猪附红细胞体病BALB／c小鼠模型的建立

合集下载

猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及相关指标检测

ｅｅｔｏｃｓｏｅｄｔｃｉｎＴｅｈｍａｏｏｙｂｏｈｍｉａｄｃｔｒａｄｅｙｈｃｔｌｃｒｎｍｉｒｃｐｅｅｔ．ｏｏｈｅｔｌｇｉｃｅｃｉｉａｏｎｒｔｒｙｅｉｌｎｏｍｍｕｅａｈｒｎｅｆｎｔｎｗｅｅｅａｕｔｄａｔｒｉ一ｎｄｅｅｃｕｃｏｒｖａｅｆｎｉｌｅ￣ｃｏ，ＴｅｍｏｓｄｌｉｓｃｅｓｕｌｓａｌｈｄＲＢｉｔｎｈｕｅｍｏｅｓｕｃｓｆｌｅｔｂｓｅ．Ｃ，Ｈｂｙｉ，ＨＣＶａｅｄｃａｅｎｅｐｒｍｅｔｌｇｕ．Ｔｅｅｙｈｏｙｅｉｔｅｒｓｄｉｘｅｅｉｎａｒｐｈｒｔｒｃｔｍｍｕｅａ－ｏｎｄｈｒｎｅｆｎｔｎｏｃｎｅｐｒｍｅｔｌｒｕｓａｓｅｒａｅ．ｅｃｕｃｏｆｅｉｍｉｅｉｘｅｉｎａｏｐｉｏｄｃｓｄｇｌｅ
常规指标变化，红细胞免疫黏附功能和脾淋巴细胞转化功能变化，发现试验组小鼠红细胞总数减少，红蛋白含量降低，血红细胞比
容降低，红细胞免疫黏附功能下降，其他指标没有显著变化。
关键词：猪附红细胞体；型；液学变化；模血红细胞免疫
中图分类号：８８８￥２．２文献标识码：Ａ
ＥｓａｌｈｅｔｏｉｅＭｏｅｔｔｂｉｍｎｆＭｃｓｄｌｗｉｈＥｐｅｙｈｏｏｎｓｉｎｅａｏｏｙＣｈｎｅｒｔｒｚｏｕｓａｄＨｍｔｌｇａｇｓ

BALB／c裸小鼠人宫颈癌模型的建立

ＥｓａｉｈｍｅｔｏｔｂｌｓｎｆＡｎｉａｏｅｆＨｕｍａｒｉａｎｅｎＢＡＬＢ／ｍｌＭｄｌｏｎＣｅｖｃｌＣａｃｒｉｃ
ＮｕｅＭｉｅｂｍｏｓｕｅＸｅｏｒｆｄｃｙＴｕｒＴｉｓｎｇａｔ
【摘要】目的
采用在裸鼠腹部皮下移植人原代宫颈癌组织的方法，研究其在裸鼠体内的成瘤性，初步探讨此动物模型腹部并
将人宫颈癌组织接种于裸鼠腹部皮下建立人宫颈癌裸鼠模型，察荷瘤鼠成瘤、般特性和移植瘤观一接种后第４２天在接种部位可见结节，８后肿瘤块平均表面积为（００±５１第０天５．．）
ＢＡＬＢ／ｃｎｄｃｎｎｅｔｇｔｈｅｒｔｆｔｕｅｍｉｅａｄｉｖｓｉａｅｔａｅｏｕｍｏ —ｏｒｉｇａｄｔｅｂｏｏｉａｅｔｒｓｏｈｕｒＭｅｈｏＨｕｎｃｒｉａａｃｒｒｆｔ ‘ ｎｈｉｌｇｃｌｆａｕｅｆｔｅｔｍｏ．ｕｎｔｄｓｍａｅｃｌｃｎｅｖｔｓｕｅｉｅｒｍｓｒｉａｓｃｍｅｓｗｅｅｒｎｐｌｎｅｉｔｈｓｂｕｉｏｕｍｉｅ．Ｔｈａｅｆｔｍｏｔａｓａｔｔｏｉｓｅｄｒｖｄｆｏｕｇｃｌｐｅｉｎｒｔａｓａｔｄｎｏｔｅｕｃｔｓｆｎｄｅｃｅｒｔｏｕｒｒｎｐｌｎａｉｎ，ｇｎｔｃｅｅｉｃｒｃｅｉｔｃ，ｔｍｏｒｗｔｆｂａｉｇｃｎｃｒｍｉｅｗｅｅｏｅｖｄｅｅｙｄｙ．Ｏｎｄｙ８ｔｕｒｂａｉｇｍｉｅｗｅｅｋｉｅｎｕｒｈａａｔｒｓｉｕｒｇｏｈｏｅｒｎａｅｃｒｂｓｒｅｖｒａａ５ｈｅｔｍｏ — ｅｒｎｃｒｌｄａｄｔｍｏｌｍａｓｓｗｅｅｏｌｃｅｏｎｌｓｓｆｈｉｔｌｇｃｌｆａｕｅ．ＧｅｏｃｓｅｒｃｌｔｄｆｒａａｙｉｏｓｏｏｉａｅｔｒｓｅｎｍｉＤＮＡｏｕｍｏｉｓｅ，ｐｒｐｒｌｏｄ，ｌｅ，ｓｅｎ，ｋｄｎｙ，ｆｔｒｔｓｕｅｉｈｅａｂｌｏｉｒｐｌｅｖｉｅ

抗猪附红细胞体药物体内筛选模型的建立与应用

抗猪附红细胞体药物体内筛选模型的建立与应用李辉;刘聚祥;刘静;王建平;李宏娟;许亚改【摘要】为实现抗猪附红细胞体药物的高通量筛选,拟建立小鼠最优感染模型及应用其进行药物敏感性研究.采用三因素三水平的正交试验法,通过对感染率、菌血症峰期及临床症状考察,确定最佳感染方法、感染途径和接种剂量.而后应用感染模型对土霉素、四环素、贝尼尔、青蒿素、咪唑苯脲等10种抗生素和抗原虫药进行药物敏感性测试.方差分析结果显示,以0.1 mL剂量尾静脉接种猪EH提纯液,能够使处于免疫抑制状态的昆明小鼠在3 d时达到菌血症峰期.药物敏感性测试反映贝尼尔、咪唑苯脲和青蒿素对猪附红细胞体作用最强.因此,用此模型可进行体内抗猪附红细胞体药物的高通量筛选.【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2010(025)00z【总页数】5页(P290-294)【关键词】猪附红细胞体;小鼠模型;药物筛选;药效评价【作者】李辉;刘聚祥;刘静;王建平;李宏娟;许亚改【作者单位】河北农业大学,动物科技学院,河北,保定,071001;河北农业大学,动物科技学院,河北,保定,071001;河北农业大学,动物科技学院,河北,保定,071001;河北农业大学,动物科技学院,河北,保定,071001;秦皇岛市畜牧产业发展协会,河北,秦皇岛,066300;河北农业大学,动物科技学院,河北,保定,071001【正文语种】中文【中图分类】S852.62附红细胞体病(Eperythrozoonosis)是由专性血液寄生的附红细胞体(Eperythrozoon，EH)寄生于红细胞表面、血浆及骨髓中而引起的以溶血性贫血、发热、黄疸等为主要症状的人兽共患病[1-3]。

1928年Schilling等首次在啮齿类动物中发现附红体样小体，当时将其命名为球状血红体，随后国内外学者陆续报道了绵羊附红体、牛温氏附红体和猪附红体、人附红体等[4,5]。

附红细胞体病的出现在我国已经有20多年的历史，但近年来猪附红细胞体病有趋于严重的态势，很多猪场因此也损失惨重。

猪附红细胞体感染小鼠模型的实验研究

１２实验动物．
济损失，对畜牧生产及人类健康构成了严重威胁，
是一种亟待控制的疫病之一。近年来，对附红细胞体病的流行病学、临床表现、检测方法、治疗药物等报道较多，而对组织的病理形态学观察研究不多，有关附红细胞体的病理解剖学、病理组织学变化在有些文献中虽有所涉及，但都比较局限于病理形态学观察，尤其是在不同感染过程中的病理学变化，更为少见。
［中图分类号］５３【Ｑ９．３文献标识码］［章编号］０４８４（０８０．３２０Ａ文１０ —４８２０）６０７ —５
附红细胞体是一种亲血性支原体，广泛寄生在人和各种脊椎动物体内，引起一种人兽共患的传染病，主要致病过程是通过附着宿主的红细胞，宿主通过自身免疫等机制破坏红细胞，从而导致宿主发热、贫血、黄疸甚至死亡。附红细胞体病的流行范围很广泛，在自然条件下易感动物较广泛，
性感染，感染率较高，给养殖业造成了巨大的经
发病，床主要表现为精神沉郁、昏睡、高热、贫临血、黄疸、肌肉震颤、后肢瘫痪、腹下、耳尖等处皮肤有出血点或出血斑等典型附红细胞体病感
染症状。无菌采集该病猪的血样，对其进行镜检和ＰＣＲ检测，定其为附红细胞体感染。确

抗猪附红细胞体药物体内筛选模型的建立与应用

Ｌｉ，ＩｕｘｎＬＵＪｇ，ＮｉｎｐｎＬｎ－ａＸａｇｉＩＬＵＪ．ｉｇ，ＩｉＷＡＧＪａ．ｉｇ，ＩＨｕａｎＨｏｇｕｎ，ＵＹ．ａｊ
（．ｏｅｅｏｎｍｌｃｎｅａｄＴｃｎｌｙＡｒｕｔｒｌｎｖｒｔｏｂｉＢｏｉｇ７０１Ｃｉａ１ＣｌｇｆｉａＳｉｃｎｅｈｏｏ，ｇｃｌａＵｉｅｉｆｌＡｅｇｉｕｓｙＨｅｅ，ａｄｎ０１０，ｈｎ；
２ＱｎｕｎｄｏＡｉａＩｄｓｙＤｖｌｐｅｔｓｃｔｎＱｎｕｎｄｏ６３０Ｃｉａ．ｉｈａｇａｎｍｌｎｕｔｅｅｍｎＡｓｉｉ，ｉｈａｇａ０６０，ｈｎ）ｒｏｏａｏ
ＡｓａｔＩｒｅｃｅｒｇｆｃｅｔｇｉｓ印ｅｔｒｚｏｉａｐｉｌｕｅｍｏｅｆＨｉｅ－ｂｔｃ：ｏｄｒｏｓｒｎｄｕｓｉｉｌａａｔｒｈｏｎｓｓｎｏｔｓｄｌｏＥｆｃｒｎｔｅｅｎｙｎｙｏｕ，ｍａｍｏｒｎ
ｔｎｗａｏｂｅｅｔｂｉｈｄａｐｌｅｒｓｕｅｎｄｕｅｓｂｌｙＴｘｅｍｅｔｗａａｅｎｏｔｏｏｌｔｓｉｓｔｓａｌｓｅｎｄａｐｉｄｆｔｄｉｓｏｒｇｓｎｉｉｔ．ｈｅｅｐｒｎｓｂｓｄｏｒｈｇｎａｅｔｏｏｉｉｗｉａｔｒｉｈｅｃａｉｐｒｔｅｅｓＡｔｆｒｔｔｅｏｔｍａｎｅｔｏｔｏｐａｈｙｏｅｔｎａｄｄｓｔ３ｆｃｏｓｗｈｃａｈｈｄ３ｄｓａａｅｌｖｌ．ｓ，ｐｉｌｉｆｃｉｎｍｅｈｄ，ｔｗａｆｉｃｉｎｏ — ｈｉｈｆｎｏａｅｏｎｃａｉｎｗａｅｅｍｉｄｂｎｄｘｓｓｈａｎｅｔｎｒｔｐａｅｏｆｂａｔｒｍｉｎｄｃｉｉａｙｔｎｇｆｉｏｕｌｔｓｄｔｒｎｅｙｉｅｅｕｃｓｉｆｃｉａｅ，ｅｋｐｒｄｏｃｅｅａａｌｃｌｓｍｐｏｏｏｉｎｏａｈｅｐｒｍｅｔｌｇｏｐ．ｈｅｈｐｉｌｍｏｅｓａｐｉｄｔｖｌａｅｔｎｏｎｉｉｔｃｎｎｉｒｔｚａ — ｆｅｃｘｅｉｎａｒｕＴｎｔｅｏｔｍａｄｌｗａｐｌｅｏｅａｕｔｅｆａｔｂｏｉｓａｄａｔｏｏｏｎａｐｇｎｓｃｎｔｉｉｇｔｒａｃｎ，ｅｒｃｃｉｅ，ｒｎｌａｔｍｉｉｉｉｄｃｒｎＯｏｂｈｅｔｓｆｄｇｓｎｉｖｔｅｔ，ｏａｎｎｅｒｍｙｉｔｔａｙｌｎｂｅｅｉ，ｒｅｓｎｎ，ｍｉｏａｂａｄＳｎ，ｙｔｅｔｏｒｅｓｔｉｕｉｙ．

猪附红细胞体病的诊治(doc 5页)

猪附红细胞体病的诊治(doc 5页)猪附红细胞体病的诊治几个月以来，在山东农业大学动物保健医院门诊上常发现以高热、贫血、轻度黄疽、皮肤发红为特征的疾病。

由于大部分猪场猪群己用猪瘟、猪丹毒、猪肺疫、仔猪副伤寒疫苗进行了免疫预防接种，因此很多人怀疑为猪弓形虫病，但用磺胺类等药物治疗，均未见效，并出现死亡。

我们根据临床症状，流行特点结合实验室检查确诊为猪附红细胞体病，并且取得了明显的治疗效果。

1、病原特点在猪体内存在有两种附红细胞体，一种是猪附红细胞体，另一种是小附红细胞体。

后一种对猪不发生致病作用，常引起猪发病的只是前一种，它能使猪发生一种热性病。

猪附红细胞体是这两种原虫中较大的一种，直径平均为0．8微米，最大的可达2，5微米。

通常的形态是环形，也有球形、杆状和发芽状的。

这些原虫通常依附于红细胞上，有时也游离于血浆中。

其增殖是在红细胞内行二分裂萌芽法。

附红细胞体对干燥和化学药品的抵抗力很低，但耐低状出血；全身骨骼肌色泽变淡、稍黄染；肝表面有黄色条纹状坏死，胆囊充满胆汁；肺叶边缘充血、出血；纵隔淋巴结水肿；心包积液，心脏肿胀，心内外膜有点状出血；脾脏肿胀、柔软，切面有稀薄血液。

4、实验室诊断4.1 血液压片取病猪新鲜血液一滴，加等量生理盐水混匀，加盖玻片，油镜暗视野下观察，发现红细胞表面和血浆中有多种形态如球形、椭圆形、环形及杆状的闪光虫体，这些虫体能前后、左右、上下伸展、旋转、翻滚。

由于在红细胞表面的虫体有张力作用，使红细胞的形态发生变化，呈锯齿状、菠萝状等不规则形态，一个红细胞上可附着数个至数十个虫体。

4.2姬姆萨染色镜检取病猪耳静脉血，涂片，姬姆萨染色，在1500倍油镜下，可观察到附在红细胞表面的淡紫色、呈多种形态的附红纲胞体，而以点状、不规则的环形为多，其特点是当调动微动螺旋时，折光性较强，附红细胞体中央发亮，形似空泡。

5、治疗咪唑苯脲20-30mg/kg体重肌肉注射间隔24小时再注射一次。

注射本品前，可先注射地塞米松以防猪只过敏；注射本品后若有猪只出现严重的气喘症状，可以用硫酸阿托品缓解。

猪附红细胞体感染BALB_c小鼠模型的建立及相关指标检测_冯会权

猪附红细胞体感染BALB/c小鼠模型的建立及相关指标检测冯会权1，徐昆2，宋立先1，田晶1，贺宝军1，巴彩凤1*（1．辽宁医学院实验动物中心，辽宁锦州121001；2．辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州121000）摘要：通过建立猪附红细胞体感染BALB/c小鼠模型，检测BALB/c小鼠外周血中血细胞的变化特征，同时检测感染小鼠血浆中红细胞表面分子CD35分子（Ⅰ型补体受体），进一步揭示附红细胞体的免疫致病机理。

结果显示小鼠感染猪附红细胞体随感染时间的增加，红细胞数量呈降低趋势，白细胞数量呈升高趋势，且两者呈负相关。

CD35的表达水平显著增高，说明附红细胞体感染可降低机体免疫水平。

关键词：猪附红细胞体；BALB/c小鼠；免疫水平中图分类号：S854文献标识码：B文章编号：0529-5130（2011）01-0063-03附红细胞体是一种亲血性支原体，广泛寄生在人和各种脊椎动物体内，引起一种人兽共患的传染病。

主要致病过程是附着宿主的红细胞，宿主通过自身免疫等机制破坏红细胞，从而导致宿主发热、贫血、黄疸甚至死亡［1－3］。

目前，国内外对附红细胞体病的研究尚不深入，本试验采用体外感染建立附红细胞体感染小鼠动物模型，动态观察感染后小鼠血液中红细胞、白细胞的变化及其之间的关系，检测小鼠游离红细胞表面CD35分子（Ⅰ型补体受体）的表达，探讨血细胞参与免疫反应的机制，为研究附红细胞体的免疫致病机理及机体的免疫反应奠定理论基础。

1材料与方法1.1试验动物清洁级BALB/c小鼠54只，7周龄，雌雄各半，体重20 25g，购自大连医科大学实验动物中心。

猪附红细胞体阳性和阴性血液由辽宁医学院畜牧兽医学院馈赠，猪附红细胞体阳性血经姬姆萨染色镜检附红细胞体阳性率达90%以上。

1.2小鼠模型建立BALB/c小鼠尾静脉采血分别经鲜血压片标本镜检和猪附红细胞体PCR检测，确定小鼠无猪附红细胞体感染后，随机将54只小鼠分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ共3组，每组18只。

猪附红细胞体pcr检测方法的建立和初步应用

猪附红细胞体pcr检测方法的建立和初步应用文章标题：猪附红细胞体PCR检测方法的建立与初步应用在农业领域，猪附红细胞体PCR检测方法的建立和初步应用备受关注。

本文将从建立方法的过程、应用范围和未来发展等方面进行深入探讨，帮助读者全面了解这一重要的技术。

一、建立方法的过程1.1 猪附红细胞体PCR检测方法的原理猪附红细胞体PCR检测方法是一种基于多重PCR的检测技术，主要用于检测猪体内的特定病原体。

1.2 关键步骤和技术要点建立这一检测方法需要充分理解猪体内病原体的生物学特征，同时需要在PCR技术上进行优化，确保灵敏度和特异性。

1.3 方法的验证和实验数据经过大量实验和数据对比，可以确定该方法在猪体内病原体检测方面具有可靠性和准确性。

二、初步应用2.1 在疾病防控中的应用猪附红细胞体PCR检测方法可以用于疾病的早期诊断和监测，为疾病的控制和防治提供重要支持。

2.2 在饲养管理中的作用通过该方法的应用，可以及时检测病原体，避免疾病的传播，保障猪的生长和健康。

2.3 对农业生产的意义猪附红细胞体PCR检测方法的建立和应用，对农业生产具有重要意义，可以提高疾病检测的精准度，保障畜禽健康生产。

三、未来展望3.1 技术的改进和完善在未来，需要不断改进和完善猪附红细胞体PCR检测方法，提高其在现实应用中的效率和稳定性。

3.2 拓展应用领域除了用于猪体内病原体的检测，该技术还可以在其他动物的病原体检测中得到拓展，具有广阔的应用前景。

3.3 国内外研究现状与竞争优势通过了解国内外研究现状，可以为我们提供更多的启发和借鉴，提高我们的研究水平和竞争力。

个人观点和总结通过对猪附红细胞体PCR检测方法的建立和初步应用的深入探讨，我认为这一技术具有巨大的潜力和应用前景。

在未来，随着技术的不断改进和完善，相信它将在农业生产和疾病防控领域发挥更大的作用。

在撰写本文的过程中，我深刻理解了猪附红细胞体PCR检测方法的重要性和价值所在。

养猪技术(PPT)猪附红细胞体病

猪附红细胞体病
附红细胞体病
本病是由猪附红细胞体，又名红细胞孢子虫寄生于红细胞和血浆中而引起的一种原虫病。
诊断要点之流行特点
本病多发生于夏季雨后湿度大时，猪虱、蚤等吸血节肢动物可以起到传播作用，此外，污染的针头、手术器械、交配等也可传播。有人提出哺乳仔猪感染发病是由母猪子宫传染所致。生产中多见于饲养密度大的猪场，特别是１月龄断奶时期受应激因素的影响、使其发病率与死亡剖检病变
主要是贫血与黄疸。全身性黄疸。皮肤及粘膜苍白，血液稀薄。肝肿大变性，呈黄棕色，胆囊充满浓明胶样胆汁。脾肿大变软。有时淋巴结水肿、胸腔、腹腔及心包囊积液。
诊断要点之病理特征
（４）实验室诊断 1）从发高烧病猪耳静脉采血涂片，用瑞士或姬姆萨氏染色法染色，油镜下检查有无虫体，如在红细胞内发现圆球形的小体，大小为０．８－１．０微米即是之。 2）对于隐性感染猪，可用间接血球凝集试验（ＩＨＡ）作出诊断。
预防方法
1、应采取综合性的措施，着重灭蚊和驱蚊。 2、驱除猪体内外寄生虫 3、在进行阉割、断尾、剪牙时，注意器械的消毒；在注射时应注意更换针头，减少人为传播的机会。 4、土霉素，800 克/吨饲料，连用 14 天，可降低附红细胞体病的发病率。
治疗方法
1、贝尼尔（血虫净），在猪发病初期，使用贝尼尔疗效较好，按 5～7 毫克/千克体重深部肌肉注射，间隔 48 小时重复注射一次。 2、四环素类如土霉素或四环素，按 20-30 毫克/千克体重肌肉注射，24 小时即可见有临床症状的减轻，连用 5 天。 3、对氨基苯胂酸钠或阿散酸，180克/吨饲料，连用 1 周，以后改为 90 克/吨饲料，连用 1 个月。
诊断要点之临诊特征
1）仔猪。小于５日龄的主要症状是皮肤苍白和黄疸，１周龄后多可自愈；１月龄左右断奶时期的仔猪，最初表现贫血，后出现黄疸症状，生长发育不良，成为僵猪；有些病猪高热稽留，全身皮肤发红，或是耳、腹下、四肢先发红后出现紫斑，数天内死亡。 2）母猪。往往在应激条件下发生急性感染，体温达４０－４１．７℃，高热稽留数天，厌食；慢性感染时，猪群中部分母猪出现衰弱，苍白及黄疸症状，其中部分猪只不发情或屡配不孕。

猪附红细胞体病PCR诊断方法的建立及应用

猪附红细胞体病PCR诊断方法的建立及应用（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）作者：巴彩凤，李久纯，冯会权，赵微【摘要】目的建立一种新型的猪附红细胞体病PCR诊断方法。

方法根据猪附红细胞体部分CDS基因序列（AJ504999）设计引物，建立一种新的猪附红细胞体病PCR诊断方法。

通过实验室染毒实验，建立感染猪附红细胞体病的小鼠模型，并应用研制的PCR 方法进行实验室验证。

应用建立的PCR诊断方法对辽宁5个城市的385个猪样本进行猪附红细胞体病流行病学情况调查，确定猪附红细胞体病的感染率。

结果成功建立猪附红细胞体病PCR诊断方法，通过染毒模型验证了该方法具有快速、特异性强、敏感性高的特点。

并估计出辽宁省猪群中附红细胞体总体感染率95%的可信区间为（82.50%，89.44%）。

结论本研究建立的猪附红细胞体病PCR诊断方法及临床应用，为辽宁地区乃至全国附红细胞体病的防治工作提供了科学理论数据。

【关键词】猪附红细胞体病PCR 动物模型感染率Abstract: Objective To establish a new PCR diagnostic method of mycoplasma suis(M.suis) .Methods The primers were designed based on the partial CDS gene sequences(GenBank nos AJ504999) to establish a new PCR diagnostic method. A mouse model was established through the toxicity test in the lab and the lab test was conducted using the PCR method. The epidemiology situation of M. suis of 385 porcine blood samples in Liaoning Province was investigated using the CPR diagnostic method. Results It showed that the PCR diagnostic method was established successfully and it has been tested that this method was rapid, specific and highly sensitive . In this study, we find that the prevalence rate of M. suis infection varied from 82.50% to 89.44% in province. Conclusions The study showed that the PCR diagnostic method and its clinical application of M. suis provided the scientific theory data for the prevention and cure of M.suis in Liaoning Province even the whole nation.Key words:mycoplasma suis; polymerase chain reaction; animal model; infectionrate附红细胞体是一种专性血液寄生生物，寄生于多种动物和人红细胞表面、血浆及骨髓内，引起一种以溶血性贫血、黄疸、发热等为主要临床症状的人兽共患传染病［1］。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

红细胞总数、红蛋白含量均显著下降（＜Ｏ０）红细胞比容显著下降（＜ＯＯ）因此，附红细胞体对低血Ｐ．５，Ｐ．１。猪免疫力的ＢＢｃ鼠具有一定感染性，表现出典型临床症状。ＡＬ／小并
束反应。ＰＲ产物经１５琼脂糖凝胶电泳检测结果。Ｃ．
１５血液常规检测．
每组ＢＢｃ鼠在猪附红细胞体感染前和感染后第８天，集各组ＢＢｃ鼠血液做血液常规检ＡＬ／小采ＡＬ／小
测，并应用ＳＳｖ９０软件对检测结果进行统计学分析。ＰＳ１．
附红细胞体消失，射地塞米松组在感染后第３注２天消失，摘除脾脏组在试验结束时仍具有较高的感染率。而经血液常规检测，组ＢＢｃ鼠在感染猪附红细胞体后，细胞总数显著升高（＜Ｏ０）淋巴细胞总数、各ＡＬ／小白Ｐ．１，
胞体阳性血液采自具有明显贫血、疸症状的仔猪，静脉无菌采集抗凝血，血液压滴标本、姆萨染色镜黄颈经姬检及ＰＲ鉴定为阳性的仔猪血液，菌ＰＳ无菌条件下洗涤３次后，Ｃ灭Ｂ４℃保存备用。
１２试验动物分组与感染．
Ｔｅ：７４６３２Ｅ— ｍａｌｉｎｗｆｙｕｅｕｃｌ１０４１０，３ｉ：ｌｇ＠ｂ．ｄ．ｎａ
第２期
１４ＰＲ鉴定．Ｃ
杨明艳，：附红细胞体病ＢＢｃ鼠模型的建立等猪ＡＬ／小
１３１
为进一步确定ＢＢｃ鼠血液中感染的猪附红细胞体，ＡＬ／小在感染后第８天，采集各组ＢＢｃ鼠血液ＡＬ／小
进行猪附红细胞体的ＰＲ鉴定，Ｃ鉴定上游引物Ｐ：ＣＰＲ１５一ＴｃＴＴＡＴＧＴｃＴＧＴＴＴＴＧＴＡＡＡＴｃＧ一３；Ｔ下游引物Ｐ：Ｔ２５一ＴＴＴＡＡＴＴＡＴＧＣＣＴＴＣＣＡ一３，增片段大小为３６ｂ。ＰＲ反应条件为：ＡｃＴＣ扩８ｐＣ９５℃预变性５ｍｉ；４℃ 变性４，７。ｎ９５Ｓ５Ｃ退火４，２。５Ｓ７Ｃ延伸４，３５Ｓ共ｏ个循环；２。延伸７ｍｉ，７Ｃｎ４℃结
２３ＢＢｃ鼠感染猪附红细胞体消长情况．ＡＬ／小
ＢＬ／小鼠人工感染猪附红细胞体后的第４天，ＡＢｃＢ组ＢＢｃ鼠感染率快速升高，７，Ａ、ＡＬ／小达６而Ｃ两组较Ｂ组稍低。感染后第８１～ｏ天，ＢＣ３组ＢＢｃ鼠相继达到高峰，Ａ、、ＡＬ／小ｃ组ＢＢｃ小鼠在感染ＡＬ／后第２４天猪附红细胞体消失，Ａ组在感染后第３２天消失，Ｂ组在试验结束时仍具有较高的感染率，Ｄ组而
组。分别对Ａ、、ＢＣ３组ＢＬ／小鼠腹腔注射０５ｍＬ猪附红细胞体阳性血液，ＡＢｃ．Ｄ组ＢＢｃ鼠腹腔注ＡＬ／小
射０５ｍＬ灭菌生理盐水，４组ＢＢｃ小鼠置于无菌室中相同条件下饲养。．将ＡＬ／１３临床症状观察及涂片染色镜检．
图１血液压滴标本镜检猪附红细胞体（０ × ）１００
图２姬姆萨染色镜检猪附红细胞体（０ × ）１００
Ｆｉ．１ＭｉｒｓｏｉｘｍｉａｉｎｏｓｉｙｂｏｄｐｅｓｒｒｓＦｉ２ＭｃｏｃｐｃｅａｉｔｏｏｓｉｙＧｉｍｓｔｉｉｇｇｃｏｃｐｃｅａｎｔｏｆＥ．ｕｓｂｌｏｒｓｕｅｄｏｐ．ｇｉｒｓｏｉｘｍｎａｉｎｆＥ．ｕｓｂｅａｓａｎｎ
ＢＢｃ鼠无变化（３。ＡＬ／小图）２４ＰＲ鉴定ＢＢｃ鼠感染的猪附红细胞体．ＣＡＬ／小
各组ＢＢｃ鼠在感染猪附红细胞体后第８天经ＰＲ鉴定，阴性对照Ｄ组外，ＡＬ／小Ｃ除其余Ａ、、ＢＣ组均检测出猪附红细胞体３６ｂ８ｐ的特异性基因片段（４Ｍ：ＮＡｒｅ０；：图，ＤＭａｋｒＤＬ２００１阳性对照；～５分别为２：Ａ、、Ｄ４组ＢＢｃ小鼠血液样本；：对照）说明注射地塞米松组、除脾脏组及正常感染组的ＢＣ、ＡＬ／６水，摘ＢＢｃ鼠均感染了猪附红细胞体。ＡＬ／小
第３４卷
第２期
延
边
大
学
农
学
学
报
Ｖｏ１３．４ＮＯ２．
２１０２年６月
ＪｕｎｌｆＡｇｉｕｔｒｌＳｉｎｅＹａｂａｎｖｒｉｙｏｒａｒｃｌｕａｃｅｃｎｉｎＵｉｅｓｔｏ
Ｊｎ２１ｕ．０２ Nhomakorabea猪附红细胞体病ＢＢｃ鼠模型的建立ＡＬ／小
杨朋艳，梁晚枫
（边大学农学院，延吉林延吉１３０）３０２
摘要：了解现阶段延边地区猪附红细胞体的致病性，注射地塞米松和摘除脾脏的ＢＩ／小鼠为实验动为以ＡｃＢ
物，腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体，过临床症状观察、液涂片姬姆萨染色镜检及ＰＲ方法对以通血Ｃ
１材料与方法
１１材料．
ＢＢｃ鼠，自吉林大学实验动物室，养ＢＬ／小鼠的垫料和饲料经７射线照射，水为高压ＡＬ／小购饲ＡＢｃ饮
灭菌水，试验用ＢＢｃ鼠经血液涂片姬姆萨染色镜检和ＰＲ鉴定为猪附红细胞体阴性小鼠。猪附红细ＡＬ／小Ｃ
ＢＢＣ鼠感染猪附红细胞体情况进行鉴定，进行血液常规检测结果表明，射地塞米松组、除脾脏ＡＬ／小并注摘
组和正常感染组ＢＬ／小鼠在感染后８１相继达到高峰，常感染组ＢＩ／小鼠在感染后第２ＡＢｃ～０ｄ正ＡｃＢ４天猪
收稿日期：Ｏ２４４资金项目：国家公益性行业（业）研专项（０９３３ — １）２ｌ一Ｏ —２农科２０００６３
作者简介：朋艳（７）女，南济源人，边大学农学院，读硕士。梁晚枫为通讯作者，杨１８９，河延在
关键词：猪附红细胞体；ＡＬ／小鼠；染；Ｃ血常规ＢＢｃ感ＰＲ；
中图分类号：８８￥２文献标识码：Ａ文章编号：０４７９（０２０ —０１一Ｏ１０— ９９２１）２１２４
附红细胞体病（ｐｒｔｒｚｏｏｉ）附红细胞体（ｒｒｚ０）Ｅｅｙｈｏｏｎｓ是ｓＥＰＤ０寄生于红细胞表面、血浆及骨髓中引起的一种以血红蛋白浓度降低、白细胞增多、血、贫黄疸和高热为主要临床特征的人畜共患病。自１２９８年首次发现以来，迄今已发现和命名的附红细胞体有１４种，中猪附红细胞体（．ｕｓ和绵羊附红细胞体（．其Ｅｓｉ）Ｅｏｉ）ｖｓ的致病力最强。猪附红细胞体病不仅导致畜产品质量和产量降低，而且还可导致动物出现严重的临床症状，至死亡。该病已对畜牧业发展及人类健康构成了严重威胁，一种亟待控制的传染病。本试验将甚是ｊ猪附红细胞体感染ＢＢｃ鼠，ＡＬ／小以期明确现阶段猪附红细胞体对ＢＢｃ小鼠的致病性。ＡＬ／
ＢＢｃ鼠感染猪附红细胞体阳性血液后，Ｆ观察并记录各组ＢＢｃ鼠的临床症状，续观察ＡＬ／小每ｔＡＬ／小连
３；隔２，２ｄ每４ｈ无菌采集ＢＢｃ小鼠尾静脉血液，用血液压滴标本镜检法和姬姆萨染色镜检法检测ＡＬ／利ＢＢｃ鼠感染猪附红细胞体情况。ＡＬ／小
２２血液压滴标本与血涂片姬姆萨染色镜检结果．
ＢＬ／小鼠感染猪附红细胞体阳性血液后，ＡＢｃ经血液压滴标本检查，见感染的猪附红细胞体呈大小不可等的卵圆形、点状等多种形态，光性很强。大多数猪附红细胞体单一或成团的寄生于红细胞表面，红逗折使细胞膜表面出现突起、凹陷、褶，细胞失去球形立体形态，星芒状、轮状或不规则的多边形（１。皱红呈齿图）经姬姆萨染色镜检，可见ＢＢｃ鼠的红细胞呈紫红色，染的猪附红细胞体有折光性（２。ＡＬ／小感图）