复方氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量测定
HPLC法测定感冒灵颗粒和复方感冒灵颗粒中对乙酰氨基酚、咖啡因和马来酸氯苯那敏含量
·334·图3 不同厂家PEG 6 000关键属样品编号（sample No.）性指标聚类分析树状图Fig. 3 Critical quality attributes cluster analysis diagram of PEG6 000 from different manufacturersPEG 6 000关键属性指标聚类分析热图Critical quality attributes cluster analysis heat map of PEG 6 000 from different manufacturers接下来进行PCA分析。
主成分得分如图5-A 样本分成3类，样本1~15来自于厂家1，样本16~21来自于厂家2，样本22~24来自于厂家3，不同厂家样本存在显著的差异。
载荷图如图5-B显Journal of Pharmaceutical Analysis Chinese 前2个主成分上的得分图（A）及载荷图（B）The score scatter plot（A）and loading plot（B）of PC1 and PC2多元质量控制模型建立以训练集15个样本进行PCA，交叉验证确定的主成分数量为2，2个主成分的累积方差贡献率为82.3%。
建立Hotelling T2、DModX统计控制图见图训练批次均分布在2个控制图的95%控制限内。
6 训练集的Hotelling T2和DModX统计量控制图Fig. 6 Hotelling T2 and DModXstatistics control charts of training batches3.4 多元质量控制模型验证采用验证集1的9个样本，进行复方丹参滴丸小试规模的验证生产，出现了液滴分离度、滴丸圆整度不符合要求等问题。
利用Hotelling T2和DModX计量对验证集1样本进行监控，见图7。
结果显示，个验证集样本均同时超出Hotelling T2和DModX制限，表明它们与用于建模的厂家1样本存在着明显的质量差异，说明本研究建立的多元质量控制模型能够准确区分出不适用于复方丹参滴丸生产的6 000。
HPLC法对二种复方氨酚烷胺制剂中对乙酰氨基酚含量测定
第７ 期
苏彦文 ， ： Ｐ Ｃ法对二种复方氨酚烷胺制剂中对乙酰氨基酚含量测定 等 ＨＬ
算 回收率 ， 果显 示 ， 乙酰 氨基 酚 的平 均 回收率 结 对
为９ ．３ ， Ｓ ０ ６ ％ ， ９ ８ ％ Ｒ Ｄ＝ ．９ 见表 ２ ．
表 １ 对 乙酰氨基酚标准 曲线结果
进 样 量／ ｇ
０． ９ Ｏ３ ０． ７ ２９
０． ６５ ４
试品溶液和阴性对照溶液各 ５ ， 注人液相色谱
仪 ， 录 色谱 图 ， 记 考察 系统适 用性 ． 结果 ， 乙酰 氨 对 基酚 峰保 留时 间为 ４４ｍｎ 阴性对 照溶 液对 测定 ． ｉ，
文 章 编 号 ：０ ７２ ５ （０ ２ ０ － ２ －４ １０ —８３ ２ １ ） ７０ ７０ ０
ＨＰ Ｃ 法 对 二 种 复 方 氨 酚 烷 胺 制 剂 中 Ｌ 对 乙酰 氨 基 酚含 量测 定
苏彦 文 张 凤 荣 苏彦斌 。 ， ，
（． １ 吉林化工学院 教务处 ， 吉林 吉林 １２２ ；． ３０ ２ ２ 吉林省食 品药品检验所 化学研究室 ， 吉林 长春 １０ ： ；． ３０ ３ ３ 吉林化工学 ３
测定 其含 量方法 可行 ， 准确 和快 速．
１ 实验部分
１ １ 仪器 与试 剂 ．
１２２ 对 照 品溶液 制备 ．． 对 照 品溶 液 的制 备 ： 密 称 取 对 乙酰 氨 基 酚 精
对 照 品约 １ ． ５ｍ ， １０ｍ Ｏ ２ ｇ 置 ０ Ｌ量 瓶 中 ， 流 动 相 加
关 键
词： 复方氨酚烷胺片 ； 复方氨酚烷胺胶囊 ； 乙酰氨基 酚 ； 对 高效液相色谱法
HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量
HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量[摘要] 目的建立测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚含量的方法。
方法采用hplc法，c18柱（6.0 mm×200 mm，5μm）；流动相为磷酸盐缓冲液（0.05 mol/l磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节ph至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；检测波长为254 nm。
结果对乙酰氨基酚在11.43～114.30μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 7），平均回收率99.21%，rsd=0.87%。
结论本方法简便、准确，重现性好，可用于复方氨酚烷胺片的质量控制。
[关键词] 高效液相色谱法；复方氨酚烷胺片；对乙酰氨基酚；含量[中图分类号] r927 [文献标识码] b [文章编号] 2095-0616（2013）02-102-02复方氨酚烷胺片为复方制剂，为感冒用药类非处方药药品。
适用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的发热、头痛、四肢酸痛、打喷嚏、流鼻涕、鼻塞、咽痛等症状。
本品不宜与氯霉素类、巴比妥类等并用。
国家药品标准ws1-xg-015-2002所记载的复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚含量方法为永停滴定法。
容量分析最大缺点是误差较大，结果不准确。
作者通过筛选多种色谱体系，建立了hplc 法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量，方法简单可靠，可用于复方氨酚烷胺片的质量控制。
1 仪器与试药uvikon紫外分光光度计（法国），mettler电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），hp1100高效液相色谱仪（美国安捷伦）；hp1100化学工作站，agilent g1313als自动进样器；对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号100018-200408，供hplc 含量测定、比色检查用，使用前不需干燥处理）；复方氨酚烷胺片（长春海外制药集团有限公司，批号：20120403；吉林省吴太感康药业有限公司，批号：1112039；安徽三精万森制药有限公司，批号：20120502）；三乙胺为分析纯，水为纯净水，甲醇为一级色谱纯。
复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量测定方法的改进
复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量测定方法的改进作者：刘佳来源：《中国医药科学》2013年第21期[摘要] 目的改进高效液相色谱法测定复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量的方法。
方法采用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚含量，色谱柱为SHIMADZU VP-ODS 150L×4.6mm，流动相为甲醇-0.5%冰醋酸（20︰80），流速1.0mL/min，检测波长249nm，柱温：25℃。
结果高效液相色谱法中，对乙酰氨基酚在0.0416～0.8320µg范围内线性良好，r=1，平均回收率为98.4%；RSD为1.2%。
结论该法操作简便、快速，结果准确。
[关键词] 复方感冒灵片；高效液相色谱法；对乙酰氨基酚；含量测定[中图分类号] R927 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）21-59-03复方感冒灵片收载于1997年《卫生部药品标准中药成分制剂》第十二册，主要由金银花、野菊花、三叉苦、南板蓝根、岗梅、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、咖啡因等8种中药流浸膏以及适量辅料制成，成分较复杂。
具有辛凉解表，清热解毒的功效，临床上用于风热感冒及湿病之发热、微恶风寒、头身痛、口干而渴、鼻塞涕浊、咽喉红肿疼痛、咳嗽、痰黄粘稠等，对乙酰氨基酚（C8H9NO2）是本品的主要成分之一，原标准用亚硝酸钠滴定分析法，测定对乙酰氨基酚含量，因采用外指示剂，其滴定终点判断因人而异导致结果波动较大，为了有效控制该制剂的质量，本研究采用HPLC法测定复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量[1-4]，结果准确，重现性好，为该制剂的质量控制提供了实验依据。
1 仪器、试药及处方1.1 仪器Agilent 1100高效液相色谱仪，电子天平（瑞士，型号：BP211D、AB204-N），数控超声波清洗器（昆山，型号：KQ-250DE）。
1.2 试剂与试药甲醇（色谱纯，天津市四友精细化学品有限公司），超纯水（ACY-1002-U超低元素型超纯水机），冰醋酸（广州化学试剂厂），对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100018-200408），复方感冒灵样品（供试品1：海南海力生，批号：2130102；供试品2：广州嘉禾，批号121202；供试品3：广州一力，批号：313001），其他试剂均为分析醇。
高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量
高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量复方对乙酰氨基酚的概述：复方对乙酰氨基酚是对乙酰氨基酚、异丙基安替比林和咖啡因的复方制剂，主要用于治疗头痛、牙痛、月经痛、神经痛、风湿痛及感冒引起的发热等。
异丙基安替比林的极性弱，与对乙酰氨基酚和咖啡因的极性相差很大，且这3组分的紫外吸收特征及溶解度也有较大差异, 因此建立同时测定这3 组分血药浓度的色谱方法存在较大困难，目前尚未见相关报道。
二、实验部分1.仪器与试剂(1)仪器。
日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，配UV检测器，N-2000双通道色谱工作站，BS 224 S型电子天平。
（2)试剂。
对乙酰氨基酚标准品，咖啡因对照品，异丙安替比林标准品；复方对乙酰氨基酚片II；甲醇。
2.溶液的配制(1)标准储备液的配制。
分别精密量取对乙酰氨基酚标准品（约25mg）、咖啡因标准品（约10mg）、异丙安替比林标准品（约15mg）置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）溶解并稀释到刻度。
其中对乙酰氨基酚的浓度约为0.5mg/ml，咖啡因的浓度约为0.2mg/ml，异丙安替比林的浓度约为0.3mg/ml。
(2)对照液的制备。
精密量取对乙酰氨基酚储备液10ml，咖啡因储备液5ml、异丙安替比林储备液10ml，并分别置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）稀释至刻度，使其浓度分别约为0.1mg/ml、0.02mg/ml、0.06mg/ml，作为对照液。
(3)标准溶液的配制。
分别精密移取三组分的储备液，置于25ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，配成五种不同浓度的标准溶液。
(4)供试品溶液的制备。
取20片复方对乙酰氨基酚片，精密称定（平均片重0.6539g），充分研细，精密量取适量（约相当于对乙酰氨基酚250mg）置50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）30ml，超声提取15min，加混合溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，作为供试液。
HPLC法测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量
5
5. 000
100. 0
100 %
5
4. 995
99. 9
100. 0
0. 1
5
5. 005
100. 1
5
5. 005
100. 1
6
6. 012
100. 2
6
6. 000
100. 0
120 %
6
6. 018
100. 3
100. 2
0. 1
6
6. 018
100. 3
6
6. 018
100. 3
3. 4. 3 取样品三批 (批号 :030201 、030804 、030905) 分别用本 法与原标准方法测定对乙酰氨基酚的含量 ,结果见表 2 。
取对乙酰氨基酚对照品适量 ,用流动相溶解并制成每 1 ml 约含 015 mg 的溶液 ,备用 。 3. 1 干扰实验 取备用液 1 ml 于 10 ml 量瓶中 ,分别加入 1 ml 011 mol·L - 1 氢氧化钠溶液 、1 ml 011 mol·L - 1 盐酸溶液 、 水 、011 mol·L - 1高锰酸钾溶液 1 ml ,于 100 ℃加热 30 min ,放 冷后用流动相稀释至刻度 ,分别进样 20μl 记录色谱图到主峰 保留时间 2 倍 ,从色谱图知对乙酰氨基酚的酸 、碱 、水化及氧 化后破坏的降解物峰与主药峰能很好的分离 ,不干扰主药的 含量测定 。辅料未见色谱峰 。 3. 2 线性关系 精密量取备用液 210 、2125 、215 、2175 、310
从以上结果知本方法测得对乙酰氨基酚含量与原方法结 果基本一致 。 3. 5 回收率测定 取已知含量供试品一批 ,分别按 80 %、 100 %、120 %加入对乙酰氨基酚对照品 ,照含量测定方法测定 含量 ,结果见表 3 。 4 讨论
(完整word版)实验一复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验一 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
一、目的要求
1掌握亚硝酸钠滴定法测定胺类药物含量的基本原理
2熟悉复方制剂含量测定的特点
二、实验原理
复方对乙酰氨基酚片由对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸、咖啡因三种药物组成，根据其结构的不同，可通过亚硝酸钠滴定法测定对乙酰氨基酚的含量.
1、对乙酰氨基酚的测定：
第一步，水解，得到芳香伯胺
第二步，重氮化定量反应: 三、仪器与试药
1恒温水浴锅、酸式滴定管、碱式滴定管、三角瓶
2氯仿、乙醇、酚酞指示剂、0.1mol/L 氢氧化钠液；稀硫酸、溴化钾、含锌碘化钾淀粉指示液、0.1mol/L 亚硝酸钠液
3复方对乙酰氨基酚片（市售品）
四、操作步骤
精密称取上述细粉适量，(约相当于对乙酰氨基酚0.3g ），加稀硫酸40mL ，附回流冷凝管，加热回流1小时，冷却，加水50mL 、盐酸20mL 、溴化钾3g ，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处,用0.1mol/L 亚硝酸钠液迅速滴定,随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水将尖端洗涤，洗液并入溶液中,继续缓缓滴定，至用细玻璃棒蘸取溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上,即显蓝色条痕，停止滴定，5分钟后，再蘸取溶液少许划过一次，如仍显蓝色条痕,即为终点,即得.每1mL 亚硝酸钠液（0.1mol/L ）相当于15。
12mg
的对
NH.COCH 3 OH
+ H 2O 稀H 2SO 4 △
OH NH 2 + CH 3 COOH
OH + NaNO 2 + 2HCl
+ N. Cl - OH + NaCl +2 H O
乙酰氨基酚（C8H9NO2）.
五、计算。
HPLC法测定小儿酚氨咖敏颗粒中对乙酰氨基酚含量
精密量取阴性对照溶液、对照品溶液和供试品溶液按上述 2.1 色谱条件分别进行测定，结果见图 1. 结果表明：供试品溶液在与 对乙酰氨基酚对照品溶液保留时间一致处有相应的色谱峰；阴性 对照溶液在与对乙酰氨基酚对照品溶液保留时间一致处无相应的 色谱峰。本方法的专属性良好。
图 1 对乙酰氨基酚 HPLC 色谱图
试 药 ：对 乙 酰 氨 基 酚 对 照 品（中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 研 究 院） 批号 100018-200408，小儿酚氨咖敏颗粒（金花企业（集团）股份 有限公司西安金花制药厂）（批号 171213）。
试剂：冰醋酸（国药集团化学试剂有限公司，批号：20180425） 分 析 纯，二 乙 胺（国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司，批 号：20141031） 分 析 纯，甲 醇（默 克 公 司，批 号：1837107.623）色 谱 纯，水 为 18.3ΜΩ·CM 的超纯水。
2 方法与结
2.1 色谱条件 色 谱 柱：Diamonsil C18（250×4.6mm,5μm）；流 动 相：1% 醋
酸溶液（用二乙胺调 pH 至 3.7）—甲醇（60：40）；柱温：30℃ ; 流速： 1.0 mL·min-1；检测波长：257nm；进样量：20μl。 2.2 溶液的配制
对照品溶液：精密称取对乙酰氨基酚对照品 40.02mg，置于到 100mL 容量瓶中，加适量的流动相，彻底摇匀使对乙酰氨基酚完 全 溶 解，用 流 动 相 稀 释 至 刻 度，制 成 约 400μg/mL（400.2μg/mL） 的溶液，制成对照品储备液；精密量取 5mL 上述对照品储备液，置 50mL 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
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复方氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含
量测定
摘要：
目的建立复方氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法[1] [2] [3]
的检测方法，方法方法色谱柱采用Aglea Venusll MP C18（4.6*150mm，5μm），流速1.0ml/min，流动相为甲醇：水（40:60），柱温30℃，检测波长为216nm，
进样量为20μl，结果对乙酰氨基酚在300~700μg/ml浓度范围内线性关系良好
（r=0.9998），平均回收率为99.8%，RSD为0.16%（n=9），溶液稳定性、精密度、耐用性试验含量的RSD均小于2.0%。
结论用高效液相色谱法简便准确，专属
性强，重复性好，适用于小儿氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量的检测。
关键词：复方氨酚黄那敏颗粒，对乙酰氨基酚，含量，高效液相色谱法
一、试验方法
色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂（C18,150*4.6mm，5μm）；溶剂：10%
乙醇
流动相：甲醇-水（40:60）；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；波长：216nm；进样量：20μl；
含量对照品溶液（0.5mg/ml）：取对照品约25mg，精密称定，置50ml量瓶，用乙醇溶解（乙醇量控制在最后溶液约含10%乙醇）并用水稀释至刻线，摇匀即得。
供试品溶液：取装量差异项下的内容物，研细，精密称取适量（约相当于对
乙酰氨基酚0.125g）置具塞锥形瓶中，精密加乙醇25ml振摇使溶解，用干燥滤
纸过滤，精密量取续滤液5ml，置50容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供
试品溶液。
空辅：取空白辅料1.875g置具塞锥形瓶中，精密加乙醇25ml振摇使溶解，
用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液5ml，置50容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
二、结果
2.1专属性
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配制溶剂，空辅及对照品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行含量测定。
结果表明溶剂及空辅均不干扰对乙酰氨基酚检测。
2.2进样精密度
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配制对照品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。
结果表明同一溶液连续6次进样，峰面积RSD为0.10%小于1.0%，表明仪器进样精密度良好。
2.3滤膜吸附性
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置对照品与供试品溶液，分别采取未过滤，经0.22μm滤膜过滤，弃去初滤液0.5ml、1ml及2ml，去续滤液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。
结果表明弃去0.5ml、1ml及2ml均不干扰
样品检测，因此，本品含量供试品溶液采用0.22μm滤膜过滤弃去1ml。
4.4溶液稳定性
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置对照品与供试品溶液，分别在室温下
0h，4h，8h，12h，24h，48h进样，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。
结果表明对照品溶液、供试品溶液室温下48h内相对于0h的峰面积变化值
均小于2.0%，对照品溶液、供试品溶液室温下48h内稳定性良好。
4.5线性
线性贮备液：取对照品约100mg，精密称定，置100ml量瓶中，用乙醇溶解
并用水稀释至刻线，摇匀即得，作为线性贮备液。
分别精密量取线性贮备液
3.0ml、
4.0ml、
5.0ml、5.5ml、6ml、7ml分别置10ml量瓶中，用水稀释至刻线，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。
以对乙酰氨基酚峰面积为
纵坐标，以乙酰氨基酚浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果表明对乙酰氨基酚浓
度在300~700μg/ml范围内，线性方程为y=0.5438x-2.899，R为0.9998（n=6），线性关系良好。
4.6准确度
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置空辅及对照品溶液。
回收率溶液：取空白辅料1.875g置具塞锥形瓶中，分别精密称取对乙酰氨
基酚对照品100mg、125mg、150mg，精密加乙醇25ml振摇使溶解，用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液5ml，置50容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
回收率80%、100%、120%溶液各平行配制3份。
精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。
结果表明对乙酰氨基酚平均回收率（n=9）为99.8%，RSD为0.16%。
4.7精密度
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置空辅、对照品、供试品溶液平行配置
6份。
精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。
结果表明对乙酰氨基酚含
量的RSD为0.45%（n=6），精密称取同一批号样品6份，在另外一台高效液相色
谱仪上检测，对乙酰氨基酚含量的RSD为0.63%（n=12），说明精密度良好。
4.8耐用性
溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置空辅、对照品、供试品溶液。
分别在
流速±0.2ml/min，柱温±5℃，波长±2nm，有机相比例变化±2%，相同品牌不
同批号色谱柱，不用品牌色谱柱，各色谱条件下，分别精密量取上述溶液各
20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果表明个条件下，空白溶剂及空辅溶液
均不干扰样品检测，对乙酰氨基酚含量与原条件的RD均小于2%，符合可接受标准，方法的耐用性良好。
[参考文献]
[1] 化学药品地方标准上升国家标准第三册，标准编号WS-10001-(HD-0256)-2002。
[2]2020版《中国药典》第四部通则0512高效液相色谱法。
[3]2020版《中国药典》第四部指导原则9101分析方法验证指导原则。