血小板膜表面CD62P检测活化方法
流式细胞仪双色术检测机采血小板活化方法
流式细胞仪双色术检测机采血小板活化方法傅晓岚;陈兆珍;成晓玲;赵树铭【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2003(25)18【摘要】目的探讨一种流式细胞仪检测机采浓缩血小板悬液活化状态的方法。
方法用CD41 FITC、CD62 PE双色标记 ,避光反应 15min后加入 1ml 1%多聚甲醛固定 ,上机分析。
结果采用此方法测定2 2℃保存下不同时间的血小板CD62P表达 ,表明随着时间的延长CD62P阳性率增加 ,保存达到 3d及以上 ,CD62P阳性率增加非常显著。
标本以多聚甲醛固定在 2 4h对CD62P测试结果无明显影响 ,样品不固定处理 ,不同时间测定对结果影响非常大。
结论双色标记流式细胞术检测机采血小板活化敏感、特异 ,重复性好 ,操作简便 ,能较好地反映储存中血小板的CD62P的变化。
可方便应用于血小板的保存及输注的质量监控。
【总页数】2页(P1672-1673)【关键词】流式细胞术;血小板活化;CD62P;血小板保存【作者】傅晓岚;陈兆珍;成晓玲;赵树铭【作者单位】第三军医大学高原军事医学系中心实验室;第三军医大学附属西南医院输血科【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.机采血小板保存质量控制的主要指标及检测方法 [J], 王鹤;鲍丽;王淑梅2.流式细胞术检测活化血小板采血方法的改良和护理 [J], 王素侠;张华伟;王振芳;郭琼;吕合作3.机采血小板中白细胞碎片定量检测方法的建立及其影响因素 [J], 蒋光明;张林杰;王保龙;叶书来;陈家萍;周建华;王敏;廖艳秋4.全血三色法流式细胞术检测血小板P-选择素的方法 [J], 龚艳春;郭冀珍;史桂英;石学耕5.流式细胞术与三种活化血小板检测方法对比与分析 [J], 吴迪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
流式细胞术在血小板检测中的应用于方法介绍
47
Flow Cytometry
June 2000
血小板的活化、荧光染色与流式细胞仪分析
前言 血小板活化试验，对于血小板功能、心血管疾病的研究，有重要意义。使用流式细 胞仪进行多参数分析，可以特异灵敏地检测血小板表面标记，了解血小板的活化状态和 反应性，并同时获得更多关于血小板的信息。在疾病监测、抗血小板治疗病人的筛选及 治疗监测、预测并发症等方面有良好的应用前景。 使用推荐的三色流式分析方法检测血小板活化的优点是： 检测血小板的反应性。 了解血小板活化进程。血小板先发生膜糖蛋白变化，然后是胞浆内颗粒释放到 血小板外。 同时检测多种血小板表面标志。 高度灵敏。 直接检测血小板的多种标志。 使用全血，标本量少。 操作简便快捷，将血小板人工激活减至最低。
51
Flow Cytometry
June 2000
附：BDIS 血小板活化试剂
BD 抗体： CD PAC-1 CD62P CD61 Isotype 1 CaliBRITE 3 Ig Subclass IgM IgG1 IgG1 Form FITC PE PerCP PE Unlabeled,FITC,PE,PerCP Catalog No. 340507 348107 340506 340013 340486 Tests 50 100 50 25g 25
流式细胞仪检测全血中血小板功能状态 全血中血小板更接近生理状态 操作简便，减少由于操作造成的血小板状态改变（如血小板活化试验） 同时检测血小板的多个标志物，结合 FSC 和 SSC，评估多个参数，进行定量分析 多采用血小板特异抗体 CD41 或 CD61 画门，找出血小板，避免杂质碎片的干扰 检测血小板亚群灵敏度高 用血量少 无放射性污染
活化血小板检测方法
活化血小板检测方法活化血小板是指被某种刺激物激活后，细胞内释放出一种含有血小板生长因子（platelet-derived growth factor，PDGF）的血小板。
这种活化血小板在生理和病理条件下都有丰富的生物学功能，它们可以促进血管新生、细胞迁移和增殖、纤维蛋白溶解等。
活化血小板在生物学研究、生物医学技术和临床应用等方面都有广泛的应用。
为了检测活化血小板的生物学功能和应用价值，科学家们开发了多种方法，包括细胞学、免疫学、分子生物学等方法。
下面是十条关于活化血小板检测方法的详细描述：1. 光散射法光散射法是一种典型的血小板功能检测方法，它基于光学特性来测量血小板的形态、大小和聚集状态。
光散射法检测活化血小板时，可以通过检测血小板的聚集状态和形态来判断其活化状态。
2. 电阻抗法电阻抗法是一种测量细胞电阻的方法，它可以用来检测血小板的形态和大小，进而评价其活化程度。
电阻抗法还可以用于测量血小板与其他细胞的互作效应。
3. 血小板聚集率测试血小板聚集率测试是一种检测血小板功能的方法，它基于血小板在接触到激活物质后，聚集和黏附的特性。
通过测量血小板聚集率的改变，可以评价血小板的活性和功能状态。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种高通量的单细胞分析技术，可用于评估单个细胞及其亚群的生物学特性。
流式细胞术可以检测活化血小板的数量、形态和功能状态，并且可以分析不同血小板亚群的活性和功能。
5. 电子显微镜检查电子显微镜检查可以清晰地看到血小板的细节结构，包括血小板的形态、大小、颗粒和内部结构等，从而能够准确评估血小板的活性和功能状态。
6. PCR技术PCR技术是一种针对DNA序列进行扩增的高灵敏度技术，其可以用于检测血小板内含有的mRNA和DNA序列。
通过PCR技术，可以检测血小板内含有的多种生物标志物，如DNA 和RNA修饰物、微小RNA等，从而评价血小板的功能状态和表达谱。
7. 血小板膜蛋白检测血小板膜蛋白检测可以测量血小板表面的分子，如GPIIb/IIIa、GPIb、P-selectin等，这些分子是血小板活化的标志。
肿瘤患者放疗中血小板CD62P CD63及血浆CD62P的检测及意义
肿瘤患者放疗中血小板CD62P CD63及血浆CD62P的检测
及意义
唐中;杨明辉
【期刊名称】《川北医学院学报》
【年(卷),期】2003(018)001
【摘要】目的探讨肿瘤患者在放射治疗中血小板CD62P、CD63、SCD62P水平
的变化情况.方法利用流式细胞术检测血小板CD62P、CD63,ELISA测定SCD62P,血球计数仪CD1700测定血小板数量.结果随着放射治疗时间延长CD62P、CD63、SCD62P表达均明显高于对照组,血小板数量低于对照组.结论放射治疗能使血小板CD62P、CD63高度活化,最终导致血小板数量下降.
【总页数】3页(P104-106)
【作者】唐中;杨明辉
【作者单位】川北医学院附属医院检验科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院
检验科,四川,南充,637000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11+3
【相关文献】
1.肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测 [J], 唐中;杨明辉
2.血小板活化标志物CD62P、CD63的表达与血小板参数对非小细胞肺癌患者的
意义 [J], 雷鸣;胡黎娅;王自米;金从国;杨蕊
3.肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测 [J], 唐中;杨明辉
4.肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测 [J], 唐中;杨明辉
5.流式细胞仪检测血小板CD63、CD62P在偏头痛患者发病中的意义 [J], 郑冰;林惠;张书强;罗助荣
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原发性血小板减少性紫癜的血小板活化分子CD62P及CD …
原发性血小板减少性紫癜的血小板活化分子CD62P及CD …肖若冰;周铭
【期刊名称】《衡阳医学院学报》
【年(卷),期】2000(028)002
【摘要】目的探讨原发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者血小板的活化。
方法
应用流式细胞术检测ＩＴＰ患者的血小板ＣＤ６２Ｐ（α－颗粒糖蛋白）、ＣＤ６３（溶酶体膜糖蛋白）表达。
结果（１）ＩＴＰ患者的ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ６３表达率显著高于对照组；（２）患者ＣＤ６２Ｐ的表达与ＣＤ６３、ＰＡＩｇＧ、ＰＡＩｇＭ呈正的直线相关，与Ｐｌｔ呈负的直线相关，与ＰＡＩｇＡ为零相关；（３）患者ＣＤ６３的表达与ＰＡＩｇＧ、ＰＡＩｇＡ、ＰＡ
【总页数】2页(P145-146)
【作者】肖若冰;周铭
【作者单位】衡阳医学院第二附属医院,湖南衡阳;上海市中西医结合医院检验科【正文语种】中文
【中图分类】R554.6
【相关文献】
1.冠心病心虚证不同证型与血小板活化分子CD62P及CD63表达的关系 [J], 杨
丁友;段学忠
2.紫外线照射充氧自血回输对银屑病患者血小板活化分子CD62P及CD63表达的影响 [J], 刘华昌;李冠勇;周春蕾
3.脑挫裂伤血瘀证患者血小板活化分子CD62P和TSP的改变及临床意义 [J], 陈
永斌;阮玉山;黄李平;陈业强;李山;谭源福
4.PAIgG及血小板活化标志物PAC-1、CD62P检测在原发性血小板减少性紫癜患者临床意义 [J], 王传新;牛爱军;卢振铎;杨晓静;王立水;邹雄;
5.银屑病辨证分型与血小板活化分子CD62P及CD63表达的关系 [J], 李冠勇;刘华昌;尹格平;孙晓明
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危重患者血小板活化标志物CD_(62)P、PAC-1的临床观察
Ｐ Ｃ １随病情加重 ， Ａ一 绝对值逐渐增加 ， 比较 差异有统计 学意义 （ ３组 Ｐ均 ＜ ． １ 。结论 ００ ） 关键词 ： 全身炎症反应综合征 ； 多脏器功能不全 ； Ｄ２ ；Ａ — Ｃ ６Ｐ Ｐ Ｃ ｌ
Ｓ Ｃ ９ １年芝加 哥会议 上提 出 的 ＳＲ Ｃ Ｍ １９ Ｉ Ｓ诊断 标准 ， 符合 诊 断 标 准 为 ＳＲ Ｉ Ｓ组 ， 符 合 诊 断 标 准 为 无 不 ＳＲ Ｉ Ｓ组 。ＭＯ Ｓ诊 断参 照 Ｆｙ１９ Ｄ ｒ ９ ２年提 出的 ＭＯ Ｓ Ｄ 诊 断标准 ， 符合 诊 断标 准 为 ＭＯ Ｓ组 。排 除标 准 为 Ｄ １ ０ｄ内有应 用抗血 小板 药物史 ； ｄ内有抗凝史 。 ３ １２ 血 标本 的采 集 与标 记 ． 患者 均 放置 中心 静脉
６ ８例患 者根 据全身 炎症 反应综 合征 （Ｉ Ｓ 和多 脏器 功能 不全 （ Ｄ ） ＳＲ ） ＭＯ Ｓ 诊断 标准 ， 将患 者分为 无 ＳＲ Ｉ Ｓ组 、 无 ＳＲ ＩＳ组 、ＩＳ组 、 Ｏ Ｓ组 患者 Ｃ Ｐ ＳＲ Ｍ Ｄ Ｄ 、 动 态监测危重 患者 Ｃ Ｐ Ｄ 、
ＳＲ 组 和 ＭＯ Ｓ 。应用 Ａ Ａ Ｈ 评分 系统分别评分 ； ＩＳ Ｄ 组 Ｐ Ｃ Ｅｌ Ｉ 应用 Ｈ ＭＡ Ｅ ＬＰｕ 全 自动血细胞分析 仪通过阻抗法进 Ｅ Ｃ Ｌ ｌｓ 行血小板 的计数 ； 应用流式细胞 仪分别 检测 ３组 Ｃ Ｐ、Ａ 一。结 果 Ｄ Ｐ Ｃ１
［ ］ 西 学 杂 志 ，０６，５ ３ ：３ Ｊ． 陕 ２０ ３ （ ）３ ．
技 杂 志 ，０ ７ １ （ ０ ：２ ０１６ ． ２ ０ ，４ １ ） １６ —２ １
［ ５］华裕忠 ， 许俊华 ， 陈敏 ， ． 等 胸腔积液腺苷脱氨酶测定对结核性胸 膜炎的诊断价值 ［ ］医学检验与临床 ，０６，７ ２ ：４ Ｊ． ２０ １ （ ）４ ． ［ ］王西华 ， ６ 高庆梅 ， 杨远 ， ． 等 支气管肺泡灌洗液腺苷脱 氨酶对肺结 核鉴别诊断的临床价值 ［］临床荟萃，０４， （３ ：３３１３． Ｊ． ２０ １ ２ ） １３－３５ ９ ［ ７］吕青． 结核 性多 发浆 膜炎 ４ ５例 Ｉ 临床分 析 ［ ］ 中国防痨 杂志 ， Ｊ．
血小板活化标志物CD62P、CD63在糖尿病患者早期肾脏微血管病变中的表达
血小板活化标志物CD62P、CD63在糖尿病患者早期肾脏微血管病变中的表达李云婷;张雷雷;张巧丽【摘要】目的观察糖尿病肾病患者血小板活化标志物CD62P、CD63表达情况,探讨其在糖尿病早期肾脏微血管病变中的作用.方法选择单纯糖尿病48例,早期糖尿病肾病50例,正常对照组49例.应用流式细胞仪检测各组CD62P、CD63的阳性表达率.结果早期糖尿病组CD62P、CD63阳性表达率高于单纯糖尿病组和正常对照组;单纯糖尿病组CD62P、CD63阳性表达率高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).早期糖尿病肾病组与单纯糖尿病组β2微球蛋白高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论血小板活化标志物CD62P、CD63在糖尿病早期肾损害中有着重要的临床意义.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2015(036)005【总页数】3页(P551-553)【关键词】糖尿病肾病;CD62P;CD63;微血管病变【作者】李云婷;张雷雷;张巧丽【作者单位】河北医科大学第二医院检验科,河北石家庄 050000;河北省食品质量监督检验研究院食品部,河北石家庄050000;河北医科大学第二医院检验科,河北石家庄 050000【正文语种】中文【中图分类】R735.7糖尿病肾病是2型糖尿病最常见的并发症，是糖尿病主要微血管病变之一。
据统计30%～40%糖尿病患者可能发生糖尿病肾病，进而发展成为终末期肾脏疾病［1］；因其发生机制复杂，早期缺乏明显的症状和体征，容易错过最佳的治疗时间而最终导致肾衰竭，因此临床早期全面诊断显得尤为重要。
近年有研究发现糖尿病肾病患者血小板活化显著高于不伴肾病者，且2型糖尿病早期患者开始出现血小板活化，抗血小板活化药物对2型糖尿病有一定的疗效［2］，均提示血小板的活化与糖尿病肾病的形成有关。
本研究观察2型糖尿病并发早期肾病患者血小板膜糖蛋白CD62P、CD63的表达情况，旨在探讨其在糖尿病肾病早期微血管病变发展过程中的临床价值。
测定血小板表面CD62p评估心房颤动的高血凝状态
测定血小板表面CD62p评估心房颤动的高血凝状态樊红光;洪小苏;陈建昌;江建良【期刊名称】《中国血液流变学杂志》【年(卷),期】2004(14)1【摘要】目的通过测定心房颤动(房颤)患者血小板表面CD62p了解血小板活化百分率,评估原发病、左房内径(LAD)、年龄和心室率对房颤的血凝状态的影响,以期对临床治疗产生一定的指导作用.方法采用流式细胞仪(FCM)测定房颤组和对照组血小板表面CD62p了解血小板活化百分率.结果除孤立性房颤组外,其它各房颤组血小板活化率均高于对照组(P<0.05).血小板活化率与LAD、年龄有良好的相关性(r分别为0.655和0.508,P值均<0.01),与心室率无相关性.结论血小板活化率和LAD可以作为评估房颤患者高血凝状态的两个重要指标,对指导抗凝治疗有重要意义.【总页数】2页(P84-85)【作者】樊红光;洪小苏;陈建昌;江建良【作者单位】连云港市第一人民医院心脏中心,连云港,222004;苏州大学附属第二医院心内科,苏州,215006;苏州大学附属第二医院心内科,苏州,215006;苏州大学附属第二医院心内科,苏州,215006【正文语种】中文【中图分类】R541.75【相关文献】1.单核细胞和血小板CD40L高表达及血小板CD62P高含量与急性冠脉综合征的关系 [J], 沈凯;袁国裕;陈国雄;俞晓军;王炎一;方波;王红娜;魏峰涛2.流式细胞仪测定血小板表面CD62p的临床意义 [J], 徐长根;戴瑞娣;朱阳泉3.化纤胶囊对脓毒症大鼠血小板最大聚集率、血小板活化复合物（PAC-1）、血小板表面蛋白CD62p的影响 [J], 王若晖;李雪;李卉4.糖尿病合并急性冠状动脉综合征患者血小板表面PAC-1和CD62P表达水平 [J], 柳晓娜;朱宁;魏国峰;王纪文;李忠艳5.外周血凝血指标、血小板计数和NLR检测对恶性肿瘤患者治疗前机体凝血状态的评估价值 [J], 汪敏;于鹏跃;王言;宋燕珂;李峣;孙莹;赵丽艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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血小板膜表面CD62P检测
操作步骤
1. 标本采集：
(1)采血管顺序编号。
(2)抽取静脉血，采血管中注入2ml。
(3)于10分钟之内完成血小板激活和染色步骤，操作时应注意
减少人工激活。
注意事项：1、至少要采集10ml全血
2、而且必须用粗针采血
3、如果是用注射器，则将采的血先放入才血管，最后将
剩余的几毫升弃掉或做它用。
4、如果是用采血针采血，先弃掉2ml,然后再往采血管中采
集。
2. 荧光抗体染色：
(1)取2支试管，加入待测外周血标本，两管各加5ul
(2)在对照管中加入CD62P的同型对照抗体、CD61 各20μl
(3)在试验管中加入CD62p抗体和CD61抗体各20μl。
(4)轻轻混匀，室温暗处孵育15-20分钟。
(5)孵育后，加入500ul的PBS（若血小板数目过多，可以多加一
些PBS），混匀后上机检测；若不能立即上机，加入500ul 1%的多聚甲醛溶液固定，24小时内上机分析。
注意事项：
1、在所有操作中动作应轻柔，不可力度过大，因为血小板容易活化
2、方案的建立：
两张图：（1）散点图CD61/SS，圈CD61阳性的血小板（2）直方图CD62P，分析血小板的表达情况
FS，SS均应选择Log方式检测，阈值设在FL1（CD61的荧光通道）上，值可能会比较大，可能在200、300左右。