生物技术基础名词解释
现代生物技术-名词解释

学习好资料欢迎下载1.质粒: 细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子。
能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上。
2.生物防治: 就是利用一种生物对付另外一种生物的方法,大致可以分为以虫治虫、以鸟治虫和以菌治虫三大类。
它是降低杂草和害虫等有害生物种群密度的一种方法。
它利用了生物物种间的相互关系,以一种或一类生物抑制另一种或另一类生物。
它的最大优点是不污染环境,是农药等非生物防治病虫害方法所不能比的。
3.转化: 转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。
4.生物净化: 生物净化是生物类群通过代谢作用使环境中的污染物的数量减少,浓度下降,毒性减轻,直至消失的过程。
5.抗体:机体在抗原物质刺激下,由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
6.亚单位疫苗:一类新型疫苗。
其去除病原体中与激发保护性免疫无关甚或有害的成分,但保留有效免疫原成分。
7.Km: Km值等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度,是酶的特征常数之一。
8.cDNA library: 含一种生物体所有基因编码的cDNA分子的克隆群。
9.monoclonal antibody: 单克隆抗体,高度均质性的特异性抗体,由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。
一般来自杂交瘤细胞。
10.ribozyme: 具有自身催化作用的RNA称为核酶(ribozyme),核酶通常具有特殊的分子结构,如锤头结构。
11.连续发酵: 是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基,同时以相同速度流出培养液,从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。
12.干细胞:具有无限制自我更新能力、同时也可分化成特定组织的细胞,在细胞发育过程中处于较原始阶段。
13.domain:结构域, 生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域14.antibiotics: 抗生素(antibiotics)是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物,能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。
生物技术名词解释

生物技术名词解释
生物技术是指使用生物的基因特性或分子特性来解决科学问题的过程。
生物技术主要分为细胞工程、生物识别技术和生物分析技术。
细胞工程是指一种利用细胞生物学技术,将特定分子、复杂细胞构造或生物产品嵌入到细胞内,用以改变其表型特性或为生产特定产物而施加改变的技术。
例如,可以在植物细胞或微生物细胞中根据自然调控反应网络以及调控基因构建自定义的反应体系,从而改造植物或微生物以产生更多用途的生物产品。
生物识别技术是利用生物分子来识别病毒和细菌的技术。
抗原抗体可用于检测物体是否含有指定的抗原,即免疫反应。
它也可以用来识别细菌、病毒或蛋白质。
此外,生物识别技术还可以用来鉴别有毒物质、药物或其他物质,例如DNA测序可以用来分析和比较基因的结构和组成,用于抗癌药物的研究和器官移植辨识等。
最后,生物分析技术主要是指对生物物质,如蛋白质、多肽、核酸、酶等进行分析,以及利用细胞和基因工程技术分运行物理、化学和其他分析技术,以提取并研究细胞、器官、组织或遗传物质的有效成分的技术。
其中常用的方法有酶联免疫吸附试验、细胞培养、块抽提、显微镜观察等。
以上技术可应用于分子生物学、药物发现以及社会与健康的诸多领域中。
综上所述,生物技术可以非常有效地解决当今科学问题,像细胞工程、生物识别技术和生物分析技术,它们可以用于研究、分析和检测,真正为现代科学技术和社会发展作出贡献。
生物技术名词解释

生物技术名词解释生物技术是一种利用生物体、细胞和分子等方面的知识和技术来开发新型产品、改进现有产品或解决生物问题的科技领域。
下面是一些常见的生物技术名词的解释:1. 基因工程: 基因工程是通过人工改变生物体的基因组,使其产生新的性状或功能。
通过基因工程,可以插入、删除或改变生物体的基因序列。
2. 克隆: 克隆是指利用细胞分裂或基因工程技术复制生物体的过程。
通过克隆技术,可以复制出具有相同基因组的生物体。
3. DNA测序: DNA测序是指确定DNA序列的方法和技术。
它是研究生物基因组和进行基因工程的重要工具。
4. 基因组学: 基因组学是研究生物体基因组的科学。
它包括分析和解读生物体的全部基因组信息,以及研究基因组的结构、功能和演化等方面的内容。
5. 生物传感器: 生物传感器是一种能够将生物体内的生物信号转化为电信号或光信号的装置。
生物传感器主要用于生物识别、环境监测、药物筛选等领域。
6. 重组蛋白: 重组蛋白是通过基因工程技术将人工合成的DNA 插入到微生物或其他细胞中,使其产生重组蛋白。
重组蛋白具有广泛的应用价值,可以用于制药、农业、工业和环境等领域。
7. 转基因: 转基因是指通过基因工程技术将外来基因导入到目标生物体中,使其具有新的性状或功能。
转基因技术在农业、医学和工业等领域有重要的应用。
8. CRISPR-Cas9: CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术,可以精确地修饰细胞或生物体的基因序列。
它可以用于研究基因功能、治疗遗传病和改良农作物等方面。
9. 组织工程: 组织工程是一种利用生物材料和细胞工程技术来构建和修复人体组织和器官的方法。
组织工程主要用于治疗损伤、疾病和器官功能障碍等问题。
10. 人工合成生物: 人工合成生物是通过合成生物学技术构建的具有特定功能的微生物或细胞。
人工合成生物可以用于制药、能源和环境等领域的研究和应用。
这些是生物技术领域中的一些常见名词,它们代表了生物技术的发展方向和应用领域。
生物技术基础名词解释

第一章1、现代生物技术:也称生物工程。
在分子生物学基础上建立的创建新的生物类型或新生物机能的实用技术,是现代生物科学和工程技术相结合的产物。
2、基因重组:gene recombination 造成基因型变化的核酸的交换过程。
3、酶工程:enzyme engineering 酶制剂在工业上的大规模应用,主要由酶的生产、酶的分离纯化、酶的固定化和生物反应器四个部分组成。
4、蛋白质工程:protein engineering 按人们意志改变蛋白质的结构和功能或创造新的蛋白质的过程。
5、快速无性繁殖:7、生物工程:bioengineering应用生命科学及工程学的原理,借助生物体作为反应器或用生物的成分作工具以提供产品来为社会服务的生物技术。
包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等。
8、细胞工程:cell engineering应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上,遵循细胞的遗传和生理活动规律,有目的地制造细胞产品的一门生物技术。
9、发酵工程:是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。
10、转基因工程:转基因工程又叫重组DNA技术,重组是指在体外将分离到的或合成的目的基因(object gene),通过与质粒、病毒等载体(vector)重组连接,然后将其导入不含该基因的受体细胞(host cell),使受体细胞产生新的基因产物或获得新的遗传特性。
11、生物固氮:是指固氮微生物将大气中的氮气还原成氨的过程。
12、人类基因组计划:human genome project于20世纪80年代提出,由美、英、日、中、德、法等国参加并于2001年完成的针对人体23对染色体全部DNA的碱基对(3×109)序列进行排序,对大约25 000基因进行染色体定位,构建人类基因组遗传图谱和物理图谱的国际合作研究计划。
生物技术概论考试复习题解答

现代生物技术概论复习题一、名词解释1、生物技术:也称生物工程,是人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计,改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2、基因组DNA文库:将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后,与载体DNA重组,再全部转化宿主细胞,得到含全部基因组DNA的种群,称为基因组DNA文库。
3、蛋白质工程是指:利用基因工程的手段,在目标蛋白的氨基酸序列上引入突变,从而改变目标蛋白的空间结构,最终达到改善其功能的目的。
4、基因工程:在体外将外源基因进行切割并与一定的载体连接,构成重组DNA分子并导入相应受体细胞,使外源基因在受体细胞中进行复制、表达,使目的基因大量扩增或得到相应基因的表达产物或进行定向改造生物性状。
简单概括,就是将外源目的基因与载体重组后再进入宿主细胞的过程。
5、发酵工程:是发酵原理与工程学的结合,是研究由生物细胞(包括动植物、微生物)参与的工艺过程的原理和科学,是研究利用生物材料生产有用物质,服务于人类的一门综合性科学技术。
6、基因和基因组DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因(gene)。
一个生物体的全部DNA序列称为基因组(genome)5、载体:把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。
6、cDNA文库:即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库,构建的文库不包含内含子。
7、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。
8、重叠基因:一个基因序列中,含有另一基因的部分或全部序列。
9、基因组文库:把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。
10、细胞工程:以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。
生物技术概论复习题及答案

生物技术概论复习题及答案一、名词解释1、生物技术:是指人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理,利用生物得体或其体系或它们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2、基因工程:是指在基因水平上的操作并改变生物遗传特性的技术。
即按照人们的需要,用类似工程设计的方法将不同来源的基因(DNA分子)在体外构建成杂种DNA分子,然后导入受体细胞,并在受体细胞内复制、转录和表达的操作,也称DNA重组技术。
3、细胞工程:是指在细胞为基本单位,在体外条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而达到改良生物品种和创造新品种的目的,加速繁育动植物个体,或获得某种有用物质的技术。
4、食品添加剂:是指为改善食品的品质(色、香、味)以及有防腐和加工工艺的需要而加入到食品中的化学合成物或天然物质。
5、湖泊的富营养化:由于环境的污染,象农业上的化肥、工业废水等大量排放使水中含有大量的营养元素象氮磷钾等非常丰富,使微生物生长迅速,造成富营养化。
6、生物反应器(bioreactor):主要包括微生物反应器、植物细胞培养反应器,动物细胞培养反应器以及新发展起来的有活体生物反应器之称的转基因植物生物反应器,转基因动物生物反应器等。
7、转基因植物:是指通过体外重组DNA技术将外源基因转入到植物细胞或组织,从而获得新遗传特性的再生植物。
8、细胞融合:是指促融因子的作用下,将两个或多个细胞融合为一个细胞的过程。
9、抗原:凡能刺激机体免疫系统发生免疫应答的物质均称为抗原。
10、组织培养:指在无菌和人为控制外因(营养成分、光、温、湿)的条件下,培养研究植物组织、器官,甚至进而从中分化发育出整个植株的技术。
11、原生质体培养:是关于原生质体分离,原生质体纯化、原生质体培养、原生质体胞壁再生,细胞团形成和器官发生,等技术。
12、有益微生物:指对人类有帮助,能满足人们需求的某些微生物。
生物技术概论

一.名词解释。
1.生物技术:有时也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础科学的科学原理,采用先进的科学技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。
生物技术是人们利用微生物、动植物体对物质原料进行加工,以提供产品来为社会服务的技术。
它主要包括发酵技术和现代生物技术。
2.细胞核移植技术:是指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中,产生与供细胞核动物的遗传成份一样的动物的技术。
3.单克隆抗体:高度均质性的特异性抗体,由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。
一般来自杂交瘤细胞。
4.现代发酵:就是将传统发酵技术与现代生物技术(DNA重组、细胞融合等基因工程技术)相结合,并运用现代化学工程技术,进行工业化生产的一个大工业体系。
5.酶:催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。
是生物催化剂,能通过降低反应的活化能加快反应速度,但不改变反应的平衡点。
绝大多数酶的化学本质是蛋白质。
具有催化效率高、专一性强、作用条件温和等特点。
二:简述题。
1.基因工程的四大要素和五大操作元件是什么?四大要素:基因工程,细胞工程,酶工程和发酵工程。
五大操作元件:切,接,转,增,检。
2.植物组织培养技术中主要的消毒灭菌方法有哪些?每种方法主要适应的消毒灭菌对象是什么?(1)干热灭菌法,适用于各种玻璃器皿和器械的灭菌消毒。
(2)湿热灭菌法,可用于大多数液体)、液体培养基、玻璃器皿、各种器械等的灭菌。
(3)过滤灭菌,空气过滤灭菌主要用于形成无菌的操作空间,液体过滤灭菌主要用于对高温、高压不稳定的物质的灭菌。
(4)射线灭菌,用于培养室、接种室、工作台面等的消毒。
(5)灼烧灭菌,用于金属操作器械的消毒。
(6)药剂灭菌,适用于外植体培养材料的表面灭菌。
(7)熏蒸灭菌,适用于培养室和接种室的灭菌。
3.简述发酵工程的一般过程。
菌种的选育,培养基的配置,灭菌,扩大培养和接种,发酵过程,分离提纯。
生物技术概论知识概要

11.动物细胞融合的基本过程:细胞准备 诱导融合 杂种细胞的选择 杂种细胞克隆
12.遗传物质的转移方法:显微注射技术 基因枪技术 电穿孔 磷酸钙共沉淀法
脂质体法 二乙胺乙基葡聚糖技术 反转录病毒感染 原生质体融合法
9.外植体:由活体植物上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。
10.愈伤组织:植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织,由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
11.微繁殖技术:利用组织培养方法将植物体某一部分的组织小块进行培养并诱导分化成大量的小植株,从而达到快速无性繁殖的目的。
(4)杂种细胞克隆:对选择出来的杂种细胞进行选择与纯化,在经过培养获得所需的无性繁殖系。
10.次级代谢产物具有以下特征;
(1) 次级代谢产物是由微生物产生的,不参与微生物的生长和繁殖。
(2)次级代谢产物的生物合成与初级代谢产物合成无关的遗传物质有关。
3) 有利于提高培养基和产物的浓度,以提高单位容积发酵罐的生产能力。
4) 有利于提高产物的合成速度,缩短发酵周期。
5) 尽量减少副产物的形成,便于产物分离纯化。
6) 原料价格低廉,质量稳定,取材容易。
7) 所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响,有利于提高氧的利用率,降低能耗。
8) 有利于产品的分离纯化,并尽可能减少产生“三废”的物质。
6. 发酵生产常用的酵母菌:啤酒酵母、卡尔斯伯酵母、汉逊氏酵母属、假丝酵母属、红酵母属、毕赤氏酵母属。
7.工业常用的霉菌:藻状菌纲的根霉、毛霉、犁头霉。子囊菌纲的红曲霉。半知菌类的曲霉及青霉等。
8.根据营养来划分培养基:天然培养基 合成培养基 综合培养基
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生物技术基础名词解释Revised on November 25, 2020第一章1、现代生物技术:也称生物工程。
在分子生物学基础上建立的创建新的生物类型或新生物机能的实用技术,是现代生物科学和工程技术相结合的产物。
2、基因重组:gene recombination 造成基因型变化的核酸的交换过程。
3、酶工程:enzyme engineering 酶制剂在工业上的大规模应用,主要由酶的生产、酶的分离纯化、酶的固定化和生物反应器四个部分组成。
4、蛋白质工程:protein engineering 按人们意志改变蛋白质的结构和功能或创造新的蛋白质的过程。
5、快速无性繁殖:7、生物工程:bioengineering应用生命科学及工程学的原理,借助生物体作为反应器或用生物的成分作工具以提供产品来为社会服务的生物技术。
包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等。
8、细胞工程:cell engineering应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上,遵循细胞的遗传和生理活动规律,有目的地制造细胞产品的一门生物技术。
9、发酵工程:是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。
10、转基因工程:转基因工程又叫重组DNA技术,重组是指在体外将分离到的或合成的目的基因(object gene),通过与质粒、病毒等载体(vector)重组连接,然后将其导入不含该基因的受体细胞(host cell),使受体细胞产生新的基因产物或获得新的遗传特性。
11、生物固氮:是指固氮微生物将大气中的氮气还原成氨的过程。
12、人类基因组计划:human genome project于20世纪80年代提出,由美、英、日、中、德、法等国参加并于2001年完成的针对人体23对染色体全部DNA的碱基对(3×109)序列进行排序,对大约25 000基因进行染色体定位,构建人类基因组遗传图谱和物理图谱的国际合作研究计划。
13、愈伤组织:callus;calli(复) 原指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。
它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
现多指切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块。
第二章一、名词解释1 、DNA变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程叫DNA的变性。
DNA的变性是DNA二级结构破坏、双螺旋解体的过程。
DNA的变性中以DNA的热变性最常见。
1.增色效应:DNA变性时其溶液0D260增高的现象。
:热变性的DNA是在一个相当窄的温度范围内完成。
在这一范围内。
医学教`育网搜集整理紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA 的解链温度,又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。
其大小与G+C含量成正比。
2、复制子:(replicon)是DNA复制是从一个DNA复制起点开始,最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。
DNA 中发生复制的独立单位称为复制子。
每个复制子使用一次,并且在每个细胞周期中只有一次。
3、启动子:promoter DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域,在许多情况下,还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。
4、内含子:(introns)是真核生物细胞DNA中的间插序列。
这些序列被转录在前体RNA中,经过剪接被去除,最终不存在于成熟RNA分子中。
内含子和外显子的交替排列构成了割裂基因,在前体RNA中的内含子常被称作“间插序列”。
5、限制性内切酶:生物体内可以识别并切割特意的双链DNA序列的一种内切核酸酶,简称限制酶。
它们能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息。
6、酶切位点:DNA上一段碱基的特定序列,限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DNA序列切成两段。
7、PCR:聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方.8、基因克隆载体:在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。
三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。
9、质粒:细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子,能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上。
现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的,常含抗生素抗性基因,是重组DNA技术中重要的工具。
10、Ti质粒:(Ti-plasmid)根瘤农杆菌染色体外的环状双链DNA质粒,能诱导植物产生异常氨基酸和冠瘿碱或二者之一,并诱生冠瘿瘤。
11、噬菌体载体:12、基因芯片:gene chip固定有寡核苷酸、基因组DNA或互补DNA等的生物芯片。
利用这类芯片与标记的生物样品进行杂交,可对样品的基因表达谱生物信息进行快速定性和定量分析。
13、cDNA文库:cDNA library:是以特定的组织或细胞mRNA为模板,逆转录形成的互补DNA(cDNA)与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。
cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中,在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因,因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。
14、转化:(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。
15、转导:(transduction)由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。
它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。
其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。
16、克隆子:摄取外源DNA并令其稳定维持的受体细胞。
17、报告基因:(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。
18、DNA杂交:(DNA hybridization)一种用互补碱基配对的程度,来分析不同生物品种来源的两条或多条DNA链间彼此关系密切程度的实验技术。
19、southern印迹杂交:利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
20、northern印迹杂交:一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。
RNA印迹技术正好与DNA相对应,故被称为Northern印迹杂交,与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。
二、思考题1、基因工程操作流程目的基因或DNA片段的获取、重组DNA分子的构建、重组DNA分子引入受体细胞、目的基因或DNA片段的扩增或表达。
2、原核生物与真核生物基因及转录的区别基因的区别:真核生物基因编码区有内含子与外显子的区别,内含子不能编码蛋白质;原核生物没有内含子。
转录的区别:1)真核生物有由核膜包裹的细胞核,因此,基因的转录和翻译有时间和地点的差别;而原核生物没有细胞核,转录和翻译可以同时同地点进行。
2)真核生物基因有内含子,转录所得的前提mRNA需要经过修饰,除去由内含子转录得到的mRNA序列而得到成熟mRNA;原核生物基因因没有内含子,转录得到的mRNA不需要经过修饰。
3、EcoR1的识别序列,酶切位点EcoR1是从大肠杆菌R菌株中分离出来的第一个限制酶,EcoR表示是从大肠杆菌的R型菌株分离来的,“Ⅰ”表示是从大肠杆菌R菌株中分离出来的第一个限制酶。
EcoR1切割序列,切割位点在G与A之间,形成黏性末端。
4、PCR基本原理PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环,使DNA片段在数量上呈指数增加,从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。
5、MCS连杆衔接头6、PBR322、λ噬菌体载体、cosmid载体、YAC载体的结构、特点、主要用途PBR322质粒:大小为4362bp,含有两个抗药性基因,一个复制起始点和多个用于克隆的限制酶切点。
有7种限制酶的识别位点位于四环素抗性基因内部,,两种限制酶识别位点位于该基因启动区内,3种限制酶识别位点位于氨苄青霉素抗性基因内。
λ噬菌体载体:λ噬菌体的基因组长达50 Kb,共61个基因,其中38个较为重要。
可分为裂解周期和溶原周期。
细菌处于溶原化状态时,细胞质中有一些λ CI基因的产物CI蛋白,这是一种阻遏蛋白,可以阻止λ左、右两个早期起动子的转录,使之不能产生一些复制及细胞裂解的蛋白。
λ的DNA随着宿主的染色体复制而复制。
但在UV诱导下Rec蛋白可降解CI蛋白诱导90%的细胞裂解。
有时λ也可自发地从宿主的染色体上游离出来,进行复制,最终导致宿主细胞的裂解,此称为治愈(curing)。
游离在细胞质中的λ可以进行滚环复制,产生多个拷贝,并合成头部和尾部蛋白,包装成完整的λ噬菌体,使细胞裂解,释放出λ噬菌体再感染新的细胞。
因为λ噬菌体的DNA也有整合在染色体上和游离于细胞质中两种状态,所以也称做附加体。
但和F因子不同,λ噬菌体有细胞外形式,而F因子无细胞外形式。
cosmid载体:cosmid 是英文 cos site-carrying plasmid 的缩写, 也称粘粒、柯斯载体。
本意是带有粘性末端位点的质粒, 因此, 柯斯质粒是人工建造的的含有λDNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。
这是一类用于克隆大片段DNA的载体,它是由λ噬菌体的cos(cohesive)末端及质粒(plasmid)重组而成的载体。
cosmid载体带有质粒的复制起点、克隆位点、选择性标记以及λ噬菌体用于包装的cos末端等,因此该载体在体外重组后,可利用噬菌体体外包装的特性进行体外包装,利用噬菌体感染的方式将重组DNA导入受体细胞。