关于禽流感相关知识综述

关于禽流感相关知识综述
向祖棚2014级预防班学号：2014106107
摘要：：参阅相关文献，综述了禽流感的产生、禽流感病毒的理化性质及变异和它的抗体等。

关键词：禽流感；病毒；文献综述；荧光RT —PCR ；快速检测。

前言：认识和了解禽流感的产生和现在禽流感病毒分子生物学研究进展，以及禽流感的一种检测技术：荧光R T —P C R 快速检测禽流感病毒H 5亚型的研究，还有我国禽流感防制研究进展。

（1）禽流感的产生：该病于1878年首次发生于意大利，以后国内外不少学者都相继报道了该病的发生及其给养鸡业造成的巨大经济损失。

H 9N 2亚型禽流感是目前世界上分布最广泛的禽流感病毒亚型。

H 9N 2亚型禽流感病毒最早于1966年从北美的火鸡体内分离得到，该亚型的流感病毒最初只感染火鸡，几乎不感染鸡。

但从2O世纪90年代以来，H9N2亚型禽流感病毒就在亚洲很多养鸡场传播开来。

该病目前已流行于世界上许多国家和地区，给养禽业造成了巨大的经济损失。

根据AIV 对禽类致病性的差异，可将A IV分为高致病性禽流感病毒(H PAIV )和低致病性禽流感病毒(LPAIV o 1878年，Perroncito~ ,录了发生于意大利鸡群的实际上为禽流感的一种严重疫病，当时称之为鸡瘟，1901年Centanni分离和描述了该病的病原，但直到1955年才证实为A 型禽流感病毒。

以后，不断有分离到禽流感病毒的报道。

有关病毒可引起鸡、火鸡和其它禽类高度致死。

1981年，在美国马里兰~HB eetsville 召开的第一届国际禽流感学术讨论会上建议废除“鸡瘟”病名，改称高致病性禽流感( H ighly pathogen ic avian infl uena ，H P A I o 1 959—2003年，全球共暴发高致病性禽流感30余次，如：1959年报道发生于英格兰的高致病性禽流感暴发；1991年英格兰一个火鸡群暴发禽流感；1997年中国香港发生高致病性禽流感，不仅引起大批感染鸡的死亡，而且导致18A 受感染，其中6人死亡。

2005年以来亚洲地区禽流感大面积、多国家同时暴发，与候鸟的迁徙散毒不无关系，欧洲和非洲的禽流感也可能与候鸟迁徙有关。

2005年5月，我国从青海湖发病死亡的斑头雁、鱼燕等候鸟体内分离到H5N 1亚型禽流感病毒。

2006年2 ～3月，瑞典、波兰、捷克分别报道了在病死的野鸭和天鹅体内发现H 5N 1亚型禽流感病毒的消息。

也许因为候鸟以及水禽的相互作用，才使得高致病性禽流感疫疫情传播具有速度快、范围广以及跳跃性强等特点。

H PAIV导致的禽流感多以突然死亡和高死亡率为主要特征，常导致感染鸡群的全群覆没，从而引起人们的极大关注，迄今发生的高致病性禽流感(H ighly Pathogenic AvianInfluenza，H PAI)均由H 5和H 7这两个亚型的病毒引起的，而且H P A I己被世界动物卫生组织列为A 类烈性传染病，在我国其也被列为一类动物疫病。

LP A IV 导致的禽流感常以呼吸道症状，产蛋率、受精率及孵化率下降为主要特征。

目前，在LP A IV 中存在最为广泛的、最具危害性的病毒就是H 9N 2亚型A IV 。

（2）A Ⅳ的基因组A IV 的基因组由8 条单性负链R N A 组成，每一条R N A 都以不同的核糖核酸蛋白复合体形式存在J。

在丙烯酸胺一琼脂糖一尿素凝胶上电泳可得8 个分子量不同的片段。

所有基因片段的5’端前13 个核苷酸高度保守，其序列为：G G A A C A A A G U G A ppp 5’；3’端也有12个高度保守的核苷酸，序列为：3 ’H O —U C G U U U —U C G U C C ]。

2 A IV 基因编码的蛋白质A IV基因共编码1O 种蛋白(P A 、P B 1 、P B 2、H A 、N A 、N P 、M 1 、M 2、N S 1、N S 2) 。

其中N S 1 与N S2 为非结构蛋白，其余均为结构蛋白。

结构蛋白又有糖基化和非糖基化之别。

糖基化的结构蛋白包括H A 和N A ，其他均为非糖基化结构蛋
白。

2 ．1H AH A 是基因表达产物中最大的糖蛋白，它是诱生保护性免疫的主要抗原。

H A由H A 1 和H A 2 亚单位组成，H A 1 具有与宿主细胞受体结合的特性，H A 2 是参与和细胞膜融合的重要亚单位。

利用抗H A 抗体，可以分析并观察H A 的结构及其与受体的结合[5]。

甲型流感病毒香港／1968 株(H 3)H A由两个结构独特的区域所构成：一个柄状区域，包含有3 股a一螺旋的线圈，从膜延伸出76 pm ；另一个是球状区域，由不平行的p 片段构成，含有受体结合部位和位于顶端的可变抗原决定簇。

每个H A 分子形成一个环，由H A 1 的N 端在膜上开始向外延伸13．5 pm ，再折叠回来，由H A 2 C 端插入膜内。

在电镜下观察到的H A 突起，其实是由3 个H A 蛋白分子所组成。

其顶端为大的球形体，是病毒与细胞受体结合的部位。

多数糖链位于球形体下面的基部，使茎部外侧面有亲水性。

病毒H A 的变异区也存在大球体上，并聚集成五个区。

H A 是决定宿主范围的因素之一，H A 有免疫原性，可诱生抗体及细胞免疫。

（3）荧光R T —PCR 检测 A IV H5 的特异性和敏感性试验
敏感性试验：
包括对感染性尿囊液、人工感染SPF 鸡组织脏器的检测。

特异性试验：
将主要的禽肉产品(鸡肉、鸭肉) 中因使用弱毒苗或其它原因可能存在的干扰病毒，进行荧光R T —PCR检测，观察对本课题检测方法的影响。

共选择如下毒株进行：AIV H 9、IBDV 弱毒苗、IBD V 中等毒疫苗、ND V强毒、NDV 疫苗毒(Ⅳ系)、ND V 疫苗毒(Clone 一30)、IBV 疫苗毒(H 120)、IBV 疫苗毒(H 52)、肾型传支疫苗毒、鸡传染性贫血因子(CAA ，Cux 一1 毒株)、鸭瘟弱毒疫苗、鸭病毒性肝炎弱毒疫苗。

（4）禽流感的疫苗防制研究。

流感病毒水平传播效率极高．其致病力变异极为复杂，并且对其机制迄今知之甚少，故禽流感的弱毒疫苗自然成为可望而不可及的奢望传统的灭括疫苗具有良好的免疫保护性，是禽流感防制的主动措施、关键环节和最后防线，在许多国家禽流感防制中都起到厂极其重要的作用。

1995 年墨西哥发生禽流感，在其后的 3 年内，诙国使用厂8．5 亿羽份的灭活疫苗，有效地控制厂疫情。

目前．我国针对已分离鉴定的所有不同亚型禽流感病毒的灭括疫苗已研制成功，并均具有良好的免疫保护效果] 其中的H 9 亚型禽流感灭活苗在我国吉林、浙江、河南、河北等地开展厂区域试验，应用达2 000 余万羽份，对我国广泛存在的H 9 亚型禽流感局部疫情的控制起到厂积极作用禽流感灭活苗的使用．在控制疫情的同时，也一定程度上增加r 疫病监测中区分疫苗免疫与自然感染的难度，全面的综合防疫措施与基因工程疫苗相结合才是我国禽流感防制的发展方向。

目前，我国在禽流感基因工程疫苗的研制方面也取得r 一批具90 年代国际先进木平的研究成果。

其中．采用H 5 亚型血凝素(H A ) 和神经氨酸酶(N A )基因．经杆状病毒表达．构建r H 5 亚型基因重组杆状病毒昆虫细胞表达亚单位疫苗．初步动物试验结果已显示出良好的免疫保护原性；开展厂禽流感H A 基因疫苗脖质体的研究【蹦]，以脂质体转染技术构建，H 7 亚型禽谎感病毒血凝性基因重组鸡痘病毒，并对其进行，免疫保护性研究，结果表明，H 7 亚型A IV H A 基因的重组禽瘟病毒可诱导鸡产生有效的免疫保护反应，肠道排毒显著减少；近期H 5 亚型A TV H A 基因重组禽痘病毒在动物试验中也显示出良好的免疫保护反应在H 5、H 7 亚型A 1vH A 基因重组禽痘病毒研究的基础上，H 5 和H 7 亚型H A基因重组禽瘟病毒载体疫苗即将获得成功。

D N
A 疫苗作为90 年代刚剐兴起的新型疫苗策略，已在禽流感防制上显示出极为光明的前景我国研制的H 7亚型血凝素基因D N A 疫苗，在极小的使用剂量下即可成功诱导免疫保护反应，并有效阻断同源低致病力禽流感病毒在机体内的感染和排毒；研制的H 5 亚型血凝素基因D N A 疫苗，具有良好的免疫原性，肌肉注射途径即可达到对同源强毒攻击的免疫保护．并船有效阻断免疫保护存话鸡机体的排毒。

我国开展的上述基因工程疫苗防制禽流感的基础性研究，为我国禽流感基因工程疫苗的开发与应用奠定r 技术储备，使我国应用禽流感基因工程疫苗，清除鸡群中流行的具有潜在高致病突变可能的H 5、H 7 低致病力禽流感病毒及耳前流行广泛、危害严重的中、低致病力H 9 亚型禽流感病毒的防制策略成为可能。

参考文献：关于禽流感病毒的相关文献综述李颖靓( 山西农业大学动物科技学院，山西太谷030801 )
禽流感病毒分子生物学研究进展金元昌-，李景鹏，张龙，孙岳，于敏，杨甲芳。

(1．东北农业大学生命科学学院生命中心基因部，黑龙江哈尔滨150030；2．东北农业大学食品科学学院，黑龙江哈尔滨150030 ；3．东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江哈尔滨)
荧光R T —P C R 快速检测禽流感病毒H 5亚型的研究朱文斯赖平安黄茜华张鹤晓杨伟(深圳市匹基生物工程股份有限公司，深圳518000) ( 国家质检总局动植物检疫实验所，北京100029)
我国禽流感防制研究进展于康震，付朝阳．崔尚垒．步志高，唐秀英(1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心，黑龙江哈尔滨15000 1{2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨1 50001)。