2测微尺
微生物大小的测定及显微镜直接计数法
微生物大小的测定及显微镜直接计数法微生物的大小测定与显微计数生32 程雨婧 2013012406一、实验目的1. 学习并掌握使用显微镜测微尺测定微生物大小的方法。
2. 了解血细胞计数板的构造及计数原理。
3. 掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1. 显微测微尺可用于测量微生物细胞或孢子的大小，包括镜台测微尺和目镜测微尺两个部件。
镜台测微尺全长1mm，等分为100格，每格0.01mm。
用于校正目镜测微尺的长度.目镜测微尺的中央刻有50等分或100等分的小格.测量前应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大镜下,目镜测微尺每小格所代表的实际长度(见图1),再以后作为测量微生物细胞的长度。
2. 球菌用直径表示大小;杆菌用宽和长来表示(μm)图一:测微尺的校正3. 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。
中间较宽的平台，被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区(大方格)分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。
计数区由400个小方格组成。
每个大方格边长为1mm，其面2积为lmm，盖上盖玻片后，盖载玻片间的高度为0.1mm，所以每个计数区的体3积为0.1mm。
使用血球计数板计数时，通常测定四或五个中方格的微生物数量，求其平均值，再乘以16或25，就得到一个大方格的总菌数，然后再换算成1毫升菌液中微生物的数量。
设5个中方格中的总菌数为A，菌液稀释倍数B，则: A441mL菌液中的总菌数= ×25×10×B=5×10×A?B (25个中格) 5图二:血细胞计数室构造三、实验器材1. 菌种:啤酒酵母2. 器材:普通光学显微镜、目镜测微尺镜头、镜台测微尺、盖玻片、载玻片、滴管、试管、无菌水、血细胞计数板、计数器、吸管、生理盐水、移液器。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1．活材料：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1．目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
微生物大小测定
微生物的大小测定胡雪芳 201300261033【实验目的】1.了解显微镜测定微生物大小的原理。
2.学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、镜台测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术。
【实验原理】微生物细胞的大小，是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
1.目镜测微尺目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分（如图1所示）。
图1 目镜测微尺测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
2.镜台测微尺镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的（如图2所示）。
图2 镜台测微尺校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
【实验材料】1.菌株酵母菌液，枯草芽孢杆菌斜面培养物2.仪器和用具普通光学显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、酒精灯、吸水纸、擦镜纸、结晶紫染液等。
【实验步骤】1.目镜测微尺的校正（1）把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
2.实验二 微生物细胞计数与显微测量
实验二微生物细胞计数与显微测量一、实验目的与要求1、了解血球计数板结构，掌握血球计数板计数微生物数量的技术。
2、了解目镜测微尺和物镜测微尺，掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术。
二、微生物细胞计数1、血球计数板的结构：4条竖槽和1条横槽；计数室（即正中间的大方格）大小为1mm×1mm×0.1mm；计数室共有400个小格，划分有两种可能：16中格×25小格或25中格×16小格。
菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，因血球计数板较厚，不能使用油镜，故细菌不易看清。
2、血球计数板的使用（1）低倍镜下观察空白的血球计数板，找到计数室，注意应用调光旋钮、聚光镜和光圈调节视野亮度，建议将调光旋钮调到较亮的位置、聚光镜上升、光圈调到较小的位置。
（2）滴加稀释至适宜浓度的样品，盖上特制的盖玻片，静置5-10min. 也可以先盖上盖玻片，再沿槽滴加样品。
以酵母菌为例，以小格内含4-5个酵母菌为宜。
（3）在低倍镜下寻找大方格，将正中间的大方格（即计数室）移至视野正中央，再根据需要换上高倍镜计数。
3、血球计数板的计数方法（1）计数室含25个中格时，取4个角的中格及中间1个中格计数；计数室含16个中格时，取4个角的中格计数。
当样品中的细胞数较少时，应计算所有中格中的细胞。
每个样品须重复计数2-3次。
（实验室现有的血球计数板均为25中格的格式。
）（2）计数时需调节细准焦螺旋，以看到计数室内不同深度的微生物细胞（3）压线的细胞的计数方法：计压左线和上线的细胞或压右线和下线的细胞。
4、计算方法：样品细胞数（个/mL）=每小格的细胞数×400×10000×稀释倍数三、草履虫大小（长*宽）的显微测量1. 目尺和物尺的形态、安装及用途。
注意物尺每一小格代表的实际长度。
2. 标定：两尺平行--记录两尺重合线之间的刻度数--计算标定结果（即某一放大倍数下，目尺一小格代表的实际长度）。
微生物量微生物大小及数量的测定
微生物大小及数量的测定一、实验目的1.学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方法。
2.了解血细胞计数板的构造及计数原理。
3.掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1.微生物大小测定原理微生物细胞的大小是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
其测量工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺是中央部分刻标准刻尺的载玻片，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100小格，每一小格长度为0.01mm，即10μm。
如图1。
图1镜台测微尺中央部分及镜台测微尺校正目镜测微尺目镜测微尺，如图2，是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，一般有等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微放大后的细胞物象。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
图2目镜测微尺2.血球计数板测定微生物数量的原理血细胞计数板是一块特制的载玻片，其上由4条槽构成3个平台。
中间较宽的平台又被一段横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分9个大方格，中间的大方格即为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16小方格（图5-2）；另一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是2400个。
每一个大方格边长为1mm，则每一个大方格的面积为1mm，盖上盖玻片后，盖玻片3与载玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm（10-4mL）。
以25个中方格的计数板为例，设5个中方格中的总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则：1mL菌液中的总菌数=A/5×25×10×B图3血球计数板侧面及两种类型的计数室三、实验1.菌种枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)斜面培养物；酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)液体培养基培养物。
微生物大小与数量的测定实验报告
微生物大小与数量的测定实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握使用显微镜测量微生物大小的方法，以及学会运用血球计数板对微生物数量进行测定。
通过实验操作和数据处理，深入了解微生物的形态特征和种群密度，为后续的微生物学研究打下基础。
二、实验原理（一）微生物大小的测定微生物细胞的大小是微生物的基本特征之一。
使用显微镜测微尺可以较为准确地测量微生物细胞的长度、宽度和直径等参数。
显微镜测微尺包括目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形小玻片，上面刻有刻度；镜台测微尺是一块特制的载玻片，中央有精确的刻度，用于校正目镜测微尺。
（二）微生物数量的测定血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的工具。
它由一块特制的厚玻璃片制成，玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台又被一短横槽隔成两半，每半边上面各刻有一个方格网。
方格网上刻有 9 个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成 16 个中方格，而每个中方格又分成 25 个小方格；另一种是一个大方格分成 25 个中方格，而每个中方格又分成 16 个小方格。
但无论哪种规格，每个大方格的边长均为 1 毫米，盖上盖玻片后，计数室的容积是一定的。
因此，在一定体积的菌液中，通过计算微生物在计数室中的数量，就可以换算出菌液中微生物的数量。
三、实验材料与仪器（一）材料枯草芽孢杆菌、酿酒酵母的菌悬液。
（二）仪器显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、盖玻片、滴管、擦镜纸、吸水纸等。
四、实验步骤（一）微生物大小的测定1、安装目镜测微尺将目镜测微尺装入目镜的隔板上，注意有刻度的一面朝下。
2、校正目镜测微尺（1）将镜台测微尺置于载物台上，先用低倍镜观察，找到镜台测微尺的刻度线。
（2）移动镜台测微尺，使镜台测微尺与目镜测微尺的刻度线平行，并使两者的“0”刻度线重合。
（3）换用高倍镜观察，找出两尺再次重合的刻度线。
分别记录目镜测微尺和镜台测微尺在重合线段内各自的格数。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。
测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
2。
器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
测微尺的使用方法
测微尺的使用方法测微尺是一种常用的测量工具，主要用于精确测量物体长度、宽度、深度等尺寸。
它通常由一根可伸缩的尺子和一个可固定尺子的测量头组成。
下面是使用测微尺的一般方法：1.准备工作：在开始测量之前，首先要确保测微尺的尺度清洁和无损坏。
如果尺度有灰尘或污垢，可以用一块软布轻轻擦拭。
同时，确保测微尺的运动部件灵活可动，并且固定尺子能够牢牢固定住。
2.选择合适的尺度：测微尺通常有分米、厘米和毫米的尺度。
根据需要测量的对象，选择适当的尺度。
例如，如果需要测量的物体尺寸为1.5厘米，应该选择毫米的尺度。
3.测量物体的长度：将测微尺的固定尺子靠近物体的一端，使测量头与物体紧密接触。
尽量垂直于测量物体的表面，避免产生误差。
然后，伸缩尺子，直到另一端的尺度与物体的另一端对齐。
读取固定尺子上与伸缩尺子上尺度对应位置的数值，这就是物体的长度。
如果固定尺子上有多个刻度，需要将它们相加得到最终的尺寸。
4.测量物体的宽度：与测量长度的方法类似，首先将测微尺的固定尺子靠近物体的一边，使测量头与物体紧密接触。
然后，通过伸缩尺子移动固定尺子，直到另一边的尺度与物体的另一边对齐。
读取固定尺子上与伸缩尺子上尺度对应位置的数值，这就是物体的宽度。
5.测量物体的深度：要测量物体的深度，首先需要将测微尺置于物体的表面上。
然后，从物体的表面开始，将测微尺的测量头插入物体，直到达到所需的深度。
读取伸缩尺子上与固定尺子尺度对应的数值，这就是物体的深度。
6.注意事项：在使用测微尺时，需要注意以下几点：首先，要保持测微尺的平衡，避免偏斜或倾斜。
其次，读取测量结果时，要注意对准尺度的刻度线，以避免读取错误的数值。
此外，使用测微尺时应轻拿轻放，避免将其弄折或弯曲。
总结：测微尺是一种精确测量长度、宽度、深度等尺寸的工具。
使用它需要先选择合适的尺度，然后将测微尺固定尺子靠近物体，通过伸缩尺子的移动来对齐另一端，最后读取与固定尺子尺度对应的数值。
在使用测微尺时要注意保持平衡、准确读取和轻拿轻放。
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四、其他 观察细胞形态
观察兔不同组织细胞间隙、细胞形状、细胞核及核仁 形状与数目、细胞质的形态结构
观察蚕豆根尖纵切面，观察生长区与成熟区细胞异同 观察大肠杆菌细胞性状、大小及核物质
求核质比NP
NP=Vn/(Vc-Vn) 兔肾细胞 洋葱内表皮细胞
X = n·a /m 改换物镜后，需重新标定目镜测微尺！
2.目微尺测细胞长宽
将各种细胞制片置于载物台上，测定细胞的 大小并记录
3.测量细胞的厚度： 显微镜微调焦轮上的标尺
1.将微调“O”刻度与基部镜臂上刻度线对准 转动粗调看清细胞的上端面或下端面 2.顺时针或逆时针旋转微调，看清细胞的下 端面或上端面，计下微调旋过的刻度数L，则 厚度为:h=L*b
专用于校正目镜测微尺每格长度的。
B.目镜测微尺：放在目镜筒内的标尺，固定 式目微尺为圆形玻璃片，直径20-21mm,其上 标有刻度，分直线式与网格式，前者测长度 后者计数或测面积。
在使用前必须用镜台测微尺进行校正。
C.镜台标准推动器上的纵横游标尺:计算标 本移动的距离和确定标本的位置。游标尺由 主标尺A和副标尺B组成。副标尺的分度为 主标尺分度的9/10。使用时先看到标尺的0 点位置，再看主副标尺刻度线的重合点即可 读出准物的厚度。 在调上下厚度时读出数值，一般有100个刻度， 每一刻度1-2um。
2.用目微尺测细胞长宽
1.目微尺的校对
① 将目镜微尺放于目镜内
拿出显微镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜 测微尺放入接目镜的中隔板上，使有刻度一面朝 下，再旋上目透镜，并装入镜筒内
②将镜台微尺放在显微镜的载物台上
使有刻度的一面朝上，同观察标本一样，使具 有刻度的小圆圈位于视野中央
③先用低倍镜观察，对准焦距，看清物镜测 微尺的刻度
④小心转动目镜测微尺，移动镜台微尺使两尺 平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度 重合处。
⑤记录起点线到重合线之间的镜台微尺的刻度 数（格数）n和目镜微尺刻度数m ，并查出台 微尺的实际刻度值a(一般为0.01mm)该放大系统 下目微尺每格所代表的实际长度X(mm)
二、我的目标：
1.了解不同测微尺的用途 2.熟练使用目微尺测细胞长宽， 使用微调焦轮的标尺测细胞厚度
三、我的方案
1.比较几种测微尺，了解其原理与用途
A.镜台测微尺：是中央部分刻有刻度线的特制载 玻片，一般全长1mm，通常其是中央部分刻有精 确等分线的载玻片，一般将1mm等分为100格， 每格长度0.01mm（10um)。