细胞生物学论文格式
细胞生物学课程论文
无限增殖的小鼠胚胎成纤维细胞系胰高血糖素样免疫反应的建立及特性描述XXX湖北师范学院生命科学学院生物科学专业 1101班 201111XXXXXXX摘要1.背景:Hh信号是一种保守的形态形成通路,它在胚胎发育中扮演至关重要的角色,新兴的证据也支持这一角色在治疗和修复过程以及肿瘤发生中的作用。
胰高血糖素样免疫反应性家族的转录因子(Gli1,2和3)通过调节下游靶基因的表达来调解刺猬形态形成的信号。
我们以前用来自小鼠胰高血糖素样免疫反应性的一系列胚胎成纤维细胞来描述Gli蛋白在Hh目标基因调节中的个体与合作的角色。
2.结果:本文中,我们描述了缺乏单个和多个Gli基因自发地无限增值的老鼠胚胎成纤维(iMEF)细胞系的建立。
这些非无性繁殖系的细胞系概括了独特的配体介导的转录响应早期的MEFs。
然而许多Gli1对目标基因的诱导不起作用,已发现的Gli2空细胞会减弱目标基因的感应而Gli3空细胞表现出提高基底部并促进配体诱导的表达。
在Gli1 - / 2 - / - iMEFs中的目标基因反应严重地降低而Gli2 - / 3 / - iMEFs 不能引发转录反应。
然而,我们发现Gli1 / 2 - / -和Gli2 / 3 - / - iMEFs对Hh配体都表现出强劲的白三烯依赖性的综合迁移,这证明了这种反应不是依赖性的转录。
3.结论:本研究提供了一系列Gli-null iMEFs转录和非转录的Hh反应的基本特征。
向前推移,在Hh 反应程控中，这些细胞系被证明是一套有价值的工具，用来研究独特功能的调控。
背景对于多种多样的生物过程，包括发育模式和器官形成，Hh信号通路是一个至关重要的调控子。
这条路径从上游的Hh配体结合起始，到跨膜转运受体的碎片蛋白(Ptc1)。
这减轻了碎片蛋白介导对Smoothened(Smo)的抑制,引发了复杂的下游信号级联(综述[1]]。
Gli1和Ptc1是保守的Hh目标基因并且其表达水平被认为是路径活动的可靠指标。
细胞生物学论文
细胞生物学概述摘要：细胞生物学是以细胞为研究对象，从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次，（斯。
诺。
美。
A11-走在生物医学的最前沿）以动态的观点，研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。
细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一，主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。
从生命结构层次看，细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间，同它们相互衔接，互相渗透。
英文摘要：Cell biology is to cell as the research object, from the three levels of the overall level of the sub microscopic level, cells, molecular level (,. Connaught. Beauty. A11- in the forefront of biomedical) from the dynamic point of view, the structure and function of cells, cell and organelle of the life history and various life activities of the discipline. Cell biology is one of the frontier branch of modern life science, mainly is the basic rule to study cell from different hierarchy of life activities of cells. From the life structure and arrangement, and developmental biology is located between cell biology molecular biology, their mutual connection, mutual penetration.关键字：细胞学说显微技术遗传物质前言：细胞是生命的基本单位，细胞的特殊性决定了个体的特殊性，因此，对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。
细胞生物学论文.
线粒体病的研究论文12级生工一班蒋超（1202011023）【摘要】线粒体产生细胞生存所必需的能量，是细胞质内带有遗传信息的细胞器。
近年来，线粒体机能异常与人类疾病的关系逐渐受到人们关注，如线粒体脑肌病、线粒体心肌病、Parkinson病、Alzhcirner病等疾病相关。
广义的线粒体病是指以线粒体异常为主要病因的一大类疾病。
除线粒体基因组缺陷直接导致的疾病外，编码线粒体蛋白的核DNA突变也可引起线粒体病，但这种疾病变现为孟德尔遗传方式。
目前还发现有一类线粒体疾病，可能涉及到mtDNA与nDNA的共同改变，认为是基因组间交流的通讯缺陷。
通常所指的线粒体疾病为狭义的概念，即线粒体DNA突变所指的线粒体功能异常。
一、线粒体的功能1.线粒体最主要的功能是氧化磷酸化氧化代谢产生的能量转化为电化学质子梯度，结果产出高能磷酸键生成ATP。
在有氧条件下，电子从NADH传递到氧，获得的能量转移被用作两个线粒体膜之间质子泵。
质子泵经电子向链下部传递用于能量释放并产生PH梯度和近60mv的电子梯度穿过线粒体内膜，复合物V(ATP)合成酶用这种梯度能量产生ATP。
在氧化磷酸化期间，线粒体产生ROS，线粒体超氧化物歧化酶在去除反应性氧中起重要作用。
ROS能损害蛋白质和核酸，如果不及时去除可引起线粒体和细胞损害。
2.线粒体在细胞凋亡中起重要作用多数凋亡前刺激需要线粒体外膜通透性，引起线粒体内膜释放蛋白质到胞浆。
如细胞色素C和凋亡早期因子，这些因子释放的关键作用是通道开放（线粒体传递孔），孔的开放和凋亡活化与线粒体蛋白质降解相关。
在此条件下凋亡的过度活化，线粒体氧化磷酸化与Leber遗传性视神经中细胞死亡有关。
3.线粒体在某些代谢通路中也起基本作用由于丙酮酸脱氢酶（PDH）引起丙酮酸氧化发生与线粒体内部，并提供乙酰辅酶A来燃烧Krebs循环。
对Krebs循环、脂肪酸氧化、酮氧化和支链丙酮酸代谢酶全包含在线粒体内，尿素循环的某些步骤也位于线粒体内。
中国细胞生物学学报 endnote格式
我国细胞生物学学报是一本非常有影响力的学术期刊，它涵盖了细胞生物学领域的广泛研究内容，包括细胞结构与功能、细胞信号传导、细胞生理学、细胞病理学等方面。
在这篇文章中，我们将深入探讨我国细胞生物学学报的endnote格式以及其在学术研究中的重要性。
1. endnote格式的作用endnote格式在学术论文写作中扮演着非常重要的角色。
它可以帮助研究人员对文献进行管理、引用和整理，使得论文的引用部分更加规范和准确。
endnote格式也可以提高学术研究的可信度和可追溯性，为读者和评审人员提供方便的文献查阅途径。
2. 我国细胞生物学学报的endnote格式要求我国细胞生物学学报在提交论文时，要求作者按照一定的endnote格式来进行文献引用。
这些要求包括文献引用的顺序、格式和标点等方面，都需要严格遵守。
在撰写论文时，作者必须认真阅读期刊的投稿指南，并按照规定的endnote格式来编写和提交论文。
3. endnote格式的应用举例举例说明我国细胞生物学学报的endnote格式在学术研究中的应用。
一位细胞生物学研究者在撰写论文时，需要引用大量的文献来支撑自己的观点和研究成果。
通过使用规范的endnote格式，作者可以方便地管理和引用文献，确保引用的准确性和规范性。
这对于提高论文的学术水平和可信度非常重要。
4. 个人观点和理解在我看来，我国细胞生物学学报的endnote格式不仅是一项规范要求，更是对学术严谨性和规范性的体现。
它能够帮助研究人员更好地进行文献管理和引用，为学术研究提供了便利。
遵守规范的endnote格式也是作者对期刊和读者的尊重，展现了学术研究的严谨态度和承诺。
总结通过本文的探讨，我们对我国细胞生物学学报的endnote格式有了更加深入的了解。
这不仅是一项规范要求，更是对学术研究严谨性和规范性的体现。
合理使用endnote格式，对于提高论文的可信度和规范性非常重要，也是学术研究中不可或缺的一部分。
希望本文的内容能够帮助读者更好地理解和应用endnote格式，提高学术研究的质量和水平。
细胞生物学综述论文
细胞生物学综述论文细胞程序性死亡的研究进展【abstract】：细胞程序性死亡( programmed ce ll death, PCD)，是指为维护内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序性的死亡。
它是动植物生长发育过程中的一种普遍现象。
由于细胞程序性死亡与人类健康和某些重大疾病有密切关系而成为生物工程研究的热门课题。
今年来这一领域取得了令人瞩目的成果。
本文主要介绍了PCD的历史发展，并简略的说明了PCD的发展现状。
【key words】：PCD 历史进程研究进展程序性细胞死亡（programmed cell death，PCD ）是一种由基因控制的细胞自杀行为。
PCD 与生物体组织器官发育、机体正常生理功能的维持，某些疾病的发生及细胞恶变等过程密切相关，是近年来生命科学领域的热门研究方向。
1．历史发展：1951 年，Cluchsman 在研究两栖动物的变态现象时首先提出PCD 的最早定义。
1972 年，Kerr.J.F 等在研究组织变化时又沿用了细胞凋亡一词是指细胞受到生理或病理刺激发生的死亡。
细胞的这种死亡类似树叶或花的自然凋落一样，凋亡的细胞散在于正常组织细胞中，无炎症反应。
死亡的细胞碎片很快被巨影响噬细胞或邻近细胞清除，不影响其他细胞的正常功能。
1985年，科斯迈耶及其同事与另两个研究小组一起,发现定位于称为滤泡的Β一细胞淋巴瘤的人类癌症的断裂染色体位点的致癌基因。
Β一细胞产生两类主要白血细胞的一类。
这一类白血细胞负责合成称为抗体的免疫蛋白。
该基因叫做bcl-2，似乎编码一种阻抑程序细胞死亡的拯救者蛋白。
虽然这种基因的正常功能仍不清楚, 但它可以保护增生的祖先细胞和正常长寿命细胞。
例如, 某些长寿命Β一细胞提供免疫系统的记忆反应, 使人体得以对以前遇到过的外源物质迅速发生反应。
但是, 如果bcl-2不适当地存留, 细胞就会在应死时而不死, 引起标志癌症的失控的细胞增生。
1993年，华盛顿大学医学院的尤金·约翰逊（Eugene M.Johnson）与其同事斯坦利·科斯迈·科斯迈耶（Stanley J.korsmeyer）、丹尼斯·乔伊（Dennis W.choi）一起在关于细胞死亡的一次专题学术讨论会上发言“细胞在恰当时候、恰当地方死亡是生理上适宜的。
细胞生物学课程论文
细胞凋亡的机理与应用摘要：细胞凋亡是一种由基因调控的细胞主动死亡过程，是机体生长发育、细胞分化、生理及病理性死亡的重要机制。
线粒体、肿瘤坏死因子、受体基因DNA降解、凋亡因子、内质网以及缺氧条件都会导致细胞凋亡。
细胞选择不同的死亡途径，往往由导致细胞死亡的起始原因所决定。
细胞凋亡有害也有利，如会引起肿瘤、自身免疫疾病等等。
细胞凋亡在机体组织改建过程中起着不可替代的作用。
细胞凋亡是机体的一种基本生理机制，贯穿机体整个生命活动过程，为机体正常细胞的更新和异常细胞的清除提供了手段，对维持个体正常生理过程和功能表达具重大生物学意义。
细胞凋亡近年来已成为细胞生物学与分子生物学的研究热点，对细胞凋亡机理的深入探讨可对一些疾病包括癌症提供新的治疗方法和途径，目前药物开发多是从病理过程中的分子机制、正常生理过程起作用的因子来寻找新药。
关键词：细胞凋亡；基因调控；线粒体；肿瘤坏死因子；DNA降解细胞凋亡（apoptosis，APO）是一种由基因调控的细胞主动死亡过程，是机体生长发育、细胞分化、生理及病理性死亡的重要机制［1］。
20 世纪90 年代以来，细胞凋亡机制逐渐成为生物学及生物医学的研究热点，以下就近几年来细胞凋亡机制的研究综述如下。
从形态学观察, 细胞凋亡的变化是多阶段的, 细胞凋亡往往涉及单个细胞, 即便是一小部分细胞也是非同步发生的。
首先出现的是细胞体积缩小, 胞间连接消失, 与周围的细胞脱离, 核质浓缩, 核膜核仁破碎; 胞膜有小泡状形成,胞膜结构仍然完整, 最终可将凋亡细胞分割为几个凋亡小体。
1、细胞凋亡机制长期以来，人们一直将细胞线粒体视作为提供能量的细胞器，而忽略其在细胞凋亡中的作用。
随着细胞凋亡研究的深入，发现某些与凋亡相关的基因产物（蛋白质或酶）均可定位于细胞线粒体，从而使线粒体与细胞凋亡之间相关性的研究成为当今生命科学研究的前沿课题。
［3］线粒体被选择性的从细胞中清除在细胞凋亡中，这种凋亡甚至没有caspase 的活化[4]。
细胞生物学的论文
肿瘤细胞和疾病药物治疗的相关研究学生姓名学院药学院指导老师专业药学学号2012-12-3摘要目前，肿瘤尤其是恶性肿瘤已成为威胁人类健康的最严重疾病之一，采用化疗、放疗、手术、生物治疗和中西医结合等方法是治疗肿瘤的最有效手段。
其中，新型抗肿瘤药的应用，在提高肿瘤患者生存质量、延长生存时间、延缓疾病的发展等方面发挥了巨大作用。
本文分别从肿瘤特征、相关信号通路、相关基因、表观遗传修饰、肿瘤干细胞、肿瘤微环境几个方面综述了肿瘤细胞的相关研究进展，以期对肿瘤与细胞凋亡有个较全面的认识。
关键词：抗肿瘤药物发展细胞凋亡肿瘤细胞癌基因肿瘤干细胞AbstractAt present, the tumor especially malignant tumor has become a threat to the health of human being is the most serious one of disease, chemotherapy, radiotherapy, surgery, biological treatment of combination of TCM and western medicine and methods of treatment of cancer is the most effective means. Among them, the new antineoplastic applications, to improve the living quality of patients with cancer, prolong survival time, delay the disease development has played a tremendous role. This paper from the tumor characteristics, related signal path, related genes, apparent genetic modification, tumor stem cell, tumor microenvironment were reviewed several aspects of tumor cells related research progress, in order to tumor cell apoptosis and have a more comprehensive understanding.Keywords: antitumor drug research and development apoptosis tumor cell signal path cancer gene microenvironment cancer stem cells引言动物体内因分裂调节失控而无限增殖的细胞称为肿瘤细胞（tumor cell）。
细胞生物学论文
细胞生物学论文细胞生物学是现代生命科学领域的重要分支之一，研究细胞的结构、功能和生理过程，以及细胞与细胞之间的相互作用。
本论文将探讨细胞生物学的一些重要概念和研究进展，包括细胞结构、细胞器功能、细胞分裂、细胞信号传导等方面。
一、细胞结构细胞是生命的基本单位，由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
细胞膜是细胞的外层包裹，承担了细胞与外界环境之间的交流和物质交换。
细胞质是细胞膜内的胞浆，包含了各种细胞器，如内质网、高尔基体、线粒体、溶酶体等。
细胞核是细胞内的重要组成部分，含有遗传物质DNA，控制着细胞的生长和分裂。
二、细胞器功能细胞器是细胞内的各种功能区域，各有自己独特的功能。
内质网是蛋白质合成的主要场所，通过它可以将蛋白质合成、折叠和修饰后运送到其他细胞器或细胞膜上。
高尔基体则负责蛋白质的分泌和细胞外物质的转运。
线粒体是细胞内主要的能量合成器官，通过氧化磷酸化产生大量的ATP分子。
溶酶体则参与细胞内废物的降解和清除。
三、细胞分裂细胞分裂是细胞生物学中的重要过程，负责细胞的繁殖和复制。
细胞分裂包括有丝分裂和减数分裂两种形式。
有丝分裂是指细胞按照一定的步骤和顺序完成DNA复制、纺锤体形成、染色体分离和细胞质分裂等过程。
减数分裂则是在有丝分裂的基础上，再进行一次染色体分离和细胞质分裂，最终得到生殖细胞。
四、细胞信号传导细胞信号传导是细胞之间相互沟通和协调的重要方式。
细胞通过细胞膜上的受体感知外界信号，并将其转化为细胞内的化学信号。
这些信号通过信号转导通路传递到细胞核或其他细胞器，调节细胞的生理活动。
信号通路可以分为多种类型，如激活型的酶级联反应、细胞表面受体介导的信号转导和细胞间的细胞因子介导的信号传递。
总结：细胞生物学是一门重要的学科，研究细胞的结构、功能和生理过程，以及细胞与细胞之间的相互作用。
本论文对细胞生物学的几个重要方面进行了讨论，包括细胞结构、细胞器功能、细胞分裂和细胞信号传导。
这些内容对于深入理解细胞生物学的基本原理和研究进展具有重要的意义，也为进一步探索细胞的奥秘和应用于医学研究提供了基础。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
细胞生物学
课程论文
题目鸡胚成纤维细胞原代培养及应用
班别生物技术101班学号 10114040132
姓名林海州
成绩
鸡胚成纤维细胞原代培养及应用
摘要:原代培养是指在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的组织细胞生存、生长和传代,并维持原
有组织细胞的结构和功能特性。
鸡胚成纤维细胞具有相对容易获得、增殖能力强、适应性强、良好的耐受性、
性状比较稳定等特点,使得其被广泛地应用于分子和细胞生物学研究的许多方面。
论文综述了近年来有关
鸡胚成纤维细胞的培养技术,如鸡胚的取材、细胞的分离、纯化和培养,同时介绍了应用进展和未来研究方
向。
关键词:鸡胚成纤维细胞;原代培养;分离;纯化
1.前言
原代细胞培养因具有细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大变化,具备二倍体的遗传性、来源方便等优点而广泛应用于病毒学、细胞分化、药物测试等试验中。
在禽类原代细胞培养中,鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast , CEF) 得到普遍应用。
CEF 的培养是在一定的条件下,在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的成纤维组织细胞生存、生长和传代,并维持原有组织细胞的结构和功能特性。
早年的组织培养工作者,如Carrel 等曾用鸡胚做过大量研究工作。
与其他细胞相比,CEF 相对容易获得,而且增殖能力强,适应性强,具有良好的耐受性,性状比较稳定,不易发生转化。
正是具备以上的特点,使得其被广泛地应用于分子和细胞生物学的研究的许多方面。
2 鸡胚成纤维细胞的制备
2. 1 取材
CEF 细胞的制备一般选用9 日龄～11 日龄的SPF 鸡胚,鸡胚日龄不宜过大,否则剪碎组织时候较为困难,而且杂细胞也会较多。
可参考的方法是,分别用碘酒和酒精棉由鸡
胚中央向四周擦拭消毒,然后放入超净台,将有气室的部位朝上,小心地用无菌镊子磕破蛋壳,沿气室边缘夹掉蛋壳,注意不让蛋壳碎屑落入蛋内,换用新的无菌镊子揭开尿囊绒毛膜,再用弯头镊子深入胚内夹住鸡胚颈部取出,放入平皿中,将取出的鸡胚去头、四肢、内脏,放入一小烧杯中,然后用眼科手术剪刀仔细将组织反复剪碎,直到成1 mm3左右的
小块,再用HBSS 清洗3 遍,至组织块发白为止。
2. 2 分离
在培养液中1 mm3 的鸡胚成纤维细胞组织块,仅有少量处于周边的细胞可能生存
和生长。
若要获得大量生长良好的成纤维细胞,须将组织分散开,使细胞解离出来。
目前,分离CEF 的方法主要是以胰蛋白酶和胶原酶的酶消化法为主。
胰蛋白酶适用于消化细胞间质较少的软组织(如胚胎、上皮、肝、肾等组织) ,其消化效果主要与p H、温度、胰蛋白酶的浓度、组织块的大小和硬度有关,钙、镁离子和血清均对该酶有抑制作用。
胶原酶适用于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等,在钙、镁离子和血清存在的情况下仍具有活性,因此使用该酶消化后需要清洗细胞。
相对于胰蛋白酶,胶原酶的价格昂贵,增加了试验成本,所以研究中胰蛋白酶应用最为广泛。
可参考的分离方法是,将剪碎的组织块移入广口瓶中,加入适量的2. 5 mg/ mL 胰酶,于37 ℃水浴中消化30 min 左右,每隔5 min 振荡1 次,使细胞消化均匀。
当组织块变得蓬松透明时,吸弃消化液,用HB2SS 洗2 遍,终止消化。
应严格控制消化时间,及时终止消化作用,以免过量消化对细胞的损伤。
研究中应结合具体情况而定,如吕利奇等结合胰酶连续消化法与玻璃珠分散法制备CEF
细胞,并且认为该方法是制备CEF 细胞的最佳方法。
2. 3 纯化
机体内的细胞都混杂生长,因而从体内取得的培养材料所做的原代培养,绝大多数都呈混合生长,主要表现为两大类,即上皮样细胞和成纤维样细胞。
纯化方法分为人工纯化和自然纯化,人工纯化包括酶消化法、机械划除法、反复贴壁法、克隆法、流式细胞仪分离法等。
应视具体情况,选择合适的纯化成纤维细胞的时机和方法。
当成纤维细胞比例较大,上皮样细胞生长缓慢、较少时,就不需要做清除处理,通常传代之后可逐渐自然清除上
皮样细胞。
成纤维细胞与上皮样细胞生长都比较旺盛、且比例相当时,应尽量等培养物长成单层后处理。
这样成纤维细胞数目较多,去除上皮样细胞的成功率较高。
研究中多联合运用酶消化法和反复贴壁法来达到纯化成纤维细胞的目的。
由于上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶耐受性不同,在消化培养细胞时,常常是成纤维细胞先脱壁,而且传代后贴壁快,附着快,而上皮细胞在短时间内不能附着或附着不稳定,
稍振动即浮起,需要生长基质如胶原或其他细胞外基质成分等的支持,在原代培养早期此差别尤为明显,因此,利用这个差别,经酶消化法和反复贴壁法处理2 代～3 代后,能够完全纯化成纤维细胞。
可参考方法如下:将2. 5 mg/ mL 胰蛋白酶注入培养瓶2 次,稍加摇动,让胰蛋白酶流过所有细胞,吸出消化液,将培养瓶放在倒置显微镜下观察,发现纤维样细胞变圆,部分脱壁,立即加入有血清的培养液终止消化,用弯头吸管轻轻吹打纤维样细胞生长区域,将培养瓶中的液体吸出分装于准备好的培养瓶中,放入CO2 培养箱中培养。
3 鸡胚成纤维细胞的培养
CEF 的培养相对较为容易。
首先是培养器皿的选择,由于CEF 贴壁性较好,其对培养器皿的选择没有严格的要求,目前大多数研究者选用塑料、玻璃培养皿或培养瓶。
为了增加贴壁细胞的表面积,张立等认为胶原型微载体(如GT22 、Cytodex23)是CEF 最适合的微载体。
其次是培养基和培养介质的选择,用于CEF 的常用培养液有乳汉液、199 培养液及DMEM 培养液等。
多数研究者一般使用含有血清的DMEM 培养基。
血清中的生长因子对于成纤维细胞有较强的促有丝分裂作用,并可通过诱导终末分化抑制上皮细胞的增殖。
研究中添加的血清达到100 mL/ L 以上,对于有效抑制上皮细胞的增殖具有重要作用。
另外,不同来源的血清,在培养时虽然质量分级一样,但细胞生长情况也会有显著差异,因此在研究同一细胞时尽量使用同一批次的相同等级血清。
再者是培养条件的选择,动物细胞一般适宜的p H 范围为7. 2～7. 4 ,当p H 偏低或偏高时均会影响细胞的正常生长,而向培养基中加入NaHCO3 或HEPEs 能有效起到平衡的p H 的作用。
研究中大多数人用37 ℃,体积分数为5 %的CO2 培养箱中培养CEF 细胞,但也有用38. 5 ℃或39 ℃的培养温度。
4 鸡胚成纤维细胞的应用
CEF 细胞良好的耐受性使之易于进行从基因转染到微注射等较多领域的研究,还被广泛应用于病毒学领域的相关研究,同时也是疫苗生产的一种重要的细胞资源。
现在它被用来生产各种鸡的疫苗,如传染性法氏囊病、马立克病、新城疫疫苗等,也被用来表达一些基因工程产物。
CEF 的原代培养在分子生物学、细胞学、遗传学、免疫学、肿瘤学及细胞工程学等领域,已发展成为一门重要的生物技术,并取得显著成就。
CEF 之所以能够增殖病毒是因为细胞上有病毒受体。
然而Brandt M 等研究表明, IBDV 超强毒株无CEF 细胞受体, 在其传代致弱过程中,VP2 基因的几处核苷酸改变导致其细胞嗜性的改变,然而致弱毒株与CEF 如何作用及病毒的CEF受体还未见相关报道。
CEF 细胞cDNA 文库的成功构建为筛选和研究CEF 上病毒受体分子奠定了基础,同时也为研究其他适应于CEF 上生长的病毒提供可靠的试验基础,而且文库也可用于CEF 相关功能蛋白的研究。
在分子生物学领域,陈学辉等用RNA 干扰(RNAi) 试验成功阻断了CEF 的32磷酸甘油醛脱氢酶基因( GAPDH) 的表达,傅安静等用脂质体转染试剂转染化学合成的GFP2siR2NA ,成功地干涉了腺病毒载体介导的GFP 基因在CEF 的表达,这为利用RNAi 技术,通过阻断基因表达而研究病毒和鸡的基因功能奠定了基础;姜世金等利用CEF 细胞来表达马立克病病毒(MDV) 的pp38 基因; Ravindra P V 等利用CEF 接种新城疫病毒(NDV) 后,通过检测发现NDV 的HN 蛋白引起了CEF 的细胞凋亡。
另外,高喜梅等利用CEF 接种MDV 后,用微卫星标记技术对CEF 的部分染色体上微卫星不稳定性进行了研究;Sharma A等的研究结果表明,CEF 也可用于细胞毒性的检测。
万学琴等采用低血清法培养CEF 至单层后,以人白蛋白代替小牛血清培养的NDV 的效价和活性符合人用疫苗要求。
总之,随着CEF 培养方法和技术的成熟,其也将会被应用于更广更深的研究领域。
5 展望
综上所述,鸡CEF 是一类较易获得的细胞,随着培养原理与方法的日臻完善,其大规模培养技术趋于成熟,以及相应细胞系的建立,将极大降低在诸多领域的研究困难,将会
为研究一些动物和人类疾病发挥着重要作用。
研究表明,CEF 的细胞受体和细胞嗜性决定病毒是否可以增殖。
因此,病毒与CEF 如何作用及病毒的CEF 受体也成为未来的研究方向。