人β2糖蛋白1抗体IgA试剂盒使用方法
人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H0149c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
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Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中IL-1β浓度。
碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。
IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。
正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。
IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。
抗β2-糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用

抗β2-糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用摘要】目的了解抗β2-糖蛋白I抗体(抗β2-GPI抗体)及亚型与系统性红斑狼疮(SLE)的关系及在诊断中的价值。
方法应用间接免疫荧光法检测100例SLE患者、39例疾病对照组类风湿关节炎(RA)7例、系统性硬化病(SSc)5例、干燥综合征(SS)19例、自身免疫性肝病4例、MCTD4例)患者和30例正常人血清中的抗β2-GPI抗体、抗心磷脂抗体(抗ACL抗体)水平,并分析与临床的关系。
结果 100例SLE患者抗ACL抗体阳性率为39%,特异性67.7%,与疾病组比较有显著性差异。
100例SLE患者抗β2-GPI抗体的滴度显著高于疾病组和正常组,联合检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率高于疾病组,且显著高于单独检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率。
抗β2-GPI抗体Ig-M与SLE存在相关性。
结论抗β2-GPI抗体在SLE 中具有敏感性,联合检测抗β2-GPI抗体和抗ACL抗体能辅助诊断SLE,抗β2-GPI抗体Ig-M在SLE诊断临床意义更大。
【关键词】抗β2-糖蛋白I抗体抗心磷脂抗体间接免疫荧光法系统性红斑狼疮【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)03-0150-02抗磷脂抗体(anti—phospholipid antibody,APL)是一组主要针对磷脂结合蛋白的异质性抗体。
如抗心磷脂抗体(ACL)、狼疮抗凝物(LAG)以及抗β2-糖蛋白(抗β2-GP)I抗体等。
抗β2-GPI抗体是以磷脂结合蛋白为靶抗原的APL,这种抗体除在系统性红斑狼疮(SLE)中有检出外,还存在于其他疾病中,如干燥综合征(ss)、类风湿关节炎(RA)、硬皮病、传染性单核细胞增多症以及免疫缺陷病毒感染等。
在自身免疫性疾病中,APL常与动静脉血栓形成、反复流产以及血小板减少有关。
1990年,研究者发现在自身免疫性疾病中APL识别的是磷脂结合蛋白β2-GP I,而在感染性疾病中APL则主要识别心磷脂。
两种试剂检测抗心磷脂抗体的比较

两种试剂检测抗心磷脂抗体的比较朱益佳;徐龙珍;胡伟;陶月;张葵;王庆飞【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】目的:对两种商品化的抗心磷脂抗体(Anti-cardiolipin,ACA)试剂的检测结果进行比较。
方法采用欧蒙公司ACA-IgA/G/M(总 ACA)检测试剂和亚辉龙公司 ACA-IgG,IgM 和抗β2糖蛋白 I(β2GPI)抗体 IgG(ACA 3项)测定试剂盒,同时检测66例血清样本,比较两者结果的差异,并分析两者之间的关系。
结果欧蒙总 ACA 试剂的检出阳性率为37.88%(25/66);亚辉龙 ACA 3项试剂的检出阳性率为31.82%(21/66,ACA-IgG,IgM 和抗β2GPI IgG 三者任一阳性),两种试剂检测结果不具有统计学差异;两者的检测符合率为87.88%(58/66)。
欧蒙试剂 ACA-IgA/G/M 的检测结果与亚辉龙试剂 ACA-IgG,IgM 和抗β2GPI IgG 3个检测值的总和具有良好的相关性(r 2=0.892,P <0.01)。
结论两种试剂检测结果符合性较高,具有良好的相关性,能满足临床应用的需要;两种试剂各具特色,可以根据需要选择合适的试剂单独或联合进行检测。
【总页数】3页(P94-96)【作者】朱益佳;徐龙珍;胡伟;陶月;张葵;王庆飞【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008【正文语种】中文【中图分类】R446【相关文献】1.优化后的线粒体抗体检测试剂盒与两种同类进口试剂盒的比较 [J], 舒翠莉;赵军;李靖;高蓉;李伯安;郑宇;程云2.两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验 [J], 张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政3.两种检测试剂盒对猪瘟抗体水平检测结果的比较 [J], 李丽;徐璐;王琴;李金海;邓飞;周莉媛;陈弟诗;张毅;张睿4.两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒检测效果比较 [J], 邢刚;邱小伙;阮系真;金玉兰5.两种HBV DNA荧光定量PCR检测试剂的检测能力精度比较 [J], 巫智勇;叶英因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤

双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。
IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-1β会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后,抗人IL-1β抗体与IL-1β接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂,若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-1β浓度。
标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作:A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测;D.标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:1.试剂盒请保存在2~8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶,请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后,请在三天内用完。
4.底物请勿接触氧化剂和金属。
5.加样时,请及时更换枪头,避免交叉污染。
6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。
7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要,在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。
8.室温反应,请严格控制在25~28℃。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程

1、 检验申请单独检验项目申请:人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV (1+2)]测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆,用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml 的全血标本,或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min ,离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间:室温(15-25℃)下可稳定48h ,普通冰箱中(2-8℃)稳定7d ,在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4-8℃冰箱内保存7d 。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛,避免剧烈活动。
医院检验科免疫室 体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程 生效日期: 年 月 日版本:第1版第 页,共 页3.方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。
当待测标本中存在HIV 抗体时,该抗体和固化的抗原结合于反应板上,并进一步与酶结合物相结合,在TMB 底物参与反应的情况下,产生显色反应。
抗β2糖蛋白1抗体(Anti-β2-GP1 )测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求zh

抗β2糖蛋白1抗体(Anti-β2-GP1 )测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法) 组成:
适用范围:用于体外定量测定人血清中的抗β2糖蛋白1抗体(Anti-β2-GP1)含量。
2.1外观
2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;
2.1.2磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液,无明显凝集;
2.1.3液体组分应澄清,无沉淀或絮状物;
2.1.4包装标签应清晰,易识别;
2.2溯源性
应根据GB/T21415-2008及有关规定提供校准品的来源、溯源的赋值方法和相应指标、以及不确定度等内容。
本试剂盒校准品可溯源至企业工作校准品,并与已上市产品比对赋值。
2.3准确度
回收率应在85%-115%范围内。
2.4 空白限
应不大于1RU/mL。
2.5线性
在[2,200]RU/mL的测量范围内,相关系数r应≥0.9900。
2.6重复性
变异系数(CV)应不大于8%。
2.7质控品的赋值有效性
质控品的测量值应在质控范围内。
2.8批间差
变异系数(CV)应不大于15.0%。
2.9稳定性
试剂盒的有效期为12个月,取到效期后的试剂盒样品进行检测,检测结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6和2.7的要求。
ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学实验技术,用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装,包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料:-ELISA检测试剂盒:根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒,确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本:准备需要检测的样本,如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板:根据试剂盒的要求选择合适的微孔板,同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备:如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤:-取出储存在4℃的试剂,确保其达到室温(一般为20-25℃),再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本:根据试剂盒的说明书,进行样本的预处理,包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样:将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中,通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板:使用洗板机或手工操作,将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体:根据试剂盒的说明书,将稀释好的特异性抗体加入各孔中,确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物:根据试剂盒的说明书,将稀释好的酶标记物加入各孔中,确保加入的量准确无误。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物:将稀释好的底物加入各孔中,使其与酶标记物反应,生成可视化的颜色。
-终止反应:根据试剂盒的要求,在一定的反应时间后,加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果:使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化,通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析:-计算样本的结果:根据试剂盒的说明书,根据吸光度或颜色强度测量结果,计算样本中目标物的浓度。
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人β2糖蛋白1抗体IgA试剂盒使用方法
检测范围:96T
60pg/ml-1600pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本β2糖蛋白1抗体IgA含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人β2糖蛋白1抗体IgA水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入β2糖蛋白1抗体IgA,再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β2糖蛋白1抗体IgA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠β2糖蛋白1抗体IgA浓度。
试剂盒组成
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。