β-榄香烯对肺腺癌A549和H460细胞增殖和凋亡的影响

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抑制miR-21-5p表达通过靶向FOXP2调控肺癌细胞增殖和凋亡

殖情况２５％胰蛋白酶消化肺癌细胞，调整细胞浓度为２×１０４个／ｍｌ，接种于６孔板中，分别转染ｍｉＲ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｐｃＤＮＡＦＯＸＰ２及其阴性序列或共转染ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｓｉＦＯＸＰ２；转染４８ｈ后弃去旧培养基，加入ＭＴＴ２０μｌ混匀，培养４ｈ；然后每孔加ＤＭＳＯ溶液１００μｌ混匀，培养１５ｍｉｎ；采用酶标仪检测吸光值，每组３个复孔。１２７流式细胞仪检测细胞凋亡转染后Ａ５４９细胞培养４８ｈ后，弃去培养基，磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）清洗２次；加入５００μｌ１×结合缓冲液，５μｌＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ，避光孵育１５ｍｉｎ；加入２５μｌＰＩ，孵育５ｍｉｎ，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。１３统计学方法采用ＳＰＳＳ２２０软件进行ｔ检验、单因素方差分析。
崔艳红等抑制ｍｉＲ２１５ｐ表达通过靶向ＦＯＸＰ２调控肺癌细胞增殖和凋亡第１４期
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２ｍｉｎ，９５℃ １５ｓ，６０℃ ２０ｓ，７２℃ ２０ｓ，共４０个循环；反应体系为２０μｌ：２×ＳＹＢＲＭｉｘ１０μｌ，上下游引物各０５μｌ，１０×ｃＤＮＡ模板１μｌ，Ｈ２Ｏ８μｌ。引物序列：ｍｉＲ２１５ｐ：正义链５′ＧＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＧＡＧＧＴ３′，反义链５′ＧＣＣＧＣＴＡＧＣＴＴＡＴＣＡＧＡＣＴＧＡＴＧＴ３′；Ｕ６：正义链５′ＣＴＣＧＴＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＣＴ３′，反义链５′ ＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＧＴ３′；ＦＯＸＰ２：正义链５′ＧＧＴＣＡＴＧＡＣＣＣＣＴＧＡＴＴＡＧＧ３′，反义链５′ＡＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＧＧＣＴＴＣＡＴ３′；βａｃｔｉｎ：正义链５′ＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＣＴＣ３′，反义链５′ＴＧＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴ３′。分别以Ｕ６、βａｃｔｉｎ为ｍｉＲ２１５ｐ、ＦＯＸＰ２的内参基因计算相对表达量。１２３Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白表达情况肺癌细胞株以５×１０４个／ｍｌ接种于６孔板中贴壁培养２４ｈ，收集细胞，ＲＩＰＡ裂解液冰上裂解５ｍｉｎ提取总蛋白，测定总蛋白浓度，蛋白与样品缓冲液混合后煮沸５ｍｉｎ变性蛋白；１０％十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ）跑胶，转膜至聚偏氟乙烯（ＰＶＤＦ）膜，５％脱脂奶封闭１５ｈ；一抗４℃孵育过夜，ＴＢＳＴ清洗３次／５ｍｉｎ；稀释二抗室温孵育１ｈ，ＴＢＳＴ清洗３次／５ｍｉｎ；ＥＣＬ显影液显影，ＧＩＳ凝胶成像仪采集图片，以ＧＡＰＤＨ为内参计算蛋白表达水平。１２４双荧光素酶实验检测ｍｉＲ２１５ｐ对ＦＯＸＰ２的影响扩增ＦＯＸＰ２基因的转录本３′ＵＴＲ，构建野生型ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＷＴｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒；采用定点突变技术，将３′ＵＴＲ上的与ｍｉＲＮＡ结合的核心区域突变构建突变型ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＭＵＴｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒；将两种质粒分别转染至肺癌细胞，转染４８ｈ后检测荧光强度。１２５细胞转染转染前２４ｈ将细胞接种于２４孔板中，使细胞贴壁密度约８０％。设计并合成ｍｉＲ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ及其对应阴性序列，使用ｌｉｐ２０００将合成序列分别转染肺癌细胞，空白对照（ＮＣ）组不做任何处理，无血清ＤＭＥＭ培养６ｈ，换完全培养基培养１８ｈ后进行功能试验，并继续培养筛选稳定低表达ｍｉＲ２１５ｐ的细胞株。

β-榄香烯的药理活性研究概况

β-榄香烯的药理活性研究概况【摘要】β-榄香烯是一种具有潜在药理活性的化合物，在药物研究领域备受关注。

本文从β-榄香烯的来源、生物活性、药理作用、药理机制和临床应用等方面进行了综述。

β-榄香烯来源于植物精油中，具有昆虫斥避和抗菌等多种生物活性。

在药理作用方面，β-榄香烯显示了抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗菌等作用。

其药理机制主要通过调节炎症途径、氧化应激和细胞凋亡等途径实现。

β-榄香烯在临床应用上具有广阔前景，可用于治疗炎症性疾病、肿瘤及感染等多种疾病。

研究展望显示β-榄香烯在药物研究中有着广阔的应用前景，其潜在价值值得进一步挖掘。

β-榄香烯的药理活性研究将促进该化合物在临床治疗中的应用。

【关键词】β-榄香烯, 药理活性, 研究, 来源, 生物活性, 药理作用, 药理机制, 临床应用, 展望, 潜在价值, 应用前景1. 引言1.1 研究背景β-榄香烯是一种天然存在于许多植物中的化合物，具有独特的芳香和药理活性。

近年来，越来越多的研究表明，β-榄香烯具有抗炎、抗菌、抗氧化和抗肿瘤等多种生物活性。

随着现代医学的发展，人们对β-榄香烯的药理活性及其潜在应用价值越来越感兴趣。

β-榄香烯的来源非常广泛，主要存在于植物的果实、叶片、根茎和树皮中。

薄荷、月桂、桉树等植物中含量较高，成为β-榄香烯的重要来源。

通过提取和分离技术，可以从这些植物中获取纯度较高的β-榄香烯，为进一步研究其药理作用奠定基础。

1.2 研究目的研究目的是探讨β-榄香烯的药理活性及其潜在药用效果。

通过对β-榄香烯的来源、生物活性、药理作用、药理机制和临床应用进行全面的研究和分析，旨在揭示其在治疗各种疾病方面的潜在机制，为开发新的药物治疗方案提供科学依据。

通过对β-榄香烯的药理活性进行深入了解，可以为临床医生提供更多可靠的药物选择和治疗方案，为患者带来更好的临床疗效和生活质量。

研究目的还在于为β-榄香烯的进一步开发和应用提供理论支持，为其在医药领域的应用前景和市场开拓提供指导。

abexinostat结构

abexinostat结构
abexinostat是一种新型的抗癌药物，属于组蛋白去乙酰化酶抑制剂。

它的化学结构主要包括苯基、吡啶环和氨基等部分。

abexinostat主要通过抑制组蛋白去乙酰化酶，干扰细胞内组蛋白的翻译后修饰，从而影响细胞的DNA修复、细胞周期调控和凋亡等生理过程，进而抑制癌细胞的生长和扩散。

abexinostat的结构中含有苯基和吡啶环，这两个基团在抗癌药物中常见。

苯基结构具有较强的亲脂性，有助于药物在细胞膜内部的扩散和靶点结合。

而吡啶环则可以增加药物的稳定性和生物活性。

此外，abexinostat中的氨基基团能够与其他分子形成氢键或离子键，增强药物与靶点的相互作用，提高药效。

通过抑制组蛋白去乙酰化酶，abexinostat可以调控多种细胞信号通路，包括细胞增殖、凋亡、生存和血管生成等。

这使得abexinostat在多种癌症治疗中具有广泛的应用前景。

近年来，临床研究表明，abexinostat在治疗淋巴瘤、白血病、乳腺癌和前列腺癌等恶性肿瘤中显示出良好的疗效和安全性。

尽管abexinostat在抗癌领域表现出良好的潜力，但其在临床应用中仍然存在一些挑战。

例如，药物的副作用和耐药性问题仍然需要进一步研究和解决。

此外，如何提高药物的靶向性、生物利用度和药效持续时间也是当前研究的重点。

总的来说，abexinostat作为一种新型抗癌药物，具有独特的化学结构和作用机制，对多种癌症具有治疗潜力。

随着对该药物的深入研究和临床实践，相信其在癌症治疗领域将发挥越来越重要的作用，为患者带来新的希望和机遇。

β-榄香烯的放疗增敏作用与肿瘤血管形成的关系

β-榄香烯的放疗增敏作用与肿瘤血管形成的关系黄佳夫【摘要】目的探讨β-榄香烯对移植瘤的放疗增敏机制与血管形成是否相关.方法①当待移植瘤体积为0.8～1.0 cm3时,将荷瘤裸鼠随机分成8组(每组5只),包括空白组(A1,NaOH)、25 mg/kg药物组(B1)、45 mg/kg药物组(C1)、100mg/kg药物组(D1)、放疗组(A2,NaCl+放疗)、25 mg/kg药物+放疗组(B2)、45 mg/kg药物+放疗组(C2)、100 mg/kg药物+放疗组(D2),按剂量腹腔注射β-榄香烯,空白组注射同体积NaCl,比较各组肿瘤生长延缓时间和增敏系数,比较各组血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34表达水平.结果 B1、C1、D1组体积倍增时间长于A1组,D1长于B1、C1组,差异均有统计学意义(P＜0.05);B2、C2、D2组体积倍增时间长于A2组,D2、C2组长于B2组,D2组长于C2组,差异均有统计学意义(P＜0.05);放疗组与未放疗组体积倍增时间差异有统计学意义(P＜0.05).45 mg/kg和100 mg/kg 2种剂量具有增敏作用.A2组平均光密度和微血管密度高于A1组和C1组,C2组低于A2组,差异均有统计学意义(P＜0.05),A1组与C1组之间差异无统计学意义(P＞0.05).累计光密度C2组低于A2组,差异有统计学意义(P＜0.05),其他各组差异均无统计学意义(P＞0.05).结论β-榄香烯通过抑制VEGF的表达和下调微血管密度而发挥放疗增敏作用,且45 mg/kg剂量的β-榄香烯最适合作为放疗增敏剂.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2016(037)012【总页数】3页(P1391-1393)【关键词】肺肿瘤;化放疗;β-榄香烯【作者】黄佳夫【作者单位】中国人民解放军南京军区福州总医院九五临床部,福建莆田351100【正文语种】中文【中图分类】R739.9放射治疗是抗肿瘤治疗中的主要治疗方式之一，但因为某些肿瘤耐放射治疗，导致其有一定局限性。

色素上皮衍生因子对非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响

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６０４・
安徽医科大学学报
ＡｃｔａＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＭｅｄｉｃｉｎａｌｉｓＡｎｈｕｉ２０１３Ｊｕｎ；４８（６）
色素上皮衍生因子对非小细胞肺癌ＮＣＩ．Ｈ４６０细胞增殖和凋亡的影响
１．１材料
人非小细胞肺癌ＮＣＩ — Ｈ４６０细胞由安
徽医科大学第一附属医院中心实验室惠赠；ＰＥＤＦ
购自美国Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ公司；ＲＰＭＩ一１６４０购自美国Ｈｙ — Ｃｌｏｎｅ公司；胎牛血清购自杭州四季青生物有限公
２０１２一ｌ１— ３０接收
Ｈ４６０对数生长期细胞，消化后用培养液制成单细胞
悬液，以５×１０个／孔接种于９６孔板，分别加入含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ一１６４０培养液培养，６ｈ后加
入ＰＥＤＦ使终浓度分别为１８０、３６０、７２０ｎｍｏｌ／Ｌ，记
司；四甲基偶氮唑蓝（Ｍ１＿ｒ）、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）购
自美国Ｓｉｇｍａ公司；ＡｎｎｅｘｉｎＶ— ＦＩＴＣ／ＰＩ双染试剂盒
细胞凋亡率分别为１０．９％、１１．４％及１４．３％；随着ＰＥＤＦ浓度的升高，细胞凋亡率逐渐增高，且各干预组与阴性对照组

β-榄香烯的药理活性研究概况

β-榄香烯的药理活性研究概况作者：霍晋彦于宗霞冯宝民来源：《中国化工贸易·中旬刊》2019年第01期摘要：提高疗效和降低副反应是药物研发的两大问题。

β-榄香烯的药理活性研究是对β-榄香烯进一步开发利用的必然途径。

本文对β-榄香烯的药理活性进行了介绍，并对其进一步开发和利用进行展望。

关键词：β-榄香烯;药理活性;研究現状β-榄香烯化学名称为：1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙基环己烷（C15H24），为黄色和淡黄色的橙明液体，有着辛辣的茴香气味，具有抗肿瘤、抗病毒、改善微循环等作用。

β-榄香烯是中国拥有自主知识产权的I类新型抗癌中药，也是II类广谱非细胞毒性抗肿瘤药，获得美国和中国专利，2005年获得美国FDA批准进行I期临床观察，2008年以β-榄香烯为主（含量>65%）的乳剂作为国家二类抗癌新药被卫生部批准进入二期临床研究。

2010年批准上市，在临床上主要用于治疗胃癌、肝癌、乳腺癌等疾病。

本文通过对近年来的文献研究，对β-榄香烯的药理活性进行简要综述，并针对其应用现状的优缺点和未来研究方向进行讨论。

1 胃癌细胞β-榄香烯对胃癌BCA823细胞的增值抑制率与其浓度有正相直线相关关系（p<0.01），其半数抑制率为0.078mg/mL，最佳作用浓度为0.04～0.08mg/mL，β-榄香烯可使BCA823细胞停滞于S期，并诱导细胞凋亡。

作用效果可能与P38MAPK通路的活化程度有关。

β-榄香烯可诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡，其凋亡程度与作用浓度和时间相关。

β-榄香烯在浓度为20、40及80μmol/L时，可显著抑制SGC-7901细胞的增殖。

其作用机制可能与上调促进细胞凋亡的Bax蛋白的表达，下调抑制细胞凋亡的Bcl-2蛋白的表达及SurvivinmRNA 和蛋白水平，增强Caspase酶活性相关。

β-榄香烯可诱导胃癌MGC803细胞发生凋亡，随着药物浓度增加、作用时间延长，MGC803细胞凋亡率明显增高（P均<0.05），而MGC803细胞中p-ERK表达量则显著下降（P 均<0.05）。

重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460 wt细胞凋亡

维普资讯
第３卷４
２７Ｏ
第
学
报（医
学
版）
Ｖｏ．４ＮＯ２１３．
Ｍａ．２００ｒ８
２００８年３月
ＪｕｎｌｆｉｎＵｎｖｒｉ（ｅｉｉｅＥｄｔｎｏｒａｌｉｅｓｔＭｄｃｎｉｉ）ｏＪｉｙｏ
［摘要］
目的：获得人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（ｓＲＡＩ）蛋白，并探讨其应用于非小ｒＴＩ
细胞肺癌（ＣＩ）治疗的前景。方法：ＲＣ从外周血单核细胞（ＢＮＳＣＴＰＲＰＭＣｓ中获取目的基因片段，构建重）组质粒ＰＥＴＡＩｑＲＬ并转化人大肠杆菌（．ｏｉＭ、，ＩＴ诱导目的蛋白表达并经镍固定金属亲和层析纯Ｅｃ／）。ＰＧ
ｔａｓｏｍｅｙｔｅｒｃｍｂｎｎｌｓｄＴｈｘｒｓｉｎｏｈａｇｔｐｏｅｎｗａｎｕｅｔＰｒｎｆｒｄｂｈｅｏｉａｔｐａｍｉ．ｅｅｐｅｓｏｆｔｅｔｒｅｒｔｉｓｉｄｃｄｗｉｈＩＴＧｎｕｉｅａｄｐｒｆｄｉ
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｏｏｓｒｃｐｏａｙｔｅｐｅｓｎｌｓｄｏｈｍａｒｃｍｂｎｎｓｌｂｅｓｒｃ：ｊｃｉｖｃｎｔｕｔｒｋｒｏｉｘｒｓｉｐａｍｉｆｕｎｅｏｉａｔｏｕｌｃｏＴＮＦｒｌｔｄ－ｅａｅ

生物化学 β-榄香烯简介

主要生物学活性
降低肿瘤细胞有丝分裂能力，诱发肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长。对肿瘤细胞的DNA、RNA及蛋白质合成有明显抑制作用。直接作用于细胞膜，使肿瘤细胞破裂，可以改变和增强肿瘤细胞的免疫原性，诱发和促进机体对肿瘤细胞的免疫反应。
相较于其他抗癌药物的优点
分子量小，且脂溶性强抗瘤谱广是广义上的靶向药物给药途径多样毒副作用小，给药剂量高来源经济，易提取
β-榄香烯是从中药温莪术根茎提取的抗癌有效成分，属倍半萜烯类成分，精油的一种。是一种新型的抗癌药，以其独特的药理作用被广泛用于治疗肺癌、消化道肿瘤、脑瘤以及其他浅表性肿瘤，具有很强杀灭肿瘤细胞及抑制肿瘤细胞生长的作用，其抗癌谱广、高效、安全、无毒。对肾功能无损害，无骨髓抑制，能提高患者的生存质量。
β-榄香烯简介
The Introduction Of β-elemene
，β-E )
• 化学名：1-乙烯基-1-甲基-2,4-二(丙-1-烯-2-基)环己烷 • 分子式：C15H24 • 结构式： • 分子量：204 • 来源：温莪术（温郁金）根茎
β-榄香烯功用综述
β -榄香烯药物
The End
Thank you
Wish you a happy afternoon

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陕西医学杂志２０１５年９月第４４卷第９期
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１１０７
论著・基础研究・
Ｉ３一榄香烯对肺腺癌Ａ５４９和Ｈ４６０细胞增殖和凋亡的影响
西安交通大学医学院附属西安市中心医院（西安７１０００３）杜旭升鱼军李建英ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 刘安杨拴盈△ 王一理▲
ｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａＡ５４９ａｎｄＨ４６０ｃｅｌｌｌｉｎｅｗｅｒｅｉｎｈｉｂｉｔｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｂｙＥ１一
ｅｍｅｎｅａｎｄｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｗａｓｔｉｍｅａｎｄｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ．Ｔｈｅ８一ＥｌｅｍｅｎｅｃｏｕｌｄｐｒｏｍｏｔｅＡ５４９ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ａｎｄｌｏｗｅｒｂｃｌ一
腺癌Ａ５４９和Ｈ４６０细胞的增殖及诱导其凋亡，其作用机制可能与下调Ｂｃｌ一２和Ｂｃｌ — ｘｌ有关。
主题词肺肿瘤／病理生理学细胞凋亡＠Ｂ一榄香烯
【中图分类号】Ｒ７３４．２【文献标识码】Ａｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００ — ７３７７．２０１５．０９．００１ＥｆｆｅｃｔｏｆｅｌｅｍｅｎｅｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｌｕｎｇｃａｎｃｅｒＡ５４９ａｎｄＨ４６０ｃｅｌｌｓ
ｕｒｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅｅｘｐｌｏｒｅｄｂｙｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｒｅ
摘要目的：探讨Ｇ一榄香烯对肺腺癌Ａ５４９和Ｈ４６０细胞增殖和凋亡的影响。方法：应用不同浓度的Ｄ一榄香烯干预Ａ５４９和Ｈ４６０细胞后，台盼蓝拒染试验和ＭＴＴ试验检测肿瘤细胞的增殖，流式细胞术检测Ａ５４９细胞凋亡率，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测凋亡相关蛋白的表达。结果：不同浓度
Ｘｉ ’ ａｎＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌ，Ｘｉ ’ ａｎＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｘｉ ’ ａｎ７１０００３）ＤｕＸｕｓｈｅｎｇＹｕＪｕｎＬｉＪｉａｎｙｉｎｇｅｔａｌ
ＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｌ￣－ｅｌｅｍｅｎｅｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｈｕｍａｎＬｕｎｇｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＬｕｎｇｃａｎｃｅｒＡ５４９ａｎｄＨ４６０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ口一Ｅ１一
Ｊ｝榄香烯能抑制肺腺癌Ａ５４９和Ｈ４６０细胞的增殖，且呈剂量与时间依赖性，８一榄香烯干预后的Ａ５４９细胞凋亡率明显升高，其相关抗凋亡蛋白Ｂｃｌ一２和Ｂｃｌ — ｘｌ表达下调。结论：Ｇ一榄香烯可抑制肺
２ａｎｄｂｃｌ — ｘｌｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：￣－ＥｌｅｍｅｎｅｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｙｌｏｗｅｒｂｃＩ一２ａｎｄ
ｅｍｅｎｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＴｈｅｅｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｔｒｙｐａｎｂｌｕｅｓｔａｉｎａｎｄＭＴＴ．Ａ５４９ａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｗａｓｍｅａｓ —