基因；4、PCR体外扩增的DNA片段。
（二）载体载体载体(Vector)：是指能运载外源性DNA进入宿主细胞，并能进行自我复制的DNA。
1、载体分类----按功能分类：克隆载体(cloning vector)：为使插入的外源DNA序列被大量扩增而设计的载体。
表达载体(expression vector)：为使插入的外源DNA序列可转录翻译成多肽链而设计的载体。
基因克隆(包括DNA提取技术步骤)
基因克隆DNA克隆是指在体外将目的基因或DNA片段同能够自我复制的载体DNA 连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程，又称为重组DNA技术。
DNA克隆涉及一系列的分子生物学技术，如目的DNA片段的获得、载体的选择、各种工具酶的选用、体外重组、导入宿主细胞技术和重组子筛选技术等。
一 DNA的提取二目的DNA片段的获得（酶切）三体外重组1 LB培养基的配制2大肠杆菌感受态细胞的制备3载体的选择四导入受体细胞五重组子的筛选1插入失活法实验一DNA提取取0.5克以下的鱼类组织或20ul血液：1 准备1.5ml离心管，加入500ul裂解液，取组织放入离心管，破碎。
（常温操作）2 恒温箱裂解，55℃。
30min。
3 加等体积Tris饱和酚(酚：氯仿：异戊醇25：24：1)，先颠倒混匀后静置抽提10分钟，离心4度12000g 10分钟。
（注意酚在油层下面）4 取上清（把枪头去掉部分，注意液面。
蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中），加入等体积CI(氯仿：异戊醇24：1)，先颠倒混匀后静置抽提10分钟，离心4度12000g 10分钟。
5 汇集上清，加2倍无水乙醇(-30度保存)，颠倒混匀可观察到絮状DNA。
在-30度冰箱沉淀30min。
离心4度12000g 10分钟。
6 弃去上清，75%乙醇洗涤，7500g离心5分钟。
7 重复一次上述操作。
7 在无菌台干燥半小时，乙醇挥发。
8 溶解于200ulddwater。
9 定量DNA。
裂解液的配制1ml体系200ul 0.5M EDTA（PH=8.0高压灭菌。
作用抑制酶的活性。
）螯合DNA酶发挥作用需要的金属离子。
50ul 10%SDS（蛋白质变性剂）10ul 1MTris-cl（PH=8.0高压灭菌）缓冲溶液5ul PK（消化）735ul 灭菌超纯水EDTA（0.5 M，pH8.0）将186.1 g 二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na.2H2O）加入800ml水中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
基因克隆技术名词解释
基因克隆技术名词解释基因克隆技术是指通过人工手段将一个生物体的基因从其源生物体中抽取并插入到另一个宿主生物体中的过程。
以下是一些基因克隆技术的常见术语的解释：1. DNA复制（DNA replication）：在细胞分裂或基因克隆过程中，DNA的双链被解开，通过酶的作用，在每个单链上合成一条新的互补链，从而产生两条完全相同的DNA分子。
2. 基因库（gene library）：基因库是一个储存基因序列的集合，通常通过将DNA分子从一个组织或生物提取出来，并将其插入到载体（如细菌或酵母）中来构建。
3. 重组DNA技术（recombinant DNA technology）：重组DNA技术是一种通过将不同来源的DNA片段连接到一起来生成新的DNA分子的方法。
这种方法可用于将特定基因插入宿主生物体的基因组中。
4. 基因放大（gene amplification）：基因放大是指通过体外复制方法制备大量特定DNA序列的过程，如聚合酶链式反应（PCR），从而获得足够量的DNA来进一步研究。
5. 基因表达（gene expression）：基因表达是指基因通过转录和翻译的过程产生功能性蛋白质的过程。
基因克隆技术可以用于将外源基因（来自其他物种）插入宿主生物体的基因组中，从而使宿主生物体表达该基因及其编码的蛋白质。
6. 表达载体（expression vector）：表达载体是一种DNA分子，其中包含了一个外源基因的表达序列，如启动子、转录终止子和转录调控元件等。
表达载体可以在宿主生物体中将外源基因表达出来。
7. 选择标记（selection marker）：选择标记是一种用于帮助筛选转化成功的宿主生物体的方法。
常用的选择标记包括耐抗生素基因，只有含有特定基因的宿主生物体才能在含有相应抗生素的培养基中生长。
8. 基因敲除（gene knockout）：基因敲除是指通过特定的基因编辑技术（如CRISPR/Cas9）来使宿主生物体中的特定基因失去功能。
植物遗传工程中的基因克隆与转化技术
植物遗传工程中的基因克隆与转化技术植物遗传工程是指通过改变植物的遗传物质，以达到改良、改变或创新植物性状的目的。
其中基因克隆与转化技术是植物遗传工程中的关键技术之一。
基因克隆指的是通过将特定基因从一个生物体中分离并扩增形成DNA片段，使其能够在其他生物体中稳定表达。
转化技术则是将克隆的基因导入到目标植物体内，使其能够在植物表达并产生相应的功能。
一、基因克隆技术基因克隆技术是植物遗传工程中的关键环节。
首先需要从源生物体中分离出目标基因。
常用的方法有PCR扩增、限制酶切片段分离等。
通过PCR扩增技术，可以快速、高效地扩增目标基因，提供足够的DNA片段用于后续的克隆工作。
限制酶切片段分离则是利用特定的酶将目标基因从源DNA片段中切割出来。
接下来，克隆基因需要被插入到适当的载体中，常用的载体包括质粒和病毒等。
将基因插入载体后，需要通过转化技术将其导入目标植物体内。
二、转化技术转化技术是将克隆的基因导入到目标植物体内的关键步骤。
常见的转化技术主要有基因枪法、农杆菌介导法和化学法等。
基因枪法是通过将DNA微粒射入植物细胞，使基因得以导入的方法。
此方法简单、高效，对不同植物都适用，因此被广泛应用于植物遗传工程中。
农杆菌介导法则是利用农杆菌将目标基因导入植物细胞。
这种方法克服了基因枪法的一些限制，可以导入更长的DNA片段，但受适用植物种类的限制。
此外，化学法也是一种常用的转化技术，通过利用化学物质使植物细胞的细胞壁通透性增强，从而实现目标基因的导入。
三、应用前景与挑战基因克隆与转化技术在植物遗传工程中具有广阔的应用前景。
通过基因克隆和转化技术，可以实现对植物农艺性状的改良，提高植物的抗病虫害能力、耐逆性和产量，从而促进农业的可持续发展。
此外，利用基因克隆和转化技术还可以为植物生物制药、环境修复等领域提供解决方案。
然而，基因克隆与转化技术在应用过程中也面临一些挑战。
首先，对于目标基因的选择和定位仍然是一个复杂的问题。
DNA分子克隆技术(也称基因克隆技术)
DNA分子克隆技术（也称基因克隆技术）：在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。
其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。
载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。
主要目的是获得某一基因或NDA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库（genomic library）,另一种是cDNA库。
载体所谓载体是指携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具。
细菌质粒是一种细菌染色体外小型双链环状结构的DNA，分子大小为1-20kb，对细菌的某些代谢活动和抗药性表型具有一定的作用。
质粒载体是在天然质粒的基础上人工改造拼接而成。
最常用的质粒是pBR322。
基因库的建造含有某种生物体全部基历的随机片段的重组DNA克隆群体，其含有感光趣的基因片段的重组子，可以通过标记探针与基因库中的重组子杂交等方法而筛选出来，所得到的克隆经过纯化和扩增，可用于进一步的研。
其主步骤包括：（1）构建基因库迅速的载体；(2)DNA片段的制备；（3）DNA片段与载体DNA 的连接；（4）包装和接种。
cDNA库的建造是指克隆的DNA片段，是由逆转录酶自mRNA制备的cDNA。
cDNA库包括某特定细胞的全部cDNA克隆的文库，不含内含子。
特异基因的筛选常用的方法有：（1）克隆筛选即探针筛选法；（2）抗体检测法，检测其分泌蛋白质来筛选目的基因；（3）放射免疫筛选法，查出分泌特异抗原的基因；（4）免疫沉淀法，进行特异基因的筛选。
核酸序列测定DNA的碱基序列决定着基因的特性，DNA序列分析（测序，sequencing）是分子生物学重要的基本技术。
生物基因工程核心技术
生物基因工程核心技术生物基因工程是一门利用分子生物学和遗传学知识来改变生物体遗传物质的科学技术。
它可以通过对基因进行修改和调控，实现对生物体特性和功能的精确控制。
生物基因工程的核心技术有许多，下面将逐一介绍。
1. 基因克隆技术基因克隆技术是生物基因工程的关键技术之一。
它允许从一个生物体中精确地分离出一个特定的基因，并在实验室中进行大量复制。
基因克隆技术包括DNA提取、限制性内切酶切割、DNA连接、转化等步骤。
通过基因克隆技术，科学家可以大规模制备目标基因，用于后续的研究和应用。
2. 基因测序技术基因测序技术是生物基因工程的另一个核心技术。
它用于确定DNA序列中碱基的顺序，并获得生物体基因组的完整信息。
目前，常用的基因测序技术包括Sanger测序和高通量测序。
这些技术的发展使科学家能够更深入地研究基因组结构和功能，进一步理解生物体的遗传机制。
3. 基因编辑技术基因编辑技术是指通过改变生物体自身的DNA序列，来实现对基因型和表型的精确控制。
CRISPR-Cas9系统是目前最常用的基因编辑技术之一。
它利用Cas9蛋白和RNA引导序列，可以精确地切割DNA，进而实现基因的修改、插入和删除。
基因编辑技术在农业、医学和生物学研究领域有着广泛的应用前景。
4. 基因转导技术基因转导技术是指将外源基因导入到目标细胞或生物体中的技术。
这些外源基因可以来自同种或不同种的生物。
常用的基因转导技术包括病毒载体介导的基因转导和非病毒载体介导的基因转导。
通过基因转导技术，科学家可以向生物体中引入新的基因，从而赋予其新的功能或特性。
5. 基因表达技术基因表达技术是指将目标基因在宿主细胞中转录和翻译成蛋白质的技术。
常用的基因表达技术包括原核表达系统和真核表达系统。
通过基因表达技术，科学家可以大规模制备目标蛋白质，用于生物学研究、药物研发和工业生产等领域。
综上所述，生物基因工程的核心技术涵盖了基因克隆、基因测序、基因编辑、基因转导和基因表达等方面。
基因克隆的概念
基因克隆的概念基因克隆是指以细胞或生物体为基础，通过人工手段复制出与原始生物体完全相同的基因组和基因表达的过程。
它是利用现代生物技术和分子生物学技术，通过人工手段将一个或多个基因从一个物种的生物体中提取并复制到另一个物种的生物体中，从而在目标生物体中表达出与原始基因相同的特性和功能。
基因克隆的过程可以分为五个主要步骤：DNA提取、DNA切割、DNA连接、DNA转化和筛选。
首先，进行DNA提取。
DNA可以从目标生物体的组织样品中提取，通常使用聚合酶链式反应(PCR)或限制酶切技术来放大和获取所需的基因片段。
接下来，进行DNA切割。
使用一种特殊的酶，即限制酶，可以将特定的DNA 序列切割成片段，从而得到所需的基因片段。
然后，进行DNA连接。
在连接过程中，将目标基因片段插入到载体DNA中，形成重组DNA。
常见的载体包括质粒、噬菌体和人工染色体等，它们可以用于将基因片段转移至目标生物体中。
接着，进行DNA转化。
将重组DNA导入到宿主细胞中，使其在宿主细胞中复制和表达。
常使用细菌或酵母等微生物作为宿主细胞。
最后，进行筛选。
通过筛选方法来鉴定带有目标基因的宿主细胞，如选择性培养基、荧光标记等。
这样就可以筛选出目标基因在宿主细胞中稳定复制和表达的克隆。
基因克隆的应用非常广泛。
在农业领域，基因克隆可以用于制造具有抗虫、抗病、抗逆境等特性的转基因作物；在医学领域，基因克隆可以用于合成药物、生产重组蛋白和生物材料等；在基础科学研究中，基因克隆可以用于分析基因功能、研究疾病机制等。
然而，基因克隆也存在一定的问题和争议。
首先，基因克隆技术涉及到伦理和道德问题。
由于基因克隆涉及到对生命进行人工干预，引发了关于对生命是否应当加以个体尊重和保护的争议。
其次，基因克隆过程中可能发生不确定的突变和不稳定的基因表达，导致不可预测的副作用和潜在风险。
此外，一些人担心基因克隆可能导致基因多样性的减少，进而影响生物体的适应性和生存能力。
基因克隆与表达
基因克隆与表达基因克隆与表达是生物学领域中重要的技术手段和研究方法。
通过基因克隆和表达，科学家能够研究特定基因的功能、调控机制以及其在生物体内的作用，这对于深入了解生物体的生理过程和疾病发生机制具有重要意义。
本文将介绍基因克隆与表达的原理、方法以及应用。
一、基因克隆基因克隆是将特定基因从一个生物体中分离并复制到另一个载体中的过程。
这个过程主要涉及DNA的分离、复制和连接。
常用的基因克隆技术包括PCR、限制性内切酶切割、琼脂糖凝胶电泳和基因插入等。
1. PCR聚合酶链反应（PCR）是一种强大的基因扩增技术。
它通过不断地重复某一特定区域的DNA序列，使其得以大规模复制。
PCR可以在短时间内合成大量目标DNA片段，为基因克隆提供了充足的材料。
2. 限制性内切酶切割限制性内切酶可以识别并切割特定的DNA序列。
通过选择合适的限制性内切酶，可以实现将目标基因从源DNA中切割下来，为下一步的基因克隆做好准备。
3. 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种常用的DNA分离技术。
通过将DNA样品加入琼脂糖凝胶槽中，并施加电场，DNA片段会根据其大小在凝胶中迁移。
凝胶电泳可以帮助科学家分离和纯化目标基因。
4. 基因插入基因插入是将目标基因连接到载体上的过程。
载体可以是质粒、病毒或者人工染色体等。
通过连接酶的作用，目标基因与载体可以稳定地结合在一起。
二、基因表达基因表达指特定基因通过转录和翻译过程转化为蛋白质的过程。
从基因克隆到基因表达，可以分为以下几个步骤：转染或转化、筛选和检测。
1. 转染或转化转染是指将外源DNA导入到动物细胞中的过程，而转化是将外源DNA导入到细菌细胞中的过程。
转染和转化可以通过多种方法实现，如化学法、电穿孔法和基因枪法等。
2. 筛选筛选是为了确定是否成功将目标基因表达在宿主细胞中而进行的步骤。
常见的筛选方法包括荧光筛选和克隆筛选。
荧光筛选利用荧光蛋白标记目标基因，观察细胞是否出现荧光信号。
克隆筛选则利用选择性培养基，筛选出含有目标基因的克隆。
生物技术中的基因克隆技术
生物技术中的基因克隆技术随着科技的不断进步，生物技术已经逐渐成为科学和社会领域的重要组成部分。
其中，基因克隆技术是生物技术领域中最为重要的技术之一。
基因克隆技术可以通过对基因进行精准的复制和编辑，为人类和其他生物提供各种不同的应用场景。
本文将对基因克隆技术做出详细的介绍和分析。
一、什么是基因克隆技术基因克隆技术是利用生物技术手段对生物体内的DNA分子进行复制和编辑的技术。
在基因克隆技术中，科学家通常会从一个特定的源生物体中获取目标基因序列，随后将其进行分离、转录、复制、编辑等多种操作，最后再将其重新结合在一起，形成一个与原始基因序列完全相同或类似的新的基因序列。
这种技术主要是通过对基因序列进行分析，来寻找和筛选出特定的基因序列，并利用PCR、电泳、DNA序列分析等各种技术手段以非常高的精确度对基因进行复制和编辑。
二、基因克隆技术的应用基因克隆技术的应用领域非常广泛。
以下是一些基因克隆技术的主要应用领域：1. 生命科学研究：基因克隆技术可以使科学家更方便和精准地研究各种生物体的基因信息和遗传学性质，以进一步深入了解生命的进化和发展机制。
2. 医学：基因克隆技术对于人类医学的发展有重要的启示作用。
例如，基因修饰技术可以用于创建更加安全和有效的药物、诊断和治疗各种疾病的方法，如癌症、心血管疾病等。
3. 农业：基因克隆技术可以用于改良作物、畜禽的品质和产量。
如可以利用这种技术改造作物的基因，提高作物的抗病性、耐旱性、抗旱性等，以适应更加恶劣的生长环境和气候条件。
4. 工业：基因克隆技术还可以应用于工业领域中的生产和制造过程中。
例如，可以利用这种技术生产更加安全和环保的生产原料，或者生产更好的生物燃料、清洁能源等。
三、基因克隆技术的风险与限制尽管基因克隆技术有着广泛的应用前景，但是它也存在着各种风险和限制。
例如：1. 伦理风险：基因克隆技术的应用可能引发一些伦理和道德方面的争议。
例如，人类克隆技术可能会导致人类社会面临诸如基因种族歧视、大规模“定制”的情况等问题，甚至可能威胁到人类的存在和生存。
基因克隆及相关技术
基因克隆及相关技术随着生物科技的发展，基因克隆及相关技术成为了当今生物学领域的重要研究方向。
基因克隆是指通过人工手段将一个个体的基因复制并传递给另一个个体，从而获得具有相同基因组的新个体。
这项技术的应用广泛，包括基因工程、生物医学研究、农业生产等领域。
基因克隆的过程主要分为DNA提取、DNA复制和基因插入三个步骤。
首先，需要从原始个体中提取DNA。
这可以通过细胞裂解、蛋白酶处理和有机溶剂萃取等方法来实现。
其次，在DNA复制过程中，需要使用聚合酶链式反应（PCR）技术，将DNA扩增为足够数量。
最后，将扩增后的DNA片段插入到受体细胞中，使其具有与原始个体相同的基因组。
基因克隆技术的应用非常广泛。
在基因工程领域，基因克隆可以用于生产重组蛋白和制造基因药物。
通过将目标基因插入到细菌或酵母等微生物中，可以大量生产所需蛋白，如胰岛素、生长激素等。
此外，基因克隆还可以用于治疗遗传性疾病。
科学家们可以通过基因克隆将正常基因导入患者体内，修复受损的基因，从而达到治疗的效果。
在农业生产中，基因克隆技术也发挥着重要的作用。
通过克隆转基因植物，科学家们可以调整植物的基因组，使其具有抗虫、抗病、耐旱等特性。
这不仅能够提高农作物的产量和质量，还能够减少对农药和化肥的依赖，减少环境污染。
然而，基因克隆技术也存在一些争议和风险。
首先，基因克隆可能导致基因多样性的减少，从而降低生物的适应性和抗病能力。
其次，基因克隆可能引发道德和伦理问题。
例如，克隆人类可能导致人类基因组的重复，进而对人类社会和道德价值观产生影响。
为了解决这些问题，科学家们在基因克隆技术的研究中不断努力。
他们通过基因编辑技术，如CRISPR-Cas9系统，可以精确地修改基因组，实现对特定基因的修饰和调控。
这一技术的出现，为基因克隆技术的发展带来了新的可能性。
基因克隆及相关技术是当今生物学领域的重要研究方向。
通过基因克隆技术，科学家们可以复制和传递基因，从而实现特定功能的基因表达。
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设计一个片段分解的策略 选择合适的载体 载体双酶切 片段PCR克隆,双酶切
设计一个功能验证的策略 选择内切酶种类和设计引物 酶连转化
大肠杆菌 DH5а
三亲杂交到KT 功能验证
双酶切
双酶切
酶连
内切酶的选择
只有Apa I和EcoR I可供选择
正向引物 5’---CGCTGAATTCGTGAAGTTGCCATATCGCTTAG---3’ EcoR I 保护碱基
三、基因工程所用到的克隆载体
以扩增外源DNA为目的载体-克隆载体（cloning vector）
（1）载体在细胞中必须能够进行独立自主地复制
（2）载体应具有酶切位点，便于外源DNA的插入 （3）载体必须具有可供选择的遗传标记
还应具备的特点：
a）低分子量；
b）具有较高拷贝数；
c）易于导入细胞； d）具有安全性；
反向引物 5’---TATAGGGCCCTTGGCTTGATCGCTAAA---3’ Apa I 保护碱基
N=ln（1-p）中每个独立克隆所含有外源DNA片段的平均 clones and puc19
阳性克隆在含有相应农药的平板上产生水解圈
如何做亚克隆?-----以四氢嘧啶降解相关基因为例
穿梭载体
表达载体
基因工程的基本过程
1. 基因分离或合成： 2. 体外重组
3. 重组载体导入受体细胞
4.特定克隆子的筛选菌株或突变菌株
筛选能功能互
Total DNA extraction
EcoRI E： 表示大肠杆菌属名第一个字母 co： 表示种名头两个字母 R： 表示株名 I： 表示该菌中第一个被分离出来的酶。
5`-A A G C T T-3` Hind III的识别序列： 3`-T T C G A A-5`
5`-A 3`-T T C G A
A G C T T-3` A-5`
切割后形成具有粘性末端（cohesive end）的DNA片段： 限制性酶一般不在识别序列的对称轴上切割，而是交错切 割结果形成5 或3单链突出的粘性末端的DNA限制片段。 二个具有互相匹配的粘性末端的DNA片段可以通过碱基 的互补及DNA连接酶的作用而重新连接起来。
HpaI的识别序列：
5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5`
5` - G T T 3` - C A A
A A C - 3` T T G - 5`
切割后形成具有平末端（blunt end）的DNA片段：
限制酶在识别序列的对称轴上切割，形成的DNA片段 没有突出的单链。
Sau3AI partial digest(gatc)
puc19载体提取
puc19载体 BamH I 酶切
Sau3AI:
Recovery of 2-4kb fragments 载体脱磷
gatc ctag g gatc c c ctag g
BamH I:
ligation
转化,挑选转化子
筛选阳性克隆在理论上，构建的基因采用 Clarke的统计公式计算：
基因克隆的技术方法探讨
2008.11.28
基因工程所用到的酶系
（一）限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）
能识别双链DNA分子的特定序列，并在识别位点或其附近切割 DNA的一类内切酶。简称为限制性酶（restrition enzyme）。
取微生物属名的第一个字母和种名的头两个字母组成 三个斜体字母加以表示，遇有株名，再加在后面。如果同 一菌株先后发现几个不同的酶，则用罗马数字加以表示。
具有平末端的DNA片段也可以在DNA连接酶的 作用连接起来
（二）DNA聚合酶 具有催化DNA链从5’→3’方向聚合反应的活性，还具 有从5’→3’(其小片段)和从3’→5’(大片段)的外切核酸 酶活性。
（三）DNA连接酶（DNA ligase） DNA连接酶可以将两个DNA片段的3’-OH与5’-P连接起 来