顺铂对小鼠耳蜗Calpain表达的影响及机制

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抗癌药顺铂对小鼠的耳、肾和肝毒性及其机制的研究

抗癌药顺铂对小鼠的耳、肾和肝毒性及其机制的研究廖英俊;汤浩;金亚平【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2004(20)1【摘要】目的以小鼠为实验对象建立抗癌药顺铂毒性研究的实验动物模型,并探讨其毒性作用产生的可能机制,为进一步对顺铂毒性作用的防治研究提供科学参考资料.方法选择♂昆明种小鼠,经腹腔连续注射顺铂5 d,观察不同剂量顺铂对小鼠的听力、肾脏和肝脏的毒性作用及肝和肾组织抗氧化系统各指标的变化.结果顺铂可引起小鼠体重明显下降、全频率的听力阈值升高,肝和肾的脏器系数、血清尿素氮(BUN)含量和丙氨酸氨基转换酶(ALT)活性等指标的异常,并呈剂量依赖关系.此外,顺铂还可引起肝和肾抗氧化及氧化损伤指标的异常.结论 3.0～4.0 mg*kg-1 b.w 的顺铂可引起小鼠出现明显的听力、肾和肝组织的损伤.氧化损伤是抗癌药顺铂产生其毒性作用的可能机制之一,但对于不同的脏器和在不同的给药时期,其发挥的作用不同.【总页数】4页(P82-85)【作者】廖英俊;汤浩;金亚平【作者单位】中国医科大学基础医学院生理教研室,沈阳,110001;中国医科大学基础医学院生理教研室,沈阳,110001;中国医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室,沈阳,110001【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.47;R322.61;R322.92;R979.19【相关文献】1.抗癌药顺铂耳毒性机制及防治方法的研究进展 [J], 廖英俊;汤浩2.维生素E对顺铂所致的小鼠肾毒性的影响及其机制研究 [J], 张林;刘伏友;彭佑铭;李大伟;曾妮;武蓉;刘沧桑3.富氢盐水拮抗顺铂对小鼠耳毒性的作用研究 [J], 卢燕;林信衡;蔡友铮;徐浩;王宏波;吴小波;林昶;钟秀荣;孙丽清4.熊果酸对顺铂所致小鼠耳毒性的防护作用研究 [J], 孙美玲;沈天骄;邸阳;田原;王爱梅5.艾叶挥发油致小鼠急性肝毒性作用及其机制研究 [J], 刘红杰;李天昊;詹莎;陈亮;陈灵修;唐树杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用

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ｂｖｎｅｕａｂｍｉ．Ｔｅｒｍｅｈｌｈｄｍｉｅｏｉｅｓｒｍｌｕｎｔａｔｙｒｏａｎ
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ｔｉｉｙｉｔｏ，ｎｏｉｅｔｇｔｈｅｅｆｃｆｃｓａｉｎｉｐａｒｅｎｐｏｏｉｆｃｃｅｒｏｘｃｔｎｖｉｒａｄｔｎｖｓｉａｅｔｆｅｔｏｉｐｌｔｎｏｍｉｍｎｔａｄａｐｔｓｓｏｏｈｌａｈａｒｃｌｓＭｅｈｄＴｈｏｈｅｒｂａｉａｅｂｒｎｓｉｏａｅｒｍｉｅａｏｔｔ１ｄｙ３ａｉｅｌ．ｔｏｓｅｃｃｌａｓｌｒｍｍａｅｗａｓｌｔｄｆｏｍｃｔｐｓｎａａａｎｄ
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南昌大学学报（学版）２源自１第５医００年０卷第８期
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顺铂对小鼠耳蜗毒性及caspase_3表达的影响_孙伟霞

第30卷第5期2009年10月西安交通大学学报(医学版)Jour nal of Xi an Jiaotong University (Medical Scie nces )Vol .30No .5Oct .2009顺铂对小鼠耳蜗毒性及caspase -3表达的影响孙伟霞1,王爱梅1,包翠芬2,惠丽杰1,常志杰1(1.辽宁医学院生理学教研室;2.辽宁医学院科学实验中心,辽宁锦州　121001)摘要:目的　建立小鼠顺铂耳毒性模型,研究不同剂量顺铂对小鼠耳蜗毒性及caspa se -3表达的影响。

方法　69只昆明小鼠随机分成对照组、顺铂2.5mg /(kg ·d )组、顺铂3.5mg /(kg ·d )组和顺铂4.5mg /(kg ·d )组,腹腔连续注射5d 。

通过听脑干反应(audito ry brainstem respo nse ,A BR )测试观察用药前后小鼠听力的变化;应用免疫组织化学Envision 法检测半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase -3)在耳蜗中的表达。

结果　不同剂量顺铂组小鼠体重和听力明显下降,与对照组比较均有显著性差异(P <0.05,P <0.01);并且随着顺铂给药剂量的增加,小鼠耳蜗中caspase -3表达亦明显增强。

结论　应用顺铂可建立小鼠耳毒性模型;caspase -3参与了顺铂致小鼠耳蜗细胞损伤的过程,提示内耳细胞凋亡可能是顺铂的耳毒性机制之一。

关键词:顺铂;耳蜗;caspase -3;免疫组织化学中图分类号:R764.43 文献标志码:A 文章编号:1671-8259(2009)05-0616-04Effect of cisplatin on ototoxicity and expression ofcaspase -3in mouse cochleaSUN Wei -xia 1,WANG Ai -mei 1,BAO Cui -fen 2,H UI Li -jie 1,CH ANG Zhi -jie1(1.Department of Physiology ;2.Scientific Labo rato rial Cente r ,Liaoning M edical Co lleg e ,Jinzhou 121001,China )ABSTRAC T :Objective To establi sh a m ice m odel of cispla tin -induce d ototoxicity and to investigate the ef fectof cisplatin on the expression of caspase -3in mouse cochle a .Methods Totally 69Kunm ing mice were r andomly divide d into contr ol gr oup ,cisplatin 2.5mg /(kg ·d )group ,c i splatin 3.5mg /(kg ·d )gr oup and cisplatin 4.5mg /(kg ·d )group .Mice wer e injected intr aper itoneally f or 5days .Auditor y br ainstem r esponse (ABR )was m easure d to obser ve the change of he aring .Envi sion me thod of immunohistochemistr y was applie d to de tect the expr ession of caspase -3in cochle a .Results　The we igh t and hear ing of mice in dif fer ent dose cisplatin groups were decline dsignif icantly as com pa red with those in contr ol gr oup (P <0.05,P <0.01),and the expression of caspase -3was gr eater r emar kably with m or e cisplatin injected .Conclusion A mouse model of cisplatin -induced ototoxicity could be establi shed .C aspase -3is involved in cisplatin -induced cochlear injur y .I t suggests that apoptosis m ay be one of the mechanisms of cispla tin ototoxicity .KEY WORDS :cisplatin ;cochle a ;caspase -3;immunohistochem istr y 收稿日期:2008-11-05 修回日期:2009-01-06通讯作者:王爱梅,教授,硕士研究生导师.E -mail :aim eiw ang @yah oo .com .cn作者简介:孙伟霞(1981-),女(汉族),在读硕士研究生.研究方向:听觉生理与病理.E -m ail :soffeesw x @ 顺铂(cisplatin ,CDDP )作为一种抗癌药,被广泛用于治疗各种恶性肿瘤。

顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡及槲皮素保护作用的机制研究

顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡及槲皮素保护作用的机制研究顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡及槲皮素保护作用的机制研究引言：顺铂是一种广泛应用于临床的抗肿瘤药物，其通过与DNA结合，抑制肿瘤细胞的分裂和增殖。

然而，顺铂也对健康细胞产生毒性作用，其中包括耳蜗中的血管纹周细胞。

近年来研究发现，槲皮素作为一种天然的抗氧化剂和抗炎物质，能够对顺铂产生的耳蜗损伤具有保护作用。

本研究旨在探究顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡的机制，并研究槲皮素在保护耳蜗细胞方面的作用机制。

方法：1.细胞培养：使用小鼠耳蜗血管纹周细胞株，采用细胞培养技术进行培养。

2.顺铂处理：将耳蜗血管纹周细胞分为对照组和顺铂处理组，顺铂处理组细胞暴露在一定浓度的顺铂中，对照组细胞不受任何处理。

3.细胞凋亡检测：采用细胞凋亡检测试剂盒，通过流式细胞仪分析细胞的凋亡率。

4.槲皮素处理：将顺铂处理组的细胞分为槲皮素处理组和非处理组，槲皮素处理组的细胞暴露在一定浓度的槲皮素中，非处理组细胞不受任何处理。

5.细胞活性检测：采用MTT法测定细胞的活性。

结果：1.顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡：与对照组相比，顺铂处理组细胞的凋亡率显著升高。

2.槲皮素对顺铂诱导的细胞凋亡具有保护作用：与顺铂处理组相比，槲皮素处理组细胞的凋亡率显著降低。

3.槲皮素能够提高耳蜗血管纹周细胞的活性：与非处理组相比，槲皮素处理组细胞的活性显著增强。

讨论：本研究结果表明，顺铂诱导了耳蜗血管纹周细胞的凋亡，并且槲皮素具有保护细胞免受顺铂损伤的作用。

这可能是由于槲皮素的抗氧化和抗炎性活性，能够减少顺铂产生的氧化应激和炎症反应。

此外，槲皮素还能够提升细胞的活力，对细胞的修复和再生起到积极的促进作用。

因此，槲皮素可能是一种潜在的耳蜗保护剂。

结论：本研究证实了顺铂对耳蜗血管纹周细胞的凋亡作用，并发现槲皮素对顺铂产生的损伤具有保护作用。

这为寻找更多可能的耳蜗保护剂提供了理论依据，并为临床预防顺铂耳毒性提供了借鉴。

顺铂通过Cav1.2诱导耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的研究

顺铂通过Cav1.2诱导耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的研究顺铂通过Cav1.2诱导耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的研究引言：顺铂（Cisplatin）是一种广泛应用于临床癌症治疗的铂类化合物。

尽管其抗肿瘤效果显著，但顺铂同时也对机体产生诸多不良作用，特别是对耳蜗中的螺旋神经节神经元产生损伤。

然而，关于顺铂对螺旋神经节神经元凋亡的机制研究仍然不完善。

本文旨在通过研究顺铂通过Cav1.2促进耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的作用机制，为进一步预防和治疗顺铂耳毒性提供实验依据。

方法：本研究选用体外培养的耳蜗螺旋神经节神经元作为研究对象，通过顺铂处理不同浓度（0.1μM，1μM，10μM）的细胞，合适时间后用Annexin V/PI染色技术，流式细胞术观察细胞凋亡情况。

同时，通过Western blot和免疫荧光染色技术检测细胞凋亡相关蛋白（caspase-3、Bcl-2和Bax）的表达水平。

此外，利用siRNA靶向下调Cav1.2的表达，观察其对顺铂诱导的神经元凋亡的影响。

结果：实验结果显示，与对照组相比，顺铂处理后的细胞明显出现凋亡，表现为Annexin V阳性/PI阳性细胞的显著增加。

此外，顺铂处理后caspase-3的表达水平增加，而Bcl-2/Bax比值减少，表明细胞凋亡通路被激活。

进一步的免疫荧光染色结果也证实了这种观察结果。

值得注意的是，在Cav1.2表达受抑制的耳蜗螺旋神经节神经元中，顺铂诱导的细胞凋亡明显减少，相关凋亡蛋白的表达也有所下降。

讨论：本研究结果表明，顺铂通过Cav1.2通道参与了耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的调控。

Cav1.2通道的激活可能导致钙离子内流增加，从而引起线粒体损伤和细胞凋亡。

我们的研究发现，抑制Cav1.2通道的表达可以减轻顺铂诱导的细胞凋亡，这为未来通过调控Cav1.2通道来减轻顺铂耳毒性提供了新的治疗策略。

结论：顺铂通过Cav1.2通道参与了耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的机制。

抑制Cav1.2通道的表达可以减轻顺铂诱导的细胞凋亡。

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响张立伟;刘芳芳;于利;王爱梅【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2016(024)002【摘要】Objective To investigate the effects of cisplatin on the expressionof calpain in mouse cochlear hair cells in vitro ,and to explore the mechanism of cisplatin-induced apoptosis in mouse cochlear haircells .Meth‐ods A total of 600 cochlear basilar membranes isolated from Kunming mice at postnatal day 3 were cultured for 24 hours ,then randomly divided into control group and 3 cisplatin groups (4 μg/ml ,8μg/ml and 16 μg/ml) .Each group contained 150 basilar membranes .Four groups were continually cultured for another 24 hours .Hoechst 33258 staining was used to detect the apoptosis of cochlear haircell .Immunofluorescent staining and Western blot were carried out forde tecting the expressions of calpain 1 (μ-calpain) and calpain 2 (m-calpain) in mouse cochlear hair cells .Results The percent of apoptotic hair cells in the three cisplatin groups (15 .63% ± 0 .20% ,38 .40% ± 2 .64% and 64 .24% ± 0 .05% ,respectively) was g reater than that of in the control group (5 .55% ± 0 .12% ) , showing a clear dose-response relationship(P<0 .01) .Furthermore ,the expressions of μ -calpain and m -cal‐pain in different cisplatin groups were increased ,and m -calpain expression was great remarkably with increased concentration of cisplatin(P<0 .01) .Conclusion Our results suggest that cisplatin can induce the apoptosis in mouse cochlear hair cells by regulating calpain pathway .This may play a role in the cisplatin-induced ototoxicity .%目的：观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶（calpain ）表达的影响，探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。

顺铂腹腔注射对小鼠卵巢相关基因表达谱的影响

北京１０００７８）
摘要：目的：应用基因芯片技术研究顺铂（Ｃｌｓｐｌａｔｉｎ）腹腔注射给药对小鼠卵巢相关基因表达的影响，探讨顺铂对卵巢功能损伤的作用机制。方法：建立化疗损伤后卵巢功能低下小鼠模型，按一步法抽提顺铂给药后的小鼠及对照组小鼠卵巢组织的总ＲＮＡ；经逆转录分别用Ｃｙ３、Ｃｙ５荧光标记，获得两组小鼠卵巢ｅＤＮＡ的探针，再与ｅＤＮＡ基因表达谱芯片杂交，结果由激光扫描仪扫描，并用计算机软件进行图像分析、标准化处理、ｒａｔｉｏ值分析和聚类分析。结果：顺铂给药后的小鼠与对照组小鼠卵巢组织基因表达谱分析发现，１０９个差异表达基因有１９个基因低表达，９０个基因高表达。结论：本研究从顺铂给药后的小鼠卵巢组织中筛选出大量的差异表达基因，说明这些基因可能参与顺铂对卵巢功能损伤的发生、发展过程，从而为化疗药物损伤性卵巢功能减退的诊治提供依据。关键词：卵巢；顺铂；基因表达谱；寡核苷酸序列分析；小鼠中图分类号：Ｑ７８６文献标识码：Ａ文章编号：１００８－８１９９（２００７）０３－０２４６０３－
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（１．ＴｈｅＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｅｌｌａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＢｅｉｉｆｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｉｆｎｇ１０００２９，

红景天苷改善顺铂引起的小鼠耳蜗毛细胞和螺旋神经节神经元损伤的机制

红景天苷改善顺铂引起的小鼠耳蜗毛细胞和螺旋神经节神经元损伤的机制李兆龙;徐义策;李泽文;周洁【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2024(32)1【摘要】目的探究红景天苷(SAL)改善顺铂(CIS)引起的耳蜗毛细胞(CHC)和螺旋神经节神经元(SGN)损伤的作用及其与环磷腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP效应元件结合蛋白(CREB)通路的关系。

方法分离新生C57BL/6小鼠的耳蜗基底膜,分为对照组(C组)、CIS组、SAL组、SAL+SQ22536(cAMP抑制剂)组和SAL+H-89(PKA抑制剂)组,每组20条。

C组仅加入无血清BME培养液;CIS组在培养液中加入15μmol/L CIS;SAL组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL;SAL+SQ22536组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL和5μmol/L SQ22536;SAL+H-89组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL和30μmol/L H-89。

各组在培养箱中孵育48 h后,免疫荧光染色观察各组CHC和SGN损伤;试剂盒检测各组耳蜗基底膜中ROS和cAMP含量;Western blot检测各组PKA、p-CREB、CREB、Bcl-2、BDNF、NF-M蛋白水平。

结果CIS组CHC排列混乱、体积肿大,SGN细胞核破碎、神经突缺失,SAL可减轻CHC和SGNs损伤。

与C组相比,CIS组CHC、SGN数量较少(P<0.05),ROS、cAMP含量、PKA、BDNF、NF-M、Bcl-2蛋白及p-CREB/CREB水平较高(P<0.05);与CIS组相比,SAL组CHC、SGN数量较多(P<0.05),ROS含量较低(P<0.05),cAMP含量、PKA、BDNF、NF-M、Bcl-2蛋白及p-CREB/CREB水平较高(P<0.05)。

SQ22536和H-89均可逆转SAL对CHC和SGN的保护作用。

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ｃｌａ２顺铂所致的耳毒性相关。ａｉ与ｐｎ关键词：钙蛋白酶；蜗；鼠；铂耳小顺中图分类号：５５Ｒ９文献标识码：Ａ文章编号：０１７１（０２０ — ０００１０ — １９２１）４０４ — ３
第２８卷第４期
２１０２年４月
科技通报
ＢＬＴＩＯＦＳＩＵＬＥＮＣＥＮＣＥＡＮＤＩＥＣＨＮＯＬＯＧＹ
Ｖ０．８１Ｎｏ４２．
Ａｐ．２２ｒ０１
顺铂对小鼠耳蜗Ｃｌａ表达的影响及机制ａｉｐｎ
常亮王爱梅才岩林宇涵，兆亮２，，，沈
（．宁医学院，宁锦州１１０２锦卅市第二医院，宁锦州１１０１辽辽２００；．Ｉ辽２００）
摘要：立小鼠顺铂表达水平的影响。将７只建研ａｉｐｎ０
成年ＢＬ／小鼠随机分成４，ＡＢｃ组用不同剂量的顺铂进行干预后，通过听脑干反应测试用药前后小鼠听力的变化；应用Ｗｅｔｎｂｏ以及免疫荧光检测耳蜗中Ｃｌａ的表达。不同剂量顺铂组小鼠的体重和听力ｓｒｌｅｔａｉｐｎ明显下降，随着给药时间的增加，ａａｌＣｌｉ在耳蜗中的表达水平逐渐减弱，ａａ２ｐｎ而Ｃ｜ｉ在耳蜗中的表达水ｐｎ平逐渐增强。应用顺铂可建立小鼠耳毒性模型；正常小鼠耳蜗中存在Ｃｌｉｌａａ２ａａ和Ｃｌｉ的表达，ｐｎｐｎ并且