莲子心生物碱提取分离、鉴定及制剂研究概述

时珍国医国药２０１２年第２３卷第９期ＬＩｓＨＩｚＨＥＮＭＥＤＩｃＩＮＥＡＮＤＭＡＴＥＲＩＡＭＥＤＩｃＡＲＥｓＥＡＲｃＨ２０１２ｖｏＬ２３Ｎｏ．９◇文献综述◇莲子心生物碱提取分离、鉴定及制剂研究概述吴梅青（湘潭职业技术学院，湖南湘潭４１１１０２）摘要：综述近年来莲子心生物碱的提取分离方法，同时介绍相关生物碱的鉴定方法及制剂研究概况，以期为后续研究提供一定的参考作用。

关键词：莲子心；生物碱；提取分离；鉴定；制剂ＤＯＩ标识：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８＿０８０５．２０１２．０９．０７４中图分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ２８３文献标识码：Ｂ文章编号：１００８一０８０５（２０１２）０９．２２７８旬２莲子心为睡莲科植物Ⅳｅｆ＂ｍ６０凡∽咖ｒ０Ｇａｅｒｎｌ．的成熟种子中的干燥幼叶及胚根。

取出，晒于。

主产于湖南、湖北、福建、江苏、浙江等地，具有清心安神、交通心肾、涩精止血只功，用于热人心包、神昏谵语、心肾不交、失眠遗精、血热吐血的治疗。

被２０１０年版《中国药典》收载…。

现代研究表明，莲子心含有生物碱、黄酮、谷甾醇、挥发油和微量元素等化学成分。

其中生物碱包括莲心碱、甲基莲心碱、异莲心碱和莲心季铵碱等，是莲子心的主要药效成分，具有降血压、抗心律失常、抗血小板聚集、抗脂质过氧化及清除自由基、抗癌等药理作用。

本文就近年来国内外对莲心生物碱提取分离、鉴定及制剂研究进展进行综述，以期为后续研究提供参考。

１莲子心生物碱的提取分离方法１．１醇提法醇提法的优点在于其羟基能与酚羟基形成氢键，增大提取过程中的作用力，从而提高提取效率。

由于所要提取的莲子心生物碱多为苄基异喹啉结构，其中含有较多酚羟基，因此一般选用乙醇进行提取莲子心生物碱。

董兰等‘２１采用乙醇从莲子心中提取莲心总碱，经正交实验确定了该法提取的最佳工艺条件。

刘产明等¨－采用正交试验设计法，以莲子心总生物碱得率为指标，同时考察了乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间、调酸ｐＨ、调碱ｐＨ和放置条件７个因素，得出了莲子心总生物碱最佳提取工艺条件为：莲子心加３倍８５％乙醇，回流提取６次，每次４５ｍｉｎ，诃酸ｐＨｌ～２，调碱ｐＨ７～８，室温放置。

但醇提取液中含有生物碱及其盐，尚含大量脂溶性杂质，且稀醇提取液含水溶性杂质，尚需进一步处理。

１．２酸液渗漉法黄先菊等。

４。

用２％Ｈｃｌ的酸液渗漉法提取莲心碱，简化了工艺，节约了时间，总收率为６％。

用该方法提得的莲心碱收率与醇提法（０．５７％）相当，且减少了醇提时甲醇、乙醉、乙醚等有机试剂对人体的毒性和危险性，更符合工业化生产的要求。

但提取物中杂质较多，需有成熟的柱色谱分离方法配合，方可得到高纯度产品；并且莲子心的粉碎粒度也会影响提取率。

１．３半仿生提取法袁小红等。

５ｏ采用均匀设计法优选半仿生提取工艺以总生物碱含量、干浸膏得率为指标，考察药材的提取时间、溶媒量、ｐＨ值等因素对提取工艺的影响，优选工艺为：莲子心加８倍量水提取３次，煎用水的ｐＨ值分别为５．０，６．ｏ，８．０，煎煮总时间为４ｈ。

验证实验结果接近预测值，说明优选条件可行，也证明了均匀设计法适用于莲子心提取工艺中多因素的优选试验。

并为莲子心的提取提供了理论依据。

１．４离子交换树脂法针对生物碱的性质选用强酸型阳离子交收稿日期：２０１２旬１州；修订日期：２叭１＿０６ＪＤ４基金项目：湖南省教育厅基金研究项目（Ｎｏ．１ｌｃｌ２５６）作者简介：昊梅青（１９７６一），女（汉族），湖南湘乡人，现任湘潭职业技术学院副教授，硕士学位，主要从事药学专业课程教学及科研工作．·２２７８·换树脂，将酸化的生物碱提取液通过树脂，使生物碱盐的阳离子交换到树脂上而与其他成分和杂质分离；经过离子交换后的树脂用氨水碱化得到游离态生物碱；等树脂晾干后根据生物碱的亲脂或亲水性质用相应的溶剂进行提取得到总生物碱。

郭毛娣等。

６ｊ采用强酸型阳离子交换树脂对莲心总碱进行交换吸附。

在上柱之前，用２％Ｈｃｌ溶液渗滤、酸化莲子心粉，使生物碱分子带上正电荷；然后上柱使生物碱盐的阳离子与树脂上的氢离子交换而与其他成分和杂质分离；最后，用１０％氨水碱化得到游离态生物碱，晾干树脂后利用乙醚回流洗脱。

最终得率为１．１％，效果较为理想。

１．５７７分子印迹技术分子印迹技术（ＭＩＴ）是２０世纪末出现的一种高选择性分离技术，通过印迹、聚合、去除印迹分子３步制备分子印迹聚合物（ＭＩＰｓ），以其特定的分离机理而具有极高的选择性，可以作为高度专一的固相萃取材料。

刘韶等。

７ｏ以固定模板分子用量，改变功能单体与交联剂的用量以及温度，考察了不同功能单体、交联剂与模板分子比例合成的ＭＩＰｓ对甲基莲心碱吸附性能的影响，所得聚合物对甲基莲心碱的吸附率能达到９３％。

但对莲心碱、异莲心碱也有一定的吸附，要将三者完全分离，还需要借助硅胶色谱等分离方法辅助解决，或者选择其他的分子印迹材料。

目前ＭＩＴ分离生物碱的技术尚属研究阶段，需要在热力学及动力学性质、ＭＩＰｓ制备、降低成本等方面作进一步探索。

１．６膜分离法膜分离技术（ＭｓＴ）是一项新兴的高效分离技术，分离过程以选择透过性膜作为分离介质，通过在膜两侧施加某种推动力（如压力差、化学位差、电位差等），使原料液中组分选择性通过膜。

以压力差为推动力的膜分离过程包括微滤、超滤、纳滤、反渗透，根据筛分原理使某些组分选择性透过，实现提纯和浓缩。

王晓静等¨。

利用莲心碱与酸反应生成的盐溶于水，而叶绿素是一种脂，根据其不溶于水的性质，先进行了醇提液中叶绿素的分离预处理，而后对比了３种不同材质的微滤膜和一种超滤膜，通过滤料液时的稳定渗透通量、莲心碱回收率和叶绿素截留率的比较，最后选择了改良聚醚砜微滤膜分离莲心碱。

在此基础上等徐燕辉。

９。

采用十字流微滤法对聚醚砜膜分离莲心碱的膜技术进行了改良，并提供了降低膜污染的依据和提高膜过滤速率的措施。

王艳强等¨则将膜分离和吸附联合，应用于莲心碱的分离提纯，成品中有效成分含量从原有工艺的７５％提高到８５％左右，简化生产工艺流程，提高了成品中有效成分含量，有机溶剂使用量降低。

虽然膜技术优势明显，还存在使用过程中膜抗污染能力弱、膜阻力影响因素多、使用寿命短等问题。

１．７大孔树脂分离法大孔树脂是在离子交换树脂基础上，自２０世纪６０年代初开发出的一类新型高聚物吸附剂，其纯化机理是利用大孔树脂的吸附性和分子筛结合的原理，选择性吸附中药提取液中有效成分，去除杂质。

树脂经过洗脱、浸泡、冲洗等过程处理后再生可重复使用。

目前莲心生物碱的分离主要采用大孔树脂法。

张吉祥等…ｏ考察了ＡＫｓ—ｗ、ＡＢ一８和Ｈ２１４树脂对莲万方数据时珍国医国药２０１２年第２３卷第９期心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的静态及动态吸附性能，提取物中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的质量分数分别提高到１０．２％，６．７％和１１．９％，比较研究得出大孔型非极性吸附树脂ＡＫＳ—ｗ对莲子心中有效成分是一种较为理想的分离介质。

柳伟等１１…以洗脱率和吸附量为指标，考察了大孔吸附树脂纯化莲子心总生物碱的吸附性能和洗脱参数，过大孔吸附树脂纯化后，莲子心总生物碱纯度为７０．９８％。

在此基础上张吉祥等¨列还采用双柱联合吸附法，利用阳离子交换树脂Ｄ７２制备出莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的含量分别为ｌｏ．６％，１０．６％和２８．Ｏ％，总含量为４９．２％的莲子心总碱提取物。

利用ＡＫＳ—ｗ大孑Ｌ吸附树脂能去除极性较大的生物碱，而Ｄ７２阳离子交换树脂能去除非生物碱的特点，制备出３种吸附质含量分别为３３．１％，１５．Ｏ％和３４．５％，总含量为８２．６％的莲予心总碱提取物。

采用双柱吸附法工艺简单，适用于巾试及工业生产，为大规模开发莲子心生物碱奠定ｒ良好的基础。

２莲子心生物碱的鉴定方法２．１薄层扫描法薄层色谱法也是一种简便、快速的分析检测方法。

固定相和移动相的选择和变化具有较大的灵活性，能同时分离多种样品。

但该法也存在不足，由于该法是一种操作体系开放的离线测量技术，导致定量鼋复性和再现性的影响因素较多；移动相的运动依赖于毛细作用力，分离能力受到限制。

然而随着现代仪器的发展，这些缺点在一定程度卜．得到了弥补。

宋进闽等”４１对４个不同产地的莲子心中的莲心碱，用薄层扫描方法进行了含量测定。

采用甲醇回流提取，点样于硅胶Ｇ薄层板上，以氯仿一丙酮一二乙胺（６：４：１）为展开剂，展开，在紫外光灯下定位，选用入ｓ为２８０ｎｍ，入Ｒ为３００ｎｍ扫描，测得不同产地莲子心中莲心碱含量（％）分别为：湖北Ｏ．３８、湖南０．１７、福建ｏ．１４、广东０．２５。

胡学明等¨５。

采用薄层扫描法测定福建、江西、湖北产莲子心中甲基连心碱的含量分别为Ｏ．１９％，２．２６％和２．４８％。

２．２高效液相色谱法ＨＰＬｃ法主要考察柱温、固定相、流动相等的影响，选择最佳色谱条件以达到检测分离的较优结果。

该法重现性好、操作简单、回收率也较为理想。

何晓娟等¨札建立ＨＰＩ。

Ｃ测定不同产地莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱。

采用ＰｏｉａｒｉｓＣｌＲ色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５¨ｍ），甲醇一０．１％ｉ乙胺水溶液（６２：３８）为流动相，检测波长为２８２ｎｍ，流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ。

３种生物碱平均回收率为莲心碱９６．９９％，异莲心碱１０４．２６％，甲基莲心碱１００．７１％，ＲＳＤ值分别为ｏ．４７％，０．２ｌ％，Ｏ．１６％。

涂霞等¨¨采用反相ＨＰＬＣ一荧光检测（ｎｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｄｅ—ｔｅｃｔｏｒ，ＦＤ）法测定中药莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱等３种酚性生物碱的含量。

Ｐｈｅｃｄａｃ，。

为色谱柱（５¨ｍ，４．６ｍｍ×２５０ｍｍ），乙腈一Ｏ．０１５ｍｏＬ／Ｌ十二烷基磺酸钠一冰醋酸（５５：４５：１）为流动相，流速为１．Ｏｍｌ·ｍｉｎ～，柱温为３０ｃＣ，ＦＤ的激发波长为２８０ｎｍ，发射波长为３１９ｎｍ，ｕＶＤ的检测波长为２８２ｎｍ。

ＨＰＬｃ—ＦＤ法测定莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱含量方法可靠、结果准确，与ＨＰＬｃ—ｕＶＤ法一样。

但是ＲＰ—ＨＰＬｃ法普通存在色谱峰的展宽拖尾，导致分离效能低，即使是所测生物碱在较低浓度下，仍常产生峰漂移及峰对称性差等现象。

针对此缺陷，潘扬等。

１副采用离子对反相高效液相色谱（ＲＰ—ＰＬｃ）法同时测定莲子心中莲心季铵碱、莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱等四种异喹啉生物碱的含量。

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱为ＨｉｂａｒＴＲ（５¨ｍ，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ），流动相为乙腈一水一冰醋酸（５５：４５：ｌ，每１ｏｏｏｍｌ中加入４ｇ十二烷基磺酸钠），流速为１．２ｍ１·ｍｉｎ‘。

，检测波长为２８２ｎｍ，柱温为３０℃。