新流二联灭活疫苗田间对比试验
鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗三种佐剂乳化效果比较
77投稿信箱sydk2007@新城疫（ND）和禽流感（AI）是危害养禽业最为严重的两种传染病，广泛分布于世界各国。
这其中，ND 与H9亚型AI 混合感染发病率最高，在临床上最常见，给我国的养禽业造成了严重的经济损失。
国内外普遍使用疫苗（有活苗和灭活苗两种）预防这该疾病，单苗的使用较为普遍，但单苗存在使用不便，两次免疫造成养殖成本上升。
为此研制开发一种安全有效的二联疫苗将两种病毒抗原联合，达到一针防两病的目的，对预防控制危害养禽业的两种主要病原具有重要的实践意义。
灭活疫苗是采用化学或物理方法杀死病原生物所制备的一种用于预防接种的生物制品。
灭活疫苗是先对病毒或细菌培养，然后用加热或化学剂将其灭活。
灭活疫苗即可由整个病毒或细菌组成，也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。
鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗主要是由甲醛灭活后与油佐剂混合乳化制成。
所有的乳化剂分子都是由极性的亲水基团和非极性的亲油基团两部分组成。
而且两部分分处分子两端，形成不对称的结构。
这样的分子结构使得乳化机分子一部分可溶于水，另一部分易于和油相结合。
乳化剂的作用就在于使用机械作用分散所得的液滴不互聚集结。
乳化机在成品质量方面发挥的很大的功效，影响着产品的质量，本文主要通过试验对不同乳化剂进行研究，以便指导生产。
一、材料和方法（一）材料1.试验用主要试剂（如表1）。
2.试验用动物。
试验用SPF 鸡，由哈药集团生物疫苗有限公司实验动物中心提供，饲养在SPF 舍内，由专人负责管理和饲喂，饲料均经Co60照射消毒，饮水用煮沸消毒的常水；试验用SPF 鸡胚，由山东济南斯帕法斯家禽有限公司提供SPF 种蛋，哈药集团生物疫苗有限公司孵化；SPF 鸡血清，SPF 鸡鸡翅静脉采取血液1 ml，3 000 rpm 离心10 min 获得3.试验用疫苗。
鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗样品（A-M、A-F、A-H）。
4.试验用主要仪器（如表2）。
猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗田间试验
2018 年第 3 期 兽医实验室
201701、201702、201703，201704，201705， 由 哈 药 集 团生物疫苗有限公司制备 ；
（2）检验用强毒。猪传染性胃肠炎病毒（JL 株），批 号为 TGEV-Q-201601，病毒含量 107.50TCID50/0.2 ml ； 猪流行性腹泻病（HN-1 株），批号 ：PEDV-Q-201601， 病毒含量 107.38TCID50/ml，由哈药集团生物疫苗有限公 司制备、鉴定、保存 ；
表 1 仔猪田间安全性试验设计
地点 疫苗批次
试验名称
免疫动物 剂量 接种 数量 / 只 ml/ 头 次数
201501 一次单剂量接种 1 400 1.0 1
猪场 1 201502 单503 一次超剂量接种 600 2.0 1
二联灭活疫苗和弱毒疫苗，对该病的控制起到了积极的 作用。但 2010 年 10 月以来猪流行性腹泻在我国多个省 份暴发流行，并且表现出新的特征。
本产品前期实验室研究结果显示猪传染性胃肠炎、 猪流行性腹泻二联灭活疫苗（JL 株 + HN-1 株）具有 良好的安全性，为了进一步明确该灭活疫苗在田间应用 的安全性，课题组开展了本项研究，旨在为猪传染性胃 肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗（JL 株 + HN-1 株） 的现地应用提供一定的理论依据。
一、材料与方法
1. 材料 （1） 疫 苗。 猪 传 染 性 胃 肠 炎、 猪 流 行 性 腹 泻 二 联 灭活疫苗（JL 株 + HN-1 株），5 批中试产品，批号为
3. 客观认识蓝耳免疫的策。蓝耳病出现问题后，首先 要考虑综合性应对措施，而不是期望一针疫苗解决问题。 近两年蓝耳病也在不断出现新的毒株，如类 NADC30 毒 株，目前认为和引种有很大关系。对于新出现的蓝耳问题， 不一定是因为蓝耳苗本身，引种等因素对蓝耳稳定影响重 大。尤其是目前疫苗对新毒株的保护作用十分有限。
高致病性禽流感免疫方案
高致病性禽流感免疫方案一、要求对所有鸡、水禽（鸭、鹅）和人工饲养的鹌鹑、鸽子等禽只进行高致病性禽流感强制免疫。
对进口国有要求且防疫条件好的出口企业，以及提供研究和疫苗生产用的家禽，经报自治区水产畜牧兽医局批准后，可以不实施免疫。
二、免疫程序（一）规模养殖场家禽的免疫。
1、种鸡、蛋鸡免疫。
雏鸡7～14日龄时，用H5N1亚型(或H5H9双价)禽流感灭活疫苗或禽流感一新城疫重组二联活疫苗(rL-H5)进行初免;初免3～4周后，用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗进行一次加强免疫。
开产前再用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗进行强化免疫。
以后根据免疫抗体检测结果，每隔4个月用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗免疫一次。
2、商品代肉鸡免疫。
（1）快大型肉鸡。
7～14日龄时，用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5）初免，或者用H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫一次；2周后，用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5）加强免疫一次。
（2）慢大型肉鸡。
7～14日龄时，用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5）初免；2周后，用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5）加强免疫一次，以后每隔4个月加强免疫一次。
或者，7～14日龄时，用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗初免；初免3～4周后，用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗加强免疫一次，以后每隔4个月加强免疫一次。
3、种鸭、蛋鸭、种鹅、蛋鹅免疫。
雏鸭或雏鹅14～21日龄时，用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗进行初免；初免3～4周后，用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗进行一次加强免疫。
以后根据免疫抗体检测结果，每隔4个月用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗免疫一次。
4、商品肉鸭、肉鹅免疫。
（1）快大型肉鸭。
7～10日龄时，用H5N1亚型（或H5H9双价）禽流感灭活疫苗进行一次免疫即可。
新型禽流感-新城疫重组二联活疫苗诱导雏鸡免疫效果初步探讨
广西 畜牧兽 医
２ ０ １ ３年 Ｖ ｏ １ ． ２ ９（ ３ ）
新 型 禽流 感一 新 城疫 重 组 二联 活疫 苗诱导 雏 鸡 免疫效 果 初 步探 讨
陆建华 ， 李 津 ， 周 莲英
（ １ ． 广西大学动物科学技术学 院， 广西南宁 ５ ３ ０ ０ ０ ５ ； ２ ． 右江 民族医学院 ， 广西百色 ５ ３ ３ ０ ０ ０ ；
均用点眼滴鼻禽流感一新城疫重组 二联 活疫苗 １
羽份。
Ｂ组 ： ７ ｄ龄 用 新 城 疫 Ⅳ系 苗 １羽 份 点 眼滴 鼻 初免 ， 于１ ４ ｄ龄 用 ｌ ｍＬ禽 流 感 灭 活 苗 肌 肉注 射 二
３ 讨 论 与 分 析
３ ． １ 禽流 感灭 活苗 采用 注射 接种 ， 注 射剂量 比较
性、 阴性 血清 ， 稀 释液 ， 由 中国农 业科 学 院哈尔滨 兽 医研 究所 生产 ； 新城 疫诊 断抗原 ， 标准 阳性 、 阴性 血
繁 蓁
矗 Ｂ Ｃ Ｄ
组捌
图１ 四 个试 验 组抗 体 检 测 结 果柱 状 图
图 １结果显 示 ， 单独免 疫禽 流感一 新城疫 重组 二联 活疫 苗 的 ， 禽 流感 的抗 体 合 格率 为 ０ ， 其 他 组
广西畜牧兽 医
好 把握 ； 禽 流感 一新 城疫 重组 二联 活疫 苗 可 以采 用 点眼 、 滴鼻 、 肌 肉注射 免疫 或饮 水 免疫 ， 而本 次试 验
２ ０ １ ３ 年Ｖ ｏ １ ． ２ ９（ ３ ）
１ ５ ９
流感 ＨＩ 抗体 反应 水 平 ， 成 年鸡 均 显 著 高 于低 日龄
耄
噼
简称 ： 禽苗 ） ， 青 岛易邦生物技术 公司生产 ， 批号 ： ２ ０ １ １ ０ ０ ７ ； 新城疫Ⅳ系苗（ 以下简称 ： 新Ⅳ苗 ） ， 广西 丽原生物技术公司生产 ， 批号 ： １ １ ０ ３ ０ １ ； 新城疫克隆
热烈祝贺齐鲁动保公司“新流二联灭活疫苗”成功上市
化 工 艺 ， 显 著提 高免疫 效果 ； 给 鸡群提 供 坚 强 、 持 久 的保 护 力 。 丽
市 畜牧 总站 派 人 参 加 “ 重 庆 市 2 0 1 0 年 农 资 打 假 专 项 整 治 行 动 暨 放 心 农 资 下 乡进 村 宣 传 周 ’’ 活 动
为 广 泛 开 展 识 假 辨 假 维 权 和 科 学 使 用 农 资知 识 宣 传 培 训 ， 积 极 营 造 打 假 护 农保 春 耕 的 良好 氛 围 ， 切 实 维 护 农 民权 益 ， 保 障春 耕 生 产 顺 利 进 行 ， 按 照 市 农 委 的 统 一 安 排 ， 5 月 1 7 日 ， 市 畜 牧 技 术 推 广 总 站 何 国 栋 副 站 长 带 领 种 畜 禽 管 理 科 有 关 技 术 人 员 参 加 在 丰 都 县 举行 的 “ 重 庆 市 2 b 1 0 年 农 资 打 假 专 项 整 治 行 动 暨 放 心 农 资 下 乡进 村 宣 传 周 ” 活 动 。 在 此 次 活 动 上 ， 我 站 共 发 放 《中 华 人 民 共 和 国 畜 牧 法 》、 科 学 养牛 、 养 山 羊 、 养 鸡 、 养 奶 牛 、 养 猪 等 专 业 书籍 1 0 0 余 套 ， 发放 肉牛 管理 与 育肥 关 键 技 术 、 山 羊 高床 舍 饲 高产技 术 、 夏 季 防 暑 降温 蛋 鸡养殖 技 术 、 发 酵 床 零排 放 养猪 技 术 、 奶 牛 高产 养殖 技 术 等 专 业 技 术 资 料 8 0 0 0 余份 ， 现 场 讲 解 种 畜 禽识 假 辨 假 、 维 权 和 科 学 使 用 等 2 0 余 次 ， 现 场 解 决 养 殖 户 提 出 的 问 题 5 0 余 条 ， 有 效 宣 传 了我 市 种 畜 禽 管 理 方 面 的 法 律 法 规 ， 较 好 普 及 了识 假 辨 假 和 科 学 选 育 种 畜 禽知 识 ， 大 大提 高 了农 民 维 权 意 识 和 自我 保 护 能 力 ， 切 实 维 护 了 养殖 者 的 合 法 权 益 。 黑
鸡新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫不同日龄商品肉鸡的效果比较
鸡新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫不同日龄商品肉鸡的效果比较江兴华;赵华娥;林晓荣;郑敬敏;包松英;林拱阳;王全溪【摘要】3,7,14-day-old forty commercial broiler chickens were respectively inoculated with bivalent vaccines containing inactivated Newcastle disease virus(NDV) and avian influenza virus(AIV) and simultaneously, chickens were mock inoculated as control group. In order to detection antibodies against NDV and AIV, blood samples were collected from 3, 7, 14, 21, 28, 35 and 42-day-old chickens in both immune groups and control groups, and 21, 28 and 35-day-old chickens were infected with AIV, respectively. Antibody levels against NDV and AIV, as well as mortality of each group were detected for comparative analysis.The results showed that antibodies a-gainst NDV and AIV in control group represented an gradual decline as days went, till to zero on 42th day, antibody levels of immune groups decreased in the early stage, and began to increase since 21th day, ending up with 6log2 on 35th day. Immune protection effect of 3-old-day immune group was the best and protection rate against AIV reached 100 percent on 21, 28 and 35-day-old chickens. Protection rate of 7-old-day immune group was 70%on 28-day-old and that of 14-old-day immune group was 30%on 21-day-old. In conclusion, better immune protection against AIV was obtained from commercial broiler chickens inoculated with bivalent vaccine containing inactivated NDV and AIV on 3-day-old, which could improve immune protection effectagainst NDV and AIV and reduce economic losses of poultry industry.%使用鸡新城疫-禽流感（H9N2 HP株）二联灭活疫苗分别免疫3、7、14日龄三组商品肉鸡各40羽，同时设一组空白对照组。
国内外疫苗研究进展
（2）按我国《条例》分为两类
1）第一类疫苗是指政府免费向公民提供，公民应 当依照政府的规定受种的疫苗，包括国家免疫规 划确定的疫苗，省、自治区、直辖市人民政府在 执行国家免疫规划时增加的疫苗，以及县级以上 人民政府或者其卫生主管部门组织的应急接种或 者群体性预防接种所使用的疫苗。
2）第二类疫苗是指除第一类疫苗外由公民自费并 且自愿受种的其他疫苗。
荷兰研究发现以痘苗病毒安卡拉株为基础的疫
苗应用于免疫缺陷短尾猴是安全的。 改进
美国研初接究次种则发现以辛德毕强化 斯病毒为基础接（的种如 疫苗
荷兰生物制药公司Crucell和Aeras全球结核病疫苗基金 会合作研制的Aeras-402是以腺病毒为载体，过表达Mtb AN85A、A985B和TB10.4融合抗原，刺激宿主产生高水平的 CD8+T细胞免疫反应。以上2种疫苗都已进入临床Ⅱ b期。
（4）减毒Mtb疫苗 减毒活疫苗通常是在结核分枝杆菌或牛分枝杆菌等野生
。
近年来，各国都致力于研制新型高效的抗结 核疫苗。
（1）重组BCG疫苗
是将一些重要的抗原或者其他因子重新导入到现有的 BCG株，得到一个以BCG为载体的重组疫苗，或者使Mtb的基 因缺失得到基因缺失突变株从而制造出新的结核疫苗。
德国马普感染生物学研究所研制的VPM 1002是将BCG的 尿素酶基因敲除，同时重组表达来源于李斯特菌(Listeria monocytogenes)的细胞溶解素，该疫苗可能通过缩短BCG在 体内的存活时间，提高疫苗诱导的长期免疫记忆，已进入 临床Ⅱ期。
他因研究了白喉的血清疗法 而获得1901年首届诺贝尔生理 学或医学奖。
1919年第一次世界大战结束时，人类发现 了体液免疫现象,活的或者灭活疫苗的效价 得到了很大的提高。伤寒热、志贺氏细菌 性痢疾、结核、白喉、破伤风和百日咳疫 苗也被成功制备。
禽流感灭活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗对比试验
禽流感灭活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗对比试验韩春梅;刘居萍;谢丽;赵余【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2007(28)2【摘要】为得到较好的禽流感免疫效果,根据本地区禽流感流行特点选用两种不同剂型流感疫苗,即禽流感灭活苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗,分别对蛋鸡和肉鸡进行免疫接种,通过血凝抑制试验来检测两种不同剂型疫苗免疫后禽流感抗体水平.结果显示,禽流感灭活苗无论对蛋鸡还是对肉仔鸡的抗体检测效价均高于禽流感-新城疫重组二联活疫苗,免疫接种后21 d时,禽流感灭活疫苗(H5N1亚型)的HI抗体水平平均为6.5,而禽流感-新城疫重组二联活疫苗的HI抗体水平平均为3.75.【总页数】2页(P112-113)【作者】韩春梅;刘居萍;谢丽;赵余【作者单位】塔里木大学动物科技学院,新疆,阿拉尔,843300;库车县兽医站,新疆,阿克苏,843300;库车县兽医站,新疆,阿克苏,843300;塔里木大学动物科技学院,新疆,阿拉尔,843300【正文语种】中文【中图分类】S852.659.5【相关文献】1.不同剂型新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫SPF鸡后抗体水平对比试验 [J], 江兴华2.禽流感-新城疫重组二联活疫苗与重组禽流感灭活疫苗组合免疫效果观察 [J], 杨飞燕;刘颖;张廉;陆成春;雷振;许宗丽3.快大型商品肉鸡禽流感母源抗体的监测及禽流感-新城疫重组二联活疫苗配合禽流感灭活疫苗免疫鸡只的效果观察 [J], 林永坚;关建新;袁海峰;李瑞亭4.重组鸡γ-干扰素联合鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫效果的研究[J], 刘晓婧;魏波;蒋贻海;曲信芹5.国家三类新兽药重组新城疫病毒、禽流感病毒(H9亚型)二联灭活疫苗(αSG10株+G株) [J], 无因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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“优瑞康”田间免疫效果项目总结报告
瑞普诊断研究中心
针对“优瑞康”田间免疫效果如何，研发二部以诊断研究中心为主，成立了“优瑞康”田间免疫效果专项研究小组，研究瑞普生物生产的不同系列的新流二联灭活疫苗--“优瑞康”与其他公司生产新流二联疫苗免疫效果对比试验。
1 实验材料
1.1实验用鸡 1日龄蛋公雏（品种为京白），购自河北大午集团，开放饲养至7日龄和22日龄分别进行免疫试验；1日龄罗斯308肉鸡，购自三融集团，开放饲养至7日龄和22日龄分别进行免疫试验。
1.2 试验用疫苗疫苗：疫苗A、疫苗B、疫苗C、疫苗D、疫苗E五个厂家的新流二联灭活疫苗由技术服务人员从市场购买；优瑞康(蓝)100202、优瑞康(蓝)090901、优瑞康(红)091102取自瑞普生物公司；优瑞康红（超浓缩，进口白油）、50批（普通白油）、51批（1：2乳化比例，进口油）同样取自瑞普生物公司。
3 实验方法
选择市场上同我公司“优瑞康”相似的产品，进行田间实验，分别免疫7日龄蛋公雏、22日龄蛋公雏和7日龄肉鸡仔，每只鸡颈背部皮下注射0.3ml，免疫后每隔1周用血凝-血抑法测定抗体水平。
4 实验结果
4.1 商品化疫苗免疫7日龄蛋雏鸡的H9抗体
表1 新流二联灭活疫苗高母源抗体免疫效果
免疫后天数优瑞康红
优瑞康蓝
090901
优瑞康蓝
100202
疫苗A 疫苗B 疫苗C 疫苗D 疫苗E
0天7.20 7.20 7.20 7.20 7.20 7.20 7.20 7.20 7天 6.10 6.20 5.33 6.33 7.33 5.73 6.40 6.22 14天 5.44 3.20 3.82 3.56 3.82 3.55 4.13 3.75 21天7.80 3.75 5.33 4.43 4.90 5.00 5.89 5.22 28天9.78 6.88 8.75 6.71 7.60 8.55 8.56 6.44 35天9.71 7.00 9.27 7.00 7.14 7.40 6.63 5.40 42天10.43 8.80 9.87 8.50 9.00 8.90 7.50 5.60
4.2商品化疫苗免疫22日龄蛋雏鸡的H9抗体
表2 新流二联灭活疫苗低母源抗体免疫效果
免疫后天数 优瑞康红 优瑞康蓝 100202 优瑞康蓝 090901 疫苗A 疫苗B 疫苗C 疫苗D 疫苗E 0天 3.40 3.40 3.40 3.40 3.40 3.40 3.40 3.40 7天 1.00 1.20 1.40 3.00 0.80 1.20 2.00 1.40 14天 6.80 4.00 6.00 6.50 5.10 4.30 5.60 5.00 21天 8.50 7.27 7.25 8.00 6.25 6.29 6.75 6.92 28天 10.08 10.30 9.00 10.43 8.40 7.00 7.50 8.92 35天 10.75 10.10 8.88 9.14 7.60 6.2 7.00 8.42 42天 10.92
10.10
9.50
10.71
8.80
7.00
8.63
9.42
高母源抗体蛋雏鸡免疫效果
246810120天
7天
14天21天28天35天42天
免疫后天数
抗体水平（x L o g 2）
优瑞康红
优瑞康蓝090901优瑞康蓝100202疫苗A 疫苗B 疫苗C 疫苗D 疫苗E
低母源抗体蛋雏鸡免疫效果
246810120天
7天
14天21天28天35天42天
免疫后天数
抗体水平（x L o g 2）
优瑞康红
优瑞康蓝100202优瑞康蓝090901疫苗A 疫苗B 疫苗C 疫苗D 疫苗E
4.3 商品化疫苗免疫7日龄肉仔鸡的H9抗体
表3 不同新流二联灭活疫苗的田间免疫H9抗体结果(肉仔鸡)
免疫后天数 优瑞康红 优瑞康50 优瑞康51批 疫苗A 疫苗B 疫苗C 疫苗D 疫苗E
0天 8.35 8.35 8.35 8.35 8.35 8.35 8.35 8.35 7天 6.27 5.67 5.47 6.27 6.33 6.25 6.00 6.13 14天 5.07 3.73 4.33 3.67 3.87 4.00 4.57 3.64 21天 6.47 4.50 4.40 4.00 3.07 3.43 4.43 3.00 28天 7.71 5.43 6.27 4.40 3.64 4.53 5.21 3.14 35天 7.50
5.78
6.43
4.27
4.60
5.53
5.71
4.43
肉仔鸡7日龄免疫抗体走势曲线
1234567890天
7天
14天21天28天35天
免疫后天数
抗体水平（x L o g 2）
优瑞康红优瑞康50批优瑞康51批疫苗A 疫苗B 疫苗C 疫苗D 疫苗E
5 结果
通过比对试验结果表明我公司的“优瑞康”确实免疫效果良好，优于市场上大部分同类疫苗，优瑞康红的效果明显好于优瑞康蓝，伴随着生产工艺的不断改进，2010年生产的优瑞康产品免疫效果要优于2009年的产品，另外超浓缩进口油（优瑞康红）的效果要明显优于其他产品及工艺生产出来的产品。
低母源抗体的鸡群无论免疫哪个厂家的疫苗在35日龄，禽流感H9抗体水平都可达到6以上的水平，即达到临界保护值以上，其中“优瑞康红”（超浓缩疫苗）禽流感H9抗体水平可以到达10以上。
在高母源抗体情况下蛋鸡免疫后抗体水平上升的速度和上升的高度都要好于肉仔鸡。
通过实验也可以看出母源抗体对灭活疫苗免疫同样具有干扰作用。
由于目前肉仔鸡母源抗体较高，建议在7-10日龄注射0.3ml/只“优瑞康”，在28日龄可达到抗体水平大于6，起到更好的保护作用，其中“优瑞康红”超浓缩疫苗远远好于其他公司的新流二联灭活疫苗（优瑞康红在21日龄即禽流感H9抗体水平即可达到6以上）。