植物组织培养 第一章 植物组织培养实验室的构建和操作技术

显微镜 类型： 倒置显微镜 普通显微镜 荧光显微镜 电子显微镜 体视显微镜
原生质体观察 染色体和叶片气孔观察 细胞活力观察 病毒检测、细胞器变化 形态分化的实体观察
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（四）培养设备
1.空调 作用：控制培养温度 2.加湿器和去湿机 控制培养室内湿度状况
（2）温室
为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
二、仪器和设备
（一）无菌操作设备
１.烘箱：
作用：干燥洗后的器皿
高温干热灭菌
测定培养物的干重时烘干培
养材料。
2.灭菌锅
类型：普通医用消毒锅
大的高压灭菌锅
作用：培养基、水和各种用具的消毒
医用手提式灭菌锅
不锈钢立式灭菌锅
3.超净工作台
陈列于操作室（接种室）内 类型：垂直式和水平式 作用：无菌操作
室内应配有超净工作台，紫外灯、解剖镜、各种 接种器械等。
无菌室（一）
无菌室（二）
（4）培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度，培养 室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气 扇。室内温度由空调控制，光照由日光灯控制。天花板 和内墙最好用塑料钢板装修，地面用水磨石或瓷砖铺设， 一般要分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养 室外应有一预备间或走廊。
第一章 组培的基本条件及一般技术
一、实验室设置及仪器设备
实验室是进行组培研究的主要场所， 应能满足清洗、培养基制备、储藏、 无菌操作、培养、鉴定等多方面的 工作。
第一章 组培的基本条件及一般技术
1.构成与配置
准备室
缓冲室 基本实验室 无菌操作室
实验室 组成
培养室
细胞生物学实验室 辅助实验室 温 室
组织培养实验室布局的总体要求
便于隔离 便于操作 便于灭菌 便于观察
第一章 组培的基本条件及一般技术
实验室设计原则：保证无菌操作，达到工 作方便，防止污染。 ▪ 实验室的大小应取决于工作的目的和规模 ▪ 按组织培养流程来设计，避免某些环节倒 排，引起日后工作混乱 ▪ 利用一定的设备、器材和特殊的实验室结 构设计，达到严格无菌的条件
3） 消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细 菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择 应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实 验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅，较大的 实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。 生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
如果没有条件的话，可以将上述工作间合并成 一个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、房 间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。
2）培养基配制间
面积60平方米左右，配备的主要仪器设 备有 ：冰箱、天平、微波炉、pH计、培养 基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电 炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、 烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以 体积180-200L为宜，用于储存培养基母液、 激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保 存植物材料。天平应有不同感量。
（1）准备室
▪ 所需器具的清洗、干燥和保存 ▪ 培养基的配制和灭菌 ▪ 生理生化测定等
组织培养准备实验室
1）洗涤间
根据工作量的大小决定其大小，一般面 积控制在30-50m2。在实验室的一侧设置 专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。中 央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型 玻璃器皿。如果工作量大，可以购置一台 洗瓶机。准备1-2个洗液缸，专门用于洗涤 对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应 配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗 器等。地面应耐湿并排水良好。
（二）药品贮存和配制仪器设备
1.冰箱 作用：低温保存材料，存
放药品、培养基母液、激 素、酶制剂。
2.天平
陈列于制备室中 作用：称取大量元素、微量
元素、酶制剂
3.酸度计
陈列于制备室中 作用：测定培养基及酶制剂的pH值
PHS-802中文台式酸度计
通用型或经济型酸度计
（三）观察分析仪器设备
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、 生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W，固定 在培养架的侧面或搁板的下面，每层有两支日光灯，距 离在20cm，光照强度为2000-3000lx。
培养室
植物组织培养材料移到田间前，通常 先移到温室进行练苗，待生根成活后， 再移到大田。
2．辅助实验室
生化分析实验室
基本实验室布局平面图
搁 水槽 架
搁 4.0 架 m
电 炉
门
实 验 台
准备室
4.5m
冰箱 无菌台
药 品 及 无菌台 仪
器 无菌室
柜
缓冲室
搁
拉 窗
培养架
培养架
架 培养室
培
培
养
养
架
架
3.0m
3.5m
A Glimpse of Plant Tissue Culture
第一章 组培的基本条件及一般技术
第一章植组物培组的基织本培条件养及一般技术
▪ 第一章 植物组织培养实验室的构建 和操作技术
第一章 组培的基本条件及一般技术
第一节 实验室及主要设备
第一章 组培的基本条件及一般技术
主要内容
植物组织培养的设计原则 组培室的组成及其功能 无菌操作设备 常用工具 常用仪器设备
第一章 组培的基本条件及一般技术
（1）鉴定室
细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定 和研究。要求清洁、明亮、干燥，使各种光学仪器 不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系 统等。
生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室 中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养 物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免 疫检测仪、天平、PCR仪等。
（2）缓冲室（注意门的朝向）
• 工作人员在此换上工作服、拖鞋，戴上口 罩
• 功能 减少人体从外界带入的尘埃等污染物。
• 要求 缓冲间需3-5平方米，应保持清洁无菌； 有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的工作服； 1-2盏紫外灯定时照射，对衣物及空间进 行灭菌。
（3） 无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作，所以又叫 接种室。通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于 准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与 接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无 菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设 有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操 作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入 操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。