牛蒡子止咳祛痰药效物质基础研究_袁媛

表 2 各组酚红排泌量
因。本实验跨学科地运用了中药学、药物分析学、药理 学、数学及计算机科学，将色谱的指纹图谱技术运用于 不同极性化合物的化学信息的采集，并将采集到的化 学信息与药理实验结果组成矩阵，进行相关分析和回 归分析，得出与药效相关性较大的化学组分作为药效 物质基础，为中药药效物质基础研究进行了有意义的 探索。既有利于揭示中药的作用机制，也对优化制剂 工艺、制订中药质量标准控制、保障药品临床疗效和安 全性具有重要意义。
（ 2） 试 剂： 酚 红、碳 酸 氢 钠、氢 氧 化 钠。（ 3 ） 动 物： 同 挥疗效的特点，造成目前我国中药药效物质基础研究
2. 1. 1. 3。
水平不高，这是中药难以进入国际市场的一个重要原
2. 2. 2 实验方法与结果 取健康昆明种小鼠 132 只， 雌雄各半，按体重随机分成 11 组，其中 1 组为空白对照 组，剩下 10 组将上述 10 种供试液分别按 10g / kg 灌胃给 予小鼠，实验前小鼠禁食 16h，在末次给药后 30min，腹 腔 注 射 5% 酚 红 溶 液 0. 2mL /10g 体 重，注 射 酚 红 后 30min，空气栓塞处死动物，剥离气管周围组织，剪下自 甲状骨下至气管分支处的一段气管，放入盛有 3mL 的 生理盐水的试管中，再加入 5% 碳酸氢钠 0. 1mL 调 pH 值，用 721 分光光度计，波长 546nm 测 OD 值，用酚红做 一标准曲线，根据曲线计算酚红含量，统计处理给药组 与模型组的差异。实验结果见表 2。
本实验通过对牛蒡子止咳祛痰药效物质基础的研 究，进而对牛蒡子其他如抗肿瘤、降血糖等药效物质基 础进行研究，为开发新药奠定理论基础。
组别 空白对照组
水提取物 甲醇提取物 乙醇提取物 丙酮提取物 乙酸乙酯提取物 石油醚提取物 水提正丁醇萃取物 水提乙酸乙酯萃取物 水提石油醚萃取物 水提萃后物
酚红排泌量（ x珋± s） 5． 52 ± 4． 44 1． 64 ± 0． 92* 1． 80 ± 0． 94* 1． 68 ± 1． 14* 1． 09 ± 0． 56* 1． 00 ± 0． 62 0． 91 ± 0． 47* 3． 96 ± 4． 06
色谱 柱： Hypersil ODS （ 4． 6mm × 200mm，5μm） 、 流动相： 甲醇 ∶ 磷酸水 = 50 ∶ 55、检测波长： 280nm、流 速： 0. 8mL / min、柱温： 室温。 1. 4 图谱分析
精密吸取供试品溶液各 5μL，按照上述色谱条件 进行分析，记录色谱图，对各样品色谱图进行定性和定 量分析，共得到 40 个色谱峰，依次记为 X1—X40，记录 各色谱 峰 峰 面 积，获 得 化 学 数 据，各 自 指 纹 图 谱 见 图 1 ～ 10。 2 药效实验 2. 1 不同 极 性 牛 蒡 子 提 取 物 对 浓 氨 水 诱 咳 的 影 响 （ 镇咳作用） ［1］ 2. 1. 1 实验仪器与材料 （ 1） 仪器： YLS—8A 多功能 诱咳引喘仪。（ 2） 试剂： 浓氨水。（ 3） 动物： 健康昆明 种小鼠，雌雄各半，体重 18 ～ 22g，由沈阳医学院动物 实验中心提供，合格证号： XCXK（ 辽） 2003—0016。 2. 1. 2 实验方法与结果 取健康昆明种小鼠 132 只， 雌雄各半，按体重随机分成 11 组，其中 1 组为空白对 照组，剩下 10 组将 1. 2 项下 10 种供试液分别按 10g / kg 灌胃给予小鼠，连续 7 天，末次给药 1h 后，将小鼠 置于有浓氨水的诱咳引喘仪内，雾化 15s，观察小鼠的 咳嗽潜伏期和 5min 内咳嗽次数。T 检验比较各给药 组与模型对照组之间咳嗽潜伏期和咳嗽次数差异显著
参考文献 ［1］ 徐淑云，卞如濂，陈修． 药理实验方法学［M］． 北京： 人民卫生出版
社，2002： 1361 － 1363． ［2］ 董平，李 新． 多 元 分 析［M］． 沈 阳： 辽 宁 中 医 药 大 学 研 究 生 部，
2003： 24 － 47． ［3］ 宋宗华，毕开顺，冯东，等． 苓桂术甘汤配伍机制及药效物质基础
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图 9 水提石油醚萃取物色谱图
图 10 水提萃后物色谱图
表 1 各组咳嗽潜伏期与咳嗽次数
是牛蒡苷和牛蒡苷元。通过相关分析，牛蒡苷与咳嗽
组别
咳嗽潜伏期（ x珋± s）
咳嗽次数（ x珋± s）
次数呈显著负相关，提示有减少咳嗽次数作用。又通
空白对照组 水提取物
6． 47 ± 2． 98
4． 71 ± 2． 14 2． 02 ± 0． 73*
注： 与空白对照组比较，* P ＜ 0. 05。
3结果
由于对照品种类有限，仅确定 X14 与 X25 号峰分别
本实验是将牛蒡子不同极性提取物的体外化学信 息与药理实验结果组成矩阵，进行相关分析和回归分 析，得出与药效相关性较大的化学组分作为药效物质 基础。但笔者认为，下一步应将牛蒡子不同极性提取 物的体内化学信息（ 即血清化学成分） 和药理实验结 果相结合得出药效物质基础，因为血清药物化学指出 只有入血的成分才能真正的起到药效作用。
控制及其水提物药代动力学与药效动力学。
过，浓缩挥干，用水溶解定容至 40mL，即得水提取物、 丙酮提取物、甲醇提取物、乙醇提取物、石油醚提取物、 乙酸乙酯提取物； 再取 10g 牛蒡子药材，加水 110mL， 回流提取 1h，过滤，滤液依次用正丁醇、乙酸乙酯、石 油醚萃取 2 次，萃取液和剩余药液浓缩挥干，用水溶解 定容至 40mL，即得水提正丁醇萃取物、水提乙酸乙酯 萃取物、水提石油醚萃取物和水提萃后物。 1. 3 色谱条件
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性，实验结果见表 1。
图 1 甲醇提取物色谱图
图 2 乙醇提取物色谱图
图 3 水提取物色谱图 图 4 丙醇提取物色谱图 图 5 乙酸乙酯提取物色谱图 图 6 石油醚提取物色谱图

图 7 水提正丁醇萃取物色谱图 图 8 水提乙酸乙酯萃取物色谱图
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牛蒡子止咳祛痰药效物质基础研究
袁媛
（ 辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳 110034）
摘 要： 以镇咳、祛痰为药效指标，用回归分析和相关分析对牛蒡子不同极性提取物进行物质基础研究。结果表明： 牛蒡苷和牛蒡苷元是牛蒡子止咳药效物质基础之一，但不是祛痰药效物质基础。
YUAN Yuan （ Liaoning Institute of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110034，Liaoning，China）
Abstract： With stopping cough and expectorant as the pharmacodynamic parameters，using regression analysis and correlation analysis to have a basic material research of the different polar extracts of Arctium． The results showed that： arctiin and arctigenin is one of the foundation of cough efficacy，but not the material basis for efficacy expectorant．
研究［J］． 中成药，2003，25（ 2） ： 132 － 137．
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Key words： Arctium Lappa L． ； stopping cough； expectorant
牛蒡子是一味中医临床常用解表药，有较高的药 用价值。《中华人民共和国药典》2010 年版收载其为 菊科植物牛蒡 Arctium lappa L． 的干燥成熟果实，具有 疏散风热、宣肺透疹、解毒利咽的功效，用于风热感冒、 咳嗽 痰 多，麻 疹，风 疹，咽 喉 肿 痛，痄 腮 丹 毒，痈 肿 疮 毒［1］。从该药材中提取得到的化学物质主要有木脂素 类成分（ 牛蒡苷和牛蒡苷元是代表成分） 、萜类成分和 挥发油类成分等。查阅相关文献，尚未发现对其止咳 祛痰药效物质基础的研究，本研究以此为切入点寻找 牛蒡子药理活性成分，利用不同极性溶剂将牛蒡子提 取或萃取分离成不同极性化学成分群，然后对不同化 学成分群进行止咳、祛痰实验，将药效学实验结果与提 取液各指纹色谱峰峰面积相关联，通过相关分析和逐 步回归分析确定牛蒡子药材与止咳、祛痰作用相关的 有效成分。其具体实验方法及实验结果如下： 1 牛蒡子不同极性提取物制备 1. 1 实验仪器与材料 1. 1. 1 仪器 LC － 10ATVP 高效液相色谱仪、SPD － 10AVP 检测器、DZTW 调温电热套、XS105 电子天平。 1. 1. 2 试剂 所用试剂甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、 石油醚、正丁醇均为分析纯。 1. 1. 3 试药 牛蒡子药材购于辽宁省中医药研究院 药局，经辽宁中医药大学康廷国教授鉴定为菊科植物 牛蒡 Arctium lappa L． 的干燥成熟果实。 1. 2 供试液制备
甲醇提取物 乙醇提取物 丙酮提取物 乙酸乙酯提取物 石油醚提取物 水提正丁醇萃取物 水提乙酸乙酯萃取物 水提石油醚萃取物 水提萃后物
27． 42 ± 13． 59 26． 83 ± 10． 42 39． 00 ± 17． 99 37． 25 ± 16． 97 32． 92 ± 10． 89 31． 45 ± 10． 92 33． 58 ± 7． 75 32． 58 ± 10． 77 39． 83 ± 16． 19* 32． 25 ± 10． 06 43． 82 ± 15． 85*
注： 与空白对照组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01。
为参考指标，考察不同提取物的药理效果，直至分离成