酵母细胞的固定化讲课
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酵母细胞固定化PPT课件
酵母细胞的数目少
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实验探究二： 注射器滴加的速度对固定化细胞质量的影响
滴加速度过快，凝胶珠不呈圆形或椭圆形， 而呈拖尾状或面条状
实验探究三： 注射器滴加时与CaCl2液面的距离对固定化
细胞质量的影响
滴加时离液面过低，凝胶珠也会呈拖尾状
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实验评价：
（一）观察凝胶珠的颜色和形状
①如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海 藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少； ②如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明 海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。
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2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2 溶液 （1） 过程：
称取无水CaCl2 0.83g，放入200ml的烧杯中， 加入150ml的蒸馏水，使其充分溶解，待用。
（2）注意事项： 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防自来
水中各种离子影响实验结果
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3、配制海藻酸钠溶液
（1）过程：称取海藻酸钠，放入
50ml小烧杯中，加入10ml水，用 酒精灯加热，边加热边搅拌，将海 藻酸钠调成糊状，直至完全溶化， 用蒸馏水定容至10ml。
（2）注意事项 加热时要用小火，或者间断加热反复几次，直到
海藻酸钠溶化为止
如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。
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4、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合
（1）过程：将溶化好的海藻酸钠
溶液冷却至室温，加入以活化的酵 母细胞，进行充分搅拌，再转移至 注射器中。
（2）注意事项
①溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，否则会因 温度过高杀死酵母菌。
②搅拌要彻底充分，使两者混合均匀，以免影响实验 结果的观察
酵母细胞的固定化(上课用)
酵母细胞的固定化(上课用)
二、固定化细胞技术 阅读P50内容，思考以下问题： 1、什么是固定化酶或细胞技术？ 2、细胞（或酶）固定化的常用方法有哪些？ 3、酶和细胞固定方法的选择及原因？ 4、固定化细胞常用的不溶于水的多孔性载 体有哪些？
酵母细胞的固定化(上课用)
二、固定化细胞技术 1、什么是固定化酶或细胞技术？
问题：中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反 应才能完成的.
化固细定胞设：想：酶 固是 定细 ？胞优合酵点母成细：胞的的固，定成化能(本上否课低用将) ，合操成作酶更的容细易胞. 直接.
一、固定化酶的应用实例 阅读P49-50，并思考：
1、解决酶应用中存在问题的方法是什么？ 2、这种方法的优点是什么？ 3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 4、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什 么？这种酶有何特点？ 5、了解高果糖浆生产过程。
酵母细胞的固定化(上课用)
一、固定化酶的应用实例 1、解决酶应用中存在问题的方法是什么？
固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内 的技术（如固定在不溶于水的载体上）。
2、这种方法的优点是什么？
（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；
（2）固定在载体上的酶可以被反复利用。
3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？
（一）制备固定化酵母细胞 阅读P50～51思考下列问题：
（1）制备过程包括哪几个步骤？ （2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？ （3）各步骤应当分别注意什么问题？
酵母细胞的固定化(上课用)
（一）制备固定化酵母细胞 1、酵母细胞的活化 思考： 关于酵母菌你有哪些知识？
什么是活化？其本质是什么？ 活化的方法是什么？具体操作过程？ 操作过程中应注意什么？
于是，有人设想，将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既 能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上 的酶还可以被反复利用。现代的固定化酶技术已完全实现 了这一设想。高果糖浆的生产就是固定化酶技术成功地应 用于工业生产的实例。 酶是由细胞合成的，于是，又有人设想，能否将合成酶的 细胞直接固定？自20世纪70年代，在固定化酶技术的基础 上，又发展出了细胞固定化技术。与固定化酶技术相比， 固定化细胞制备的成本酵更母细低胞的，固定操化(上作课用更) 容易。本课题中，我 们将动手制备固定化酵母细胞，体会固定化酶的作用。
二、固定化细胞技术 阅读P50内容，思考以下问题： 1、什么是固定化酶或细胞技术？ 2、细胞（或酶）固定化的常用方法有哪些？ 3、酶和细胞固定方法的选择及原因？ 4、固定化细胞常用的不溶于水的多孔性载 体有哪些？
酵母细胞的固定化(上课用)
二、固定化细胞技术 1、什么是固定化酶或细胞技术？
问题：中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反 应才能完成的.
化固细定胞设：想：酶 固是 定细 ？胞优合酵点母成细：胞的的固，定成化能(本上否课低用将) ，合操成作酶更的容细易胞. 直接.
一、固定化酶的应用实例 阅读P49-50，并思考：
1、解决酶应用中存在问题的方法是什么？ 2、这种方法的优点是什么？ 3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 4、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什 么？这种酶有何特点？ 5、了解高果糖浆生产过程。
酵母细胞的固定化(上课用)
一、固定化酶的应用实例 1、解决酶应用中存在问题的方法是什么？
固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内 的技术（如固定在不溶于水的载体上）。
2、这种方法的优点是什么？
（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；
（2）固定在载体上的酶可以被反复利用。
3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？
（一）制备固定化酵母细胞 阅读P50～51思考下列问题：
（1）制备过程包括哪几个步骤？ （2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？ （3）各步骤应当分别注意什么问题？
酵母细胞的固定化(上课用)
（一）制备固定化酵母细胞 1、酵母细胞的活化 思考： 关于酵母菌你有哪些知识？
什么是活化？其本质是什么？ 活化的方法是什么？具体操作过程？ 操作过程中应注意什么？
于是，有人设想，将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既 能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上 的酶还可以被反复利用。现代的固定化酶技术已完全实现 了这一设想。高果糖浆的生产就是固定化酶技术成功地应 用于工业生产的实例。 酶是由细胞合成的，于是，又有人设想，能否将合成酶的 细胞直接固定？自20世纪70年代，在固定化酶技术的基础 上，又发展出了细胞固定化技术。与固定化酶技术相比， 固定化细胞制备的成本酵更母细低胞的，固定操化(上作课用更) 容易。本课题中，我 们将动手制备固定化酵母细胞，体会固定化酶的作用。
酵母细胞的固定化上课用ppt课件
酵母细胞的固定化
2019/12/30
如今，酶已经大规模地应用于食品、化工、轻纺、医药等 各个领域。在应用酶的过程中，人们发现了一些实际问题： 酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感， 容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高 了生产成本；反应后酶会混中产物中，可能影响产品质量。
注意事项： 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防 自来水中各种离子影响实验结果。
2019/12/30
3、配制海藻酸钠溶液
操作过程：
称取0.7g海藻酸钠，放入 50mL小烧杯中。加人10mL蒸 馏水，用酒精灯加热，边加 热边搅拌，将海藻酸钠调成 糊状，直至完全溶化，用蒸 馏水定容至10mL。 注意事项： 加热时要用小火，或者间断加热，反复几 次，直到海藻酸钠溶化为止。
通过课题背景分析，你有何体会？ 酶：优点： 催化效率高，低耗能，低污染
实际 ①对强酸、强碱、、高温等环境条件敏感，易失活； 问题：②溶液中的酶很难收回，不能被再次利用，提高
了生产成本；
③反应后酶混在产物中，如不去除，会影响产品的品质.
设想：将酶固定在不溶于水的载体上. 固化定 酶：优实点际：酶 同 一既时 种能， 酶与还 只反可能应以催物反化接复一触利种，用化又学. 容反易应与，反而应在物生分产离实，践
固定化细胞技术 2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？
固定化细胞固定的是一系列酶 3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶 反应，应该选择哪种方法？
固定化细胞技术
4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪 种方法？ 固定化酶技术 （大2019分/12/30子物质不能进入细胞）
（一）制备固定化酵母细胞 阅读P50～51思考下列问题：
问题：中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反 应才能完成的.
2019/12/30
如今，酶已经大规模地应用于食品、化工、轻纺、医药等 各个领域。在应用酶的过程中，人们发现了一些实际问题： 酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感， 容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高 了生产成本；反应后酶会混中产物中，可能影响产品质量。
注意事项： 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防 自来水中各种离子影响实验结果。
2019/12/30
3、配制海藻酸钠溶液
操作过程：
称取0.7g海藻酸钠，放入 50mL小烧杯中。加人10mL蒸 馏水，用酒精灯加热，边加 热边搅拌，将海藻酸钠调成 糊状，直至完全溶化，用蒸 馏水定容至10mL。 注意事项： 加热时要用小火，或者间断加热，反复几 次，直到海藻酸钠溶化为止。
通过课题背景分析，你有何体会？ 酶：优点： 催化效率高，低耗能，低污染
实际 ①对强酸、强碱、、高温等环境条件敏感，易失活； 问题：②溶液中的酶很难收回，不能被再次利用，提高
了生产成本；
③反应后酶混在产物中，如不去除，会影响产品的品质.
设想：将酶固定在不溶于水的载体上. 固化定 酶：优实点际：酶 同 一既时 种能， 酶与还 只反可能应以催物反化接复一触利种，用化又学. 容反易应与，反而应在物生分产离实，践
固定化细胞技术 2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？
固定化细胞固定的是一系列酶 3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶 反应，应该选择哪种方法？
固定化细胞技术
4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪 种方法？ 固定化酶技术 （大2019分/12/30子物质不能进入细胞）
（一）制备固定化酵母细胞 阅读P50～51思考下列问题：
问题：中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反 应才能完成的.
酵母细胞的固定化(公开课)
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一、基础知识
（一）固定化酶的 应用实例
总结：固定化酶技术的
优点：
•使酶既能与反应物接触， 又能与产物分离；
•固定在载体上的酶可以
被反复利用。
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在生产实际中使用固定化酶 技术有无不足?如有不足,怎么办?
有。一种酶只能催化一种化学
反应，而在生产实际中很多产
物的形成都通过一系列的酶促
反应才能进行，所以操作比较
麻烦。
可采用固定化细胞技术。
.
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（包埋二法）是指固将定微生化物酶的细技胞术均和匀包固埋定在不化溶细于水胞的技多术孔性
载体中
化概学结念合：法利是指用将物酶分理子或或细化胞学相方互结法合将或将酶其或结合 到细载体胞上固定在一定空间的技术。
物理吸附法是指将酶吸附到包固体埋吸法附剂的表固或适 固面定者用 定化固于 化酶定细化胞细
3、反应后会混在产物中，可
能 影响产品质量
。
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3
如果你是工程技术人 员，领导要你解决这个 问题，你怎么办？
固定化酶技术
.
4
一、基础知识 （一）、固定化酶的应用实例
阅读P49独立思考3分钟后小组合作讨论： 1、解决酶应用中存在问题的方法是？ 2、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？ 这种酶有何特点？ 4、介绍一下反应柱及其优点 5、了解高果糖浆生产过程。 6、这种方法的优点是什么？
（浓度要适宜？）
验效果。
• 注意事项：
加热时要用小火， 或者间断加热（目的？）
.
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二、实验操作——酵母细胞的固定化
（1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液： （3）配制海藻酸钠溶液：
酵母细胞的固定化ppt课件
将酶（或细胞）包埋在细微网 格里
将酶（或细胞）相互结合， 或将其结合到载体上。
将酶（或细胞）吸附在载体表 面上
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【比较】酶和细胞的固定方法和特点
酶分子很小， 容易从包埋材料中漏 出。
细胞体积大， 难以被吸附或结合。
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〖思考1〗对固定酶的作用影响较小的固定方 法是什么？
吸附法。 〖思考2〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发 酵过程变为连续的酶反应，应当固定（酶、 细胞）。
（5）固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加CaCl2 溶液中，将形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡 30min左右。 〖思考〗 CaCl2溶液有什么作用？ 使胶体聚沉，形成结构稳定的凝胶珠。刚形成的凝 胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳 定的结构。
滴加注射器中的溶液时，速度一定要恒定且缓慢， 以便形成的凝胶珠呈均匀的圆形或椭圆形。
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三、实验操作：包埋法固定细胞 1、包埋法固定细胞： 即将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性 载体中。 2、包埋时常用的载体包括：
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯 酰胺等。
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海藻酸钠： 一种天然多糖，是由海带中提取的天然多糖碳水化合 物，可作为食用的食品添加剂，也可作为支架材料用 于医学用途，其温和的溶胶凝胶过程、良好的生物相 容性使其适于作为释放或包埋药物。
这些问题？
催化效率高、低耗能、低污染，大规模地应用于食
品、化工等各个领域
（2）缺点
①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶 剂等条件非常敏感，容易失活
②溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高 了生产成本
③反应后，酶会混在产物中，影响产品质量， 难以在工业生产中广泛应用
酵母细胞的固定化公开课课件
3、固定化细胞对酶的活性影响最小， 根本原因是( )。 D
A．避免了细胞破碎、酶的提取纯化 过程 B．固定化细胞在多种酶促反应中连 续发挥作用 C．促化反应结束后，能被吸收和重复 利用 D．细胞结构保证了各种酶在细胞内 化学反应中有效的发挥作用
第28页，此课件共30页哦
直接使用酶
固定化酶
酶的种类
过低，———————— • 4、固定化酶固定的是——种酶，固定化细
胞固定的是——酶
第25页，此课件共错误的 是（ B ） A、取干酵母，加入蒸馏水，使其活化 B、配制海藻酸钠时，加热用大火，直到 海藻酸钠溶化为止 C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加
二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果 凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠 是成功的。
第22页，此课件共30页哦
三、实验操作 — 用固定化酵母进行发酵
〖思考〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。
〖思考〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 酵母菌进行无氧呼吸产生的。
〖思考〗在利用固定化酶或固定化细胞进行工业生产 的过程中，需要无菌操作吗？
（浓度要适宜？）
• 注意事项：
加热时要用小火， 或者间断加热（目的？）
第18页，此课件共30页哦
二、实验操作——酵母细胞的固定化
（1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液： （3）配制海藻酸钠溶液：
（4）海藻酸钠溶液与 酵母细胞的混合：
必须将溶化的海藻酸钠溶 液冷却至室温才能与酵母 细胞进行混合。 为什么？搅拌的目的？
---观察凝胶珠的颜色和形状
➢若凝胶珠颜色过浅，说明
（5）固定化酵母细胞：
海藻酸钠的浓度偏低，固定 的酵母细胞数目较少
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（二）用固定化酵母细胞发酵
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（一）制备固定化酵母细胞 1、酵母细胞的活化 干酵母， 的小烧杯中， 取1g干酵母，放入 干酵母 放入50 ml的小烧杯中，加入蒸馏水 的小烧杯中 加入蒸馏水10 ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放 ，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状， 左右使其活化 置1h左右使其活化。 左右使其活化。 问：什么是活化？怎样活化？应注意什么？ 什么是活化？怎样活化？应注意什么？ 活化： 活化：就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活 状态 注意事项 选用的干酵母要具有较强的活性， A、选用的干酵母要具有较强的活性，而且物种单一 在缺水状态下，微生物处于休眠状态。 B、在缺水状态下，微生物处于休眠状态。注意水的用量 酵母细胞活化时体积会变大， C、酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体 429572439gao 积足够大的容器
4295724Leabharlann 9gao（二）固定化细胞技术
1、概念：固定化酶和固定化细胞是利用物理或化 概念：固定化酶和固定化细胞是利用物理或化 方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 一定空间内的技术 学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 2、常用方法：包括包埋法、化学结合法和物理吸 常用方法：包括包埋法、化学结合法和 包埋法 附法。 附法。
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（二）用固定化酵母细胞发酵 ①将固定化酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2 将固定化酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2 －3次，洗去凝胶珠表面多余的电解质溶液 150ml质量分数为10％ 质量分数为10 ②将150ml质量分数为10％的葡萄糖溶液转移 200ml的锥形瓶中 的锥形瓶中， 至200ml的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细 置于25 25° 下发酵24h 胞，置于25°C下发酵24h
429572439gao
3、酶和细胞固定方法的选择
酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 细胞适合采用包埋法固定， 细胞适合采用包埋法固定，即将微生物细胞均匀
的包埋在不溶于水的多孔性载体上
固定化细胞常用的载体
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯 酰胺等
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海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。 海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如 涉及到固定化细胞的质量 果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如 果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠； 果浓度过低， 果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞 的数目少，影响实验效果。 的数目少，影响实验效果。
课题3 课题3
酵母细胞的固定化
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课题背景
酶制剂的优点： 酶制剂的优点：
催化效率高、低耗能、低污染， 催化效率高、低耗能、低污染， 大规模地应用于食品、 大规模地应用于食品、化工等各个 领域。 领域。
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酶制剂存在的缺陷： 酶制剂存在的缺陷：
通常对强酸 强碱、 强酸、 1、通常对强酸、强碱、高温和有 机溶剂等条件非常敏感 容易失活； 等条件非常敏感， 机溶剂等条件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被 溶液中的酶很难回收， 再次利用，提高了生产成本； 再次利用，提高了生产成本； 反应后会混在产物中， 3、反应后会混在产物中，可能影 响产品质量。 响产品质量。
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刚形成的凝胶珠应在CaCl 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一 段时间，以便形成稳定的结构。 段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶 珠的质量是否合格，可以使用下列方法： 珠的质量是否合格，可以使用下列方法： 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上 用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂， 用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有 液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠 在实验桌上用力摔打凝胶珠， 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝 胶珠很容易弹起， 胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠 是成功的
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注意事项 ①控制好发酵温度，一般是室温25 °C 控制好发酵温度，一般是室温25 发酵时间可视具体情况而定， ②发酵时间可视具体情况而定，一般时间稍 长一些， 长一些，效果明显 可用不含酵母的凝胶珠做相同的处理， ③可用不含酵母的凝胶珠做相同的处理，对 照实验结果
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如果你是工程技术人员， 如果你是工程技术人员，你如 何解决这个问题？ 何解决这个问题？
固定化酶技术
即将酶固定在一定空间内的技术 如固定在不溶于水的载体上）。 （如固定在不溶于水的载体上）。
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基础知识
（一） 固定化酶的应用实例 ——生产高果糖浆 生产高果糖浆
高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。 高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替 42%左右的糖浆 代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、 代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、 龋齿和心血管病，对人的健康更有益。 龋齿和心血管病，对人的健康更有益。
1、高果糖浆的生产原理： 、高果糖浆的生产原理： 葡萄糖异构酶 葡萄糖
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实验设计 （一）制备固定化酵母细胞
1．酵母细胞的活化 酵母细胞的活化 配制物质的量浓度为 物质的量浓度为0 mol／ 2．配制物质的量浓度为0.05 mol／L的CaCl2溶液 3．配制海藻酸钠溶液 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 4．海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 固定化酵母细胞 5．固定化酵母细胞
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3、高果糖浆的生产操作： 、高果糖浆的生产操作： 从反应柱上端注入葡萄糖溶液， 从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从下端 流出果糖溶液，一个反应柱可连续使用半年。 流出果糖溶液，一个反应柱可连续使用半年。 4、固定化酶技术的优点： 固定化酶技术的优点：
酶既能与反应物接触， 酶既能与反应物接触，又容易与产物分 提高产品质量； 离，提高产品质量；同时固定在载体上 的酶还可以反复利用，节约成本。 的酶还可以反复利用，节约成本。
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〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨 思考〗 酸的发酵过程变为连续的酶反应， 酸的发酵过程变为连续的酶反应，应 当固定（ 当固定（酶、细胞）；若将蛋白质变 细胞）；若将蛋白质变 ）； 成氨基酸，应当固定（ 成氨基酸，应当固定（酶、细胞）。 细胞）。
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〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨 思考〗 酸的发酵过程变为连续的酶反应， 酸的发酵过程变为连续的酶反应，应 当固定（ 当固定（酶、细胞）；若将蛋白质变 细胞）；若将蛋白质变 ）； 成氨基酸，应当固定（ 成氨基酸，应当固定（酶、细胞）。 细胞）。
三、操作提示
海藻酸钠在水中溶解的速度较慢， 海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要通 过加热促进其溶解。溶解海藻酸钠， 过加热促进其溶解。溶解海藻酸钠，最好采用 小火间断加热的方法。例如，加热几分钟后， 小火间断加热的方法。例如，加热几分钟后， 从石棉网上取下烧杯冷却片刻，并不断搅拌， 从石棉网上取下烧杯冷却片刻，并不断搅拌， 再将烧杯放回石棉网继续加热，如此重复数次， 再将烧杯放回石棉网继续加热，如此重复数次， 直至海藻酸钠完全溶化。如果加热太快， 直至海藻酸钠完全溶化。如果加热太快，海藻 酸钠会发生焦糊。 酸钠会发生焦糊。
2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的C aCl2溶液 配制物质的量浓度为0.05mol/L 0.05mol/L的 称取无水CaCl2 0.83g。放人 的烧杯中， 称取无水 。放人200mL的烧杯中，加入 的烧杯中 150mL的蒸馏水，使其充分溶解，待用。 的蒸馏水， 的蒸馏水 使其充分溶解，待用。 注意事项 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防自来水中各种离 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解， 溶解 子影响实验结果
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4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷 将溶化好的海藻酸钠溶液冷 至室温，加人已活化的酵母细 却至室温，加人已活化的酵母细 进行充分搅拌 搅拌， 胞，进行充分搅拌，使其混台均 匀，再转移至注射器中 注意事项 溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温 冷却至室温， A、溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，否则会因温 度过高杀死酵母菌 搅拌要彻底充分，使两者混合均匀， B、搅拌要彻底充分，使两者混合均匀，以免影响实验结 果的观察
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果糖
葡萄糖异构酶的优点:稳定性好、 葡萄糖异构酶的优点 稳定性好、可以持续发挥作用
.2、固定化酶的反应柱示意图
使用固定化酶技术， 使用固定化酶技术， 将葡萄糖异构酶固定 在一种颗粒状的载体 上，再将这种酶颗粒 装在一个反应柱内， 装在一个反应柱内， 柱子底端装有分布着 许多小孔的筛板。 许多小孔的筛板。酶 颗粒无法通过筛板上 的小孔， 的小孔，而反应溶液 却可以自由出入。 却可以自由出入。
酶的几种固定方式 将酶包埋在细微网格里 包埋法 将酶相互连接起来 化学结合法 将酶吸附在载体表面上 物理吸附法
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课堂讨论： 课堂讨论： 1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化 ．从操作角度来考虑， 细胞技术哪一种方法更容易？ 细胞技术哪一种方法更容易？哪一种方法对酶活性的影 响更小？ 响更小？ 固定化细胞技术 2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？ ．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？ 固定化细胞固定的是一系列酶 3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应 ．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应， 该选择哪种方法？ 该选择哪种方法？ 固定化细胞技术 4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？ ．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？ 固定化酶技术