乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求sainuopu
乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书

货号:MS1001 规格:100管/48样乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。
测定原理:LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:提取液:60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入1.3 mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂三:液体5 mL×1瓶,4℃避光保存;试剂四:液体20mL×1瓶,4℃保存;样品测定的准备:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)

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加入物(ml) 待测样品(血清、血浆、体液等) LDH 检测工作液
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乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)
简介:
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH 或 LD)属于氧化还原酶,能够催化氢氧原 子或电子从一中底物转移到另一种底物上乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生的一个极其重要的 酶,含有锌离子,广泛分布于人和动物组织、植物和微生物中,能可逆的催化乳酸(L)和丙 酮酸(P)之间的氧化还原反应。乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)是利用乳酸脱氢 酶催化上述逆反应,即丙酮酸+NADH+H+→乳酸+NAD+。在上述反应过程中,丙酮酸还 原成乳酸,同时 NADH 氧化成 NAD+,引起 340nm 处吸光度的下降。该 LD-P 法的优点 是:1、操作比二硝基苯肼比色法简单;2、重复性好;3、准确性比二硝基苯肼法好;4、
2、 处理后的样品应及时检测,否则 LD4 和 LD5 易失效。 3、 血清或肝素抗凝血浆检测效果较好,草酸类、EDTA 抗凝剂对 LDH 活性有抑制作用。
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4、 避免使用溶血样本。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
自动分析仪计算公式:LDH(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(296/10)=ΔA/min×4758.8 注意:如果待测样品加入 LDH 保护工作液,其结果应除以 0.9。
乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明

乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明乳酸脱氢酶(LDH)法操作说明操作简介:乳酸脱氢酶(LDH)法是一种常用的生物化学分析方法。
本文将详细介绍使用乳酸脱氢酶法进行实验操作的步骤。
材料准备:1. 乳酸脱氢酶试剂盒2. 样品溶液3. 乳酸标准品4. 实验用试管和显微管操作步骤:1. 样品制备- 将待测样品装入实验用试管中。
每个样品应分别装入不同的试管,以避免交叉污染。
- 若样品过浓稀,需要进行适当的稀释,确保样品浓度在测试范围内。
2. 标准曲线制备- 准备不同浓度的乳酸标准品溶液,浓度范围可根据实验要求而定。
- 将不同浓度的标准品溶液分别装入实验用试管中。
3. 试剂添加- 分别向样品管和标准品管中加入相同体积的乳酸脱氢酶试剂,充分混匀。
4. 反应温育- 将所有试管置于恒温水浴中,温度设定为适合乳酸脱氢酶反应的温度(一般为37°C)。
- 在设定的反应温度下,将试管保持在水浴中反应一段时间(时间根据实验要求而定)。
5. 反应终止- 在反应时间结束后,以适当的方法终止反应。
常见的终止方式是添加酸性试剂或采用其他合适的方法。
6. 测定乳酸脱氢酶活性- 使用光度计、分光光度计或其他合适的仪器,测定样品和标准品反应后产生的光吸收值。
吸收值与乳酸脱氢酶活性成正比。
- 通过标准曲线,将样品的吸收值转化为对应的乳酸脱氢酶活性。
注意事项:1. 本实验操作需要严格按照实验室安全操作规范进行,避免任何可能导致个人受伤或污染的行为。
2. 实验过程中的试剂、标样和废液等应按照实验室规定的方法处理,不得随意丢弃。
3. 在操作过程中,保持实验器材和试剂的洁净,尽量避免外界因素对实验结果的影响。
4. 操作时需注意避免交叉污染,尤其是样品的装管和试剂的配比过程。
5. 样品和标准品的选择要合适,浓度范围应覆盖实验要求。
6. 温育过程中,确保试管能均匀受热,并避免发生温度不稳定的情况。
总结:乳酸脱氢酶(LDH)法是一种可靠的生物化学分析方法,适用于乳酸脱氢酶活性的测定。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求lepu

乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性。
分说明1.1 规格试剂1:3×60 mL,试剂2:1×45 mL;试剂1:1×60 mL,试剂2:1×20 mL;试剂1:1×60 mL,试剂2:1×12 mL;试剂1:2×60 mL,试剂2:2×15 mL;试剂1:1×40 mL,试剂2:1×10 mL;试剂1:1×4L,试剂2:1×1L;试剂1:1×16L,试剂2:1×4L。
1.2主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.50。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度测试300U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0085。
2.5 准确度用参考物质(GBW09177)对试剂(盒)进行测试,相对偏差应不超过±10%。
2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于5%。
2.7 线性2.7.1 在[25,750]U/L区间内,线性相关系数r应不小于0.990;2.7.2 [25,100)U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;[101,750]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.8 批间差试剂(盒)批间相对极差应不大于10%。
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui

乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒
(乳酸底物法)
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度≤0.50。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时,吸光度变化率≥0.004。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间(范围)内,其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5%。
2.5.2试剂盒批间相对极差(R)应≤10.0%。
2.6准确度
相对偏差(Bias%)应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程(SOP)

乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程(SOP)一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。
二、临床意义(一)概述乳酸脱氢酶(LDH),又称L-乳酸-NAD+氧化还原酶,酶编号为EC 1.1.1.27,分子量约为34000道尔顿。
LDH是一种细胞质酶,存在于所有组织细胞中。
由于组织中的LDH 浓度比血浆高约500倍,即使组织的轻微损伤也将导致血清中活性的明显增高,在肝、心肌、骨骼肌和肾中发现高度组织特异性活性的酶。
(二)临床意义乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗死、肝炎、肺梗死、某些恶性肿瘤、白血病等。
某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。
目前,常用于心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。
(三)医学决定水平170U/L:此值在参考范围以内,等于或低于此值可排除许多与LDH升高有关的疾病,而考虑其他的诊断。
此值还可作为病人自身的对照,用来与以前或将来的测定值作比较。
300U/L:高于此水平时,应考虑到可能引起LDH升高的各种疾病,如心肌梗塞、肝病变、传染性单核细胞增多症、进行性肌营养不良等。
因此,应作其他各种试验,以作出明确诊断。
血清溶血可使测定值增高,应予以注意。
500U/L:高于此值,常见于巨幼细胞性溶血,急性白血病、慢性粒细胞性白血病、转移癌和肝昏迷等,此时应作其他多种检测来作出正确诊断。
三、检验原理L-乳酸+NAD+−−LDH丙酮酸+NADH+H+−→NADH的生成速率与样品中LDH活性成正比,在340nm波长处,通过连续监测吸光度的上升速率(△A/min),即可计算出样品中LDH的活性。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血(禁食12小时);患者处于平静、休息状态,减少患者由于运动、饮食带来的影响;静脉采血时患者应取坐位或卧位;止血带使用后1分钟内采血,回血后立即松开;正确使用抗凝剂;防止溶血;防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆,防止样品对环境的污染、水分蒸发。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒

Focusonyourresearch Serviceforlifescience乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒货号:E-BC-K046-M方仪器:酶标仪(440-460nm)规格:96T(40sFocusonyourresearchServiceforlifescience基本信息用途本试剂盒合用于检测血清、血浆、胸水、组织、细胞等样本中LDH活力。
检测范围及敏捷度检测范围:6-1000U/L敏捷度:6U/L背景介绍乳酸脱氢酶(EC,LDH)是一种氧化复原酶,它催化丙酮酸和乳酸的互相转变,同时将NADH氧化成NAD+[1]。
LDH是一种四聚体分子,由两个亚基构成,分别为H亚基和M亚基[2]。
在组织损害或红细胞溶血后,细胞将LDH开释到血液中。
细胞外的LDH活性用于检测细胞损害或细胞死亡[3]。
检测原理以辅酶I为递氢体,LDH催化乳酸产生丙酮酸,丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,后者在碱性溶液中呈棕红色,颜色的深浅与丙酮酸的浓度呈正比,经过测定OD值,可计算LDH的活力。
本试剂盒测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,介绍使用 BCA法(货号:E-BC-K318-M)。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒供给试剂和物件编号名称规格(size)保留方式(96T)(Storage)试剂一基质液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent1)(SubstrateBuffer)试剂二辅酶I粉剂×1支2-8℃保留6个月(Reagent2)(CoenzymeI)试剂三显色剂5mL×1瓶2-8℃避光保留6(Reagent3)(ChromogenicAgent)个月试剂四碱溶液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent4)(AlkaliReagent)试剂五2μmol/mL丙酮酸标准品1mL×1支2-8℃保留6个月(Reagent5)(2μmol/mLPyruvicAcidStandard)96孔酶标板1板96孔覆膜2张样本地点标志表1张注:试剂严格按上表中的保留条件保留,不一样试剂盒中的试剂不可以混用。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求haifeng

乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)
适用范围:本产品适用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损;
2.1.2试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;
2.1.3试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量
净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1空白吸光度
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度应小于0.5。
2.3.2空白吸光度变化率
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度变化率不大于0.002/min。
2.4 线性范围
(25,1000)U/L范围内,相关系数≥0.990;
(25,100]U/L范围内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;
(100,1000)U/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下,换算为测定浓度为300U/L的样本, 吸光度变化率△A/min应不小于0.015。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5.0%。
2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090593,测定结果应不超过标示值的±10%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存,可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测,检测结果应满足2.4和2.7的规定。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
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乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)
适用范围:用于体外定量测定人体血清中乳酸脱氢酶的活性。
1.1试剂盒包装规格
试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml;
试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml;
试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:1×10L,试剂2:1×2L;
试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。
1.2试剂盒主要组成成分
2.1 外观
液体双试剂:试剂1无色至浅黄色澄清液体,试剂2无色至浅黄色澄清液体。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度:在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.5。
2.3.2试剂空白吸光度变化率:在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂时,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度
测定活性为200U/L样本时,吸光度变化率(ΔA/min)不小于0.012。
2.5 线性范围
测试血清样本,试剂线性在[25,750]U/L(37℃)区间内:线性相关系数(r)不小于0.990;在[25,100]U/L区间内线性绝对偏差应不超过±10U/L;(100,750]U/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。
2.6 重复性
用质控样品重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于5%。
2.7 批间差
不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度
相对偏差:相对偏差应不超过±10%。
2.9 稳定性
效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为15个月。
取失效期的试剂盒进行检验,试验结果满足2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。