肺癌中GRIM-19 mRNA的表达及其临床意义
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GRIM-19对肿瘤疾病的作用作者:周涛王晓单位:山东大学齐鲁医院乳腺外科GRIM-19的功能1GRIM-19在凋亡中的作用GRIM-19高表达促进细胞凋亡。
IFN/RA诱导细胞中GRIM-19的表达,促进肿瘤细胞发生凋亡。
反之,抑制GRIM-19的表达,肿瘤细胞则抵抗IFN/RA诱导的凋亡。
但有研究表明,仅仅GRIM-19的高表达并不足以引起细胞凋亡,但GRIM-19的高表达可以增加细胞对IFN/RA诱导的凋亡的敏感性;GRIM-19的羧基端对其诱导细胞凋亡是必不可少的,在真核生物中,该区域可能与ATP的结合有关;另外,核苷酸结合蛋白、尤其是GTP的结合蛋白如对抗黏(液)病毒的MX 蛋白和对抗弹状病毒的TGTP蛋白,在IFN诱导的凋亡过程中起着重要的抗病毒作用;同时,GRIM-19是一种小的核蛋白,可能协助转运凋亡激活蛋白进入细胞核。
信号传导与转录激活子(signaltransducerandactivatoroftranscription-3,STAT3)是一种存在于细胞浆、与酪氨酸磷酸化信号通道偶联的双功能蛋白,STAT3存在于线粒体和主要组织中,编码STAT3的基因定位于人类第12号染色体上(q13至q14-1)。
近年研究表明STAT3在多数肿瘤细胞中均有异常的高表达,对肿瘤的发生起着关键作用。
JAK-STAT3通路是一条极快速的从细胞外到细胞内的信号传导通路。
有研究表明细胞因子信号抑制物(suppressorofcytokinesignaling,SOCS)蛋白通过调节STAT3的活化而造成其下游基因表达的差异。
同时,在STAT3阴性的小鼠心脏中,电子传递链复合体I和II表现出选择性缺陷和活性降低;表明STAT3对电子传递链功能的优化和保持呼吸链的效率方面起着重要作用。
STAT3的转录激活域TAD,尤其是S727残端,是GRIM-19的重要结合区域。
实验证明S727突变可消除两者的结合;GRIM-19被认为是STAT3表达和激活的阴性调节子,组成性激活的STAT3上调抗凋亡基因的作用能被GRIM-19所抑制。
食管鳞癌组织中GRIM-19的表达及意义

食管鳞癌组织中GRIM-19的表达及意义陈铎;张牧霞【摘要】目的探讨干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义.方法运用免疫组化技术检测68例食管鳞癌、35例癌旁不典型增生及68例正常食管黏膜组织中GRIM-19蛋白表达;采用TUNEL方法检测食管鳞癌组织中的细胞凋亡.结果 1)GRIM-19蛋白在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为80.9%(55/68)、34.3%(12/35)和11.8%(8/68),两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05);2)食管鳞癌组织中肿瘤细胞的凋亡与GRIM-19蛋白表达有关,GRIM-19蛋白阳性表达组中肿瘤细胞AI为(5.06±0.93)%,显著高于阴性表达组的(1.12±0.06)%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GRIM-19蛋白的低表达可能与食管鳞癌的细胞凋亡有关.【期刊名称】《肿瘤基础与临床》【年(卷),期】2014(027)001【总页数】3页(P5-7)【关键词】干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因-19;食管鳞癌;免疫组化;细胞凋亡【作者】陈铎;张牧霞【作者单位】河北医科大学第三医院实验中心,河北,石家庄,050051;河北医科大学第三医院实验中心,河北,石家庄,050051【正文语种】中文【中图分类】R735.1;R730.23食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,我国是食管癌的高发国家之一,且我国食管癌组织学类型90%以上为鳞癌[1]。
食管癌被公认为一种基因性疾病,有多种癌基因和抑癌基因参与了食管癌细胞的增殖及凋亡等。
干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因-19(gene associated with retinoid-interferon-induced mortality-19,GRIM-19)是GRIMs家族重要成员,其在多种正常组织中表达,参与干扰素和维甲酸诱导的细胞凋亡[2]。
乳腺癌患者骨髓中CK19mRNA的表达及临床意义

乳腺癌患者骨髓中CK19mRNA的表达及临床意义黄艳春;阿先古丽·阿不力孜;封敏【摘要】目的:探讨乳腺癌患者骨髓中CK19mRNA的表达及其临床意义.方法:应用RT-PCR技术检测48例乳腺癌患者和20例乳腺良性病变患者骨髓中的CK19mRNA表达并分析CK19mRNA表达与临床病理因素的关系.同时应用电化学发光技术检测其外周血中CEA和CA153的表达情况.结果:48例乳腺癌患者中15例CK19mRNA阳性,阳性率为31.25%;乳腺良性病变患者骨髓中未检测到CK19mRNA的表达.CK19mRNA表达与乳腺癌分期有关(P<0.05),与年龄和淋巴结转移状况无显著性相关(P>0.05),与外周血中CEA(r=0.329,P=0.002)和CA153(r=0.312, P=0.002)异常升高呈正相关.结论:CK19mRNA可作为检测乳腺癌患者骨髓微转移的分子指标之一,可为乳腺癌患者的治疗和预后判断提供帮助.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2009(032)003【总页数】3页(P312-314)【关键词】乳腺肿瘤;骨髓微转移;细胞角蛋白19;逆转录聚合酶链反应【作者】黄艳春;阿先古丽·阿不力孜;封敏【作者单位】新疆医科大学附属肿瘤医院检验科,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学附属肿瘤医院检验科,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学附属肿瘤医院检验科,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R737.9;R34乳腺癌是妇女中最常见的恶性肿瘤,是危害妇女健康的主要恶性肿瘤。
全世界每年约有120万妇女发生乳腺癌,有50万妇女死于乳腺癌。
而影响其预后的主要原因是远处转移。
临床发现有近30%腋窝淋巴结阴性患者于术后5年内出现复发、转移而导致死亡[1]。
原因是肿瘤细胞在早期即发生远处转移,而血行播散是乳腺癌转移的重要途径。
骨髓独特的解剖及血流特点,易导致瘤细胞的集聚并形成转移灶,因此,乳腺癌易发生骨转移,成为影响患者预后的重要因素。
CEA mRNA及CK19 mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

基金项 目: 西 壮 族 自 治 区 科 技 厅 自 然 基 金 ( 号 : 科 自 广 编 桂
0408 ; 5 2 7 ) 广西壮族 自治区科技厅 青年基 金 ( 编号 : 科 桂 青 0 2 0 7 786 ) 作者单 位 : 徽省 宿州市 皖北煤 电集 团总 医院心胸 外科 , 安 宿州
g b l i t i vlm n em a au , fv n iu r eke c o a ( E l a da o c ou ea dt envle l e tc l a j t nrt P R)a dp a o t( F , e o s l h e t r ap ei e n ekf w r e P R) t l a h t f ii a ss l ou eo 一em na’s n add v t n( mao1 一D )cr ci au . s l i o nm l yt i v lm f 6 sg e t me m oc 1 l t d r ei i T s 6S % a ao o et nvle Reut r o s
2 4 1 3 01
确 诊者 , 中男 3 例 , 1 其 1 女 7例 , 龄 3 7 5 . 年 7~ 7( 66 ± . ) , 中 I期 1 87 岁 其 8例 , Ⅱ期 1 2例 , Ⅲ期 1 3例 ,
广西医科大学第一附属医院心胸外科 , 南宁 作者简介 : 丁
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确度 。
达及与临床病理参数之间的相关性 , 并进一步探讨 其作为分子标志物用于 N C C微转移诊断 的可行 SL
性。
关键词
非小细胞肺癌 ; 周血 ; 外 癌胚抗原 信使 核糖核酸 ; 细
1 材料 与 方法
21 0 1—1 0—0 收 9接
子宫颈癌组织中GRIM-19的表达及其意义

Ex r s i n o p e so f GRI - 9 a d is ci c lsg fc nc n c r i a a c n m a M 1 n t l a i ni a e i e v c lc r i o ni i
WE igZ U Qn , N igya , U Qa—i , U u ,H O We—og Z O ig I n ,H igWA G Qn—un X i qa G I n Z A i n ,H UY n Y n n Y d
(Mo clr a oao b ec ad Gncl y A l t n u P oi il o i l A h i dcl nvrt A h i rv c e l u brtr o s r s n y e o , f i e A h i r n a s t , nu i i sy nu oi eKy e aL y fO t i og f ad i v c H pa Me a U e i/ P n
采用 R .C 免疫组化 和 Wet nbo方 法分别检 TP R、 s r l e t R .C TP R结 果 显示 子宫 颈癌 组织 中 G I 1 R M一9在正常宫颈组 摘要 : 目的 研究 G I 1 R M一9在子宫颈癌组织中的表达情况及 意义 。方法
测4 0例 子宫 颈癌 患者 和 3 0例 正 常人 的宫 颈癌组 织 中 G I 1 RM一9的表 达 情况 。结果
G I 1 RM一 9的表达明显低于正常宫颈组织 , s r l 结果显示 G I 1 Wet nb t e o R M一9蛋 白水平在子 宫颈癌和正 常宫 颈组织 中的表达 阳性 率分别为 1. %和 10 , 25 0 % 子宫颈癌组织 与正 常宫颈组织 比较差异有统计学意 义( 0 0 ) P< . 1 。结论
CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA在非小细胞肺癌患者外周血微转移中的表达和意义

sre stengt ecnrl.R s l 】 mog5 eih r lo a pe o S L a et,h xrsinrt o E evd a ea v o t s【 e u s A n 9pr ea bodsm lsf m N C C p tns teepes a f A h i o t p l r i o e C
Z A Xi,LU Y —i H O a I a l 。ZH G is e g,WAN L ( i tDe a me to dcn fIn rMo g l tn mo s R go op AN L— h n G i Fr p  ̄ n fMe iie o n e n oi Auo o u e in C rs s a
m A, K 9 N n U XmR A w s2 . 1/9,3 %(05 )n 76 (4 9 , set e ;n3 lo mpe o RN C 1mR A a d L N N a 37 45) . 2 /9 a d . 3 / ) r p c vl I 1 ods lsrm %( 38 5 % 5 e i y b a f
赵 霞 ,刘 亚 丽 , 张 立 生 , 王 丽 ( 武警内 蒙古总队医院内 科,内 一 蒙古 呼和浩特 0 0 1 10 ) 3
摘 要 :【 目的 】 研究非小 细胞肺癌 外周血 C Am N 、 K 9 R A L N R A的表达及联 合检测的临床意义 。方法 】 E R A C 1m N 和 U Xm N 【 采
mR A对 判断病理类型有一定临床意义 。L N N N U XmR A表达 阳性率 与肺癌 T M分期 、 N 细胞分化程度有关。
关 键 词 :C A m N C 1 R A; U Xm N 非 小 细 胞 肺 癌 ; 转 移 ; T P R E R A; K 9m N L N R A; 微 R —C
检测CEA mRNA、CK19 mRNA和端粒酶监测肺癌血液转移的应用价值
“ 假阳性率” 分别为32 ( 9) .%9 9) . 3 9) .% 3 3、 7 ( 3、 2 / 3。 / 9 / 3 %( 表1 悯血三 标志 夕 种 物检测 【 %) 结果 例( 】
与非肿 瘤组 , 组比 较 : <0 0 健康 .1
22 不 同类型肺癌 患者外周_ E .  ̄C AmR A、K1 mR A、 N C 9 N 端粒酶活性检测结果 见表2 不 同类型肺癌组问比较 : 。 小 细胞肺癌患者C A mR A 阳性率显著低于其它类型肺癌 E N ( 尸<00) 不 同类型肺癌C 9mR A、 . ; 5 K1 N 端粒酶阳性率 比
血, 充分混匀 ,"离心分离提取有核细胞 , 4 C 用预冷的无R NA 酶生理盐水充分洗涤有核细胞 , 7 ℃密封保存 , 一0 用于检测 C A m NA、 K1 R E R C 9m NA和端粒酶 。 13 检 测 方 法 ①应用 逆 转 录一套 式一聚合 酶链 反 应 . (T N - C ) R - P P R 检测C A mR A和C 9mR A, E N K1 N 引物参 照文南 由上海细胞生物研究所合成, 逆转录试剂盒和核 酸标准物( re) Makr 为德国Po g 公司产品, rmea 出现18 p 8b
表3 分期 患 阔 血 不同 脚言 者 三种标 检测结 例( 】 志物 果【 %)
2结果
21 三 组外 周. C AmR A C 9 N 、 粒 酶 活 性 检 .  ̄ E - N 、 K1mR A 端
测 结 果 见 表1肺 癌 组 患 者C A [ A、 K1 N 。 E C 9mR A 和端粒 酶的阳性率均明显高于非肿瘤组和健康组 , 差异具 有统计 学意义 <00 )非 肿瘤 组: E R .1。 C A m NA阳性 结 果分别为2例肺结核、 例 炎性假瘤 , K1 R A 的阳性 1 C 9m N
Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结中ck19、肺特异性蛋白XmRNA表达与微转移及预
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临床肺科 杂 志
2 0 1 7年 5月 第 2 2卷第 5期
I期 非 小 细 胞 肺 癌 淋 巴 结 中 c k 1 9 、 肺 特 异性 蛋 白 X mR NA
表 达 与微 转移 及 预后 的相 关性 研 究
陆薇 梁克 诚 吴 汉 刚 梁新 梅 覃 灏
【 摘要 】 目的 研 究 I期非小细胞肺 癌淋巴结 中细胞 N X )m R N A
时 间显 著 低 于 未 表 达 患 者 , 与 N1 和N 2均 表 达 患 者 的 生 存 时 间 差 异 不 显 著 。 结 论 C K 1 9和 L U N X m R N A可
作为 I 期非小细胞肺癌患者淋巴结微转移的标记物 , 腺癌患者和 I B期患者淋 巴结微转 移率 更高 , N 2淋巴结 微转移是患者影响 I 期非小细胞肺 癌患者预后的主要 原因 , N 2淋巴结微 转移 患者 的预后更差 。
别做 H E染色 和免疫组化检测 C K 1 9 、 L U N X mR N A因子 表达 。结果 均有 C K 1 9 、 L U N X mR N A表达 , 肺炎性假瘤病例患者淋 巴结未见 C K 1 9 、 L U N X m R N A表达 。2 2例淋 巴结 可见 C K 1 9表 达 , 腺癌 1 7例 , 鳞癌 5例 ; I A期 8例 , I B期 1 4例。l 5例 淋巴结可见 L U N X m R N A表达 , 腺癌 1 1 例, 鳞癌 4例 ; I A期 5例 , I B期 1 0例。腺癌患者淋 巴结 C K 1 9 、 L U N X mR N A表 达显 著高于鳞癌患 者 , I B期 患 者淋 巴结 C K1 9 、 L U N X mR N A表达显著 高于 I A期患者。鳞癌患者与腺癌患者 、 I B期与 I A期患者 的 N l淋 巴结 C K 1 9、 L U N X m R N A表达差异不 明显 , 鳞癌 患者 与腺 癌患 者 、 I B期与 I A期 患者 的 N 2淋 巴结 C K1 9、 L U N X m R N A表 达差 异显 著( P< 0 . 0 5 ) 。仅 N 1淋巴结表达 C K 1 9 、 L U N X m R N患者 的生存 时间 6 2 . 5个月 , 仅 N 2淋巴结 表达 C K 1 9 、 L U N X u t R N患者的生存 4 0 . 2个月 , N 1和 N 2均 表达 C K 1 9 、 L U N X mR N患者的生存时间 3 6 . 6个月 , N I 和N 2均为表达 C K 1 9 、 L U N X u t R N患者 的生存 时间为 6 4 . 8个 月。仅 N I 表 达患者与仅 N 2表达 及 Nl 十N 2均表达患者 的生存时 间差异有统计学意义 , 与未表达 患者 的差异 不显著 。仅 N 2表达 患者 的生 存
MAGE-As_蛋白及mRNA_在肺癌患者的表达水平变化及其临床意义
angiogenesis in an in vitro model of ischemic injury by pro-moting Akt phosphorylation and subsequent hypoxia induc-ible factor-1αupregulation[J].Metab Brain Dis,2018,33 (5):1679-1688.ʌ文章编号ɔ1006-6233(2023)06-0937-05MAGE-As蛋白及mRNA在肺癌患者的表达水平变化及其临床意义李艳勇,㊀赵雪强,㊀陈家文,㊀杨㊀革,㊀肖智宏(桂林医学院第二附属医院,㊀广西㊀桂林㊀541199)ʌ摘㊀要ɔ目的:探讨黑色素瘤相关抗原(MAGE)-As蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义㊂方法:选取2015年1月至2020年1月在我院治疗的非小细胞肺癌患者88例,同时选取癌旁组织作为对照,采用Western blot检测肺癌和癌旁组织MAGE-As蛋白表达,RT-PCR检测肺癌和癌旁组织MAGE-As mRNA表达㊂结果:非小细胞肺癌组织MAGE-As蛋白及mRNA相对表达量分别为(0. 343ʃ0.101)和(0.728ʃ0.112),明显高于癌旁组织(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量为(0.385ʃ0.102),明显高于Ⅰ~Ⅱ期肺癌组织(P<0.05);不同性别㊁年龄㊁肿瘤直径㊁病理类型㊁分化程度肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期㊁中低分化程度肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量为(0.762ʃ0.112)和(0.742ʃ0.107),明显高于Ⅰ~Ⅱ期和高分化肺癌组织(P<0.05);不同性别㊁年龄㊁肿瘤直径㊁病理类型肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);肺癌组织MAGE-As mRNA高表达和低表达患者中位总生存期为33个月和44个月,MAGE-As mRNA高表达和低表达患者生存率有所差异(P<0.05)㊂MAGE-As蛋白高表达和低表达患者中位总生存期差异比较无统计学意义(P>0.05)㊂结论:MAGE-As 蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中表达上调,与病情严重程度有关,同时MAGE-As mRNA高表达患者预后较差㊂ʌ关键词ɔ㊀黑色素瘤相关抗原-As;㊀蛋㊀白;㊀mRNA;㊀非小细胞肺癌ʌ文献标识码ɔ㊀A㊀㊀㊀㊀㊀ʌdoiɔ10.3969/j.issn.1006-6233.2023.06.011Changes in Expression Levels of MAGE-As Protein and mRNA in Lung Cancer Patients and Their Clinical SignificanceLI Yanyong,ZHAO Xueqiang,CHEN Jiawen,et al(The Second Affiliated Hospital of Guilin Medical College,Guangxi Guilin541199,China)ʌAbstractɔObjective:To investigate the expression and clinical significance of melanoma associated an-tigen(MAGE)-As protein and mRNA in non-small cell lung cancer.Methods:A total of88patients with non-small cell lung cancer treated in our hospital from January2015to January2020were selected,and the adjacent tissues were selected as the control,the expression of MAGE-As protein in lung cancer and adjacent tissues was detected by Western blot,and the expression of MAGE-As mRNA in lung cancer and adjacent tis-sues was detected by RT-PCR.Results:The relative expression levels of MAGE-As protein and mRNA in NSCLC tissues were(0.343ʃ0.101)and(0.728ʃ0.112),which were significantly higher than those in adjacent tissues(P<0.05);the relative expression of MAGE-As protein in stageⅢ~Ⅳlung cancer was (0.385ʃ0.102),which was significantly higher than that in stageⅠ~Ⅱlung cancer(P<0.05);there were no significant difference in the relative expression of MAGE-As protein in different gender,age,tumor diameter,pathological type and differentiation degree(P>0.05);the relative expression of MAGE-As mRNA㊃739㊃ʌ基金项目ɔ广西自然科学基金项目,(编号:2022JJA140029)in clinical stageⅢ~Ⅳand moderately and moderately differentiated lung cancer tissues were(0.762ʃ0. 112)and(0.742ʃ0.107),which were significantly higher than those in stageⅠ~Ⅱand well differentia-ted lung cancer tissues(P<0.05);there were no significant difference in the relative expression of MAGE-As mRNA in different gender,age,tumor diameter and pathological type(P>0.05).The median overall survival of patients with high and low MAGE-As mRNA expression in lung cancer tissues was33and44months,with a difference in survival between patients with high and low MAGE-As mRNA expression(P<0.05).The difference in median overall survival between patients with high and low MAGE-As protein expression was not statistically significant(P>0.05).Conclusion:The expression of MAGE as protein and mRNA are up-regu-lated in non-small cell lung cancer,is related to the severity of the disease,and the prognosis of patients with high expression of MAGE As mRNA is poor.ʌKey wordsɔ㊀Melanoma associated antigen As;㊀Protein;㊀mRNA;㊀Non-small cell lung cancer㊀㊀肺癌是常见胸部恶性肿瘤,其中80%以上为非小细胞肺癌,目前肺癌新发病例和新增死亡病例逐年升高,随着现代治疗手段的发展,肺癌诊治取得了显著的提高,但是肺癌患者5年生存率仍低于20%,近年来个体化药物㊁生物标记物逐渐在临床引起重视,越来越多的研究朝向生物靶向治疗[1]㊂黑色素瘤相关抗原是近年来发现可以被细胞毒T淋巴细胞识别的少数肿瘤特异性抗原之一,其在肺癌中总表达率可以达到46%,但是目前临床对于黑色素瘤相关抗原组织表达和基因结构的研究临床报道说法不一,尤其是在非小细胞肺癌中的研究相对少见[2]㊂本研究分析了黑色素瘤相关抗原(MAGE)-As蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中的表达,以期为临床提供指导和依据,现汇报如下㊂1㊀资料与方法1.1㊀一般资料:2015年1月至2020年1月㊂我院治疗的非小细胞肺癌患者88例,其中男性47例,女性41例;年龄<60岁患者43例,ȡ60岁患者45例;病理类型:腺癌33例,鳞癌55例;临床分期:Ⅰ~Ⅱ期50例,Ⅲ~Ⅳ期38例;分化程度:高分化23例,中低分化65例㊂同时选取88例癌旁组织(>5cm)作为对照,纳入标准:①均经病理学确诊为非小细胞肺癌;②术前无放化疗等治疗史;③临床随访资料齐全㊂排除标准:①复发或合并有其他系统恶性肿瘤;②有慢性阻塞性肺疾病等其他肺部疾病㊂1.2㊀实验方法:MAGE-As蛋白表达检测:取适量肺癌组织和癌旁组织置于匀浆器中,加入裂解液进行裂解匀浆30min,提取蛋白,完成后取裂解液于4ħ下12000rpm进行离心,离心时间5min,完成后取上清液留取备用,并采用BCA法对蛋白进行定量分析,留取剩余蛋白提取液备用;制备蛋白负载缓冲液,将上述蛋白质样本溶液加入凝胶孔中,进行电泳分析值样本分离完毕,采用半湿法进行转膜,孵化,漂洗后记录各条带的灰度值,本实验以GAPDH为内参,计算MAGE-As蛋白的相对含量㊂MAGE-As mRNA检测:从肺癌组织和相应癌旁组织中获取样本,使用赛默飞世尔科技(中国)有限公司的TRIzol试剂,按照说明书的指导进行组织总RNA的提取㊂确保TU-1810S型紫外分光光度计已经安装好,并且仪器处于正常工作状态,根据仪器的操作手册进行仪器的预热和校准,根据测定得到的吸光度值和已知的吸光度-浓度标准曲线,计算样品的RNA浓度㊂准备反转录合成cDNA,准备PCR反应混合液,包括cDNA样品㊁引物㊁荧光探针㊁聚合酶和PCR反应缓冲液等㊂将PCR反应混合液加入PCR管或反应管中,确保样品充分混合㊂设置PCR扩增仪的温度程序,包括初始变性步骤(95ħ5min)和循环扩增步骤(95ħ45s㊁65ħ45s㊁72ħ90s,共31个循环)㊂在PCR扩增仪中运行PCR反应,同时监测荧光信号的累积㊂琼脂糖凝胶(1.5%)电泳PCR产物根据提供的信息,使用2-ΔΔCt公式计算MAGE-AsmRNA的相对表达量㊂在第一轮PCR中,使用MAGE-1引物(F:5'-ACTGGCCCTGGCTGCAAC-3';R:5'-GCCCT-GACCAGAGTCATCAT-3')扩增长度为993bp的MAGE-1基因片段,使用MAGE-1-1引物(F:5'-ACTGGCCTTGGCTGCAAC-3';R:5'-CCCT-GACGAGAGTCATCATG-3')扩增长度为965bp的MAGE-1基因片段㊂在第二轮PCR中,使用MAGE-2引物(F:5'-ACTGGCCCTGGCTGCAAC-3';R:5'-AGGCCCTGGCCTGGTG-3')扩增长度为914bp的MAGE-2基因片段,使用MAGE-2-2引物(F:5'-ACTGGCCTTGGCTGCAAC-3';R:5'-AGGCCCT-GGGCTTGGTG-3')扩增长度为893bp的MAGE-2基因片段㊂作为内参,使用GAPDH引物(F:5'-ACCT-GACCTGCCGTCTAGAA-3';R:5'-TCCACCACCCTGT-㊃839㊃TGCTGTA-3')㊂1.3㊀随访方法:对患者住院信息㊁门诊复查及电话进行记录,同时采取家访㊁电话等多种方式对患者信息进行跟踪随访,获取临床资料㊂1.4㊀统计学处理:数据分析采用SPSS22.0,采取Kol-mogorov-Smirnov正态性检验,确认MAGE-As蛋白㊁mRNA等数据服从正态布,以( xʃs)形式表示,独立样本t检验分析各指标间差异;生存曲线采用Kaplan-Meier法描绘,生存率比较采用Lank-Log法比较㊂检验水准为0.05㊂2㊀结㊀果2.1㊀非小细胞肺癌和癌旁组织MAGE-As蛋白及mRNA表达比较:非小细胞肺癌组织MAGE-As蛋白及mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)㊂见表1㊂表1㊀非小细胞肺癌和癌旁组织MAGE-As蛋白及mRNA表达比较组别例数MAGE-As蛋白相对表达量MAGE-As mRNA相对表达量非小细胞肺癌880.343ʃ0.1010.728ʃ0.112癌旁组织880.113ʃ0.0420.215ʃ0.092 t19.72533.202 P<0.001<0.0012.2㊀MAGE-As蛋白与患者临床病理特征:临床分期Ⅲ~Ⅳ期肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量明显高于Ⅰ~Ⅱ期肺癌组织(P<0.05);不同性别㊁年龄等肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)㊂见表2㊂表2㊀MAGE-As蛋白与患者临床病理特征临床病理特征例数MAGE-As蛋白相对表达量t P性别男470.341ʃ0.100-0.1850.853女410.345ʃ0.102年龄<60岁430.346ʃ0.1040.2720.786ȡ60岁450.340ʃ0.103肿瘤直径<5cm500.342ʃ0.101-0.0910.928ȡ5cm380.344ʃ0.103病理类型腺癌330.340ʃ0.105-0.2140.831鳞癌550.345ʃ0.107临床分期Ⅰ~Ⅱ500.311ʃ0.103-3.3520.001Ⅲ~Ⅳ380.385ʃ0.102分化程度高分化230.345ʃ0.1050.1190.905中低分化650.342ʃ0.1032.3㊀MAGE-As mRNA与患者临床病理特征:临床分期Ⅲ~Ⅳ期㊁中低分化程度肺癌组织MAGE-As mRNA 相对表达量明显高于Ⅰ~Ⅱ期和高分化肺癌组织(P< 0.05);不同性别㊁年龄㊁肿瘤直径㊁病理类型肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)㊂见表3㊂表3㊀MAGE-As mRNA与患者临床病理特征临床病理特征例数MAGE-As mRNA相对表达量t P 性别男470.730ʃ0.1080.1760.861女410.726ʃ0.105年龄<60岁430.724ʃ0.110-0.3430.733ȡ60岁450.732ʃ0.109肿瘤直径<5cm500.712ʃ0.108-1.5730.119ȡ5cm380.749ʃ0.111病理类型㊃939㊃腺癌330.731ʃ0.1090.2050.838鳞癌550.726ʃ0.112临床分期Ⅰ~Ⅱ500.702ʃ0.108-2.5410.013Ⅲ~Ⅳ380.762ʃ0.112分化程度高分化230.688ʃ0.106-2.0850.040中低分化650.742ʃ0.1072.4㊀不同MAGE -As mRNA 表达患者总生存期比较:MAGE -As mRNA 高表达(ȡ0.728)患者中位总生存期为33个月,明显短于MAGE -As mRNA 低表达患者44个月,MAGE -As 高表达和MAGE -As mRNA 低表达患者生存率有差异(χ2=4.416,P =0.036<0.05),见图1㊂图1㊀不同MAGE -As mRNA 表达患者总生存期曲线图2.5㊀不同MAGE -As 蛋白表达患者总生存期比较:MAGE -As 蛋白高表达(ȡ0.343)和低表达(<0.343)患者中位总生存期分别为36个月和36个月,两组生存率比较差异无统计学意义(χ2=1.003,P =0.316>0.05),见图2㊂图2㊀不同MAGE -As 蛋白表达患者总生存期曲线图3㊀讨㊀论肺癌已成为威胁国人生命安全的高发病率疾病,目前发病率和死亡率均位居男性群体首位,早期对肺癌进行诊断并开展积极地治疗对改善患者预后意义重大[3]㊂近年来肿瘤免疫学的飞速发展让现代医学发现肿瘤形成既同恶性肿瘤细胞内在遗传背景相关,同时与人体免疫功能密切相关[4]㊂以往临床诊断肺癌常用手段包括病理检查㊁影像扫描,但是部分患者早期症状不明显,因此检查缺乏特异性,尤其是对于微小病变检出效果不佳[5]㊂随着现代细胞生物学发展特异性肿瘤标记物在恶性肿瘤诊断中发挥了重要作用,细胞凋亡对于肿瘤的发展具有重要影响,肿瘤发生与细胞凋亡紊乱有关,这一过程中基因的改变会导致细胞转化的突变,最终导致恶性肿瘤形成并不断进展[6]㊂黑色素瘤相关抗原(Melanoma -associated anti-gens ,MACE )是由成千上万㊁多种多样的免疫球蛋白(Ig )分子所组成,且属于MAGE 家族[7]㊂其中MAGE -A 家族包括12个家族成员,包括喉鳞状细胞癌㊁食管癌等㊂然而MACE -A 家族在非小细胞肺癌中的表达尚不清楚[8]㊂其中有较高表达的MACE -As 可参与三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化的调节㊂MACE -As 在肺癌中的研究尚少㊂本研究分析了黑色素瘤相关抗原(MAGE )-As 蛋白及mRNA 在非小细胞肺癌中的表达情况,MAGE 基因为可编码并产生蛋白家族,可在睾丸组织等多种癌组织中表达异常㊂黑色素瘤相关抗原主要表达在各种肿瘤组织中,正常的组织中则仅在睾丸中表达,是癌睾丸抗原,目前临床对于黑色素瘤相关抗原蛋白生物学功能并未完全清楚,有学者发现其末端107氨基酸残疾能够部分与基因相关锌指蛋白1有关,可以增加体内p53的水平导致细胞发生凋亡[9]㊂还有研究显示黑色素瘤相关抗原蛋白具有造成肿瘤高侵袭性作用,参与早期肿瘤形成同时能够调控细胞增殖与侵袭,表达可能同肺癌耐药相关,而且表达率越高在短时间内更容易发生耐药,提示了黑色素瘤相关抗原同肿瘤生长关系密切[10]㊂本研究还对患者临床病理情况进行分析,发现临床分期Ⅲ~Ⅳ期组织MAGE -As 蛋白相对表达量明显高于Ⅰ~Ⅱ期组织,提示MAGE -As 蛋白表达与肿瘤分期具有一定关系㊂临床分期Ⅲ~Ⅳ期㊁中低分化程度组织MAGE -As mRNA 相对表达量明显高于Ⅰ~Ⅱ期和高分化组织,提示MAGE -As mR-NA 表达与肿瘤分期和分化程度具有一定关系㊂MAGE 基因表达和组蛋白乙酰化状态之间具有一定关联,组蛋白乙酰化可以利用甲基化CpG 结合蛋白同甲基化DNA 序列紧密结合,组蛋白去乙酰化酶活性得到提升,对MAGE 表达调控造成影响[11,12]㊂本研究发现,非小细胞肺癌组织MAGE -As 蛋白㊃049㊃及mRNA 相对表达量明显升高,提示非小细胞肺癌患者存在MAGE -As 蛋白及mRNA 高表达状态㊂MAGE -As 蛋白在非小细胞肺癌组织中高表达,其能促进肺癌进展㊂有研究发现,MAGE -As 蛋白在肺癌细胞核中积累,抑制肺癌细胞凋亡,并使肺癌细胞对化学治疗剂敏感性降低,意味着MAGE -As 蛋白是肿瘤促进因子,MAGE -As 由蛋白酶体加工以产生抑制凋亡的C 末端片段,其最终降低p53活性,从而抑制细胞凋亡[13]㊂随着年龄增长,以及基因不稳定因素的增加,DNA 的低甲基化状态可诱导该基因的表达,导致肿瘤易感性增加[14]㊂从而提示非小细胞肺癌患者存在MAGE -As 蛋白及mRNA 高表达状态㊂本研究还分析了非小细胞肺癌组织MAGE -As 蛋白及mRNA 表达在患者中的情况,同时进一步证实了同分期和分化程度具有一定的关系,为临床开展早期诊断和评估肺癌患者分期㊁类型㊁转移情况㊁分化程度奠定了一定的依据,但因本研究纳入样本数量不多,以及随访时间短,因此还需要开展多中心㊁大样本量㊁长期随访深入研究㊂综上所述,MAGE -As 蛋白及mRNA 在非小细胞肺癌中表达上调,与病情严重程度有关,同时MAGE -As mRNA 高表达患者预后较差㊂ʌ参考文献ɔ[1]㊀谢忠海,沈琦斌,李冬,等.黑色素瘤抑制性活性蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其对肿瘤生长及转移的作用研究[J ].中国卫生检验杂志,2020,30(5):570-572,588.[2]㊀何宗林,杜先智,邓嘉,等.黑色素瘤抗原A3mRNA 表达与NSCLC 发生发展的关系[J ].实用癌症杂志,2020,35(10):1612-1614.[3]㊀张扬,邓明扬,李睿娟,等.以 黑骨髓 伴白血病样表型为首发表现的骨髓转移性黑色素瘤病例报道并文献复习[J ].临床血液学杂志,2020,33(5):338-340,343.[4]㊀李晓玲,黄仲,刘美莲.胸水细胞蜡块与"新鲜"胸水在肺腺癌EGFR 基因检测中的应用[J ].海南医学,2020,31(20):2668-2670.[5]㊀王成吕,聂玉洁,潘润桑,等.三种新兴的免疫检查点分子在肿瘤免疫治疗中的研究进展[J ].现代肿瘤医学,2022,30(7):1308-1312.[6]㊀邹燕萍,章于潇,陈海欣,等.7项肿瘤相关自身抗体在早期非小细胞肺癌中的诊断价值[J ].浙江医学,2021,43(18):1988-1991,1995,2051.[7]㊀Alexander M ,Kim SY ,Cheng H.Update 2020:managementof non -small cell lung cancer [J ].Lung ,2020,198(6):897-907.[8]㊀Thai AA ,Solomon BJ ,Sequist 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disease defines potentially cured popula-tion in localized non -small cell lung cancer [J ].Cancer Discov ,2022,12(7):1690-1701.ʌ文章编号ɔ1006-6233(2023)06-0941-06微炎症状态及血清PTH (1-84)BALP 水平检测在维持性血液透析肾性骨病中的临床意义买尔哈巴㊃买买提,㊀王㊀婷,㊀帕热旦木㊃托乎提,㊀韩媛媛(新疆医科大学第一附属医院肾脏疾病血液透析科,㊀新疆㊀乌鲁木齐㊀830000)ʌ摘㊀要ɔ目的:分析微炎症状态及血清全长甲状旁腺激素[PTH (1-84)]㊁骨特异性碱性磷酸酶㊃149㊃ʌ基金项目ɔ新疆维吾尔自治区自然科学基金项目,(编号:2022D01C484)ʌ通讯作者ɔ韩媛媛。
非小细胞肺癌GRIM-19和STAT3的表达及临床意义
脏损 伤的发生 , 有 良好的预 防保 护作用。 具
20 , 11) 0 62 9 . 0 83 (1: 8 -0 1 2 [ 李有贵 , 5 】 时连根 . 丝胶效用 的研究进展[. J 蚕桑通报 , 0 , ] 2 4 0 3( : _1. 51 1 -3 )0 【】 封平 . 丝 蛋 白的结 构及 食用性 研 究【 . 品研 究与 开 6 蚕 J 食 】 发 ,042( :1 5 . 20 , 6 5- 4 5) [ 陈华 , 良均 , 7 ] 朱 闵思佳 , . 丝丝胶 蛋 白的结构 、 等 蚕 性能及 利用[. J 功能高分子 学报 ,011( : 4 37 ] 20 , 3 3 - 4 . 4 )4 【】 付秀美 , 8 马宝君 , 赵立 军 , . 等 丝胶 对2型糖尿病 大 鼠血糖 的影响【 . J 承德医 学院学报 , 0 ,5 ) 5- 5 . 】 2 82( : 1 33 0 43 [ 崔静 , 9 】 李竟 , 王蜀 鄂 . 素上皮 衍生 因子 和血管 内皮生长 色 因子 在 糖尿 病 大 鼠肾脏 的不平 衡 表达【] 中 国微 循环 , J. 20 ,2 ) 5- 5 . 081( : 5 17 31 【 】钟海 花 , 1 0 明扬 , 沁 .P R0 激动 荆对 高糖 刺 激 的肾 系 万 PA 【 膜细胞P D E F和V G R A表达的影 响【. E Fm N J 交通医学 , 】 20 ,21: - 7 082( 1 1. )4 [ l uH, e , o e 1 】Li R nGJ Co p r WL, t 1I e t iaino e e .d n i c t fh a f o t
eso te t ib ts r g n h i ko lci cd ss r a,ro ra i a e u sa dter fa t a ioi o h n d e d s c
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蛋白表达情 况 , 并分 析 G I 1 R A表达与 临床 病理 参 R M一 m N 9
数之 间的关 系。结果 肺癌组织 中 G I 1 R A表 达水 R M一9m N
平低 于癌 旁 组织 , 组 间 差 异 有 显 著 性 ( 两 P<0 0 , 且 .5) 并 mN R A表 达水 平 的降 低伴 随有蛋 白表 达水 平 的相 应 下 降。 G I 1 N 水 平 与 临 床 病 理 分 期 之 间 有 关 联 ( < R M一9mR A P
00 ) I一Ⅱ期 G i 9m N .5 , r R A表 达量显 著高 于 Ⅲ ~Ⅳ期 ml 中的表达 , 而与患者性别 、 年龄 、 组织分 型 、 吸烟 指数 之 间均 无关联 ( P>00 ) .5 。结 论
关。
11 标 本 收 集 收 集 20 . 06年 7月 ~20 0 7年 5月
心, 经病理证实为肺癌 。癌旁组织标本取 自 距肿瘤 可视 边界 5e 以上 区域 的组 织 , m 病理 检查 未发 现癌
细胞 , 两种 标 本分 别采 集 后放 入 一8 0℃冰箱 中保存 备 用 。4 O例 肺 癌 患 者 年 龄 4 3~7 ( 11 4 .2 7 6 .8-90 ) - 岁; 3 男 4例 , 6例 ; 烟指 数 > 0 女 吸 40支 年者 2 3例 , ≤40 支 年 者 1 O 7例 ; 照 2 0 按 0 2年 国 际 抗 癌 联 盟 ( IC)制 定 的 T M 分 期标 准 : 期 l 、 UC N I 5例 Ⅱ期 1 7 例、 Ⅲ期 7例 、 Ⅳ期 1例 ; 组织 分 型 : 癌 1 鳞 5例 、 癌 腺 1 6例 、 腺鳞 癌 6例 、 细胞 癌 2例 、 细 胞 癌 l例 。 小 大
G I 1 R M.9基 因 的 突 变 。 而 对 肺 癌 组 织 中 G I 1 R M. 9
12 材 料 和 主 要 试 剂 .
Ti l购 于 美 国 Iv rgn ro z n ioe t
公 司 ; 转 录 一聚 合 酶链 反 应 ( TP R) 剂 购 于 逆 R —C 试 Po g rmea公 司 ;R —C 所 需 引物 由大 连 宝 生 物 工 TP R 程 ( a a a 公 司合 成 ; RM.9单 克 隆 抗 体 为 美 TK R ) GI 1 国马里 兰 大学 K lao n a kl u教授 惠赠 ;tuui v a otbl . n单克 隆抗体 、 根过 氧 化 物酶 ( R ) 记 的兔 抗 鼠二 抗 辣 H P标
赵 继京 叶 , 静 黄 , 燕 ,肖卫 华 刘 荣玉 ,
摘要 目 的 了解 干 扰 素/ 甲酸 诱 导 凋 亡 相 关 基 因 维 ( R M一 )在肺 癌 中的表达及其 临床 意义。方法 G I 1 9 R —C TP R
R .C TP R检 测 了 4 0例 肺 癌 组 织 中 G I 1 R A RM一 m N 9 的表 达 , s r lt 证 2 Wet nbo 验 e 0例 肺 癌 组织 中 G I RM一
检测 4 0例肺癌患者 的癌 组织和癌旁组织 中 G I 1 N R M一 mR A 9
表达水平 , Wetr lt 用 s nbo 法验证 2 e 0例肺癌组织 中 G I 1 RM一 9
1 9蛋白表达水平 , 分析 G I 1 R A与临床病理 RM一 m N 9
特 征之 间 的关 系 , 进一 步探 讨 G I 1 并 RM-9在肺 癌 发
安徽 医科大学第一附属医院胸外科手术切除的原发 性肺 癌标 本 4 0例 , 者 均 未 曾接 受 过 化疗 、 疗 或 患 放
其他 针对 肿 瘤 的治 疗 。 肿 瘤 组 织 标 本 取 自肿 瘤 中
G I 1 R A 的表 达下 降 是 R M一9 m N
肺癌发生 过程 中的重 要事 件 , 能与肺 癌 的发 生及 进 展 有 可 主题词 肺肿 瘤 ; 因,肿瘤 抑制 ; 扰素类 ; 甲酸 ; 转 基 干 维 逆
安徽 医科 大学学报
A t U i rtt d iaiA h i 0 8D c4 ( ) c n e i iMein l n u a v sa s c s 2 0 e ; 6 3
・ 9 5 5・
◇基础 医学 研究 ◇
肺 癌中 G I 1 N R M- mR A的表达及其 临床意义 9
所有程序符合安徽 医科大学第一附属医院负责人体
试 验委员 会 所制定 的伦理 学标 准并 得 到该委 员会 的
批准。
因敲 除 的 方 法 分 离 发 现 的 一 种 细 胞 凋 亡 调 节 因 子 J 。在 一些 原 发 性 肾细 胞 肿 瘤 和 泌 尿 生 殖 系肿 瘤 中 G I 1 达缺 失 或被严 重 抑制 , 肾细胞 肿 RM.9表 用 瘤 细胞 系的 研究 证 实 G I 1 R M一9的 下 调 通 过 增 强 依 赖 S A 3基 因 的表达 而促 进肿 瘤生 长 , TT 并且 首次 表 明 G I 1 有 肿 瘤 抑 制 因 子 作 用 L 。 M x t RM一9具 3 j ai e mo al 证 实 甲 状 腺 hr l 细 胞 肿 瘤 病 例 携 带 有 l 4 ut e h
录聚合酶链反应
自由词 转录信号转导子与激活 子 3 信 号转 导通路 ;
中图分类号 R7 4 2 R 3 95 ; 4 . ; 4 .2 3 . ; 4 . 2 R 3 1 1 R3 9 8
文 献 标 识 码 A 文 章 编 号 10 00—19 (0 8 0 4 2 20 )6—09 0 5 5— 4
干扰 素/ 甲酸诱导 凋 亡相关 基 因 1 gn s 维 9(eea—
s ca e wih r tn i I N—n u e mo tlt 一 9, o itd t ei od—F i d c d raiy 1
G I 1 )是 2 0 R M一9 , 0 0年 由 A gl e a¨ 应 用 反 义基 nel t l