生物化学实验课件1动态-精选文档
《生物化学大实验》课件
分子生物学基本概念
深入探究DNA和RNA的功能及其在遗传学中的 应用，以及基因转录和翻译的分子机制。
蛋白质的结构和功能
探究蛋白质的三级结构，以及它们在细胞代谢过 程中所扮演的角色和功能。
样本制备
1
样本收集
收集到分离它们所需要细胞结构。
2 个人在实验中的收获
分享个人在实验中收获的方面，包括技能和知识的提高以及更广泛的收获。
3 对未来实验的展望
展望未来实验中可能遇到的挑战，提供有效的解决方案。
生物化学大实验
欢迎来到《生物化学大实验》PPT课件。本课程将介绍生物化学和分子生物 学的概念，酶的作用及机制，以及蛋白质的结构和功能。我们还将深入了解 实验过程并分享实验的结果和分析。
知识点介绍
生物化学基本概念
了解生物大分子，如蛋白质、核酸等的组成和结 构，以及它们在生命活动过程中的作用。
酶的作用及机制
细胞破碎液制备
2
将细胞破碎并加入含有缓冲液的溶液中。
3
离心和裂解
使用高速离心机离心裂。
利用生物化学技术从混合物中纯化蛋白 质。
蛋白质检测
Lowry方法
利用此化学方法可测定样品中蛋 白的含量。
Bradford方法
此方法是结合了蛋白质与染料结 合的测量方法。
BCA法
BCA法是利用氢氧化物还原双烷 基四氯化钴为蓝色络合物，来测 定蛋白质的含量。
酶活性测定
酶促反应原理
明白酶对催化反应的影响以及如何准确测定酶的含量。
酶活性的测定方法
学习测量酶活性的几种标准方法，并了解如何选择最佳方法。
酶的特定测量
【课件】医学生物化学实验课程PPT
常用于测定核酸和蛋白质的浓 度，酶反应的动力学研究等。
步骤
准备标准曲线、设置光程、选 择波长、测量吸光度和计算样 品浓度。
凝胶电泳
SDS-PAGE凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳
通过凝胶电泳分离和分析蛋白质。
用于分离和分析核酸，如DNA和 RNA。
非变性凝胶电泳
用于分离和分析蛋白质的三维空 间结构。
西方博洛法
戴好实验手套、口罩和实验服，避免有害物质接触。
3 合理使用实验室设备
学习如何使用化学品和设备，遵守正确的使用方法。
4 注意实验室卫生
保持实验台清洁，妥善处理废弃物和化学品。
酶活性测量
实验原理
通过测量酶催化反应速率来评 估酶活性。
实验步骤
包括制备反应混合物、控制反 应条件和测定反应速率。
数据分析
通过绘制酶活性曲线和计算酶 活性单位来解释实验结果。
医学生物化学实验课程 PPT
探索医学生物化学实验课程，从实验室中的安全措施、基本技术和设备开始， 到酶活性测量、蛋白质层析纯化、蛋白质浓度测定、分光光度法、凝胶电泳 以及PCR等。拓展知识边界，发现医学化学的奥秘。
实验室安全
1 仔细阅读实验手册
熟悉实验步骤和安全规定，确保操作正确。
2 穿戴个人防护装备
蛋白质层析纯化
1
树脂选择
选择合适的层析树脂来分离和纯化目标
制备样品和柱子
2
蛋白质。
预处理样品，并准备层析柱和缓冲溶液。
3
样品加载
将样品加载到层析柱中，充分与树脂互
洗脱和回收
4
作用。
使用洗脱缓冲液洗脱目标蛋白质，并收 集纯化的样品。
蛋白质浓度测定
1 布鲁克法
《生物化学实验指导》课件
实验操作问题
实验设备使用不当，导致设备损 坏或实验失败。
解决方法
加强实验材料管理，确保学生正 确使用和管理实验材料。
实验操作问题
实验材料管理不善，导致实验结 果受影响。
解决方法
提供设备使用说明和注意事项， 确保学生正确使用设备。
实验结果异常分析与处理
异常分析
01 实验结果与预期不符，可能存
在误差或错误。
01
02
03
实验技术原理
介绍实验所涉及的基本原 理，包括生物学、化学和 物理学原理等。
实验步骤
详细描述实验的操作流程 ，包括实验前的准备、实 验操作步骤、实验后处理 等。
注意事项
提醒实验中需要注意的事 项，以确保实验的准确性 和安全性。
实验数据分析与处理
数据收集
说明如何收集实验数据， 包括仪器的使用和数据的 记录等。
按照指导老师的安排进行实验 操作，不得擅自更改实验步骤
或使用未经批准的试剂
爱护实验室设备和器材，保持 实验室卫生整洁
02
生物化学实验基本操作
实验器材介绍与使用
实验器材
介绍生物化学实验中常用的实验 器材，如烧杯、量筒、滴管、离 心管等，并说明其用途和特点。
使用方法
详细介绍各种实验器材的使用方 法和注意事项，确保学生正确使 用，避免因操作不当造成实验误 差或安全事故。
04
生物化学实验案例分析
案例一：DNA提取与鉴定
总结词
基础实验，了解DNA提取与鉴定的基本原理和操作步骤。
详细描述
本案例介绍了DNA提取与鉴定的基本原理、实验材料、操作步骤、注意事项和 实验结果分析，旨在让学生了解DNA提取与鉴定的基本过程，掌握相关的实验 技能。
《生物化学实验》PPT课件
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3 实验记录与实验报告
3.1 实验记录 实验前写好实验预习报告(钢笔和园珠笔)。 实验中应及时准确地记录(专用纸，事先在记录纸上
设计好各种记录格式和表格）所观察到的现象和测量 的数据。 实验记录要注意有效数字，如吸光度值应为 “0.050”，而不能记成“0.05”。每个结果都要尽 可能重复观测二次以上，即使观测的数据相同或偏差 很大，也都应如实记录，不得涂改。 实验中要详细记录实验条件，如使用的仪器型号、 编号、生产厂等；生物材料的来源、试剂的规格、试 剂的浓度等。
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3 实验记录与实验报告
3.2 实验报告
实验报告的格式应为：
⑴ 实验目的；
⑵ 实验原理；
⑶ 仪器、材料和试剂；
⑷ 实验步骤；
⑸ 结果讨论（含数理据处）；
⑹ 注意事项;
(7) 思考题
注意：实验结果的讨论要充分，尽可能多查阅一些有 关的文献和教科书，充分运用己学过的知识和生物化 学原理，进行深入的探讨，勇于提出自己独到的分析 和见解，并欢迎对实验提出改进意见。
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（2）离子交换层析
原理：将能与周围介质进行离子交换的不稳定离子固 定于惰性基质上，从而分离介质中的组分。
常用的惰性基质：人工合成树脂（单体：苯乙烯、交 联剂：二乙烯苯）
阳离子交换剂：磺酸甲基、羧甲基、磷酸基 阴离子交换剂：二乙基胺乙基、三乙基胺乙基 可交换离子：阳离子：Na+、H+
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7、实验六 酵母RNA的提取和鉴定 (4学时) 8、实验七 血糖含量的测定 （4学时） 9、实验八 脂肪酸的β-氧化 （5学时） 10、实验报告讲解及考核 （2学时）编辑ppt22绪论1 实验目的
《生物化学实验》PPT课件
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四.几种常见电泳的比较
类型
优点
缺点
纸电泳
设备操作简单
分辨率差，电渗现 象
醋酸纤维薄膜电 设备操作简单，样品
泳
用量少
分辨率差
琼脂糖凝胶电泳 快速，分辨率高
电渗现象严重
聚丙烯酰胺凝胶 电泳
可调节凝胶孔径，样 品用量少分辨率高，
无电渗现象
高浓度凝胶难剥离
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五.聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳原理
A.凝胶层的不连续性
浓缩胶T=2.8％ C=20%；分离胶T=7％ C=2.5%
B.缓冲液成分的不连续性：
凝胶缓冲液Tris-HCl,含Cl－，电极缓冲液Tris-Gly,Gly
－
C.pH的不连续性：
浓缩胶pH6.7,分离胶pH8.9，电极缓冲液pH8.3
D.电位梯度的不连续性
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五. 盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 （2）盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的三种效应
样品的浓缩效应
电荷效应
分子筛效应
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A. 样品的浓缩效应
缓冲液成分及pH的不连续性 浓缩胶pH6.7 缓冲液 浓缩胶Tris-HCl, 电极缓冲液Tris-Gly
解离度 ：Cl> 蛋> Gly mcl cl>m蛋 蛋>m Gly Gly 凝胶中Cl－为快离子， Gly－为慢离子，
蛋白质从“－”极向“＋”极移 动，从浓缩胶进入分离胶，速 度变慢，堆积浓缩。
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缓冲 液
浓缩胶 分离胶
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B.电荷效应
蛋白质样品进入分离胶后 pH增大(pH 8.9)，Gly－解离度增 大，不存在快、慢离子之分， 蛋白质样品在均一电场强度和 pH条件下泳动。
《生物化学实验教案》课件
《生物化学实验教案》课件第一章：生物化学实验基本原理1.1 实验目的了解生物化学实验的基本原理和方法，掌握实验操作技巧。
1.2 实验原理介绍生物化学实验的基本原理，如光谱原理、色谱原理、电泳原理等。
1.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
1.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
1.5 实验注意事项提醒实验过程中需要特别注意的事项，以确保实验顺利进行。
第二章：蛋白质实验2.1 实验目的学习蛋白质的提取、分离和纯化，了解蛋白质的性质。
2.2 实验原理介绍蛋白质提取、分离和纯化的原理，如盐析、凝胶色谱等。
2.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
2.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
2.5 实验注意事项第三章：酶实验3.1 实验目的学习酶的活力测定和性质研究，了解酶的作用机制。
3.2 实验原理介绍酶活力测定和性质研究的基本原理，如动力学方法、抑制剂作用等。
3.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
3.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
3.5 实验注意事项提醒实验过程中需要特别注意的事项，以确保实验顺利进行。
第四章：糖类实验4.1 实验目的学习糖类的提取、分离和鉴定，了解糖类的性质和功能。
4.2 实验原理介绍糖类提取、分离和鉴定的原理，如糖的降解、糖醇的鉴定等。
4.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
4.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
4.5 实验注意事项第五章：脂质实验5.1 实验目的学习脂质的提取、分离和鉴定，了解脂质的性质和功能。
5.2 实验原理介绍脂质提取、分离和鉴定的原理，如脂质的水解、脂肪酸的鉴定等。
5.3 实验材料与仪器列出实验所需的材料和仪器，并进行详细介绍。
5.4 实验步骤详细描述实验操作步骤，包括样品处理、实验过程和结果分析。
《生物化学》全套PPT课件
目录•生物化学概述•蛋白质结构与功能•酶学原理与应用•糖代谢途径与调控机制•脂类代谢途径与调控机制•基因表达调控与疾病关系生物化学概述生物化学定义与研究对象生物化学定义研究生物体内化学分子与化学反应的科学，探讨生命现象的化学本质。
研究对象生物大分子（蛋白质、核酸、多糖等）及其相互作用；生物小分子（氨基酸、脂肪酸、糖类等）及其代谢；生物体内能量转化与传递等。
生物化学发展历史及现状发展历史从19世纪末到20世纪初，生物化学逐渐从生理学和有机化学中独立出来，成为一门独立的学科。
随着科学技术的不断发展，生物化学的研究领域和深度不断拓展。
现状生物化学已经成为生命科学领域的重要分支，与分子生物学、遗传学、细胞生物学等学科相互渗透，共同揭示生命的奥秘。
同时，生物化学在医学、农业、工业等领域的应用也越来越广泛。
ABDC疾病诊断生物化学方法可用于检测血液中特定生物分子的含量或结构异常，从而辅助疾病的诊断，如血糖、血脂检测等。
药物研发通过对生物体内代谢途径和药物作用机制的研究，有助于设计和开发新的药物，提高治疗效果和降低副作用。
营养与健康生物化学在营养学领域的应用有助于了解食物中营养成分的代谢和利用，为合理膳食和营养补充提供科学依据。
遗传性疾病研究生物化学方法可用于研究遗传性疾病的发病机制和治疗方法，如基因疗法和干细胞疗法等。
生物化学在医学领域重要性蛋白质结构与功能0102 03氨基酸种类20种常见氨基酸，包括甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸等。
氨基酸性质具有氨基和羧基的有机酸，呈两性，等电点下溶解度最低。
氨基酸分类根据侧链R基团的性质可分为脂肪族、芳香族、杂环族等。
氨基酸种类、性质及分类通过逐步去除N-末端氨基酸并测定其种类，推断蛋白质序列。
Edman 降解法质谱法cDNA 测序法利用蛋白质分子在电场或磁场中的运动规律进行测定。
通过测定编码蛋白质的cDNA 序列，间接推断蛋白质序列。
030201蛋白质一级结构测定方法主要依靠氢键维持的局部空间结构，包括α-螺旋、β-折叠等。
《生物化学实验教案》课件
《生物化学实验教案》课件一、实验目的与要求1. 实验目的(1) 了解生物化学实验的基本原理和操作技巧。
(2) 掌握生物化学实验中常用试剂和仪器的使用方法。
(3) 培养实验操作的规范性和准确性。
2. 实验要求(1) 学生需提前预习实验内容，了解实验原理和步骤。
(2) 实验过程中，要求学生认真观察实验现象，记录实验数据。
二、实验原理与步骤1. 实验原理(1) 介绍本实验所涉及到的生物化学原理，如酶的活性测定、蛋白质的定量分析等。
(2) 解释实验中使用的试剂和仪器的作用。
2. 实验步骤(1) 详细描述实验操作的顺序，如样品处理、试剂添加、实验仪器使用等。
(2) 强调实验过程中的注意事项，如操作规范、安全防护等。
三、实验材料与试剂1. 实验材料(1) 生物组织或细胞样品。
(2) 实验所需的仪器设备。
2. 实验试剂(1) 介绍实验中所需试剂的名称、浓度和作用。
(2) 说明试剂的配制方法和保存条件。
四、实验仪器与设备1. 实验仪器(1) 介绍实验中所需仪器的名称、型号和功能。
(2) 说明仪器的使用方法和注意事项。
2. 实验设备(1) 实验室常用设备，如试管、烧杯、移液器等。
(2) 强调设备的使用安全和清洁保养。
五、实验结果与分析1. 实验结果(1) 学生需观察并记录实验过程中出现的现象。
(2) 描述实验数据的记录和处理方法。
2. 实验分析(1) 引导学生运用生物化学知识分析实验结果。
(2) 探讨实验中可能出现的问题和解决方法。
1. 实验数据处理(1) 介绍实验数据的处理方法，如统计分析、图表绘制等。
(2) 强调数据处理的准确性和可靠性。
(2) 强调实验报告的规范性和完整性。
七、实验安全与环保1. 实验安全(1) 介绍实验中可能存在的危险因素，如化学品、生物制剂等。
(2) 强调实验安全操作规程和紧急处理方法。
2. 实验环保(1) 引导学生关注实验过程中的环境保护，如废弃物处理、节能减排等。
(2) 强调实验环保意识和责任。
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四、实验步骤
1.样品的处理
在电子天平上称取小麦粉2.5000g置于三角瓶中→加入 50ml 1%HCl混成浆状（不能有结块）→沸水浴中准确加 热15min→先加1ml 30% ZnSO4混匀→再加1ml 15%亚 铁氰化钾混匀→移至100ml容量瓶中加水定容混匀后过滤 →弃去最初15ml收集其余滤液。
Henan University of Technology
生物化学实验
河南工业大学生物工程学院 生物技术系
2015.3
实验内容
1. 1. 淀粉含量测定 2. 2. 氨基酸的纸上层析 3. 蛋白质分子量测定 4. 淀粉酶活力测定 5. 蛋白质含量测定 1. 6. 甲醛滴定测氨基氮 2. 7. 酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定 3. 8. 赖氨酸含量测定 9. 凝胶层析法分离蛋白质 10. 蔗糖酶的提取与部分纯化 11. 蔗糖酶活力的测定 12. Bradford法测定蛋白质含量
教学目的
生物化学是专业基础实验课，其先修课程
为无机化学、分析化学和有机化学 。其目的
是：学习和掌握生物技术，培养动手观察和思
维能力。
学习方法
1 、 预习：实验前必须进行充分的预习和准备，并写出预习报告，做到心 中 有数，这是做好实验的前提。 2 、 操作：应按拟定的实验操作计划与方案进行。做到轻（动作轻、讲话轻 ），细（细心观察、细致操作），准（试剂用量准 确 、结果及其记录准 确），洁（使用的仪器清洁，实验桌面整洁，实验结束把实验室打扫清 洁）。 3 、 在实验全过程中，应集中注意力，独立思考解决问题。自己难以解释时 可请老师解答。 4 、 写实验报告：做完实验后，应解释实验现象，并作出结论，或根据实验 数据进行计算和处理。主要包括：a、目的，b、原理，c、操作步骤及 实验性质、现象，d、数据处理（含误差原因及分析），e、 讨 论 ，f、 思考题回答。
一、实验目的
1. 2.
淀粉含量测定
掌握旋光仪的操作使用。 了解旋光法测粗淀粉的基本原理。
二、实验原理
• 在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶 液中。在一定的水解条件下，不同谷物淀粉的比旋 光度是不同的。其在 171 ～ 195 之间，因此可要仪器： （1）旋光仪 （2）电子天平（感量0.0001g） 2、试剂： ⑴1％盐酸溶液 ⑵30％硫酸锌溶液。 ⑶15％亚铁氰化钾溶液。
二、实验原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量的方法，主要是 根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素 所造成的电泳迁移率的差别。 在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一 定量的十二烷基硫酸钠（SDS），使所有蛋白质颗粒表面覆盖一 层SDS分子，导致蛋白质分子间原有的电荷差异消失，此时，蛋 白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小。当蛋白质的 分子量在15000～200000之间时，电泳迁移率与分子量的对数呈 直线关系。
2.旋光度测定 取滤液20ml置于旋光管中，先用1%HCl 调节旋光仪 “0”点，然后将样品溶液放入旋光仪中测α
六、思考题
• 样品加盐酸处理时，煮沸时间少于或多于15min会对测定
结果产生什么影响？
• 五 、 结果计算
100 淀粉含量（％）＝ 100 20 . L W D
7. 实验室公用物品（包括器材、药品等）用完后，应归放回原指定位置。实验废液、废 物按要求放入指定收集器皿。
8. 爱护公物，注意卫生，保持整洁，节约用水、电、气及器材。 9. 实验完毕后，要求整理、清洁实验台面，检查水、电、气源，打扫实验室卫生。
10. 实验记录经教师签名认可后，方可离开实验室。
实验一
三、仪器和试剂
1、主要仪器： （1）层析缸 （2）微量进样器 （3）喷雾器 2、试剂 ： （1）展开剂：乙醇：水：冰乙酸＝50:10:1 （2）氨基酸溶液：0.5%的赖氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸溶 液及它们的混合液 （3）显色剂：0.1%水合茚三酮丙酮溶液。
四、实验步骤
1、平衡：将展开剂（乙醇：水：冰乙酸＝50:10:1）放入培养 皿中置于密闭容器内使其充满展开剂（24h左右） 2、点样：取滤纸1张用铅笔在距下方2cm处划线并将所得线段 分成5等分从而得到4个标记点，用微量进样器分别取5μl下列样 品①phe②lys③pro④混合Aa向4个标记点上加样（样品扩散中 Ø≤1cm） 3、展层：将滤纸卷成筒状且不能够重叠，并用棉线扎紧然后垂 直放入培养皿中进行展层2h（当展开剂沿到达滤纸长度三分之 二时，即可取出）测量展开剂前沿移动距离（a） 4、显色：用0.1%茚三酮-丙酮溶液朝点样面喷雾（不要喷得太 多）然后将滤纸置于电炉上方20cm处加热直至斑点出现为止， 测量各斑点中心到点样点距离（b）
五、结果计算
斑点中心到点样点距离 （ b） Rf 展开剂前沿移动距离（ a）
六、思考题
• 1．计算出各种氨基酸的Rf值，并根据Rf值鉴定出混 合氨基酸中的各组分，在层析图谱上标出各氨基酸 名称。 2．对氨基酸移动快慢的原因给予简要分析。
•
实验三
一、实验目的
蛋白质分子量测定
掌握电泳基本原理、分类、影响因素, SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 用途,凝胶制备。
20 其中： D 182 .7
L 2dm W ：样品质量（ g）
实验二
一、实验目的
氨基酸的纸上层析
通过对氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方 法。
二、实验原理
纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析，滤纸纤维上的 －OH具有亲水性，因此能吸附一层水作为固定相，而通常 把有机溶剂作为流动相。有机溶剂自上而下流动，称为下行 层析；自下而上流动，称为上行层析。流动相流经支持物时 与固定相之间连续抽提，使物质在两相之间不断分配而得到 分离。
实验室守则
生物化学实验室守则是学生实验正常进行的保证，学生进入实验室必须遵守 以下规则：
1. 进入实验室，须遵守实验室纪律和制度，听从老师指导 2. 未穿实验服、未写实验预习报告者不得进入实验室进行实验。 3. 进入实验室后，要熟悉周围环境，熟悉防火及急救设备器材的使用方法和存放位置， 遵守安全规则。 4. 实验前，清点、检查仪器、明确仪器规范操作方法及注意事项，否则不得动手操作。 5. 使用药品时，要求明确其性质及使用方法后，据实验要求规范使用。禁止使用不明确 药品或随意混合药品。 6. 实验中，保持安静，认真操作，仔细观察，积极思维，实验过程中必须有原始记录， 不得擅自离开岗位。