生物化学实验技术复习重点汇编详细
生物化学重点整理
生物化学重点整理生物化学是一门研究生物体化学组成和生命过程中化学变化的科学。
它涵盖了广泛的领域，从分子水平揭示生命的奥秘。
以下是对生物化学重点内容的整理。
一、蛋白质化学蛋白质是生物体内最为重要的大分子之一。
1、蛋白质的组成蛋白质主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，其基本组成单位是氨基酸。
氨基酸通过肽键相连形成多肽链，进而折叠形成具有特定空间结构的蛋白质。
2、蛋白质的结构蛋白质具有一级、二级、三级和四级结构。
一级结构指的是氨基酸的排列顺序；二级结构包括α螺旋、β折叠等；三级结构是整个多肽链的三维构象；四级结构则是由多个亚基组成的蛋白质的空间排列。
3、蛋白质的性质蛋白质具有两性解离、胶体性质、变性与复性等特性。
变性会导致蛋白质的空间结构破坏，从而失去生物活性，但在一定条件下可以复性。
二、核酸化学核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
1、核酸的组成核酸由核苷酸组成，核苷酸包含碱基、戊糖和磷酸。
DNA 中的碱基有腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）；RNA 中的碱基用尿嘧啶（U）代替了胸腺嘧啶。
2、 DNA 的结构DNA 是双螺旋结构，两条链反向平行，碱基之间遵循互补配对原则（A 与 T 配对，G 与 C 配对）。
3、 RNA 的种类与功能RNA 包括信使 RNA（mRNA）、转运 RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）。
mRNA 携带遗传信息，指导蛋白质合成；tRNA 转运氨基酸；rRNA 是核糖体的组成部分。
三、酶酶是生物体内具有催化作用的蛋白质或 RNA。
1、酶的特点酶具有高效性、专一性和可调节性。
高效性使得酶能够大大加快反应速率；专一性保证了酶对特定底物的作用；可调节性使酶的活性能够适应生物体的需求。
2、酶的作用机制酶通过降低反应的活化能来加速反应。
它与底物结合形成酶底物复合物，然后经过一系列的中间步骤完成催化反应。
3、影响酶活性的因素温度、pH 值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都会影响酶的活性。
生物化学实验知识点整理
生物化学实验知识点整理实验一 还原糖的测定、实验二 粮食中总糖含量的测定1.还原糖测定的原理3,5-二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成棕色的氨基化合物,在550nm 处测定光的吸收增加量，得出该溶液的浓度，从而计算得到还原糖的含量2.总糖测定原理多糖为非还原糖，可用酸将多糖和寡糖水解成具有还原性的单糖，在利用还原糖的性质进行测定，这样就可以分别求出总糖和还原糖的含量3.电子天平使用4.冷凝回流的作用：使HCl 冷凝回流至锥形瓶中，防止HCl 挥发，从而降低HCl 的浓度。
5.多糖水解方法：加酸进行水解6.怎样检验淀粉都已经水解：加入1-2滴碘液，如果立即变蓝则说明没有完全水解，反之，则说明已经完全水解。
7.各支试管中溶液的浓度计算8.NaOH 用量：HCl NaOH n n =9.不能中途换分光光度计,因为不同的分光光度计的光源发光强度不同10.分光光度计的原理：在通常情况下，原子处于基态，当通过基态原子的某辐射线所具有的能量（或频率）恰好符合该原子从基态跃迁到激发态所需的能量（或频率）时，该基态原子就会从入射辐射中吸收能量，产生原子吸收光谱。
原子的能级是量子化的，所以原子对不同频率辐射的吸收也是有选择的。
这种选择吸收的定量关系服从式/E h h c νλ∆==。
实验证明，在一定浓度范围内，物质的吸光度A 与吸光样品的浓度c 及厚度L 的乘积成正比，这就是光的吸收定律，也称为郎伯-比尔定律分光光度计就是以郎伯比尔定律为原理，来测定浓度11.为什么要水解多糖才能用DNS因为DNS 只能与还原糖溶液在加热的条件下反应生成棕红色的氨基化合物，不能与没有还原性的多糖反应。
12.为什么要乘以0.9以0.9才能得到多糖的含量。
13.为什么要中和后再测？因为DNS 要在中性或微碱性的环境下与葡萄糖反应实验三 蛋白质的水解和纸色谱法分离氨基酸、实验四 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度1.纸色谱分离氨基酸分离原理由于各氨基酸在固定相（水）和流动相（有机溶剂）中的分配系数不同，从而移动速度不同，经过一段时间后，不同的氨基酸将存在于不同的部位，达到分离的目的。
完整版)生物化学知识点重点整理
完整版)生物化学知识点重点整理生物分子本章节将介绍生物分子的基本概念和特征，包括蛋白质、核酸、多糖和脂质的结构和功能。
本章节将讨论酶在生化反应中的作用机制和催化过程。
包括酶的分类、酶动力学和酶抑制剂等内容。
本章节将介绍生物体内的代谢途径，包括糖代谢、脂肪代谢和蛋白质代谢等重要过程。
本章节将探讨生物能量转化的过程，包括光合作用和呼吸作用等机制，以及相关的能量产生和消耗。
本章节将介绍生物体内遗传信息的传递过程，包括DNA复制、RNA转录和蛋白质翻译等重要步骤。
DNA复制DNA复制是遗传信息传递的第一步。
在细胞分裂过程中，DNA分子能够准确地复制自身，并将遗传信息传递给下一代细胞。
复制过程中，双链DNA分离，每条链作为模板合成新的互补链，形成两个完全一样的DNA分子。
RNA转录RNA转录是将DNA中的遗传信息转录成RNA的过程。
在细胞核中，RNA聚合酶将DNA作为模板合成RNA分子。
转录的产物是一条与DNA互补的RNA链，它可以是信使RNA（mRNA）、转移RNA（tRNA）或核糖体RNA（rRNA），这些RNA分子携带着遗传信息参与到蛋白质的合成过程中。
蛋白质翻译蛋白质翻译是将RNA中的遗传信息翻译成氨基酸序列，从而合成蛋白质的过程。
蛋白质翻译发生在细胞质的核糖体上，通过配对规则，每个三个核苷酸对应一个特定的氨基酸，从而组成特定的蛋白质。
翻译过程可分为启动、延伸和终止三个阶段。
以上是生物体内遗传信息的传递过程的重要步骤。
深入了解这些过程有助于理解生物体内的遗传机制和生命周期的维持。
本章节将讨论基因调控的机制和影响因素，包括转录因子、表观遗传学和信号转导等内容。
本章节将探讨生物化学与人体健康的关系，包括营养物质、药物代谢和疾病发生机制等相关内容。
本章节将探讨生物化学与人体健康的关系，包括营养物质、药物代谢和疾病发生机制等相关内容。
生物化学知识点重点整理
生物化学知识点重点整理生物化学是研究生物体内的化学反应过程的一个分支学科。
它主要研究生物大分子的合成和降解过程、生命活动的调节和调控、以及生物能量代谢等。
下面是生物化学中一些重要的知识点。
1.生物大分子：生物大分子主要包括蛋白质、核酸、多糖和脂类。
蛋白质是生物体内最重要的大分子，它的功能多种多样，包括构成细胞器和细胞骨架的结构蛋白质，酶和激素等。
核酸是DNA和RNA存储和传递遗传信息的分子。
多糖是一类碳水化合物，主要用于能量储存和结构支撑。
脂类是一类有机化合物，包括脂肪、油和脂肪酸等，主要用于能量储存和细胞膜的组成。
2.酶和酶动力学：酶是生物体内的一类蛋白质，具有催化化学反应的功能。
酶速度常常受到底物浓度、温度和pH值等因素的影响。
酶动力学研究酶速度与底物浓度的关系，揭示了酶催化机理和底物结合方式。
3.代谢物和代谢途径：代谢是生物体内发生的化学反应的总和。
代谢途径包括物质的合成和降解，以及能量的产生和消耗。
代谢物主要包括ATP、ADP、NADH、NAD+等，它们在细胞内起到能量储存和传递的重要作用。
4.蛋白质合成和降解：蛋白质合成是细胞内最重要的生化过程之一，包括转录和翻译两个阶段。
转录是将DNA上遗传信息转写成mRNA的过程，翻译是将mRNA上的遗传信息转化为蛋白质的过程。
蛋白质降解是将细胞内的蛋白质分解为小分子的过程，通过细胞骨架上的蛋白酶进行。
5.核酸合成和修复：核酸合成是将碱基、糖和磷酸酯键组合成核酸链的过程，包括DNA和RNA的合成。
核酸修复是维护细胞遗传信息稳定性的重要机制，通过修复酶修复DNA中的损伤。
6.糖代谢和糖酵解：糖代谢是指葡萄糖在细胞内的合成、降解和利用过程。
糖酵解是将葡萄糖降解为乳酸或乙醇产生能量的过程，这是细胞内产生ATP的主要途径之一7.脂类代谢和脂类合成：脂类代谢是指脂类在细胞内的合成、降解和利用过程。
脂类合成主要发生在肝脏和脂肪组织中，通过合成酶和脂蛋白来合成三酰甘油。
生化检验复习重点详解1
生化检验复习重点详解11.与糖尿病相关生化检测指标有哪些？它们的临床意义有何不同？2.简述目前糖尿病的诊断标准3.简述OGTT4.黄疸的形成机制有哪些5.反映肾小球滤过功能的试验有哪些6.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势：7.根据米-曼式方程计算，当[s]=3Km时，其反应速度V为多大7.简述正常血浆中的酶动态特点及影响酶浓度的因素8.简述病理性血浆中酶浓度异常的机制9.简述酶浓度的测定方法10.简述酶偶联反应法的原理:11.简述临床同工酶的分析方法:12.简述体液中酶浓度测定的主要影响因素及控制13.临床酶学测定之前，标本的采集、处理与贮存有何注意点?14.简述自动生化分析仪进行临床酶学测定时系数K值的计算与应用15.简述ALT测定及其临床意义:16. AAT的临床意义有17.简述CK及其同工酶测定的临床意义50. Apolipoprotein 检测的临床意义。
51.DHLC 抗动脉粥样硬化的功能成的α2β2四聚体。
11氨基酸代谢库（metabolic pool）：食物蛋白质经过消化而被吸收的氨基酸与体内组织蛋白质降解产生的氨基酸混在一起，分布在体内各处，参与代谢，称为氨基酸代谢库。
12氨基酸血症（amino-acidemia）：当酶缺乏出现在代谢途径的起点时，其作用的氨基酸将在血液环中增加，称为氨基酸血症。
这种氨基酸如从尿中排出，则称为氨基酸尿症（amino-aciduria）。
13高糖血症（hyperglycemia）：是糖代谢紊乱导致血糖浓度高于参考范围上限的异常现象，主要表现为空腹血糖损伤，糖耐量减退和糖尿病。
14糖尿病（diabetes mellitus，DM）：是一组由于胰岛素分泌不足和或胰岛素作用低下而引起的糖代谢紊乱性疾病，其特征是高血糖症。
15OGTT：是在口吸一定量葡萄糖后2h内进行系列血糖浓度测定，以评价不同个体的血糖调节功能的一种标准方法。
16高脂蛋白血症：指血浆中CM,VL,DL,LDL,HDL等脂蛋白有一种或几种浓度过度升高的现象。
(完整版)生物化学知识点重点整理
(完整版)生物化学知识点重点整理1.生物化学的概述生物化学是研究生物体内化学组成、结构、功能和变化的学科，是生物学和化学的交叉学科。
它研究的内容包括生物大分子（蛋白质、核酸、多糖和脂质）、酶、代谢、信号传导等生物体内的化学过程和物质的转化。
生物化学的研究对于理解生命的机理和病理过程具有重要意义。
2.蛋白质结构与功能蛋白质是生物体中最重要的生化分子之一，它们具有结构多样性和功能多样性。
蛋白质的结构包括四级结构：一级结构是氨基酸的线性序列；二级结构是氨基酸间的氢键形成的α螺旋和β折叠；三级结构是螺旋和折叠的空间结构；四级结构是多个多肽链的组合形成的复合体。
蛋白质的功能包括催化酶活性、调节信号传导、结构支架等。
3.核酸结构与功能核酸是生物体中的遗传物质，包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
DNA是双螺旋结构，由磷酸二酯键连接的脱氧核苷酸组成。
RNA是单链结构，由磷酸二酯键连接的核苷酸组成。
核酸的功能包括存储遗传信息、传递遗传信息和调控基因表达。
4.代谢与能量转化代谢是生物体内的化学反应过程，包括合成反应和分解反应。
合成反应是通过合成物质来维持生物体的正常生理功能；分解反应是通过分解物质来提供能量。
能量转化是代谢过程中最重要的一环，包括能量的捕获、传递和释放。
生物体通过代谢和能量转化来获取能量、转化能量和维持生命活动。
5.酶的催化机制酶是生物体内催化反应的生物分子，能够加速化学反应的速率，降低反应的活化能。
酶的催化机制包括底物识别、底物结合、酶底物复合物的形成、催化反应和生成产物。
酶的催化过程中涉及到酶活性位点的氨基酸残基和底物之间的相互作用。
6.信号传导与细胞通讯细胞内和细胞间的信号传导是维持生物体内稳态和调节机体功能的重要手段。
信号传导包括外部信号的接受、内部信号的传递和效应的产生。
细胞间的信号传导有兴奋性传导和化学信号传导两种方式。
7.糖的分类与代谢糖是生物体内最重要的能量源，也是合成生物大分子的前体。
生物化学考试重点笔记(完整版)
第一章蛋白质的结构与功能第一节蛋白质的分子组成一、组成蛋白质的元素1、主要有C、H、O、N和S，有些蛋白质含有少量磷或金属元素铁、铜、锌、锰、钴、钼，个别蛋白质还含有碘。
2、蛋白质元素组成的特点：各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。
3、由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量：100克样品中蛋白质的含量( g % )= 每克样品含氮克数× 6.25×100二、氨基酸——组成蛋白质的基本单位（一）氨基酸的分类1.非极性氨基酸（9）：甘氨酸（Gly）丙氨酸（ Ala）缬氨酸（Val）亮氨酸（Leu）异亮氨酸（Ile）苯丙氨酸（Phe）脯氨酸（Pro）色氨酸（Try）蛋氨酸（Met）2、不带电荷极性氨基酸（6）：丝氨酸（Ser）酪氨酸(Try) 半胱氨酸 (Cys) 天冬酰胺 (Asn) 谷氨酰胺(Gln ) 苏氨酸(Thr )3、带负电荷氨基酸（酸性氨基酸）（2）: 天冬氨酸(Asp ) 谷氨酸(Glu)4、带正电荷氨基酸（碱性氨基酸）（3）:赖氨酸(Lys) 精氨酸(Arg)组氨酸( His)（二）氨基酸的理化性质1. 两性解离及等电点等电点 :在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。
此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。
2. 紫外吸收(1)色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在 280 nm 附近。
（2）大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。
3. 茚三酮反应氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm处。
由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方法三、肽（一）肽1、肽键是由一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合而形成的化学键。
2、肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。
生物化学重点知识点总结
生物化学重点知识点总结生物化学是研究生物体及其组成部分的化学性质和化学过程的科学，它主要关注生物大分子的组成、结构和功能以及生物体内的各种化学反应。
以下是生物化学的重点知识点总结：1.生物大分子：生物大分子主要包括蛋白质、核酸、多糖和脂类。
蛋白质是生物体内最重要的大分子，它是组成细胞和组织的基本结构单元，参与几乎所有的生物功能。
核酸是存储和传递遗传信息的重要分子，包括DNA和RNA。
多糖是由单糖分子组成的长链聚合物，如淀粉和纤维素。
脂类是由甘油和脂肪酸组成的生物大分子，它们在细胞膜的构建和能量的储存中起重要作用。
2.生物大分子的结构和功能：生物大分子的结构决定了它们的功能。
蛋白质的结构包括四个层次：一级结构是由氨基酸的线性序列决定的，二级结构是由氢键形成的α螺旋和β折叠，三级结构是蛋白质的立体构象，四级结构是由多个蛋白质亚基组成的复合物的空间结构。
核酸的结构包括双螺旋的DNA和单链的RNA。
多糖的结构包括淀粉的分支链和纤维素的线性链。
脂类的结构包括单酰甘油、双酰甘油和磷脂。
3.生物体内的化学反应：生物体内的化学反应包括代谢途径和信号传导。
代谢途径包括蛋白质、核酸、多糖和脂类的合成和降解过程。
信号传导是细胞内外信息传递的过程，包括细胞膜受体介导的信号转导、细胞内信号分子的产生和调控。
4.酶和酶动力学：酶是催化生物体内化学反应的蛋白质，它们可以提高反应速率。
酶的催化机理包括亲和性和瞬态稳定性理论。
酶动力学研究酶的催化速率和底物浓度的关系，包括酶的速率方程、酶的底物浓度和酶的浓度对速率的影响。
5.代谢途径和调控：代谢途径是生物体内化学反应的网络，包括能量代谢途径和物质代谢途径。
能量代谢途径包括糖酵解、细胞呼吸和光合作用。
物质代谢途径包括核酸合成、脂类合成和蛋白质合成。
代谢途径的调控通过正反馈和负反馈机制来维持生物体内化学平衡，包括酶的合成和降解、调控基因表达和细胞信号传导。
6. 遗传信息的传递和表达：遗传信息通过DNA的复制和转录转化为RNA，再经过翻译转化为蛋白质。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
前言1.本课程主要讲述了哪些实验技术，其中被称为生化实验室中三大实验技术的是？答：层析技术、电泳技术、离心技术、分光光度技术、免疫化学技术。
其中层析技术、电泳技术、离心技术是生物学的三大实验技术。
第一章生物化学基本操作与要求1.洗涤液的种类配置与应用答：（1）铬酸洗液（称取5g重铬酸钾粉末置于250mL烧杯中，加水5mL，尽量使其溶解，慢慢加入浓硫酸100mL，边加边搅拌。
冷却后贮存备用，若颜色变绿，表示洗液已失效。
）用于洗涤玻璃器皿。
（2）浓盐酸，洗去水垢或某些无机盐沉淀。
（3）30%硝酸，洗涤CO2测定仪器及微量滴管（4）45%尿素，洗涤蛋白制剂、血样（5）有机溶剂，洗涤油脂、脂溶性染料（6）去污粉，一般污染物2.化学试剂的分级答：3.什么是准确度、精密度？答：准确度表示实验分析测量值与真实值相接近的程度。
误差。
精密度是指在相同条件下多次测量结果互相吻合的程度，表现了测定结果的再现性。
偏差。
4.如何提高实验的准确度、精密度？答：准确度：减少系统误差1.仪器校正2.空白试验3.对照实验；精密度：减少偶然误差1.平均取样2.多次取样。
第二章层析技术1.层析技术及其原理答：层析技术是一种基于被分离物质的物理、化学、生物学特性的不同，使它们在某种机制中移动速度不同而进行分离和分析的方法。
2.名词：固定相、流动相、分配系数答：固定相：固定相是层析的一个基质。
它可以是固体物质（如吸附剂、凝胶、离子交换剂等）也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附、溶解、交换等作用。
流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体等。
分配系数：是指在一定的条件下，某种组分在固定相和流动相中含量的比值，Kd=固定相中的总量/流动相中的总量。
3.层析法的分类答：按流动相的形式分：气相色谱法1.气固色谱法2.气液色谱法，液相色谱法1.液固色谱法2.液液色谱法；按固定相的形式分：1.柱层析法2.纸层析法3.薄层层析法。
4.几种主要凝胶的中英文名称、型号、及型号数字代表的含义答：葡萄糖凝胶（dextran型号Sephadex G-10~200数字代表凝胶的吸水率）聚丙烯酰胺凝胶（polyacrylamide主要型号有Bio-Gel P-2~300,数字代表它们的排阻极限的10-3）琼脂糖凝胶（agarose Sepharose,Bio-Gel A）5.凝胶层析及其基本原理、操作过程和主要应用答：是利用凝胶把物质按分子大小不同进行分离的一种方法。
原理：由于被分离物质的分子大小不同，洗脱时，大分子物质由于直径大于凝胶网孔不能进入凝胶内部，只能沿着凝胶颗粒间的孔隙，随溶剂向下移动，因此流程短，首先流出层析柱，而小分子物质，由于直径小于凝胶网孔，能自由进出胶粒网孔，使之洗脱流程增长，移动速度慢而后流出层析柱。
应用：1）脱盐及去除小分子杂质2）蛋白质的分离、生物大分子的纯化3）分子量测定4）去热源物质5）溶液的浓缩6.离子交换层析的原理、离子交换剂的类型答：原理：依据各种带电离子或生物大分子与带相反电荷离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。
阴离子交换剂：吸附阴离子，如DEAE；阳离子交换剂：吸附阳离子，如CM。
7.离子交换色谱的操作和应用答：1.离子交换剂的选择2.离子交换剂的处理和保存3.层析柱的选择4.平衡缓冲液的选择5.洗脱、洗脱速度控制6.样品的浓缩、脱盐7.再生和保存。
应用：1.水处理2.分离纯化小分子物质3.分离纯化生物大分子物质。
8.何谓亲和层析答：是利用生物分子间专一的亲和力而进行分离的一种层析技术。
9.各种层析原理和载体的综合比较（见ppt表）答：第三章电泳技术1.电泳（技术）的概念答：带电物质在电场中向相反电极移动的现象。
2.电泳的分类答：按分离的原理：1.区带电泳2.自由界面电泳3.等速电泳4.等电聚焦电泳；按支持介质的不同：1.纸电泳2.醋酸纤维薄膜电泳（1、2为区带电泳）3.琼脂凝胶电泳4.聚丙烯酰胺凝胶凝胶电泳（PAGE）5.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)；按支持介质形状不同：1.薄层电泳2.板电泳3.柱电泳；按用途不同：1.分析电泳2.制备电泳3.定量免疫电泳4.连续制备电泳；按所用电压不同：1.低压电泳2.高压电泳。
3.什么是迁移率？影响迁移率、电泳分离的主要因素答：是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度，m=v/E。
迁移率与带电分子所带净电荷成正比，与分子的大小和缓冲液的粘度成反比，与粒子的形状有关；电泳分离的影响因素：1.带电颗粒的性质（所带净电荷的数量大小及形状）2.溶液的pH 值（离等电点远，快）3.溶液的离子强度（离子强度小泳动快）4.电场强度5.电渗作用（方向一致，快）6.支持介质的筛孔。
4.如何制备聚丙烯酰胺凝胶？答：1.化学聚合：加速剂TEMED使催化剂过硫酸铵形成自由基，这些自由基的产生可引发丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的聚合、交联反应形成;2.光聚合：催化剂核黄素经光照形成无色基，再被痕量氧氧化成自由基，引发聚合反应。
TEMED存在可加速聚合。
5.聚丙烯酰胺凝胶电泳和不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的区别、分离效应答：区别：A：整个电泳体系中所用缓冲液，pH值和凝胶网孔都是相同的；B：在电泳系统中采用了两种或两种以上的缓冲液，pH值和孔径。
分离效应A：分子筛效应（某分子通过这种网孔的能力将取决于凝胶孔隙和分离物质颗粒的大小和形状）B：1.样品的浓缩效应2.电荷效应3.凝胶的分子筛效应。
6.简述等电聚焦及其优缺点答：是根据两性物质等电点（pI）的不同而进行分离的。
优点：1.分辨率高，可达0.01pH单位2.能抵消扩散作用，使区带越走越窄3.可直接测出蛋白质的等电点，精确度可达0.01pH单位。
缺点：1.该法要求用无盐溶液，而在无盐溶液中蛋白质可能发生沉淀2.不适用在等电点不溶或发生变性的蛋白质。
7.什么是双向电泳？答：由第一向等电聚焦（IEF）电泳和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结合组成。
第四章离心技术1.离心技术的概念答：是利用转头旋转产生的离心力，根据物质颗粒沉降系数、质量、密度的差异将其分离的方法。
2.名词：相对离心力、沉降速度、沉降系数、沉降常数答：相对离心力：F=mω2r,F常用重力加速度表示，称为相对离心力。
沉降速度：在离心力作用下，单位时间内物质颗粒运动的距离。
沉降系数：单位离心力下的沉降速度。
沉降常数：颗粒在20℃水中的沉降系数。
3.离心机和离心转头（转子）的种类答：离心机的种类：低速、高速、超速离心机，冷冻离心机，台式、地式离心机，制备性、分析性离心机；离心转头的种类：1.角度转头FA2.甩平式转头SW3.垂直转头V4.区带转头Z5.连续流动转头CF。
4.简述离心分离的方法（3种）p99~101答：1.差速沉降离心：不断改变离心速度，使沉降速度不同的颗粒在不同的速度和时间下分批分离的方法，一般用于沉降系数相差较大的颗粒，用角度转头。
2.差速区带离心：在一定离心力的作用下存在沉降系数差的不同颗粒各自以一定速度沉降，后在密度梯度不同的介质上形成区带，用于分离有一定沉降系数差的颗粒或密度相似大小不同的样品和核酸、蛋白质等成分。
3.等密度离心：离心管中预先放好梯度介质离心时，样品的不同颗粒一直移动到与他们密度相等的特定梯度位置上，形成不同的区带，用于分离大小相近而密度不同的样品。
5. 如何进行离心区带的收集？答：1.用注射器和滴管由离心管上部吸出2.用针刺穿离心管底部滴出3.用针刺穿离心管区带部分的管壁，把样品区带抽出4.用一根细管插入离心管底，泵入超过梯度介质最大密度的取代液，将样品和梯度介质压出，用自动部分收集器收集。
第五章分光光度技术1. 名词：朗伯-比尔定律、吸收光谱、吸收光谱曲线答：朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，吸光度与溶液的浓度、液层厚度的乘积成正比A=KCL。
吸收光谱：通常分子处于基态，当他吸收一定能量跃迁到激发态，则产生吸收光谱。
吸收光谱曲线：若逐渐改变照射某物质的入射光的波长，并测定物质对各种波长光的吸收程度或透射程度，以波长λ作横坐标，，“A（吸光度）”或“T（透光度）”为纵坐标，画出连续的“A-λ”或“T-λ”曲线。
5.图示说明分光光度计的基本结构答：6.分光光度计的光源及适用范围答：光源要求：1.能提供连续的辐射；2.光强度足够大；3.在整个光谱区内光谱强度不随波长有明显变化；4.光谱范围宽；5.使用寿命长、价格低。
热辐射光源用于可见光和近红外光区的光源如钨灯和卤钨灯，使用波长范围是320~1100nm，气体放电光源用于紫外光区的如氢灯和氘灯，使用波长范围是195~400nm。
7.分光光度计分析条件的选择（见讲义）答1.仪器测量条件的选择；2.显色反应条件的选择3.参比溶液的选择。
8.为什么要进行显色反应？显色反应需要满足哪些要求？影响显色反应的因素有哪些？答：响显色反应的因素有：显色剂用量,溶液酸度,显色时间,温度,溶剂9.分光光度法在核酸与蛋白质的纯度分析中的应用原理答：可用A260/A280的比值鉴定其纯度纯DNA比值为1.8，纯RNA比值为1.0。
第六章免疫化学技术1.双向免疫扩散法答：是以琼脂为介质的Ag-Ab沉淀反应。
2.阐述2种免疫电泳的原理（对流免疫电泳、火箭免疫电泳）答：3.对流免疫电泳与双向免疫扩散法的异同答：对流免疫电泳：是在凝胶介质中将电泳法和扩散法相结合的一种免疫化学方法。
双向免疫扩散法：是以琼脂为介质的Ag-Ab沉淀反应。
异：对流免疫电泳是抗原、抗体分子在电场作用下定向运动，双向免疫扩散法是自由扩散。
同：都基于琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应的特性，根据沉淀出现与否及沉淀量的多寡，可定性定量地检测出样品中抗原或抗体的存在及含量。
4.ELISA及其基本原理答：酶联免疫吸附法是指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上，进行免疫反应的定性和定量方法。
第七章固定化技术1.固定化酶、固定化细胞的概念答：固定化酶：将水溶性酶用物理化学方法处理，固定于不溶性载体上，称为不溶于水，但仍有酶活性的一种酶制剂形式。
固定化细胞：就是被限制自由移动的细胞，即细胞受到物理化学等因素约束或限制在一定的空间界限内，但细胞仍保留催化活性并能反复或连续使用。
2.固定化酶的优点，答：优点：1.纯化简单2.酶的稳定性有所改进；3.酶的使用效率提高，可以反复利用；4.反应条件容易控制。
3.固定化酶的制备方法答：1）吸附法：利用离子键、物理吸附等方法，将酶固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃等载体上；2）包埋法：用物理方法把酶包埋在凝胶细小的格子中，或包围在半透膜或聚合物中，酶本身不参与反应；3）共价结合法：酶与不溶于水的载体以共价键形式结合制备固定话酶的方法；4）交联法：双功能试剂或多功能试剂与酶分子中的氨基酸残基作用，使酶与酶之间交联成网。