明水梨叶片不定芽再生体系的建立

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梨叶片离体培养和植株再生

收稿日期：２０ —１０１０—２２；修回日期：２０Ｏ２一Ｏｌ一０８
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３８６
园
艺
学
报
２９卷
近，细胞分裂能力强，再生效率高。
２４不同品种试管苗叶片再生能力比较．
４０ｄ的试管苗顶部叶片，去叶柄，垂直叶中脉横切伤３刀，接种在再生培养基上，首先暗培养，然后转移到培养架上培养。叶片再生基本培养基为Ｎ６￣Ｎ９引，此培养基为正交试验筛选出的Ｎ６Ｎ９＋
（西北农林科技大学园艺学院，杨凌７２０；陕西师范大学生命科学学院，西安７０６）１１０１０２摘要：用梨（ｙｕ）４个栽培品种的叶片诱导不定芽。暗培养２，取试管苗顶部幼嫩叶片，远轴Ｐｒｓ０ｄ
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２Ｏ，２（）６～３８Ｏ２９４：３７６
ＡｅｒｅｌｒｅＳｒ＇ｔＨｏｔｕｔａｉｃａｉｕｅａ
梨叶片离体培养和植株再生
徐凌飞马锋旺王始之２任小林曹晓雁２
ｃｌｖｒ ‘ ｌＩＩｕｌａｓＲ试管苗叶片为外植体，远轴面向
下的再生频率和再生芽数分别为４．％和１３，４５．３

梨叶柄再生不定芽的研究

西
北
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学

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未见报道。本试验对梨叶柄进行了离体培养，生出不定芽，离体突变体筛选和进一步再为
ＨＡＮｉｇｆｎＸＵｎ —ｅＭＡｅｇｗａｇ，ＡＮＧｈ — ｈ。ＲＥＮａ —ｉＱｎ —ａｇ，Ｌｉｇｆｉ，Ｆｎ — ｎＷＺｅｚｉ，ＸｉｏＩｎｌ
（Ｎｏｔｗｅｔｃ ’ ｃＵｎｖｒｉｙｏｆ１ｒｈｓＳｉＴｅｈｉｅｓｔＡｇｉｕｔｅｎＦｒｓｒＹａｌｎＳｈａｘ７２０Ｃｈｎｒｃｌｕｒａｄｏｅｔｙ，ｎｇｉｇ，ａｎｉ１１０ｉａ：２
，
Ｃｏｌｇｆｉｎｅ，ａｎｌｅｏｆＬｉｅＳｃｅｃＳｈａｘｉＮｏｍａｎｖｅｓｔＸｉｒｌＵｉｒｉｙ，ｈｎ，ｈａｎｘ１０６Ｃｈｎ）Ｓａｉ７０２，ｉａ
ＡｂｓｒｔＡｄｖｅｉｉｕｓｂｕｄｓｔａｃ：ｎｔｔｏｗｅｅｒｇｅｒｔｄｆｏｍｅｉｅｏｆｐａｒＣｒｅｎｅａｅｒｐｔｏｌｅＶ ‘ ｙｕｅＢａｈｏｎｇ’ａｎｄ
关键词：；柄；生不定芽梨叶再
。
中图分类号：４．Ｑ９４６
文献标识码：Ａ
ＡｄｅｔｔｏｓｂｄｒｇｎｒｔｏｒｍｅｉｌｆｐａＰｒｓｖｎｉｉｕｕｅｅｅａｉｎｆｏｐｔｏｅｏｅｒ（ｙｕ）

西洋梨“丰产”叶片不定梢再生

西洋梨“丰产”叶片不定梢再生
孙清荣;孙洪雁
【期刊名称】《落叶果树》
【年(卷),期】1999(000)004
【摘要】以西洋利品种“丰产”试管苗叶片为外植体，研究了不同培养基及乙烯抑制剂ＡｇＮＯ３对叶片不定梢再生的影响。

在ＮＮ６９＋ＢＡ５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上，暗培养３周我下培养，获得了最高不定梢再生率，达１００％。

ＡｇＮＯ３结叶片不定梢再生也表现咄促进作用。

在不加ＡｇＮＯ３的ＭＳ＋ＢＡ５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上暗培养３周，再生率仅为２０％，附加ＡｇＮＯ３０．１ｍｇ／Ｌ，再生率可达５
【总页数】2页(P9-10)
【作者】孙清荣;孙洪雁
【作者单位】山东省果树研究所;山东省果树研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S661.201
【相关文献】
1.金花梨叶片不定梢再生体系研究 [J], 曾云英
2.'孔府酥脆'枣试管苗离体叶片不定梢诱导和再生 [J], 孙清荣;孙洪雁;周广芳
3.西洋梨品种'红考密斯'的组织培养及离体叶片不定梢再生 [J], 孙清荣;关秋竹;孙洪雁
4.AgNO_3对枣叶片再生不定梢的促进作用 [J], 周瑞金
5.AgNO_3对梨叶片不定梢再生过程中抗氧化酶活性的影响 [J], 刘娟;汤浩茹;刘玲梅
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梨叶片培养与转基因研究进展

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9G‘ 调节。在东方梨上也有使用 IR _@，。在对梨砧木
!67
培养基和植物生长调节剂基本培养基、细胞分裂素和生长素对梨不定梢
。采用的培养基一般有的诱导具有协同效应（表 "）、、 :; " & 9:; 、 AA@? CD: 、 (’ ""‘ _"I‘ 、 HI 。大量相关试验表明组织培养中广泛使用的 :; 培养基普遍不适于梨叶片不定梢的诱导，而用 "9， "M， "?‘ 。在相同激素水平（ AA@? 则效果显著_?， M8G $% & ’ 条件下，金花梨在 AA@? 培养基 HUSG8M $% & ’ OUU）上的再生率高达 "GGR ，而在 :; 培养基上未能诱导出不定芽。但也有研究指出 AA@? 的诱导率不及噻重氮苯基脲）是一 :;、 CD:_9G‘。与 HU 相比， VNW（

黄金梨叶片再生体系建立研究

ｔａｔｅｏｔｕｕｔｒｍｄｕｒｎｕｉｇｌｆｅｅｅａｏｆｕｎｊｅｒｓＭ＋．ｍ６ＢＯ２ＮＡＯｈｔｈｐｉｍｃｌｅｅｉｍｆｄｃａｇｎｒｉｏａｇｎｐａｉＳＩ－Ａ＋．ｍｍｕｏｉｎｅｒｔｎＨｉ０Ａ．ｎ
１Ｓ／Ｍ无激素培养基继续培养可获得高达９．４１％的生根率和５以上的不定根数。６个
关键词：黄金梨；不定芽；：诱导培养基
中图分类号：６１￥６．２
文献标识码：Ａ
文章编号：０６００（０２０— １８０１０—６Ｘ２１）００ —４５
２ＣｌｇｅｏｒｓａｄＥｖｒｎｅｔＨＮＣａｇｈ１１８Ｐ．ｏｌｅｏＲｓｕｃｎｉｍｎｅｆｅｎｏ，Ａｈｓａ４０２，Ｒｎ
ＡｂｔａｔＴｅｉｕｎｉｇｆｔｒｆａｇｎｒｔｎｐａｔｆｕｎｊｅｒ（ｙｓｙｉｌａａｗｒｓｄｅｏｓｒｃ：ｈｆｅｃｎｃｏｒｅｆｅｅｅａｏｌａｇｎｐａＰｒｒｏｉＮｋｉｅｅｔｉｆｍｎｌａｓｏｌｒｉｎｏＨｉｅｐｆａ）ｕｄｒ
ｔｉｏｔｍｕｔｒｄｕｔｅｖｃｉａｅｅｖｓｗｉｕｆｃｉｅｕｒｎｆｒｄｔｉｈｕｔｒｆｒｃｌｒｄｉｈｓｐｉｍｕｃｌｅｍｅｉｍ，ｈａｃｎｔｄｌａｅｔｓｒｅｓｄｐｔｓｍｅｏｌｔｃｌｅａｔｕｔｅｎｕｈａａｏｇｕｅｕｄｒｎｓｏ５ｄｎｂａｎｄ４％ｉｅｅｅａｉｎｒｔｎ．ｎａｅａｅａｖｎｉｏｓｂｄ；ｔｅａｖｎｉｏｓｂｄａｋｅｓｆｒ１．ａｄｏｔｉｅ５ｎｒｇｎｒｔａｅａｄ２２ｉｖｒｇｄｅｔｉｕｕｓｈｄｅｔｉｕｕｓｏｔｔｏｅｍｒｎｕｅｙ１２ＭＳ３５ｍｇＬＩＡｒ１ｎｈｎｔａｓｏｍｅｏ１４ＭＳｈｒｏｅｆｅｄｕｆｒｖｒ１ｃｗｅｅｉｄｃｄｂ／＋．／Ｂｆ０ｄａｄｔｅｒｎｆｒｄｔ／ｏｏｍｎ — ｒｅｍｅｉｍｏｃｎｉｕｕｕｔｒａｂａｎｔｅｒｏｉｇｒｔｐｔ６ａｄｏｅｖｄｅｔｉｕｏｔ．ｏｔｏｓｃｌｅｃｎｏｔｉｈｏｔａｅｕ９．％ｎｖｒｆｅａｖｎｉｏｓｒｏｓｎｕｎｏ１ｉｔ

八月红梨叶片不定芽诱导研究

［!］［#］用 P4 、（大量元素减半）和 ((DH B L )P4 ! 种基本培养基，附加葡萄糖 !" = L G、不同浓度的 E< 和 F<<。 # 按 G（正交试验设计，共 H 个处理，试验因子水平 H ! ）
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结果与分析
叶片不定芽再生的过程
叶片接种 B" ? 后开始隆起肿胀，在叶片切伤处、叶柄端处产生少量白色愈伤组织。经过 )" ? 暗培养，愈伤组织明显增多并形成块状，呈黄白色，主要在叶背中脉处形成，个别叶片愈伤组织上出现黄绿色芽点，已明显不同于愈伤组织。光培养 ! ? 后，愈伤组织变为黄绿色。愈伤组织继续分化，出现黄绿色芽点，形成不定芽。不定芽有的呈单个分布，有的则连成芽丛。随着培养时间延长，叶片再生频率和再生不定芽数量开始增加。光下培养 !" ? 时，叶
出不定芽，叶片再生效率高于已报道的一些梨品种，但再生效率尤其是再生芽数远低于苹果品种嘎拉、
［,］乔纳金等。这虽然与梨和苹果的基因型有关，但
体再生的影响在于其组成成分和浓度是否适宜于外植体再生。在建立外植体再生体系时，要选择适宜的基本培养基，并要同其他因素结合起来。在试验中发现八月红梨叶片在同一种培养基各次试验的 ))!, 2 3’ 1 " & 4( . 5 2 6’’ & " 1 4( . 5 上，
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再生芽数 2@C *B" G=E <=:K= ( " )! ( " &’ + " ,& + " ’’ ! " ’’ + " (( ! " $, ! " &’ + " !,

红星梨叶片不定梢诱导及增殖培养

红星梨叶片不定梢诱导及增殖培养苏艳丽;田鹏;魏闻东【摘要】为了找到红星梨叶片离体培养的最佳条件，从取材时间、暗培养、植物生长调节物质、不同继代次数等方面研究其对红星梨叶片再生的影响。

结果表明：外植体取4月初的茎段较好，选用继代2次植株的叶片，细胞分裂素BA比TDZ 效果好，生长素IBA比NAA效果好，暗培养30 d，适合叶片再生的培养基为NN69＋BA 5.0 mg/L＋IBA 0.3 mg/L，适合再生苗增殖的培养基为MS＋BA 1.0 mg/L＋IBA 0.2 mg/L＋GA 0.2 mg/L。

%In order to find the best conditions of leaves in vitro culture, effects of sampling time, dark culture, plant growth regulators and subculture times on leaf regeneration in Pyrus communis were researched. The results showed that, the best explants were the stem segments in early April, it had best effect that leaves subcultured for two times were dark cultured for 30 days, BA had better effects than TDZ, and IBA had better effect than NAA. Suitable culture medium for leaf regeneration was NN69 + BA 5.0 mg/L + IBA 0.3 mg/L, and suitable culture medium for regeneration seedling multiplication was MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 0.2 mg/L.【期刊名称】《经济林研究》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】4页(P103-106)【关键词】红星梨;叶片;再生【作者】苏艳丽;田鹏;魏闻东【作者单位】中国农业科学院郑州果树研究所，河南郑州 450009;中国农业科学院郑州果树研究所，河南郑州 450009;中国农业科学院郑州果树研究所，河南郑州 450009【正文语种】中文【中图分类】S661.2红星梨Pyrus communis cv. Starkrimson系郑州果树研究所1988年由新西兰引入国内的优秀全红色西洋梨品种，果实葫芦形，外观鲜红艳丽，风味独特有香气，肉质柔软多汁，风味酸甜清香可口，目前国内生产与市场上数量较少，价格较高，出口前景看好。

梨属植物ISSR技术体系的建立与优化

中国农学通报2011,27(6):50-53Chinese Agricultural Science Bulletin0引言ISSR （Inter-simple sequence repeat ）技术是分子标记的一种，是根据SSR (Simple sequence repeat)的特点由Ziekiewicz 于1994年创建的一种简单重复区间扩增多态性的分子标记技术[1]。

目前，ISSR 已广泛用于绘制DNA 指纹图谱、遗传多样性分析、品种鉴定等领域[2]，但是在果树上应用较少，在梨属植物种质资源研究中的应用国内报道较少。

研究对ISSR 反应体系进行了系统地摸索和优化，旨在为ISSR 技术在梨属植物种质资源的利用方面提供适宜方法。

基金项目：河北省自然科学基金（303240）。

第一作者简介：张玉星，男，1961年出生，河北沧州人，教授，博士，主要从事果树结实生理与分子生物学研究。

通信地址：071001河北农业大学学科学位办公室，E-mail ：jonsonzhyx@ 。

收稿日期：2010-05-14，修回日期：2010-08-02。

梨属植物ISSR 技术体系的建立与优化张玉星1，马艳芝1,2，赵国芳1,3(1河北农业大学园艺学院河北省梨工程技术研究中心，河北保定071001；2唐山师范学院生命科学系，河北唐山063000；3北京金泰恒业有限责任公司富地分公司，北京100031)摘要：以雪花梨为材料，对ISSR 反应体系中的模板用量、引物浓度、dNTPs 浓度、Taq DNA 聚合酶用量等一些重要参数进行探索和优化，初步建立了稳定的具有广泛适用性的梨属植物ISSR 技术的反应体系及扩增程序，即20μL 体系中含1×buffer (内含1.5mmol/L MgCl 2)、模板DNA 40~60ng 、引物浓度为0.2μmol/L 、dNTP 200μmol/L 、Taq DNA 聚合酶1U 。

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ｔｒｏａＮｋｉ‘ ｋｍｚ ’ ＡｖｎｉｏｓｂｄＲｇｎｒｔｎＭｄｕｏｉｌａａＡｅｉ；ｄｅｔｉｕ；ｅｅｅｉ；ｅｉｆｉｕｔｕａｏｍ
梨是蔷薇科（ｏｃａ）亚料（ｏａｅｅ梨属Ｒｓｅｅ梨ａＲｍｅａ）
（多年生木本植物，世界上主要的果树作物之脚）是
ｍ／ＩＡ０２ｍ／ＡＮ３．ｇＬ中暗培养２，ｇＬ＋Ｂ．ｇＬ＋ｇＯ０ｍ／１５ｄ后叶片不定芽再生率最高，达到７．％。１８关键词：明水梨；不定芽；再生；培养基
中图分类号：６．文献标识码：文章编号：０ — ５１２０）４— ０２— ３￥１２６Ａ１１８８（０９００４００
（ｏｅｅｏＨｒｃｌｒ，ａｊｇＡｎｕｕａＵｉｅｓｙａｊｇ２０９，Ｃｉ）ＣｌｇｆｏｉｔｅＮｉｇ’ ｔｌｎｖｒｔ，Ｎｎｉ１０５ｈａｌｔｕｕｎｎｃｒｌｉｎｎ
ＡｂｔａｔＵｓｇｔｅｉｌｔｄＬａｅｆ‘ ｋｍｉｕｅｒａｈｘｌｎｓｔｅｒｇｎｒｔｎｓｓｍｆｈｄｅｔｉｕｕｏｔｅｓｒｃ：ｉｈｓａｅｅｖｓｏＡｅｚ ’ｐａｓｔｅｅｐａｔ，ｈｅｅｅａｉｙｔｏｅａｖｎｉｏｓｂｄｆｍｌｎｏｏｅｔｔｒ｝ｌａｅｓｔｄｅ．ａｄｔｅｉｆｅｃｓｏｉｅｅｔａａｄａｏｉａｉｎｆＤｎＡｉｉｅｅｔｏｃｎｒｔｎ，ｕｔａｉｎｅｖｓｗａｓｕｉｄｎｈｎｕｎｅｆｆｒｎｓｌｌｄｆｂｍｅｉ，ｃｍｂｎｔｓｏＺａｄＩｏＴＢｗｔｄｆｒｎｎｅｔａｉｓｃｌｉｔｈｃｏｖｏｔｎｔｅｄｋａｄＡｇＯ，ｃｎｅｔｔｎｏｈｅｅｅａｉｎｏｄｅｔｉｕｕｅｅｅｐｏｅ．皿ｌ陀言ｔｈｗｄｔａｈｎｔｅｉｉａＮｍｅｈｒｎｏｃｎｒｉｎｔｅｒｇｎｒｔｆａｖｎｉｏｓｂｄｗｒｘｌｒｄａｏｏｔｅｌｕｓｓｏｅｈｔｗｅｈｌａｅｅｅｃｌｖｔｄＯｈｄｕＮ６ｅｖｓｗｒｕｔａｅｉｔｅｍｅｉｍＮ９＋ＴＺ１５ｍｇＬ＋ＩＡ０２ｍｇＬ＋ＡＮ０３１０ｍｇＬｆｒ２ａｓｕｄｒｄｒｏｄｔｎｉｌＤ．／Ｂ．／ｇ．／ｏ５ｄｙｎｅａｋｃｎｉｉ，ｏ
摘
要：明水’ Ａｅｉ叶片为外植体，以‘ 梨（ｋｍｚｕ）研究了不同基本培养基，同浓度噻重氮苯基Ｎ（Ｄ）不ＴＺ和吲哚丁酸（ＢＩＡ）
的组合，不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银（ｇＯ）梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明，Ｎ６ＴＺ１５ＡＮ，对在Ｎ９＋Ｄ．
，
栽培面积和产量均仅次于苹果。可是由于梨传背景复杂等原因，给传
统的有性杂交育种造成很多困难。随着生物技术的迅猛发展，转基因手段改良植物性状成为可能。 ‘ 通过明水 ’ （ ’ ｐｒｌａａＡｅｉ ’ 由新水与４６梨Ｐ邶ｙｉｉＮｋｉ‘ ｋｍｚ）ｆａｏｕ２—
ｔｅｒｇｎｒｔｏａｉｆｔｅａｖｎｉｉｕｕｓｈｉｈｓ．ｒａｈｎＯ７．ｈｅｅｅａｉｎｒｔｏｏｈｄｅｔｏｓｂｄＷａｔｅｈｇｅｔｅｃｇｔ１８％．ｔｉ
Ｋｅｏｄ：ｙｗｒｓ
冲洗３，遍再用０１．％升汞消毒８ｍｎ，ｉ后用无菌水冲洗５遍（冲洗过程中不断摇动）灭菌吸水纸吸干外植体表，面液体，将外植体接种于ＭＢ．ｇＬ＋Ａ．Ｓ＋Ａ１０ｍ／ＮＡ０１ｍ／Ｇ．ｇＬ培养基中，ｇＬ＋Ａ０７ｍ／转入光照培养。生长３５ｄ后的外植体接种于Ｍ＋Ａ０７ｍ／＋Ａ．ｍ，ＳＢ．ｇＬＮＡ０１ｅ／Ｌ的继代培养基中进行继代培养。
一
１２方法．
１２１无菌苗的获得于４月中旬左右采萌发的一年．．生枝条（２３有～片展开叶片）剥去鳞片，，把展开的叶片去除，切下的芽用流水冲洗３ｈ后，于无菌三角瓶中。置在超净工作台上先用７％的酒精浸泡２后用无菌水５ｏｓ
ＲｇｎｒｔｎｏｖｎｉｏｓＢｄｆｏＬａｅｆｙｕｙｉｌａａＡｅｚｅｅｅａｉｆｏＡｄｅｔｉｕｕｍｅｖｓｏｒｓｒｏｉＮｋｉ‘ ｋｍｉｔｒｅｐｆａｕ’
Ｕａ．ＩＯＹｓａ．Ｉｈ —ｑｎ，ＯＧＺａ — ｕ，ＨＮｈｎＨｉＱＡｕ— ｈｈＬｉｉｇＴＮｈｏｇｏＺＡＧＺｅ ‘ Ｚａ
江西农业学报
２０２（）４４０９，１４．２～４
ＡｅａＡｃｔｒｅＪａｇｉｔｕｕａｉｎｘｌ
明水梨叶片不定芽再生体系的建立
李海，乔玉山，李志强，佟兆国，镇章
（京农业大学园艺学院，南江苏南京２０９）１０５