临床医学检验技士考试辅导之2019年检验技士精选体验课

精心整理2019年检验技士精选体验课四、血液涂片制备一张良好的血片①厚薄适宜②头体尾明显③细胞分布均匀④血膜边缘整齐⑤并留有一定空隙五、血液细胞染色瑞氏染色法1.染料组成酸性染料伊红（E-）钠盐阴离子碱性染料亚甲蓝（M＋）氯盐阳离子将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中。

甲醇的作用：一是溶解亚甲蓝和伊红；二是固定细胞形态。

4.注意事项（1）血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。

（2）冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。

冲洗时间不能过久，以防脱色。

如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。

（3）染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。

染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

六、方法学评价1.血涂片制备用血量少、操作简单，是应用最广泛的方法。

2.血液细胞染色瑞氏染色法：最经典、最常用。

对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。

吉姆萨染色法：对细胞核、寄生虫（如疟原虫等）着色较好，结构更清晰，但对细胞质成分的着色能力略差。

瑞-吉姆萨复合染色：使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。

瑞氏染料的质量规格用吸光度比值（rA）来评价。

新配制染料rA接近2，降到（1.3±0.1）染料即可使用。

新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是37℃下贮存一定时间，待亚甲蓝逐渐变为天青B，贮存时间愈久，染色效果愈好。

在贮存过程中，必须加塞，以防甲醇挥发和氧化成甲酸。

所用甲醇须为AR级，若其中含过多丙酮，会使染色偏酸，白细胞着色不良。

『答案解析』手指采血操作方便，检查结果比较恒定，世界卫生组织（WHO）推荐采集左手无名指指端内侧血液，婴幼儿可采集大踇趾或足跟内外侧缘血液，严重烧伤患者，可选择皮肤完整处采血。

下列说法错误的是A.采血前要仔细检查针头是否安装牢固B.采血前要仔细检查针筒内是否有空气和水分C.使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤D.抽血时针栓可以外抽和内推E.取下注射器针头，将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中『正确答案』D『答案解析』抽血时只能外抽，不能内推。

A.抽血速度太快B.血液注入容器时未取下针头C.注入抗凝管后剧烈振荡混匀D.注射器干燥E.取血后直接放入4℃冰箱『正确答案』D『答案解析』注射器中有水会导致溶血，干燥不会。

血液标本4℃保存，可使血液分析仪A.红细胞计数结果减低B.红细胞分布宽度增加C.血小板计数结果增加D.血小板计数结果减低E.A.B.C.D.E.A.B.C.D.E.A.是酸性染料亚甲蓝和碱性染料伊红组合的复合染料B.细胞核被染成红色C.新鲜配制的染料可以马上使用D.对细胞的染色原理仅有正负电荷的作用E.是血涂片染色最常用的方法『正确答案』E『答案解析』瑞氏染色法：是最经典、最常用的血涂片染色方法。

对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。

第一节抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。

除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

一、抗原抗体结合力抗原抗体是一种非共价结合，不形成共价键。

1.静电引力（库伦引力）：是因抗原、抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两个电荷间的距离平方成反比。

两个电荷距离越近，静电引力越大。

2.范德华力：这是原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原、抗体两个大分子外层轨道上电子相互作用时，两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。

这种引力的能量小于静电引力。

3.氢键结合力：是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。

其结合力较强于范德华引力。

4.疏水作用：最强。

水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。

等相关。

第二节是pH亲和层析法就是利用这个原理来纯化抗原或抗体。

三、比例性抗原抗体比例合适时，沉淀物形成快而多，称为抗原抗体反应的等价带；若抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成，称为带现象，抗体过量时，称为前带，抗原过量时，称为后带。

四、阶段性抗原抗体反应可分为两个阶段。

第一阶段：抗原与抗体特异性结合阶段，此阶段仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。

第二阶段：可见反应阶段，此阶段需要数分钟至数小时。

反应过程受到反应条件（如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等）的影响。

一、反应物自身因素1.抗体：浓度、特异性、亲和性和等价带的宽窄都影响抗原抗体反应。

应选择高特异性、高亲合力的抗体作为诊断试剂。

但单克隆抗体不适用于沉淀反应。

2.抗原：理化性状、分子量、抗原表位的种类及数目均可影响反应结果。

颗粒性抗原出现凝集反应，可溶性抗原出现沉淀反应，单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。

二、环境因素1.电解质：抗原抗体反应时常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。

2.酸碱度：抗原抗体反应一般在pH6～9之间进行。

3.温度：一般为15～40℃，常用反应温度为37℃，如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体解离，甚至变性或破坏。

4.术等。

A.B.C.D.E.A.B.C.D.E.呈互补关系所决定的。

抗原抗体反应需要合适的温度才有利于二者结合，其范围一般为A.4～10℃B.11～15℃C.16～20℃D.15～40℃E.41～50℃『正确答案』D『答案解析』抗原抗体反应的温度一般为15～40℃，常用反应温度为37℃，如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体解离，甚至变性或破坏。

A.温度B.电解质C.pHD.适当振荡E.隔绝空气『正确答案』E『答案解析』影响抗原抗体反应的因素：①反应物自身因素：抗体、抗原。

②环境因素：电解质、酸碱度、温度、振荡。

不属于抗原抗体反应的是A.PCR技术B.免疫电泳技术C.酶联免疫技术序列10%；DNA营养类型：根据细菌对营养物质需要的不同，将细菌分为两大营养类型。

（1）自营菌：能以简单的无机碳化物、氮化物作为碳源、氮源，合成菌体所需的大分子，其能量来自无机化合物的氧化（化学能），也可通过光合作用而获得（光能），如固氮菌。

（2）异营菌：不能以无机碳化合物作为唯一的碳源，必须利用有机物如糖类、蛋白质、蛋白胨和氨基酸作为碳源和氮源，仅有少数异养菌能利用无机氮化物，合成菌体所需的大分子，其所需的能量大多从有机物质氧化而获得。

细菌的生长繁殖条件2.大多最适pH7.2～7.6（霍乱弧菌嗜碱，结核分枝杆菌嗜酸）。

3.大多嗜温菌，最适温度为37℃。

4.气体：（1）需氧菌：必须有氧（空气）。

（2）微需氧菌：5%左右的低氧环境。

（3）厌氧菌：必须在无氧的环境。

（4）兼性厌氧菌：在有氧和无氧环境中均能生长。

细菌的生长繁殖规律繁殖方式个体：二分裂。

群体：液体培养基或琼脂平板培养。

细菌群体繁殖：生长曲线1234细菌的死亡菌数远远大于活菌数的阶段是A.迟缓期B.对数生长期C.衰亡期D.稳定期E.都不是『答案解析』衰亡期：细菌死亡速率逐步增加，活菌数逐步减少，死亡数大于增加数。

细菌形态和生理活性比较典型的阶段是A.迟缓期B.对数增殖期C.稳定期D.衰亡期E.增殖期『正确答案』B『答案解析』对数生长期细菌代谢活跃而稳定，其大小、形态、染色性和生化反应典型，对外界因素反应敏感，是检测细菌生物学性状和进行药物敏感性试验的适宜阶段。

结核分枝杆菌在适宜条件下分裂一次所需时间为A.20分钟B.2C.5D.10E.18～20h才第五章）低于<1.溶血性贫血的定义和分类（熟练掌握）2.溶血性贫血的实验诊断步骤（熟练掌握）3.溶血性贫血检验的基本方法（各实验的临床意义熟练掌握，其他了解）以下各部分包括的实验几乎要求掌握二、红细胞膜缺陷的检验三、红细胞酶缺陷检验四、珠蛋白合成异常的检验五、免疫性溶血性贫血的检验一、概述（1）是由于某种原因使红细胞存活期缩短，破坏增加，超过了骨髓代偿能力所引起的一类贫血。

（2）分类1）病因学分类，见下表。

2）按溶血发生的部位分类：血管内及血管外溶血。

主要溶血性贫血的病因分类2.溶血性贫血的实验诊断步骤（1）确定有无溶血左：正常尿液与血红蛋白尿；右：含有铁颗粒的肾小管上皮细胞（普鲁士蓝染色）。

<血管外溶血的结果>血红蛋白代谢产物增多1.总胆红素？2.间接胆红素？3.尿胆原排出？4.粪胆原排出？（3）确定溶血的原因不同类型溶血性贫血的实验选择3.溶血性贫血检验的基本方法及应用（1）血浆游离血红蛋白测定（2）血清结合珠蛋白（Hp）测定（3）血浆高铁血红素白蛋白测定（4）血红蛋白尿测定（5）尿含铁血黄素试验各实验的临床意义要求熟练掌握（1）血浆游离血红蛋白测定1）原理：利用血红蛋白具有类过氧化物酶活性的特点，在过氧化氢（H202）参与下，可催化无色的邻联甲苯胺脱氢而显蓝色，根据显色深浅，与同时测定的标准血红蛋白液对照，可测出血浆游离血红蛋白的量。

参考值：＜40mg/L。

2）临床意义：血管内溶血时显着升高；珠蛋白生成障碍性贫血、自身免疫性溶贫时轻度增高；血管外溶血、红细胞膜缺陷性溶贫时不增高。

随尿液排出。

尿中含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体，蓝色的亚铁氰化铁沉淀。

尿沉渣肾小管细胞内外可见直径1～3μm的蓝色颗粒。

结果：阴性。

2）临床意义：慢性血管内溶血时阳性。

二、红细胞膜缺陷的实验诊断（熟练掌握）1.红细胞渗透脆性试验2.酸化血清溶血试验3.蔗糖溶血试验红细胞膜骨架系统对维持红细胞的形状、稳定性和变形性有重要作用。

临床意义：脆性增高见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等；降低见于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。

GPI锚连接蛋白示意图2.酸化血清溶血试验原理：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者体内存在对补体敏感的红细胞。

酸化血清溶血试验，也称Hamtest，即红细胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。

而正常红细胞不被溶解，无溶血现象。

结果：阴性。

临床意义：是PNH的确诊试验。

阳性主要见于PNH，某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。

PNH患者血清溶血，左为正常对照3.蔗糖溶血试验为PNH简易重要的筛查试验。

原理：是根据PNH患者的红细胞，在低离子强度的蔗糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育，补体与红细胞白血病、。