发酵种子扩大培养
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目的：使菌种的传代次数尽可能的少。
发酵工程
第四章 种子扩大培养
孢子培养
母瓶：活化、纯化，使保藏菌种生长，并去处变异株。 所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。
子瓶: 大量繁殖，得到大量孢子。 接种：①从母斜面上点接种，选取生长好的 单菌落 ②接种时密一点，得到大量的孢子。
孢子培养时注意湿度，子斜面使用一般不超过1个月
在发酵产品的放大中，反应级数的确定是非常重要 的一个方面
发酵工程
第四章 种子扩大培养
4.种子罐级数
种子罐级数取决于： ①种子的性质（生长繁殖性能）； ②孢子瓶中孢子的密度（密度大则级数少）； ③孢子发芽及菌丝繁殖速度； ④发酵罐中种子的最低接种量； ⑤种子罐与发酵罐的容积比；
发酵工程
第四章 种子扩大培养
发酵工程
第四章 种子扩大培养
种子扩培的目的 接种量的需要
菌种的驯化 缩短发酵时间、保证生产水平 种子的要求： 总量及浓度能满足要求 生理状况稳定，个体与群体 活力强，移种至发酵后，能够迅速生长 无杂菌污染
发酵工程
第四章 种子扩大培养
It is essential that the culture used to inoculate(接种) a fermentation satisfies the following criteria(标准 ):
谷氨酸：三级发酵 一级种子（摇瓶）→二级种子 （小罐）→发酵
青霉素：三级发酵 一级种子 （小罐）→二级种子（中罐）→发酵
发酵工程
第四章 种子扩大培养
Aeration: 通风, 通气
发酵工程
第四章 种子扩大培养
发酵级数确定的依据
级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响
级数大，难控制、易染菌、易变异，管理困难，一 般2-4级。
发酵工程
第四章 种子扩大培养
2、培养基选择的原则 培养基的选择应该是有利于菌体的生长，对孢子培养基 应该是有利于孢子的生长。 在原料方面，实验室种子培养阶段，规模一般比较小， 因此为了保证培养基的质量，培养基的原料一般都比较 精细。
发酵工程
第四章 种子扩大培养
3、起始接种物的传代问题 细菌 保藏斜面 → 活化斜面 产孢子 保藏 → 母斜面 → 子斜面
发酵工程
第四章 种子扩大培养
Aseptic: 无菌的,无毒的 lyophile 亲液胶体;亲液物
发酵工程
第四章 种子扩大培养
发酵工程
第四章 种子扩大培养
二、实验室阶段 1、培养物选择的原则 目的：种子扩培到一定的量和质，根据菌种的特点最终的 培养物可分为两类：
对于不产孢子和芽胞的微生物 ——获得一定数量和质量的菌体
20% 0.11%
0.025% 0.015%
发酵工程
第四章 种子扩大培养
薯干粉
成分
麦芽汁 薯干粉 (NH4)2SO4 琼脂
斜面 麦汁
2%
种子罐 发酵
10% 22-28% 0.5%
发酵工程
第四章 种子扩大培养
3、发酵级数的确定 一般由菌丝体培养开始计算发酵级数，但有时，
工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数
3.It must be in a suitable morphological(形态学的 ) form. 4.It must be free of contamination. 5.It must retain its product forming capabilities.
发酵工程
对于不产芽孢和孢子的微生物，实验室阶段的种子扩培最 终是获得一定数量和质量的菌体，如谷氨酸的种子培养。
发酵工程
Leabharlann Baidu
第四章 种子扩大培养
对于产孢子的微生物 获得一定数量和质量的孢子 菌丝体培养步骤少，因而更容易获得量和质稳定的种 子，但操作繁琐。 获得一定数量和质量的菌丝体 便于操作，但需要更仔细的控制。
第四章 种子扩大培养 The Development of Inocula for Industrial Fermentation
第一节 种子扩大培养的目的与要求 第二节 种子制备的技术概要 第三节 种子制备实例
发酵工程
第四章 种子扩大培养 第一节 种子扩大培养的目的与要求
种子扩大培养的概念:
种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处 休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或 摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯 种过程。这些纯种培养物称为种子。
在原料方面：不如实验室阶段那么精细，而是基本接近于 发酵培养基，这有两个方面的原因:
一是成本
二是驯化
发酵工程
第四章 种子扩大培养
例：柠檬酸发酵 以蔗糖为原料
成分
麦芽汁 蔗糖 NH4NO3 K2HPO4 MgSO4.H2O KCl 琼脂
斜面 麦汁
2%
种子罐 发酵
2.5-5% 0.225% 0.03% 0.025%
发酵工程
第四章 种子扩大培养
三、生产车间阶段 1、培养物的选择原则 在生产车间阶段，最终一般都是获得一定数量的菌丝体。 菌丝体比孢子要有利： 缩短发酵时间 有利于获得好的发酵结果
发酵工程
第四章 种子扩大培养
2、培养基选择的原则
目的：获得一定数量和质量的菌体，因此培养基的选择应 首先考虑的是有利于孢子的发育和菌体的生长.
第四章 种子扩大培养
第二节 种子制备的技术概要 一、种子制备的过程
实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验
室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因 此形象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。
生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为
发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。
4、接种量的确定 移入种子的体积
接种量＝ ————————— 接种后培养液的体积
1.It must be in a healthy, active state thus minimizing the length of the lag phase in the subsequent fermentation.
2.It must be available in sufficiently large volumes to provide an inoculum of optimum size.
发酵工程
第四章 种子扩大培养
孢子培养
母瓶：活化、纯化，使保藏菌种生长，并去处变异株。 所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。
子瓶: 大量繁殖，得到大量孢子。 接种：①从母斜面上点接种，选取生长好的 单菌落 ②接种时密一点，得到大量的孢子。
孢子培养时注意湿度，子斜面使用一般不超过1个月
在发酵产品的放大中，反应级数的确定是非常重要 的一个方面
发酵工程
第四章 种子扩大培养
4.种子罐级数
种子罐级数取决于： ①种子的性质（生长繁殖性能）； ②孢子瓶中孢子的密度（密度大则级数少）； ③孢子发芽及菌丝繁殖速度； ④发酵罐中种子的最低接种量； ⑤种子罐与发酵罐的容积比；
发酵工程
第四章 种子扩大培养
发酵工程
第四章 种子扩大培养
种子扩培的目的 接种量的需要
菌种的驯化 缩短发酵时间、保证生产水平 种子的要求： 总量及浓度能满足要求 生理状况稳定，个体与群体 活力强，移种至发酵后，能够迅速生长 无杂菌污染
发酵工程
第四章 种子扩大培养
It is essential that the culture used to inoculate(接种) a fermentation satisfies the following criteria(标准 ):
谷氨酸：三级发酵 一级种子（摇瓶）→二级种子 （小罐）→发酵
青霉素：三级发酵 一级种子 （小罐）→二级种子（中罐）→发酵
发酵工程
第四章 种子扩大培养
Aeration: 通风, 通气
发酵工程
第四章 种子扩大培养
发酵级数确定的依据
级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响
级数大，难控制、易染菌、易变异，管理困难，一 般2-4级。
发酵工程
第四章 种子扩大培养
2、培养基选择的原则 培养基的选择应该是有利于菌体的生长，对孢子培养基 应该是有利于孢子的生长。 在原料方面，实验室种子培养阶段，规模一般比较小， 因此为了保证培养基的质量，培养基的原料一般都比较 精细。
发酵工程
第四章 种子扩大培养
3、起始接种物的传代问题 细菌 保藏斜面 → 活化斜面 产孢子 保藏 → 母斜面 → 子斜面
发酵工程
第四章 种子扩大培养
Aseptic: 无菌的,无毒的 lyophile 亲液胶体;亲液物
发酵工程
第四章 种子扩大培养
发酵工程
第四章 种子扩大培养
二、实验室阶段 1、培养物选择的原则 目的：种子扩培到一定的量和质，根据菌种的特点最终的 培养物可分为两类：
对于不产孢子和芽胞的微生物 ——获得一定数量和质量的菌体
20% 0.11%
0.025% 0.015%
发酵工程
第四章 种子扩大培养
薯干粉
成分
麦芽汁 薯干粉 (NH4)2SO4 琼脂
斜面 麦汁
2%
种子罐 发酵
10% 22-28% 0.5%
发酵工程
第四章 种子扩大培养
3、发酵级数的确定 一般由菌丝体培养开始计算发酵级数，但有时，
工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数
3.It must be in a suitable morphological(形态学的 ) form. 4.It must be free of contamination. 5.It must retain its product forming capabilities.
发酵工程
对于不产芽孢和孢子的微生物，实验室阶段的种子扩培最 终是获得一定数量和质量的菌体，如谷氨酸的种子培养。
发酵工程
Leabharlann Baidu
第四章 种子扩大培养
对于产孢子的微生物 获得一定数量和质量的孢子 菌丝体培养步骤少，因而更容易获得量和质稳定的种 子，但操作繁琐。 获得一定数量和质量的菌丝体 便于操作，但需要更仔细的控制。
第四章 种子扩大培养 The Development of Inocula for Industrial Fermentation
第一节 种子扩大培养的目的与要求 第二节 种子制备的技术概要 第三节 种子制备实例
发酵工程
第四章 种子扩大培养 第一节 种子扩大培养的目的与要求
种子扩大培养的概念:
种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处 休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或 摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯 种过程。这些纯种培养物称为种子。
在原料方面：不如实验室阶段那么精细，而是基本接近于 发酵培养基，这有两个方面的原因:
一是成本
二是驯化
发酵工程
第四章 种子扩大培养
例：柠檬酸发酵 以蔗糖为原料
成分
麦芽汁 蔗糖 NH4NO3 K2HPO4 MgSO4.H2O KCl 琼脂
斜面 麦汁
2%
种子罐 发酵
2.5-5% 0.225% 0.03% 0.025%
发酵工程
第四章 种子扩大培养
三、生产车间阶段 1、培养物的选择原则 在生产车间阶段，最终一般都是获得一定数量的菌丝体。 菌丝体比孢子要有利： 缩短发酵时间 有利于获得好的发酵结果
发酵工程
第四章 种子扩大培养
2、培养基选择的原则
目的：获得一定数量和质量的菌体，因此培养基的选择应 首先考虑的是有利于孢子的发育和菌体的生长.
第四章 种子扩大培养
第二节 种子制备的技术概要 一、种子制备的过程
实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验
室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因 此形象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。
生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为
发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。
4、接种量的确定 移入种子的体积
接种量＝ ————————— 接种后培养液的体积
1.It must be in a healthy, active state thus minimizing the length of the lag phase in the subsequent fermentation.
2.It must be available in sufficiently large volumes to provide an inoculum of optimum size.