观察叶绿体和线粒体的试验
实验五用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与讨论
01 实验目的
掌握高倍显微镜的使用方法
熟悉显微镜的结构和 操作步骤，包括调节 焦距、对光、移动载 玻片等。
了解显微镜的保养和 维护，确保实验结果 的准确性和仪器的使 用寿命。
用纸巾轻轻按压盖玻片，去除多余的 液体。
用镊子夹取染色后的组织块，放在载 玻片上，盖上盖玻片。
用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
将制作好的临时装片放在显微镜 的载物台上。
调整显微镜的焦距，使观察到的 图像清晰。
仔细观察叶绿体和线粒体的形态、 分布和数量。
记录观察结果
01
用笔记录观察到的叶绿体和线粒体的形态、分布和 数量。
高倍显微镜的工作原理
高倍显微镜是一种光学仪器，通过透镜的放大作用，将微小的物体放大并清晰地呈 现出来。
高倍显微镜通常配备有多个透镜，包括物镜、目镜和聚光镜等，以实现更高的放大 倍数和更好的观察效果。
在观察叶绿体和线粒体时，高倍显微镜能够提供足够的放大倍数和分辨率，使观察 者能够清晰地看到它们的形态和分布。
掌握高倍显微镜的使 用技巧，如选择合适 的放大倍数、调整光 圈大小等。
了解叶绿体和线粒体的形态和分布
通过观察不同植物或组织切片， 了解叶绿体和线粒体的形态特征，
如大小、形状、数量等。
学习如何识别和区分叶绿体和线 粒体，了解它们在细胞内的分布
情况。
了解叶绿体和线粒体在不同类型 细胞中的差异分布和功能特点。
培养实验操作技能和观察能力
通过实验操作，培养学生对微 观世界的观察能力和动手能力。
训练学生使用显微镜进行观察、 记录和分析实验结果的能力。
细胞生物学实验叶绿体和线粒体的分离
叶绿体和线粒体的分离及活体染色
实验步骤（叶绿体部分）
叶绿体悬浮液： 1，选取鲜嫩的菠菜叶，清洗后除去叶梗及粗的叶脉，称适量叶子放于研钵中，加 入5ml 0.35M氯化钠溶液，研磨制成匀浆液。 2，将匀浆液通过6层纱布过滤到烧杯中。 3，取4 ml滤液在1000 rpm 4℃下离心2 min。弃去沉淀。 4，将上清在3000 rpm 4℃下离心5 min，弃去上清液，所得到的沉淀就是叶绿体。 5，沉淀用适量的氯化钠溶液重新悬浮。 6，滴此悬液在载玻片上，在普通显微镜和荧光显微镜下观察，再取一份滴加0.01 ％吖啶橙染色后放于荧光显微镜下观察。
叶绿体和线粒体的分离及活体染色
实验原理：
1、 差速离心（适用于不同沉降速度的颗粒分批分离） 采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心，使沉降速度不同的颗粒在
不同的分离速度及不同的离心时间下分批分离的方法。 一个颗粒在一个固定离心力的作用下的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密
度，也同悬浮颗粒介质的粘稠度有关。 当以一定离心力在一定的离心时间内进行离心时，在离心管底部就会得到最大
徒手切片： 将菠菜叶置于载玻片上，加上2滴0.35 M氯化钠溶液，用手术刀片与水平方向
成30度角将菠菜叶切削成一个斜面（尽可能选择较薄的部分切），用盖玻片轻轻 压平后在显微镜下观察边缘部分。
滴加吖啶橙染色染色2分钟，洗去余液，加盖盖玻片后用荧光显微镜观察。
叶绿体和线粒体的分离及活体染色
实验结果（叶绿体部分）
和最重颗粒的沉淀，分出的上清液在加上转速下再进行离心，又得到第二部分较大、 较重颗粒的“沉淀”及含较小和较轻颗粒的“上清液”，如此多次离心处理，即能 把液体中的不同颗粒较好分开。这时所得沉淀是不纯的，需经再悬浮和再离心 （2—3次），才能得到较纯颗粒。
[高中生物实验总结]生物实验总结
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［高中生物实验总结］生物实验总结生物实验总结篇（一）:高中生物实验知识总结实验一观察线粒体和叶绿体1、实验原理①叶绿体呈绿色的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。
②线粒体呈无色棒状、圆球状等，用健那绿染成蓝绿色后制片观察。
2、实验步骤①观察叶绿体：制作藓类叶片的临时装片T先低倍镜后高倍镜观察叶绿体②观察线粒体：制作人的口腔上皮细胞临时装片（健那绿染液染色）T先低倍镜后高倍镜观察观察线粒体3、注意问题①实验过程中的临时装片要始终保持有水状态。
②要漱净口腔，防止杂质对观察物像的干扰。
③用菠菜叶带叶肉的下表皮的原因：靠近下表皮的叶为海绵组织，叶绿体大而排列疏松，便于观察；带叶肉是因为表皮细胞不含叶绿体。
④叶绿体在弱光下以椭球形的正面朝向光源，便于接受较多的光照；在强光下则以侧面朝向光源以避免被灼伤。
实验二叶绿体色素的提取和分离1、提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有机溶剂中，所以可用无水酒精等提取色素。
2、分离色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而分离色素。
溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢。
3、各物质作用：无水乙醇或丙酮：提取色素；层析液：分离色素；二氧化硅：使研磨得充分；碳酸钙：防止研磨中色素被破坏。
4、结果：滤纸条从上到下依次是：胡萝卜素（最窄）、叶黄素、叶绿素a（最宽）、叶绿素b（第2宽），色素带的宽窄与色素含量相关。
5、注意事项：（1）画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次（2）分离色素：不能让滤液细线触及层析液实验三探究酵母菌的呼吸方式1、原理:酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：C6H12O6+6O2+6H2O6—CO2+12H2O+能量在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳：C6H12O6f2C2H5OH+2CO2+少量能量2、检测：(1)检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
(2)检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。
高三生物基础实验(人教版(上))：实验3 观察线粒体和叶绿体 含解析
高三生物基础实验(人教版(上))：实验3 观察线粒体和叶绿体含解析观察叶绿体和线粒体的方法实验原理：1.叶绿体呈扁平的椭球形或球形，呈绿色，无需染色，制片后直接观察。
2.线粒体呈无色，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等，需用健那绿染成蓝绿色后制片观察。
实验步骤：1.观察叶绿体。
2.观察线粒体。
技能方法：1.保持临时装片中的材料有水状态，以保证叶绿体的正常形态，并能悬浮在细胞质基质中。
2.滴加健那绿染液，可使细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，从而在高倍显微镜下可以观察线粒体的分布和形态。
注意事项：1.要漱净口腔，防止杂质对观察物像的干扰。
2.选择菠菜叶稍带些叶肉的下表皮为实验材料，因为靠近下表皮的叶肉为栅栏组织，叶绿体大而排列疏松，便于观察。
3.叶绿体在弱光下以椭球形的正面朝向光源，便于接受较多的光照；在强光下则以侧面朝向光源，以避免被灼伤。
4.盖盖玻片时，一定要缓慢且与载玻片成45°夹角，盖玻片一侧先接触液滴，防止装片下产生气泡。
误区警示：1.观察线粒体应选择无色细胞，不能选择绿色组织细胞。
2.观察叶绿体和线粒体均需保持细胞活性状态。
3.观察叶绿体时需保持叶片有水状态，防止失水。
4.制作观察线粒体的临时装片时，需滴加健那绿染液于载玻片中央用于染色。
5.叶绿体不仅随细胞质的流动而流动，还随光照方向的改变而旋转，一般以正面朝向光源，以利于接受更多光照。
课堂巩固：正确答案为B，不能用菠菜叶做实验材料来观察线粒体，因为菠菜叶为绿色，影响了对实验现象的观察。
2.检测试剂或染色剂在生物学实验中具有重要作用。
在脂肪的检测实验中，苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色；在探究酵母菌细胞呼吸实验中，酸性重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色；在观察线粒体的实验中，健那绿染液可将线粒体染成蓝绿色；在观察植物细胞有丝分裂的实验中，碱性吡罗红可将染色体染成红色。
因此，选D。
3.用高倍镜观察叶绿体和线粒体的实验中，叶绿体无需染色，线粒体需要用健那绿染成蓝绿色才能观察。
专题12 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 考点知识点大全
专题12 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体1．实验原理（1）叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。
（2）线粒体呈无色，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等，用健那绿染液染成蓝绿色后制片观察。
2．实验步骤（1）观察叶绿体（2）观察线粒体考向线粒体、叶绿体观察实验的原理与操作1．下列有关“用高倍镜观察叶绿体和线粒体”实验的叙述中，正确的是A．用健那绿给活细胞染色时会杀死活细胞B．观察叶绿体时必须使细胞处于有水状态C．高倍镜下可看到短棒状或哑铃形的叶绿体D．观察叶绿体可观察菠菜叶的下表皮细胞【参考答案】B易错警示走出叶绿体、线粒体观察实验的“5”个误区（1）观察线粒体应选择人体或动物细胞或植物体无色部位细胞，不能选择绿色组织细胞。
（2）观察线粒体与叶绿体均需保持细胞活性状态。
（3）观察叶绿体时需保持叶片有水状态，防止失水。
（4）制作观察线粒体的临时装片时，是滴一滴健那绿染液于载玻片中央用于染色，而不是滴一滴生理盐水。
（5）叶绿体不仅随细胞质的流动而流动，还随光照方向的改变而旋转，一般叶绿体以正面朝向光源，以利于接受更多光照。
2．下列关于用显微镜观察叶绿体和线粒体的说法，正确的是A．在高倍镜下观察可以看到活细胞的线粒体呈现灰绿色，细胞质接近无色B．若视野比较暗，可调节反光镜和减小光圈C．在低倍镜下可观察到叶绿体均匀分布在细胞质中D．藓类叶片可直接放在载玻片上观察叶绿体【答案】D【解析】在高倍镜下观察可以看到活细胞的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，A错误；若视野比较暗，可通过调节反光镜和增大光圈来增加进光量，B错误；在低倍镜下可观察到叶绿体不均匀分布在细胞质中，C错误；藓类叶片薄而小，叶片由单层细胞构成，内含叶绿体，因此可直接放在载玻片上观察叶绿体，D正确。
1．下列关于“用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体”实验的说法，不正确的是A．健那绿染液是一种活细胞染料，几乎不损伤细胞B．高倍显微镜下，可看到绿色、扁平的椭球形或球形的叶绿体C．健那绿染液可将细胞质染成蓝绿色D．藓类叶片可直接放在载玻片上观察叶绿体2．下列关于叶绿体和线粒体结构与成分的叙述中，错误的是A．两者可以分布于不同的细胞中B．两者都具有双层膜结构C．两者的基质成分与功能不同D．两者所含有的催化化学反应的酶相同3．洋葱鳞片叶内表皮细胞和人口腔上皮细胞都能用于观察线粒体，下列叙述正确的是A．都需要用蒸馏水制作装片，保持活细胞状态B．都需要用盐酸处理，加速染色剂进入细胞C．都需要用健那绿将线粒体染成蓝绿色D．都需要用酒精漂洗洗去浮色，便于观察4．下列关于生物学实验中所用试剂的说法，正确的是A．用双缩脲试剂鉴定蛋白质时，需将NaOH溶液和CuSO4溶液混匀后使用B．用吡罗红染色剂处理细胞，可以观察到DNA在细胞中的分布C．用苏丹Ⅳ染液鉴定含油多的细胞，显微镜下可见染成橘黄色的颗粒D．观察细胞中的线粒体，可以用健那绿染液给线粒体染色5．下列有关实验中，操作步骤错误的是A．观察DNA和RNA在细胞中的分布：取洋葱鳞片叶内表皮→水解→染色→观察B．观察细胞中的叶绿体：取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮→制片→观察C．观察细胞中的线粒体：取人口腔上皮细胞→染色→制片→观察D．脂肪的鉴定：切取花生子叶薄片→染色→洗去浮色→制片→观察6．下列有关显微镜的观察类活动的叙述，正确的是A．黑藻叶片可直接放在载玻片上观察叶绿体B．高倍显微镜下可观察到洋葱外表皮细胞中流动的叶绿体C．检测生物组织中的油脂时，视野下的橙黄色油脂颗粒主要在细胞间D．观察根尖分生区时，一个视野中绝大部分细胞被染成深色的棒状小体7．下列有关显微镜操作的叙述，错误的是A．标本染色较深，观察时应选用平面反光镜和小光圈B．将位于视野右上方的物像移向视野的中央，应向右上方移动玻片标本C．转换高倍物镜后，不能调节粗准焦螺旋，只能调节细准焦螺旋D．转换高倍镜之前，应将所要观察的物像移到视野的中央8．下列关于实验材料选择合理的是A．洋葱鳞片叶紫色外表皮取代口腔上皮细胞观察线粒体B．甘蔗汁取代梨汁进行还原糖鉴定C．叶肉细胞取代根尖分生区细胞观察有丝分裂D．黑藻取代菠菜观察叶绿体9．下列实验中都涉及的操作是①用花生子叶检测生物组织中的脂肪②用洋葱内表皮细胞观察DNA和RNA在细胞中的分布③用黑藻叶细胞观察叶绿体④用大蒜的不定根做低温诱导植物染色体数目的变化A．需制成装片B．需使用盐酸C．需使用酒精D．需染色处理10．使用染色剂染色是生物学实验常用的方法，某同学对有关实验做了如下归纳：（1（2）实验②和实验④在染色之前，都使用了一定浓度的盐酸处理，其中，实验②用盐酸处理可改变________的通透性，加速染色剂进入细胞；实验④用盐酸与酒精混合，对材料进行解离。
用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
3.观察线粒体的实验为什么要滴加健那绿染液？ 提示：健那绿是对活细胞中线粒体染色的专一性染料，可使活 细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，从而在高倍 显微镜下可以观察线粒体的分布和形态。
1.(2013·亳州模拟)关于观察叶绿体的实验，下列说法正确 的是( ) A.选用含叶绿体小而少的细胞来观察 B.活细胞细胞质基质中的叶绿体是静止不动的 C.选用含叶绿体大而少的细胞来观察 D.制片时叶片应用于临时装片的制作，且含 水量高，因此适宜用于观察。 (2)据A、B、C三组实验可知，光照、温度可影响叶绿体的形 态和分布。 (3)制作临时装片需要载玻片、盖玻片等。 (4)叶绿体主要分布于叶肉细胞中，且下表皮中叶绿体大且少， 易于观察，因此应选取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮。 答案：(1)叶片薄，有些部位只有一层细胞 (2)适当增加光照和提高温度 (3)载玻片、盖玻片 (4)叶绿体主要分布于叶肉细胞中，且下表皮中叶绿体大且少， 易于观察
【解析】具有双层膜结构的细胞器只有线粒体和叶绿体，叶绿 体内膜光滑，基质中含有类囊体堆叠成的基粒，类囊体薄膜上 含有ATP合成酶等与光合作用有关的酶。线粒体内膜向内折叠 形成嵴，据此可以得知甲是线粒体，乙是叶绿体。观察线粒体 所用染色剂为健那绿染液，而观察叶绿体选用菠菜稍带叶肉的 下表皮作为实验材料。生物膜的主要成分是磷脂和蛋白质，在 结构上都具有一定的流动性。光反应的产物是O2、ATP和 ［H］；Mg是形成叶绿素的必要元素，植物缺少Mg，将直接 影响光反应过程。线粒体和叶绿体中都含有DNA，它与该细胞 器的复制有关系。线粒体是有氧呼吸的主要场所，O2参与有氧 呼吸第三阶段的反应，形成H2O。
4.选取易于观察的材料 选取的实验材料观察现象越明显，越有利于得出正确结论，如 观察植物细胞的液泡时不能选用叶肉细胞，因为叶肉细胞的液 泡基本无色，并且叶绿体的绿色会对实验结果产生干扰。 5.选取易于操作的材料 选取的材料易于操作，有利于实验的顺利进行，如检测生物组 织中的脂肪，不能将芝麻种子做切片观察，因为芝麻种子很小， 不容易操作。
新课程改革生物学科考点分析word版实验：用高倍镜观察叶绿体和线粒体
实验：用高倍镜观察叶绿体和线粒体JI CHU SHU LI基础梳理1．实验原理(1)叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形，不需要染色，制片后直接观察。
(2)线粒体呈无色，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等，用健那绿染液染成蓝绿色后制片观察。
2．实验步骤(1)观察叶绿体 制作藓类叶片临时装片⎩⎪⎨⎪⎧ ①在洁净的载玻片中央滴一滴清水②用镊子取一片藓类的小叶，或取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮，放入水滴中③盖上盖玻片↓↓高倍显微镜下观察叶绿体的形态和分布(2)观察线粒体 制作人的口腔上皮细胞临时装片⎩⎪⎨⎪⎧ ①在洁净的载玻片中央滴一滴健那绿染液②用消毒牙签刮自己漱净的口腔内侧壁后涂抹于染液中③盖上盖玻片↓↓高倍显微镜下观察⎩⎪⎨⎪⎧线粒体被染成蓝绿色细胞质接近无色SI WEI BIAN XI思维辨析易错整合，判断正误。
(1)只用菠菜的表皮细胞即可观察到叶绿体( × )(2)用健那绿染完口腔上皮细胞后，上皮细胞即死亡( × )(3)常用藓类小叶作为观察叶绿体的材料，是因为叶片薄、叶绿体多( ×)YAN SHEN TAN JIU 延伸探究1．选菠菜叶作为观察叶绿体的材料，为什么要撕取带少许叶肉的下表皮？[提示]叶绿体主要分布在叶肉细胞中，叶表皮处无叶绿体，接近下表皮处为海绵组织，细胞排列疏松，易撕取。
2．观察叶绿体时，临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因是什么？[提示]保持有水状态以保证叶绿体的正常形态，并能悬浮在细胞质基质中，否则细胞失水收缩，将影响对叶绿体形态的观察。
重 难 精 讲1．实验材料的选取根据本实验原理，可以解决以下问题：(1)观察光照对叶绿体分布的影响。
(2)线粒体数量与细胞功能的关系。
(3)走出叶绿体、线粒体观察实验的“5”个误区①观察线粒体应选择人体或动物细胞或植物体无色部位细胞，不能选择绿色组织细胞。
②观察线粒体与叶绿体均需保持细胞活性状态。
③观察叶绿体时需保持叶片有水状态，防止失水。
用高倍镜观察线粒体和叶绿体实验方案的改进
（ ） 色 后 若不 洗脱 多余 染 液 ， ５染 细胞 中会滞 留较
多健那绿染液 ， 响 观察。建议染 色 时间到后 按如 下 影 方法洗脱 ： 将载玻片平放在实验 台上（ 防止 因盖玻 片滑
是单独 的叶绿体 ， 盖片观察 。 （） ４ 菠菜、 酸模皱叶 ： 事先 去除黄叶 ， 洗净 。在无直 射光和强光处 晾晒 ， 当菠菜叶稍微变软时（ 此时叶片失 去一部分水 ， 下表皮与叶 肉结合力较强、 较紧密动物 ） 水 调查方
定量 的叶肉细胞 下 的表皮 【 。放 入 载玻 片上 的水 滴
中， 盖片观察 。
２ 线 粒 体 的 观 察
线粒体 的观察主要在 以下方面改进 ：
４ ３ 合理安 排 ． 国外 大多数 的“ ｉ ｌｚ 都 是 以 ２ ｈ Ｂｏ ｌ ” Ｂｔ ４
１１ 实验材料 ．
本实验安排在第一学期 的 中期 ， 而我
国地域广 阔 ， 致使部分地 区秋季难 以找 到新 鲜藓类 、 黑 藻， 因此 菠菜 、 芦荟等是较好 的实验材料 。为让 学生观 察 到叶绿 体更 多的分布和形态 ， 建议添加 天 门冬 、 叶 皱 酸模 、 水绵等作 为实验材料 ， 这些材料在秋冬 季节均 比
子贴近 叶下表 皮从 叶 中部 向边 缘撕 揭 ， 可得 到连 有一
动造成 细胞折 叠而影响观察 ） 在载玻片的一端逐滴滴 ， 加生理盐水 ， 在另 一端 用 吸水 纸吸取 液体 ， 重复 ２～ ３
次， 即可洗 去多余 的染液 。
（） ６ 观察 线粒体 时， 用油镜 ， 应 否则无法 很好地 观 察到实验结果 。建 议在实 验 中讲 解油镜 的原 理 ， 范 示 使用方法。 需要 注意是 ， 时观察 到的蓝绿 色颗 粒不 能确定 此 为线粒体 ， 也可能是好氧细菌等 ， 只能从形态上对 线粒 体的形态分布有感性的认识 。 “ ｉＢｉ ” Ｂｏ ｌｚ 可以让学生有充分 的时 问学 习知识 ， ｔ 锻炼 技 能， 活动的效果将会更好 。所 以， 时间安排应 以实际情 况灵活变动 ， 尽量让活动效果最大化 。 ４４ 前 期培 训 虽 然参 加活 动的学 生都是 生物 爱好 ． 者， 但是他们 的生物学知 识基础相对 薄弱 ， 以可 以在 所 活动前进行 有针对性 的培训 。也可 以培训一支 专业过 硬的带队教师队伍 ， 在活动期间带领学生进行生 物多样 性普查 。培训 内容包 括 ： 生物多样性 简介 ；Ｂｏ ｌ ” “ ｉ ｉ 案 Ｂｔ ｚ