质谱法学习报告

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高效液相色谱质谱联用法实验报告

高效液相色谱质谱联用法实验报告

高效液相色谱质谱联用法实验报告
实验背景
高效液相色谱质谱联用法(LC-MS)是一种结合了高效液相色
谱(HPLC)和质谱(MS)技术的分析方法。

HPLC用于分离混合
物中的化合物,而质谱用于对这些化合物进行鉴定和定量分析。

实验目的
本实验旨在使用LC-MS方法分析给定样品中的化合物,并确
定其组成和含量。

实验步骤
1. 样品准备:将给定样品按照实验要求进行前处理,并将其溶
解于适当的溶剂中。

2. 校准仪器:使用标准品进行仪器的校准,确保LC-MS系统
正常运行,并设定适当的参数。

3. 样品进样:将样品溶液加入进样器中,并设置合适的进样量。

4. HPLC分离:使用合适的色谱柱和流动相进行HPLC分离,
使样品中的化合物逐一分离。

5. MS检测:将HPLC分离后的化合物进入质谱仪中进行检测,获取质谱图谱和相关数据。

6. 数据分析:根据质谱数据进行化合物的鉴定和定量分析。

实验结果
通过LC-MS方法,成功分离和鉴定了样品中的多个化合物。

经定量分析,确定了各化合物的含量范围和相对含量比例。

结论
LC-MS方法是一种可靠和高效的分析技术,在化合物分离和
鉴定方面具有重要应用价值。

通过本实验的结果,我们对所研究样
品的化学组成和含量有了更深入的了解,并为进一步研究提供了参
考依据。

延伸研究
在今后的研究中,可以进一步探索LC-MS方法在不同样品和
化合物类别中的应用,以及进一步提高分析的准确性和灵敏度。

同时,结合其他分析技术,如质谱成像等,可以开展更加全面和深入
的分析研究。

浅谈蛋白质质谱分析报告

浅谈蛋白质质谱分析报告

浅谈蛋白质质谱分析报告蛋白质质谱分析报告是蛋白质质谱实验的结果总结和分析,它是对蛋白质质谱实验数据进行归纳整理和解读的重要文献。

蛋白质质谱分析报告通常包括实验目的、实验方法、实验结果和数据分析等几个方面。

首先,蛋白质质谱分析报告应该明确实验的目的。

实验目的通常是指明为何要进行此次实验,可以是为了确认一种特定蛋白质的存在,或者是为了研究蛋白质的结构和功能等。

在实验目的的基础上,还可以加入一些研究背景和相关文献综述,来说明该实验对当前领域研究的重要性和意义。

其次,蛋白质质谱分析报告应该详细描述实验的方法步骤。

蛋白质质谱分析通常包括样品制备、质谱仪器设置、质谱分析参数等几个环节。

在报告中应该清晰地描述每一步实验的具体操作步骤,以便读者能够重复实验或者找出实验中的问题。

然后,蛋白质质谱分析报告应该准确地呈现实验结果。

实验结果可以通过质谱仪器生成的质谱图来展示。

在报告中可以选择展示主要峰的质谱图,以及与质谱图相关的数据,如峰的质量-电荷比(m/z)值、相对丰度等。

同时,也可以根据实验目的和需要适当地引入一些统计分析结果或者数据处理方法,例如峰面积计算、质谱峰的比例或者鉴定结果的置信度等。

最后,蛋白质质谱分析报告应该对实验结果进行合理的解释和数据分析。

在报告中可以结合相关背景知识和文献引用,对质谱图中的峰进行鉴定和注释。

这些鉴定和注释可以根据质谱数据与已知数据库进行比对,或者通过其他实验手段进一步验证。

同时,也可以对实验结果进行进一步的量化分析和比较,以得出对实验目的的解答和结论。

综上所述,蛋白质质谱分析报告是对蛋白质质谱实验结果的总结和解读。

通过清晰地描述实验目的、实验方法、实验结果和数据分析,蛋白质质谱分析报告能够帮助读者更好地理解实验过程和结果,并为进一步研究提供必要的参考依据。

质谱实验报告

质谱实验报告

前言石油作为世界最重要的能源之一和优质的有机化工原料,在近代人类文明的发展史中占据重要地位。

而由于石油资源的不可再生,及近年日益严峻的能源危机,更凸显了如何将其进行深加工以获得更高的轻质油品收率这一重要能源课题的紧迫性。

而存在于石油中的众多金属元素中,镍、钒、铁、钠、钙、铜及砷都会引起催化剂中毒,导致石油深加工难度增大等不利影响,其中以镍和钒的危害最为突出。

镍和钒都是以有机金属化合物的形式存在,普通的电脱盐过程无法将它们脱除,因此在石油精制加工过程中它们的存在容易导致催化剂中毒或催化剂床层堵塞。

而在有关石油成因的研究过程中,作为生物标记物,研究石油中的金属镍和钒化合物也具有重要的意义。

石油中的金属卟啉我们是无法直接分析的,由于其不易挥发和结构分布的复杂性,相关的分离和鉴定受到一定限制,而且金属卟啉在石油中的含量相对都比较低,分析石油卟啉时油中含有的石油基质也会对分析产生严重影响。

这就需要先把石油卟啉从石油中分离出来并提纯,再进行分析和鉴定。

从石油中分离镍和钒金属化合物的方法很多,鉴定石油卟啉常用的方法是紫外-可见吸收光谱法和质谱法,紫外-可见光谱法可以对石油卟啉进行定量分析,质谱法可以得到石油卟啉的分子量和类型等方面的信息。

随着石油需求量的日益增大,我国所加工的原油中,进口原油所占比例逐渐增高,委内瑞拉原油由于其较高的金属含量,对石油中卟啉化合物的分离和提纯具有较好的代表性。

本次试验以委内瑞拉原油为研究对象,对其中的卟啉化合物进行分离和鉴定。

为了满足分析测试的要求,采用溶剂萃取与柱色谱分离相结合的方法对委内瑞拉原油中的金属卟啉化合物进行分离和提纯,并利用傅立叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR MS)对分离后的样品进行了质谱分析。

实验内容1实验药品与仪器实验药品:乙腈、正己烷(Hexane)、二氯甲烷(DCM)、环己烷、无水乙醇(以上试剂均为分析纯);委内瑞拉原油。

实验仪器:傅立叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR MS)2实验方法2.1原油中金属卟啉化合物的分离和提纯本实验采用乙腈/正己烷液-液萃取和硅胶柱色谱层析的方法分离和提纯原油各组分,得到较纯的镍卟啉和钒卟啉组分,为质谱实验做准备。

质谱分析实验报告

质谱分析实验报告

质谱分析实验报告1. 引言实验目的:通过质谱分析仪器对待测样品进行分析,获得其质谱图谱,并对样品的组成和结构进行解析。

实验原理:质谱是通过将待测样品转化为离子,并在磁场中进行运动,利用离子质荷比的差异,将离子分离和检测的一种分析技术。

2. 实验步骤2.1 样品制备首先,将待测样品溶解于适当的溶剂中,制备出待测溶液。

确保溶液的浓度适中,以获得清晰的质谱图谱。

2.2 仪器设置根据待测样品的性质和目的,调整质谱仪的参数,如加热温度、离子化方式等。

确保仪器处于稳定的工作状态。

2.3 样品进样将待测溶液以适当的速率进样到质谱仪的离子化室中。

注意避免气泡的产生,并确保样品进入离子化室前已被均匀雾化。

2.4 质谱分析开始采集质谱图谱数据。

根据实验要求,选择质谱扫描模式和质谱图谱的范围。

将采集到的数据进行处理和记录。

3. 实验结果与分析通过质谱分析仪器测得的质谱图谱,可以得到对应的峰位、峰强度和峰的区域。

根据质谱图谱的特征,可以进行如下分析:3.1 总离子流图总离子流图显示了离子强度与质量电荷比的关系。

通过分析总离子流图,可以确定样品的主要成分和相对丰度。

3.2 特征离子峰在质谱图谱中,可以观察到特定的离子峰。

通过对这些离子峰的质荷比和相对丰度进行分析,可以确定样品的结构和组分。

3.3 质谱图谱解析根据待测样品的特性和实验目的,比对已知化合物的质谱图谱数据库,并与实验测得的质谱图谱进行对比分析,以获得更详细的结构信息。

4. 结论通过质谱分析实验,获得了待测样品的质谱图谱,并对其组成和结构进行了解析。

实验结果表明,样品中含有XXX成分,并且其结构为XXX。

实验结果与已知数据吻合度较高,证明了质谱分析的准确性和可靠性。

5. 实验总结本实验利用质谱分析仪器对待测样品进行了分析,通过质谱图谱的解析,得到了样品的组成和结构信息。

然而,在实验过程中仍存在一些问题和不足之处,如样品制备的精确度和质谱仪器的灵敏度等。

为了进一步提高实验结果的准确性和可靠性,有必要在样品制备和仪器操作方面进行更深入的研究和优化。

质谱工作总结

质谱工作总结

质谱工作总结
质谱是一种非常重要的分析技术,它在化学、生物学、药物研发等领域都有着
广泛的应用。

在过去的一段时间里,我有幸参与了质谱工作,并且积累了一些经验和体会,现在我想将这些总结分享给大家。

首先,质谱工作需要严谨的实验操作和精准的数据处理。

在进行质谱分析时,
我们需要准备样品、仪器设备,并且进行标定和校准,确保实验的准确性和可靠性。

同时,对于质谱数据的处理也是至关重要的,我们需要使用专业的软件进行数据分析和解释,以得出准确的结论。

其次,质谱工作需要团队合作和交流。

在实验过程中,我们需要与其他实验人员、仪器维护人员、数据分析人员等进行密切的合作和沟通,共同解决实验中遇到的问题,确保实验的顺利进行和结果的准确性。

另外,质谱工作需要不断学习和更新知识。

质谱技术是一个不断发展和进步的
领域,新的仪器设备、分析方法和数据处理技术不断涌现,我们需要不断学习和更新知识,以跟上行业的发展和变化。

总的来说,质谱工作是一项需要严谨、合作和不断学习的工作。

通过这段时间
的实践和总结,我对质谱工作有了更深入的理解和认识,也积累了一些宝贵的经验。

我相信,在未来的工作中,我会继续努力,不断提升自己的实验技能和专业知识,为质谱工作做出更大的贡献。

液相质谱法实验报告(3篇)

液相质谱法实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过液相质谱法(LC-MS/MS)检测胶原蛋白多肽,验证该方法在胶原蛋白检测中的灵敏度和特异性,为胶原蛋白的定量分析提供实验依据。

二、实验原理液相质谱法是一种高效、灵敏的分析技术,结合了液相色谱(LC)和质谱(MS)的优点。

本实验采用液相色谱-质谱联用技术,通过检测胶原蛋白特异的多肽片段,实现对胶原蛋白的定性和定量分析。

三、实验材料1. 仪器:液相色谱-质谱联用仪、高效液相色谱仪、分析天平、水浴锅、涡旋仪等。

2. 试剂:胶原蛋白试样、胰蛋白酶、甲醇、磷酸、流动相储备液、标准品、内标品等。

3. 试剂规格:胰蛋白酶(1mg/mL)、甲醇(分析纯)、磷酸(分析纯)、流动相储备液(甲醇:水=65:35)。

四、实验步骤1. 样品制备(1)将胶原蛋白试样溶解于适量去离子水中,加入适量胰蛋白酶,在37℃水浴中酶解过夜。

(2)酶解结束后,将样品用滤膜过滤,取滤液进行液相色谱分析。

2. 液相色谱-质谱条件(1)色谱柱:Eclipse XDB C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)。

(2)流动相:甲醇-水(65:35)。

(3)流速:0.8mL/min。

(4)柱温:30℃。

(5)进样量:10μL。

3. 质谱条件(1)电离方式:电喷雾电离(ESI)。

(2)扫描方式:多反应监测(MRM)。

(3)碰撞能量:20eV。

4. 数据分析(1)根据质谱图谱,使用肽段序列信息和数据库匹配算法鉴定胶原蛋白。

(2)通过计算肽段的峰面积或峰高,定量样品中的胶原蛋白。

五、实验结果1. 胶原蛋白多肽的鉴定根据质谱图谱,成功鉴定出胶原蛋白特异的多肽片段,如Gly-Pro-Gly-Gly等。

2. 胶原蛋白的定量分析通过液相色谱-质谱联用技术,对样品中的胶原蛋白进行定量分析,结果显示胶原蛋白含量为0.5mg/mL。

六、实验讨论1. 液相质谱法在胶原蛋白检测中的应用具有高灵敏度和高特异性,可以准确检测出不同来源的胶原蛋白。

质谱分析实验报告

质谱分析实验报告

质谱分析实验报告一、实验目的本实验旨在通过质谱分析技术对给定样品进行定性和定量分析,以了解样品的化学组成和含量,并熟悉质谱仪的操作和数据分析方法。

二、实验原理质谱分析是一种通过测量离子质荷比(m/z)来分析化合物的技术。

样品分子在离子源中被电离形成带电离子,这些离子在电场和磁场的作用下按照其质荷比进行分离,并被检测器检测。

根据离子的强度和质荷比,可以确定样品中化合物的分子量、化学式和结构等信息。

三、实验仪器与试剂1、仪器质谱仪(型号:_____)进样系统(如自动进样器、注射器等)计算机数据处理系统2、试剂标准品(化合物名称:_____)样品溶液(样品名称:_____)溶剂(如甲醇、乙腈等)四、实验步骤1、仪器准备开启质谱仪,预热至稳定状态。

检查仪器的真空度、离子源温度、质量分析器等参数是否正常。

2、样品制备准确称取一定量的标准品,用适当的溶剂溶解并配制标准溶液。

将样品用相同的溶剂稀释至适当浓度。

3、进样使用自动进样器或注射器将标准溶液和样品溶液分别注入质谱仪。

4、仪器参数设置根据样品的性质和分析目的,设置合适的电离方式(如电子轰击电离、电喷雾电离等)、扫描范围、分辨率等参数。

5、数据采集启动仪器进行数据采集,记录质谱图。

6、数据分析使用专业软件对采集到的数据进行处理和分析,包括离子峰的识别、分子量的确定、定量计算等。

五、实验结果与讨论1、标准品的质谱图分析观察标准品的质谱图,确定主要离子峰的质荷比和相对强度。

根据离子峰的特征,推断标准品的分子结构和可能的裂解途径。

2、样品的质谱图分析对比样品和标准品的质谱图,找出相似和差异之处。

对样品中出现的离子峰进行归属和解释,确定样品中可能存在的化合物。

3、定量分析结果根据标准品的浓度和响应信号,建立校准曲线。

通过样品的响应信号,计算样品中目标化合物的含量。

4、误差分析分析实验过程中可能引入的误差来源,如样品制备误差、仪器精度误差、数据处理误差等。

讨论如何减小误差,提高实验结果的准确性和可靠性。

实验报告质谱分析实验

实验报告质谱分析实验

实验报告质谱分析实验实验报告:质谱分析实验一、实验目的质谱分析作为一种强大的分析技术,在化学、生物、医药等领域有着广泛的应用。

本次实验的主要目的是通过实际操作,熟悉质谱分析的基本原理和实验流程,掌握仪器的使用方法,能够对给定的样品进行准确的质谱分析,并根据所得数据进行物质的鉴定和结构解析。

二、实验原理质谱分析是通过将样品分子转化为离子,并根据其质荷比(m/z)的不同在电磁场中进行分离和检测的方法。

样品首先经过离子化源,常见的离子化方式有电子轰击电离(EI)、化学电离(CI)、电喷雾电离(ESI)等。

离子化后的样品离子在加速电场中获得一定的动能,进入质量分析器。

质量分析器的作用是根据离子的质荷比将其分离。

常见的质量分析器有扇形磁场分析器、四极杆分析器、飞行时间分析器(TOF)等。

分离后的离子最终到达检测器,产生电信号,经过放大和处理后得到质谱图。

质谱图是以质荷比为横坐标,离子强度为纵坐标绘制的曲线。

通过对质谱图的分析,可以确定样品的分子量、化学式、结构等信息。

三、实验仪器与试剂1、仪器质谱仪(型号:_____)进样系统(包括自动进样器、注射器等)数据处理系统(计算机及相关软件)2、试剂标准样品(已知分子量和结构的化合物,如苯、甲苯等)待测试样(未知组成的混合物)溶剂(如甲醇、乙腈等,用于溶解样品)四、实验步骤1、仪器准备开启质谱仪电源,预热至稳定状态。

检查仪器的真空度,确保达到工作要求。

校准仪器,使用标准物质进行质量轴的校准。

2、样品制备准确称取一定量的标准样品或待测试样,用适当的溶剂溶解并配制一定浓度的溶液。

将样品溶液转移至进样瓶中。

3、进样与分析设置进样参数,如进样量、进样速度等。

启动进样程序,将样品引入质谱仪进行分析。

4、数据采集与处理在分析过程中,仪器自动采集质谱数据。

利用数据处理软件对采集到的数据进行处理,如平滑、基线校正、峰识别等。

5、结果分析根据质谱图中的峰位置(质荷比)和峰强度,确定样品中所含物质的分子量和相对含量。

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《质谱法》学习报告摘要质谱(分析)法作为近代科学一种重要的分析方法正在越来越多的领域彰显它不可或缺的地位。

而在近几十年生命科学也开始蓬勃发展。

二者就此发生了融合,互相影响。

本文在简介质谱(分析)法的同时,重点阐述其在生命科学领域的重要作用。

关键词质谱法原理、装置、操作、质谱法与生命科学一、质谱法的原理质谱(分析)法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。

主要利用电磁学原理,使带电样品的离子按质合比进行分离。

具体过程为:离子电离后经加速进入磁场中,其动能与加速电压及所带电荷数有关。

具有不同速率的带电粒子进入质谱分析仪器的电磁场中,根据所选择的分离方式,最终实现各种离子按质合比进行分离。

[1]二、质谱法采用的仪器1.原理利用运动离子在电场和磁场中偏转原理设计,用于进行质谱分析的仪器称为质谱计或质谱仪。

前者指用电子学方法检测离子,而后者指离子被聚焦在照相底板上进行检测。

质谱仪可以分成三个部分:离子化器、质量分析器与侦测器。

其基本原理是使试样中的成分在离子化器中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。

在质量分析器中,再利用电场或磁场使不同质荷比的离子在空间上或时间上分离,或是透过过滤的方式,将它们分别聚焦到侦测器而得到质谱图,从而获得质量与浓度(或分压)相关的图谱。

2.分类[2](1)分类标准:应用角度①有机质谱仪(用途最广)气相色谱-质谱联用仪液相色谱-质谱联用仪其他有机质谱仪,主要有:基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪,傅立叶变换质谱仪②无机质谱仪火花源双聚焦质谱仪。

电感耦合等离子体质谱仪二次离子质谱仪辉光放电质谱仪③生物质谱分析生物质谱分析(Biological mass spectrometry)是以质谱分析技术用于精确测量生物大分子,如蛋白质,核苷酸和糖类等的分子量,并提供分子结构信息。

对存在于生命复杂体系中的微量或痕量小分子生物活性物质进行定性或定量分析。

一般的方法有:电喷雾电离质谱,基质辅助激光解吸电离质谱,快原子轰击质谱,离子喷雾电离质谱,大气压电离质谱。

可对分子量高达几十万的生物大分子进行快速(几分钟一个样品)、精确( 0.01%)和高灵敏度(10-15mol)的测定。

质谱仪由工作原理的不同可区分如下:(2分类标准:电离方式电子碰撞质谱化学电离质谱光电离质谱阈值电离质谱(3)分类标准:质量分析方式从质谱仪所用的质量分析器的不同,把质谱仪分为双聚焦质谱仪、四极杆质谱仪、飞行时间质谱仪、离子阱质谱仪、傅立叶变换质谱仪等。

三、质谱仪的操作1.无机质谱法:首先原子化;其次将原子化的大部分转化为离子流,一般为单电荷正离子;然后将离子按质量——电荷比分离;最后计算各种离子的数目或测定由试样形成的离子轰击传感器时产生的离子电流。

2.有机质谱法:采用质谱法的手段获得无机、有机和生物分子的结构信息,并对复杂化合物的各组分进行定性与定量分析。

通常采用高能粒子束(如:电子、原子、离子)等使已气化的分子离子化,或将固态或液态试样直接转变成气态离子,让分解出的阳离子加速导入质量分析器中,然后按照质荷比的大小顺序进行收集和记录。

根据质谱图中出峰的位置,可以进行定性和结构分析;根据峰的强度,可以进行定量分析。

四、质谱法的应用(一)质谱法的传统应用[3]1.相对分子量的测定除同位素峰外,分子离子峰应出现在谱图中的最高质量位置。

但当分子离子不稳定时,可能导致分子离子峰不在谱图中出现,或生成大于或小于分子离子质量的峰。

2.分子式的测定分子式测定可采用同位素丰度法,但此时对分子量大或结构复杂、不稳定的化合物是不适用的。

现在一般都采用高分辨质谱法测定,可直接显示可能分子式及可能率。

若测出的分子量数据与按推荐的分子式计算出的分子量数据相差很小,则可认为推测是可信的。

(二)质谱在生命科学研究中的应用概述在80年代中期研发出的的两种新的电离技术:电喷雾电离(electrospray ionization, ESI)和基质辅助激光解吸电离(matrix-assisted laser desorption ionization, MALDI)带来了质谱法应用真正意义上的变革,这两种技术所具有的高灵敏度和高质量检测范围,使得在pmol (10-12)乃至fmol(10-15)水平检测分子量高达几十万的生物大分子成为可能,从而开拓了质谱学一个崭新的领域——生物质谱,促使质谱技术在生命科学领域获得广泛应用和发展。

1.柱前衍生高效液相色谱·质谱法测定血浆中的氨基葡萄糖浓度[4]该方法以氨基半乳糖为内标,用丙酮沉淀蛋白后,加入5μL三乙胺和lOμL 异硫氰酸苯脂后,在60℃的恒温水浴中反应1h,用氮气吹干、流动相溶解后于离心机上以12000r/rain离心5rain后进样20μL分析;以甲醇与水作流动相,经过Ultimate.XBC柱(4.6mm×250mm,5μm,WelchMaterials)在梯度模18式下分离后1:4分流,以0.2mlVmin的流速进质谱分析.实验结果表明:氨基葡萄糖的回归方程为Y=6.70×10-4X+1.1l×10-2(r2=0.996),在0.10—5.00μg/mL 范围内线性关系良好;最低定量限为0.10mg/L;氨基葡萄糖和内标的萃取回收率分别为88.3%一92.1%和85.2%;日内、13间精密度的RSD值分别为<6.0%、<5.O%,稳定性的RSD<7.5%。

所建立的方法准确度好、灵敏度高、稳定性好,适合于血浆中的氨基葡萄糖的含量测定。

2.蛋白质和多肽的分析[5](1)分子量测定分子量是蛋白质、多肽最基本的物理参数之一,是蛋白质、多肽识别与鉴定中首先需要测定的参数,也是基因工程产品报批的重要数据之一。

分子量正确与否往往代表着所测定的蛋白质结构正确与否或者意味着一个新蛋白质的发现。

生物质谱可测定生物大分子分子量高达400,000Da,准确度高达0.1%-0.001%,远远高于目前常规应用的SDS电泳技术与高效凝胶色谱技术。

生物质谱配以响应的软件还可实现对组合化学多肽产物的快速测定。

(2)肽谱测定(Peptide Mapping)肽谱是基因工程重组蛋白结构确认的重要指标,也是蛋白质组研究中大规模蛋白质识别和新蛋白质发现的重要手段。

生物质谱可测定肽质量指纹谱,并给出全部肽段的准确分子量,结合蛋白质数据库检索,可实现对蛋白质的快速鉴别和高通量筛选。

(3)肽序列测定技术①肽序列标签技术(peptide sequence tags)构成蛋白质的常见氨基酸有20种,一段3个氨基酸的肽段碎片将有8,000种可能的排列方式,4个氨基酸将有160,000种排列方式,即一个特定的4个氨基酸序列的出现概率为1/160,000。

因此即使对于不是很大的原核生物的蛋白质组来说,一个短的序列片段也具有很高的特异性。

生物质谱技术中的串联质谱技术可直接测定肽段的氨基酸序列,将串联质谱产生的肽段序列用于数据库查寻,称之为肽序列标签技术,目前广泛应用于蛋白质组研究中的大规模筛选。

较之传统的Edman降解末端测序技术,生物质谱具有不受末端封闭的限制,灵敏度高,速度快的特点。

②肽阶梯序列技术(peptide ladder sequencing)采用不同浓度的蛋白酶分别降解同一蛋白或多肽,产生长短不等的一组多肽样品,根据质谱测定的肽段质量间的差异推导出多肽的序列。

(4)疏基和二硫键定位二硫键在维持蛋白和多肽三级结构和正确折叠中具有重要作用,同时也是研究翻译后修饰所经常面临的问题,自由疏基在研究亚基之间及蛋白与其它物质相互作用中具有重要意义。

将生物质谱技术中的串联质谱技术与蛋白酶切、肽谱技术相结合,可实现对二硫键和自由巯基的快速定位与确定。

在含有多二硫键结构的活性多肽与蛋白质研究中有重要用途。

3.傅里叶变换·离子回旋共振质谱法在蛋白质翻译后修饰研究中的应用[6]蛋白质翻译后修饰几乎参与了细胞所有的正常生命活动,并发挥十分重要的调控作用,目前已成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的领域。

常见的蛋白质翻译后修饰包括类泛素化、乙酰化、磷酸化、甲基化、糖基化等。

傅里叶变换·离子回旋共振质谱(FT·ICRMS)具有超高分辨率、高质量测量准确度、质量范围宽、速度快、性能可靠等显著优点,在确定蛋白质翻译后修饰位置以及修饰的结构研究方面具有独特优势。

4.寡核苷酸和核酸的分析[7]人类基因组有30亿个碱基,但真正与疾病有关的只是少数可变的基因。

基因库中有一个很丰富的资源是300万个单核苷酸多态性片段(SNPs),它们可以作为药物基因组学中基因型和表型的纽带。

SNPs不一定要准确定位,关键是测定其在种群中出现的频率及其遗传和表型的关系,这便需要大规模的测序技术。

Griffin T.J.等用浸染剪切分析(一种不经PCR而可以直接进行SNPs分析的信号放大方法)结合MALDI-TOF-MS分析人基因组SNPs,该法节省时间,又适于高通量分析,有利于特异性基因的定位、鉴定和功能表征。

DNA在内环境中的温度、pH、机体代谢过程产生的超氧化物自由基,外环境中的各种化学物质(如烷化剂)、物理因素(紫外线等)各种条件作用下,都可能发生损伤,若损伤不能及时修复,就会产生严重的生物学后果,各种条件下DNA损伤的质谱研究多有报道。

采用MALDI-TOF/MS已经实现对数十个碱基寡核苷酸的分子量和序列测定。

此技术可用于天然或人工合成寡核苷酸的质量控制。

5..药物代谢[8]近年来质谱在药物代谢方面的研究进展迅速。

其主要研究药物在体内过程中发生的变化,阐明药物作用的部位、强弱、时效及毒副作用,从而为药物设计、合理用药提供实验和理论基础。

特别是采用生物技术获得的大分子药物的体内代谢研究,更是传统的研究手段难以解决的难题。

体内药物或代谢物浓度一般很低,而且很多情况下需要实时检测,而质谱的高灵敏度和高分辨率以及快速检测则为代谢物鉴定提供了保证。

LC-ESI-MS-MS在这方面有独特的优势。

由于对液态样品和混合样品的分离能力高,可通过二级离子碎片寻找原型药物并推导其结构,LC-ESI-MS-MS已广泛地应用于药物代谢研究中一期生物转化反应和二期结合反应产物的鉴定、复杂生物样品的自动化分析以及代谢物结构阐述等。

6.质谱法在抗肿瘤靶点蛋白的外源性化学修饰研究中的应用[9]研究证明:某些具有迈克尔反应活性的化合物对于肿瘤细胞中靶点蛋白作用的化学生物学物质基础通常源于其对后者进行的化学共价修饰,从而破坏了后者正常的生物学功能并且诱导肿瘤细胞死亡。

鉴于质谱法已成为研究化学小分子与生物分子共价修饰作用的一种主流手段。

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